組培關(guān)鍵技術(shù)-外植體滅菌（植物組織培養(yǎng)技術(shù)）

外植體消毒一、外植體預(yù)處理常用方法用75%的酒精對(duì)植物體表進(jìn)行擦拭一、外植體預(yù)處理常用方法對(duì)材料進(jìn)行流水處理一、外植體預(yù)處理常用方法對(duì)植物材料進(jìn)行洗手液或洗潔劑浸泡處理，特別是對(duì)于植物體表有絨毛的植物外植體。一、外植體預(yù)處理常用方法對(duì)植物材料進(jìn)行低溫處理，減少后期褐化一、外植體預(yù)處理常用方法對(duì)植物材料進(jìn)行清水催芽處理，選取催出的新芽進(jìn)行外植體消毒利于后期消毒，特別是一些常規(guī)不易消毒的植物可以用此方法二、外植體消毒處理前期處理完成后我們就要對(duì)植物材料進(jìn)行消毒處理，消毒處理的目的就是為了去除植物體表和體內(nèi)的菌類物質(zhì)，使其得到我們需要的無菌材料。二、常見消毒劑濃度、消毒時(shí)間及滅菌效果藥物種類濃度/(%)滅菌時(shí)間/min效果酒精70-750.1-2（+）好升汞（氯化汞）0.1-0.22-25（+++）最好漂白粉飽和上清液5-30（++）很好次氯酸鈉25-30（++）很好二、常見消毒劑濃度、消毒時(shí)間及滅菌效果藥物種類濃度/(%)滅菌時(shí)間/min效果酒精70-750.1-2（+）好升汞（氯化汞）0.1-0.2-25（+++）最好漂白粉飽和上清液5-30（++）很好次氯酸鈉25-30（++）很好不同的消毒劑有各自的優(yōu)缺點(diǎn)，如升汞消毒效果較好，可是對(duì)人體有毒，操作需要小心，而且在植物體內(nèi)不易清除；次氯酸鈉、漂白粉等毒性低且易清除，只是消毒效果相對(duì)較差。二、常見消毒劑濃度、消毒時(shí)間及滅菌效果藥物種類濃度/(%)滅菌時(shí)間/min效果酒精70-750.1-2（+）好升汞（氯化汞）0.1-0.23-25（+++）最好漂白粉飽和上清液5-30（++）很好次氯酸鈉25-30（++）很好有些植物材料我們會(huì)同時(shí)選取兩種或兩種以上的消毒劑配合使用對(duì)植物進(jìn)行消毒處理三、蝴蝶蘭外植體消毒1、蝴蝶蘭花梗的前期處理Ⅰ蘸有75%酒精的脫脂棉從基部往頂端擦拭1、蝴蝶蘭花梗的前期處理Ⅱ要求：刀片鋒利，快、準(zhǔn)切段芽上1.5-1.8CM,芽下1.8-2.2CM1、蝴蝶蘭花梗的前期處理Ⅲ將花梗切分為4種不同的級(jí)別，方便消毒2、蝴蝶蘭花梗的消毒處理Ⅰ75%酒精消毒30秒2、蝴蝶蘭花梗的消毒處理Ⅱ無菌水沖洗2次2、蝴蝶蘭花梗的消毒處理Ⅲ0.1%升汞消毒8-25分鐘不同級(jí)別花梗對(duì)應(yīng)消毒時(shí)間花梗級(jí)別消毒時(shí)間（分鐘）頂芽8嫩芽12-15中芽15-18老芽18-252、蝴蝶蘭花梗的消毒處理Ⅳ無菌水沖洗3次3、蝴蝶蘭花梗消毒后處理切段（芽上0.5-0.7CM,芽下1-1.2CM）4、無菌接種5、寫好標(biāo)簽并放育苗室培養(yǎng)5、寫好標(biāo)簽并放育苗室培養(yǎng)標(biāo)簽書寫需要注明品種代碼、接種日期和操作員代碼三個(gè)信息5、寫好標(biāo)簽