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文檔簡介

6.2.7

二氧化碳對發(fā)酵的影響及其控制(1)二氧化碳對發(fā)酵的影響CO2是微生物的代謝產(chǎn)物,同時也是某些合成代謝的一種基質(zhì),它是細胞代謝的重要指標。CO2的抑制作用

影響菌體生長、形態(tài)及產(chǎn)物合成高濃度的CO2會影響產(chǎn)黃青霉的菌絲形態(tài)。

大多數(shù)微生物適應(yīng)低CO2濃度(0.02~0.04%體積分數(shù))。當尾氣CO2濃度高于4%時微生物的糖代謝與呼吸速率下降。CO2對細胞的作用機制:CO2——主要作用在細胞膜的脂肪酸核心部位——影響磷脂的親水頭部帶電荷的表面及細胞膜表面上的蛋白質(zhì)當細胞膜的脂質(zhì)相中CO2濃度達到一臨界值時,膜的流動性及表面電荷密度發(fā)生變化。這將導(dǎo)致膜對許多基質(zhì)的運輸受阻,影響了細胞膜的運輸效率,使細胞處于“麻醉”狀態(tài),生長受抑制,形態(tài)發(fā)生變化。(2)呼吸商與發(fā)酵的關(guān)系呼吸商:RQ值可以反映菌體的代謝情況,例如酵母培養(yǎng)過程:

RQ=1糖代謝走有氧分解代謝途徑,僅供生長、無產(chǎn)物形成;RQ>1.1走EMP途徑,生成乙醇;RQ=0.93生成檸檬酸;RQ<0.7生成的乙醇被當作基質(zhì)再利用?!锞w在利用不同基質(zhì)時,其RQ值也不同;★在抗生素發(fā)酵中在生長、維持和產(chǎn)物形成階段的RQ值也不一樣。(3)二氧化碳濃度的控制發(fā)酵液中CO2濃度受到許多因素的影響,如細胞的呼吸強度、發(fā)酵液的流變學特性、通氣攪拌程度、罐壓大小和設(shè)備規(guī)模等。值得注意的是,罐內(nèi)的CO2分壓是液體深度的函數(shù)。CO2濃度的控制:根據(jù)其對發(fā)酵的促進或抑制作用,通過調(diào)節(jié)通氣量和攪拌速率,提高或降低其濃度。6.2.8加糖、補料對發(fā)酵的影響及其控制分批發(fā)酵常因配方中的糖量過多造成細胞生長過旺,供氧不足。解決這個問題可在發(fā)酵過程中加糖和補料。補料的作用是及時供給菌合成產(chǎn)物的需要。通過補料控制可解除抑制:基質(zhì)過濃的抑制、產(chǎn)物的反饋抑制以及G分解代謝物的抑制。從而調(diào)節(jié)菌體的呼吸,以免培養(yǎng)過程受氧的限制。P185補料的策略:一次性大量:操作簡便,但會造成發(fā)酵液瞬時大量稀釋,擾亂菌的生理代謝,難于將過程控制在最適合于生產(chǎn)的狀態(tài);多次少量:麻煩些,但更合理;連續(xù)流加:快速、恒速、指數(shù)和變速流加。流加操作控制系統(tǒng)又分為有反饋控制和無反饋控制兩類在反饋控制操作中:

非直接法:溶氧、PH、呼吸商、排氣中的CO2、代謝產(chǎn)物的濃度;

直接法:限制性營養(yǎng)物的濃度(氮源、碳源、碳氮比)(由于缺乏直接測量的傳感器,此法受限制)

補料應(yīng)注意的問題1、料液配比要適當2、加強無菌觀念3、經(jīng)濟核算,節(jié)約糧食4、培養(yǎng)基的碳、氮要平衡

必須選擇恰當?shù)姆答伩刂茀?shù),以及了解這些參數(shù)對微生物代謝、菌體生長、基質(zhì)利用以及產(chǎn)物形成之間的關(guān)系。采用最優(yōu)的補料程序也是依賴于比生長曲線、形態(tài)、產(chǎn)物形成速率及發(fā)酵的初始條件等情況。

優(yōu)化補料速度也是補料控制的一個重要環(huán)節(jié)。因為養(yǎng)分和前體需要維持適當?shù)臐舛?,而它們則以不同速被消耗,所以,補料速度要根據(jù)微生物對營養(yǎng)等的消耗速度及所設(shè)定的培養(yǎng)液中最低維持濃度而定。補料糠的原睡則:趴就在屬于控參制微肢生物們的中紅間代啦謝,口使之挖向著浴有利蜻于產(chǎn)糊物積撓累的蹈方向責發(fā)展址。補料辜的內(nèi)圈容和案補料褲時機袋,都刪是根立據(jù)菌翁的生晴長代衛(wèi)謝、境生物基合成突規(guī)律生進行樹調(diào)節(jié)綁控制裳,但瓶大多布數(shù)都熱根據(jù)駕經(jīng)驗券進行章。經(jīng)驗金表明贈,在茅最適隔補料資條件松下,濁能正形確控弟制菌芽體量樸的增驚加和趙糖的司消耗紅,獲夜得較緊好的鏈效果崖。6.問3泡沫對發(fā)貼酵的甩影響繞及控咳制6.棉3.砌1發(fā)酵優(yōu)過程睡中泡汁沫的零產(chǎn)生(1)由外界準引進澤的氣味流被機援械地顛分散做形成(2)由發(fā)酵背過程會產(chǎn)生另的氣夏體聚結(jié)估生成婚的發(fā)索酵泡礙沫(3)發(fā)騙酵液桂中糖剝、蛋科白質(zhì)致和代棉謝物串等的辛存在地起到加強瞞或穩(wěn)業(yè)定泡衰沫的作漠用泡沫冷產(chǎn)生跳的原劈燕因(1)通旁氣、填攪拌糖的劇瓣烈程敬度(2)培姻養(yǎng)基發(fā)所用緣瑞原材錦料性采質(zhì):蛋白買質(zhì)原牽料如蛋聲白胨譯、玉森米漿蒙、花控生餅杠粉、跪黃豆喝餅干戰(zhàn)粉、粘酵母稈粉和掉糖蜜殿等是究主要惰的發(fā)鄉(xiāng)豐泡物勺質(zhì)。集培養(yǎng)融基中尺蛋白嫩質(zhì)含豪量越熔多,扔發(fā)酵版液的白粘度遲也越洽大,拜越容行易起勢泡,陡泡沫車多而漆且持害久穩(wěn)叫定。另外芝,與培養(yǎng)站基的滅菌里方法呈、滅刺菌溫幅度和訂時間也會抬影響絲式到培飼養(yǎng)基儲成分信的變平化,方從而喝影響幅培養(yǎng)枕基的誼起泡緊能力鄰。泡沫鋸消長熱的影既響因劫素:6.嘗3.歲2泡沫漠對發(fā)析酵的均危害(1)使搶發(fā)酵使罐的裝填宏系數(shù)頭減少(2)造璃成大爹量逃斑液,野導(dǎo)致產(chǎn)物食損失(3)增加坡了染毅菌的機另會(4)增架加了菌群魂的非星均一憐性(5)消悅泡劑渾的加爛入給提取樹工序帶來鎖困難6.原3.昂3發(fā)酵超過程垃中泡罷沫的朵控制★機械桶消沫★化學國消沫(消哀沫劑遭消沫思)(1)機嫌械消京沫原理渴:利桐用物碑理作盡用,稀靠機孫械的強烈土振動或壓力拒的變霧化促使輔泡沫欺破碎懷。優(yōu)點少:節(jié)鼻省原嘉材料撓,不例會增盛加下住游工嚴段的堤負擔古,減創(chuàng)少染師雜菌帶。缺點諒:效遙率不談高(扭作為概消沫城的輔墾助方疫法)飾,不明能從呈根本喉上消辛除泡外沫成絨因。例如蓄:耙健式消疼泡槳慈裝在仆發(fā)酵疤罐的項攪拌拾軸上礦,槳住上的寺齒面雀略高墓于液忽面,牽靠軸撿的旋屯轉(zhuǎn)帶依動來打碎洗泡沫,起扮到消面泡的武作用拆。罐內(nèi)機械或消沫罐內(nèi)機械奏消沫通過噴頭將含辰氣泡叫的培午養(yǎng)液討噴向轉(zhuǎn)向闖板,使傲其破秤裂,區(qū)然后藝再流回發(fā)酵籠罐。罐外機更械消逢沫(2)化縮慧學消逼沫★化學口消沫同的機汗理:淡化學臂消沫逢劑是表面紛活性舌劑。一言般好念的消侄沫劑嗚應(yīng)同舞時具攤備降低兩液膜慰的機掙械強霜度和表面晃粘度這兩緩種性燭能?!锍S檬璧南D(zhuǎn)沫劑(溶內(nèi)解度槳較小競、分罪散性劫較差鬼的高本分子奧化合躺物):a)天然必油脂類:潛玉米妥油、些豆油茄、菜薦油及飽豬油帖等b)高級刑醇類:男十八誘醇、近聚二萍醇等c)聚醚類:灑聚氧遮丙烯椒甘油(G艦P)、聚要氧乙摘烯氧叨丙烯蘇甘油按(“著泡敵遠”)(G在PE皂)等P1乏87d)硅酮類:燙聚二疏甲基娘硅氧砌烷及托其衍喝生物e)氟化忌烷烴消泡灶劑多汁數(shù)是舅溶解雙度小她、分知散性乎不十待分好待的高乒分子舉化合僅物,梳所以朗在使深用時釀,要眾考慮汪如何其降低俘它的例黏度尤和提溉高它序的分噸散性汗,來鄙增強蓬它們態(tài)的消納泡效開果。溝使用傅的增浴效方矩法有:a)機械豆分散突、或駐借助脂分散箭劑b)與載囑體一翻起使策用c)多種罰消沫庸劑并潔用d)利用臟乳化芳劑增盒強消聽沫劑蘿的消黑沫作便用(2)化忙學消滑沫6.葡4發(fā)酵染菌的防烘治及勺處理染菌是發(fā)酵翅生產(chǎn)磁中的新一個糟致命陡弱點尚,輕抽者影啊響了坊生產(chǎn)興產(chǎn)品因的收爛率和波產(chǎn)品淋質(zhì)量虧,重威者會江導(dǎo)致登“倒格罐”遣,造籃成嚴撒重的尚經(jīng)濟診損失旱。目前媽:提炊高生益產(chǎn)技盞術(shù)水挪平,呼盡可搏能防止發(fā)酵以染菌鼓的發(fā)卻生,伴而且址一旦劉發(fā)生斃染菌折,要脾能盡煌快找價出其件污染不的原因,并奪采取破相應(yīng)攔的有頌效措疊施,干把發(fā)找酵染疾菌造抬成的槐損失降低則到最綱小。6.吐4.享1染菌忽的途服徑分動析●種子喇包括喝進罐備前菌餡種室勢階段遼出問郵題●培養(yǎng)剖基的國配制茶和滅閱菌不誦徹底●設(shè)備鞠上特鍵別是神空氣乘除菌凍不徹羽底和責過程督控制罵操作宗上的鉛疏漏★連續(xù)耐攪拌★供給歸無菌鬧空氣炭、排吐放多輝余空嚼氣★多次筆添加機消沫跟劑、河補充床培養(yǎng)鎖基★定時椅取樣雷分析6.哭4.滾2染菌龜?shù)呐斜P斷和學防治◆鏡檢◆無菌黨試驗◆一些狀態(tài)唐參數(shù),如權(quán)溶氧標變化褲、排砌氣中科的CO2含量戀等◆異常播現(xiàn)象,如粒菌體鳳生長哭不良介、耗偽糖慢食、pH值異腹常變謹化、孟發(fā)酵陸過程汪中泡現(xiàn)沫的土異常錘增多界、發(fā)槐酵液廉的顏唉色異扮常變旅化、扔代謝繳產(chǎn)物尺含量奏的異仇常下興跌、五發(fā)酵輔周期叼的異蹈常延果長、臣發(fā)酵置液的靈粘度乘異常腳增加蠅等▲造成概發(fā)酵池染菌無的原迫因有逐很多柄,且墊常因辭工廠柏不同挖而有屋所不議同,疤但設(shè)備撕滲漏、空氣秋中有志雜菌、種燒子帶只菌、驕滅菌葬不徹嚴底和童技術(shù)責管理傳不善等是露造成慢各廠患污染晴雜菌牽的普劈燕遍原告因?!话闾潱瑥娜炯饩木劮N類壁可大繩致判蒜斷其勸來源P2問08從發(fā)眨酵染益菌的石規(guī)模灑分析不同葡染菌建時間村分析▲對抗襪生素爛發(fā)酵宅染菌藥:前期——原則猾上可們適當撞改變絞生長浴參數(shù)涉,使跪有利邪于生吹產(chǎn)菌村而不聯(lián)利于蹄雜菌絞的生騾長,并或加捧入某施些抑輛制雜牽菌的鞋化合股物。中后林期——除非守是噬旦菌體語通常螞后果呀不會喚那么影嚴重妖。6.內(nèi)4.憂3染菌直的挽萬救或壩處理(1)種壇子培責養(yǎng)期煌染菌愧的處識理種子彩受到灣雜菌各污染夏后,碰應(yīng)經(jīng)教滅菌進后棄何之,漁并對吃種子讓罐、謹管道展等進染行仔虛細檢貞查和輛徹底砌滅菌誘。同告時采跳用備俗用種耕子。(2)發(fā)妥酵前磁期染疏菌的帖處理如培跑養(yǎng)基門中的擾碳、撕氮源貓含量斑還比罰較高蜘時,暫終止市發(fā)酵遺,將讀培養(yǎng)仍基重緣瑞新進垂行滅匹菌處桿理后輪再用姿;否擴則,抗補充臉新鮮扔培養(yǎng)育基,筑再進頌行滅家菌處璃理。也可掌采取柜降溫立培養(yǎng)貪、調(diào)欄節(jié)pH值、裁調(diào)整冤補料帖量、芽補加底培養(yǎng)黎基等臘措施灶。(3)發(fā)共酵中醒、后暗期染螺菌的促處理加入攪適當辱的殺眠菌劑腥或抗舉生素洗,以庫抑制魔雜菌孝的生逼長,墓也可柔采取佳降低靜培養(yǎng)風溫度秋、降挎低通般風量映、停睛止攪換拌、滅少量調(diào)補糖蔬等其云他措欺施。若產(chǎn)集物含覺量已賠達一束定值賺,也揉可放輝罐。廢液婦應(yīng)加浮熱滅訂菌后凳才能辨排放貞。(4)染趣菌后測對設(shè)暴備的圓處理徹底輛清洗緒發(fā)酵繡罐,廁并加兇熱滅盡菌后婚才能服使用歡。也可豪用甲債醛熏授蒸或灑甲醛眠溶液鏟浸泡12傘h以上洋等方解法進竟行處給理。6.縫4.冊3染菌掉的挽料救或月處理6.膠4.舍4噬菌浴體污擺染及溝其防頭治利用客細菌辱或放館線菌斧進行個的發(fā)蠢酵容釣易受遵噬菌肆體的寒污染辯,由景于噬則菌體撈的感擁染力位非常租強,健傳播惰蔓延鴨迅速茶,且房誠較難挑防治離,對戲發(fā)酵月生產(chǎn)革有很頃大的毅威脅緊。噬木菌體貓是一楊種感染細菌或放線監(jiān)菌的病毒孝。噬菌指體有摧兩類章:烈性精噬菌曠體:感單染宿膏主細芬胞后次,立廉即引拳起細暈胞裂傍解溫和頸性噬示菌體:感輝染細研胞后扛,并汽不馬灑上引單起細促胞裂染解,逃而是燦以“原噬匠菌體”方妹式整游合在昨宿主掏的DN少A中,條隨寄芹主繁搶殖而更延續(xù)切傳代與。帶有原噬瞞菌體的菌鄙株稱撒為溶原沒性菌吵株。原噬丹菌體不同敗于營逼養(yǎng)期攪的噬冬菌體低,它獻沒有否感染隆性,銅對宿持主一艇般無緞不良健影響芳,但炸是:☆溶原枝性菌物株具兔有產(chǎn)轎生噬音菌體冰的潛車在能波力:溶燦原性紅菌株珍培養(yǎng)缺時,微少數(shù)和會自丹發(fā)脫索離染庫色體捎,導(dǎo)事致細育菌裂完解。累而在岡某些慌物理辰化學聾因素紛(UV,X射線哲,氮效芥等箏)刺明激下初,原掉噬菌浩體會于脫離渣染色浩體,寬開始雹復(fù)制辭,從別而導(dǎo)古致溶律原性傻菌株猛裂解巡壽,產(chǎn)報生大哭量的緞噬菌年體?!顚νN一類勾型噬健菌體折具有遮免疫仿性:溶晚原性肌菌株旱對其雁本身體產(chǎn)生昆的噬酸菌體結(jié)或外洗來的網(wǎng)同源間噬菌頁體不接敏感待,這眼些噬君菌體茄雖然稿可以您進入俘溶原夸性菌獄株,如但不洞能增被殖,堂也不爺能導(dǎo)熊致溶悲原性避菌株戴裂解跨。噬菌守體的架污染延途徑:可以蘿通過騙環(huán)境扮污染謊、設(shè)騾備的未滲漏晚或”關(guān)死角毀”叨、空植氣系年統(tǒng)、僵培養(yǎng)與基滅唇菌不慨徹底蜜、補毒料過檔程及低操作勤失誤哨、菌劃種帶甚進噬渡菌體唐或本希身是急病原石性菌逗株等作途徑歐使發(fā)藏酵染乒菌。噬菌離體的付危害租:可引豈起發(fā)想酵中銜噬菌呆體污賢染的陷實例屑:丙酮質(zhì)、丁篩醇發(fā)插酵中盤的噬法菌體臥污染抗生縱素發(fā)囑酵中覽的噬褲菌體路污染谷氨彎酸發(fā)驚酵的決噬菌責體污兄染發(fā)酵漂前期言污染致噬菌繁體后禾的異著?,F(xiàn)伸象:(1)光密乎度開始馬上升膨后下低降、土不升轉(zhuǎn)或回逼降,闊甚至單下降金到零簡小時亡以下酬。(2)pH值逐漸邀上升紡,升欄到8.梯0以上鴿,不秀再下掘降,雙排氣C02一反顧常態(tài)州,CO2迅速矮下降紡,相歷繼出肚現(xiàn)OD值下領(lǐng)跌,PH上升總、耗火糖慢肯等異愉?,F(xiàn)認象。(3)耗糖港緩慢或停稿止,核發(fā)酵匯緩慢玻,周役期長斑,提工取困涌難。(4)產(chǎn)生夠大量順泡沫;發(fā)次酵液周粘度踏大,驅(qū)甚至鋼呈現(xiàn)母粘膠扎狀,煩可拔幕絲,逆發(fā)酵勤液發(fā)帽紅、每發(fā)灰杏;有遼刺激飲氣味觸。(5)谷氨新酸產(chǎn)聞量甚鞠少,或失增長跡極為峽緩慢再,或燒不產(chǎn)瓶酸;歷也會務(wù)出現(xiàn)妻產(chǎn)酸都反而員偏高妹或一述段時盲間內(nèi)悄忽好炎忽壞。(6)鏡糧檢時玩可發(fā)次現(xiàn)菌體投數(shù)量必顯著關(guān)減少,菌養(yǎng)體不鼓規(guī)則留,缺押乏八夠字排未列,服發(fā)圓運;細員胞核及染色負,部澡分細耽胞核靠消失恐;革州蘭氏慣染色寨后,糞呈現(xiàn)右紅色答碎片偷,完整酒菌體佳很少。(7)平泄板檢爸查有噬伙菌斑,搖浸瓶檢期查發(fā)悼酵液遼清稀所。噬菌番體的棵防治揪:1)嚴溜格控零制活杠菌體艦排放友,切事斷噬殲菌體微的“乘糧源照”。2)注鋒意環(huán)忍境衛(wèi)春生,童消滅虧噬菌段體與糖雜菌歸。3)選蛇育抗謊性生曠產(chǎn)菌族株。4)生劫產(chǎn)中栽輪換鞭使用顧菌種灑。5)藥幟物防竟治例如酷用金潔霉素能、四液環(huán)素洲等。6.澤5發(fā)酵終點的判舍斷要確財定一脅個合闊理的瘋放罐妙時間眨,需殿要考敬慮下棵列幾谷個因肉素一.經(jīng)濟付因素二.產(chǎn)品阻質(zhì)量糖因素三.特殊酒因素產(chǎn)率睛、得駝率、箏發(fā)酵雜系數(shù)稍、高考的產(chǎn)怕物濃漲度◆如要呢提高填總產(chǎn)響率,猾則必腥須縮浪短發(fā)滑酵周到期。柔即在段產(chǎn)率評降低靜時放葉罐?!舴殴掎槙r間對下攔游工欄序有敲很大膏的影侄響。達放罐鵝過早趴,會議殘留槐過多框養(yǎng)分貪,增鉗加提筒取工脆段的罪負擔咱;如建放罐鍬過晚浪,菌閉絲自定溶,仗不僅護會延鋪長過鳥濾時飄間,畫還可態(tài)能使虎一些角不穩(wěn)希定的腰產(chǎn)物斯?jié)舛劝碌?,擾濟亂提劣取工虛段?!襞R近尸放罐始時加糖奪、補窩料或消沫供劑要慎念重。發(fā)酵喚類型石不同躁,要潮求達薪到的匹目標騙也不享同,穿因而青對發(fā)嗓酵終佳點的判斷側(cè)標準城也應(yīng)饑有所陡不同。判斷犬放罐初的指養(yǎng)標主要頭有:產(chǎn)物嘆濃度宇、過替濾速繡度、挺菌絲困形態(tài)痛、氨席基氮紙、pH、DO、發(fā)酵格液的傲粘度蛋和外研觀等絕大差多數(shù)撥抗生盜素發(fā)弱酵掌咬握在弦菌絲斜自溶篩前,致極少蘿數(shù)品知種在出菌絲注部分濾自溶逐后放囑罐,含以便證胞內(nèi)際抗生沒素釋屢放出滲來。6.奮6發(fā)酵蛛過程餡參數(shù)逐監(jiān)測蕉的研讀究概咱況發(fā)酵冶過程腥參數(shù)鑄檢測齒的研億究概宣況微生泄物發(fā)夕酵的瓣生產(chǎn)爐水平妹不僅疫取決慨于生惑產(chǎn)菌曉種本浪身的漏性能流,而霉且要悉賦以愁合適毀的環(huán)貿(mào)境條壟件,抹才能橫使它團的生慢產(chǎn)能肌力充著分表蕩達出嘴來。垂為此售,必糟須通粒過各羊種研討究方僻法了重解生補產(chǎn)菌少種對做環(huán)境揭條件詢的要龍求,厘如培坐養(yǎng)基痛、溫蔥度、pH、溶氧駝等,嬸并深國入了姨解生照產(chǎn)菌浙在合打成產(chǎn)賢物過草程中衰的代夜謝調(diào)舍控機默制以掉及可章能的抄代謝揪途徑絮,為感設(shè)計纏合理晃的生悅產(chǎn)工謎藝提嗽供理墨論基拘礎(chǔ)。同時斤,為慚了掌怠握菌捧種在毒發(fā)酵蜘過程息的代旋謝變萍化規(guī)弦律,擴可以模通過雕檢測俗手段侄,給往予有賤效的??刂品?,使墾生產(chǎn)剛菌處義于產(chǎn)處物合傭成的克優(yōu)化診環(huán)境塘中。由于廳發(fā)酵套受許搬多因室素的肯影響扛和工洋藝條臂件制敘約。因此州,發(fā)儀酵過炸程中偉,為琴了能寒對生宗產(chǎn)過俱程進亭行必次要的規(guī)控制,需蛙要對徑有關(guān)率工藝寶參數(shù)壁進行您定期越取樣些測定濾或進鏡行連芬續(xù)測硬量,最參數(shù)邪如下惜:★常規(guī)飯在線屯測量甩和控啊制發(fā)員酵過哈程的設(shè)定狹參數(shù):罐溫參、罐夕壓、破通氣山量、及攪拌鞭轉(zhuǎn)速初等★狀態(tài)俘參數(shù)的測跡量現(xiàn)有崗的監(jiān)厭測狀態(tài)出參數(shù)蛋的傳弱感器小必須彎耐高蔑溫蒸保汽反獸復(fù)滅丈菌,免而且鍵探頭句表面磨易被層微生澤物堵零塞,糕從而充導(dǎo)致目測量匠失敗諷。特表別是pH和溶氧電極且有時襲還會府出現(xiàn)名失效治和顯撞著漂挖移的并問題汗,為了頁克服長漂移仔和潛龜在的課探頭柳失效糾問題唯,發(fā)也明了糞探頭逮可伸淹縮的晴適合廁于大鳥規(guī)模建

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