血清學檢驗技術-沉淀試驗（動物疫病檢驗技術）

沉淀試驗概述01沉淀試驗概念沉淀試驗概念沉淀試驗是指可溶性抗原（如細菌的外毒素、內毒素、菌體裂解液、病毒的可溶性抗原、血清、組織滲出液等）與相應抗體結合，在適當量電解質存在下，經過一段時間，形成肉眼可見的白色沉淀。試驗反應中的抗原稱為沉淀原，抗體為沉淀素。02沉淀試驗的分類沉淀試驗的類型

沉淀反應液相沉淀試驗固相沉淀試驗環(huán)狀沉淀試驗絮狀沉淀試驗瓊脂擴散試驗免疫電泳試驗

沉淀反應液相沉淀試驗固相沉淀試驗環(huán)狀沉淀試驗絮狀沉淀試驗瓊脂擴散試驗免疫電泳試驗環(huán)狀沉淀試驗方法：在小口徑試管中進行。原理：試管內，下層沉淀素和上層沉淀原在液界面應形成白色沉淀環(huán)。本試驗常用做抗原定性，如炭疽的診斷（Ascoli氏試驗）、鑒別血跡等。沉淀試驗的類型絮狀沉淀試驗方法：試管或凹玻片中進行。原理：將抗原與相應抗體在試管內或凹玻片上混勻，在電解質存在的情況下，抗原抗體復合物形成肉眼可見的絮狀沉淀物。本試驗常用毒素與抗毒素的滴定，如診斷梅毒的康氏反應。沉淀試驗的類型利用可溶性抗原與抗體在半固體瓊脂內進行擴散，若抗原與抗體對應，并且比例適當，就會出現(xiàn)白色沉淀線，此為陽性反應。分為單向瓊脂擴散試驗和雙向瓊脂擴散試驗兩類。瓊脂擴散試驗沉淀試驗的類型單向瓊脂擴散試驗本試驗主要用于檢測標本中各種免疫球蛋白和血清中各種補體成分的含量，敏感性很高。沉淀試驗的類型雙向瓊脂擴散試驗本法主要是用于檢測血清中各種免疫球蛋白、甲胎蛋白、乙肝表面抗原等。缺點是需要時間過長，靈敏度不高。沉淀試驗的類型將瓊脂內電泳和凝膠內沉淀反應相結合。具有分辨率高，靈敏度高，時間短，是很理想的分離和鑒定蛋白質混合物的方法。用于抗原、抗體定性及純度的測定。臨床上常見的是對流免疫電泳和火箭免疫電泳。免疫電泳技術沉淀試驗的類型對流免疫電泳本法比瓊脂擴散法的靈敏度要高10～16倍，而且反應時間短，可用于各種蛋白的定性和半定量測定。沉淀試驗的類型火箭免疫電泳當抗原與抗體分子達到適當比例時，形成一個形狀如火箭的不溶性免疫復合物沉淀峰，峰的高度與撿樣中的抗原濃度呈正相關。1、2、3、4為標準抗原；5、6為標本抗原沉淀試驗的類型禽流感瓊脂擴散試驗01禽流感概述禽流感概述禽流感病毒屬于甲型流感病毒，根據禽流感病毒對雞和火雞的致病性的不同，分為高、中、低/非致病性三級。禽流感概述禽流感病毒感染雞禽流感病毒感染人禽流感概述人感染禽流感有接觸史人類預防禽流感02禽流感瓊脂擴散試驗禽流感瓊脂擴散試驗試驗目的掌握瓊脂擴散試驗的操作和判定標準。明確此試驗在生產中的應用。禽流感瓊脂擴散試驗試驗原理將可溶性抗原與相應抗體分別加入瓊脂板上相對應的孔內，兩者相互擴散，在比例適宜處形成沉淀線。禽流感瓊脂擴散試驗試驗儀器及材料溫箱、瓊脂平板、瓊脂打孔器、生理鹽水、禽流感瓊脂擴散抗原、禽流感標準陽性血清、被檢血清、pH7.2、0.01mol/LPBS。1423瓊脂板的制備試驗操作方法試驗結果判定試驗注意事項試驗方法禽流感瓊脂擴散試驗瓊脂板的制備稱取瓊脂糖1.0g，加到100mLpH7.2、0.01mol/LPBS中，在水浴中煮沸或用電爐煮沸充分融化加入8g氯化鈉，充分溶解后加1%硫柳汞溶液lmL。禽流感瓊脂擴散試驗禽流感瓊脂擴散試驗試驗操作方法——打孔禽流感瓊脂擴散試驗試驗操作方法——封底禽流感瓊脂擴散試驗試驗操作方法——加樣禽流感瓊脂擴散試驗試驗操作方法——反應將瓊脂板置于日光燈或側強光下觀察，若標準陽性血清與抗原孔之間出現(xiàn)一條清晰的白色沉淀線，則試驗成立。禽流感瓊脂擴散試驗試驗結果判定1試驗注意事項加樣時，注意不要將瓊脂劃破，以免影響沉淀線的形狀。23反應時間要適宜。時間過長，沉淀線可解離至假陰性；時間過短，則沉淀線不出現(xiàn)。加樣時抗體、陽性血清及待測標本應各用一支加樣器，以免混淆，影響實驗結果。禽流感瓊脂擴散試驗炭疽環(huán)狀沉淀試驗01炭疽概述炭疽概述炭疽桿菌炭疽桿菌（Bacillusanthraci）屬于芽孢桿菌屬，是引起某些家畜、野獸和人類炭疽?。ㄈ诵蠊不迹┑牟≡?2炭疽環(huán)狀沉淀試驗炭疽環(huán)狀沉淀試驗試驗目的掌握炭疽環(huán)狀沉淀試驗的操作和判定標準。明確此試驗在生產中的應用。炭疽環(huán)狀沉淀試驗試驗原理抗原抗體交界面形成白色沉淀環(huán)。。炭疽環(huán)狀沉淀試驗試驗儀器及材料沉淀試驗用小試管、毛細吸管、漏斗、濾紙、乳缽、剪刀、微量加樣器(帶滴頭)、生理鹽水、0.5%石炭酸生理鹽水、炭疽沉淀素血清、炭疽標準抗原、疑似被檢材料（脾、皮張等）。1423被檢抗原的制備試驗操作方法試驗結果判定試驗注意事項試驗方法炭疽環(huán)狀沉淀試驗被檢抗原的制備熱浸出法冷浸出法炭疽環(huán)狀沉淀試驗炭疽環(huán)狀沉淀試驗被檢抗原的制備先用毛細吸管在小試管底部加1/3試管的炭疽沉淀素血清；傾斜小試管；再用毛細吸管沿小試管璧緩慢加入1/3試管的可溶性被檢抗原；靜置，5-10min內判定結果。小試管重疊的兩液界面出現(xiàn)白色沉淀環(huán)，為陽性反應。結果判定炭疽環(huán)狀沉淀試驗1試驗注意事