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WHO第五版人類精液及精子宮頸粘液相互作用之精液分析的改變演示文稿目前一頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)WHO第五版人類精液及精子宮頸粘液相互作用之精液分析的改變目前二頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)背景1980年出版第一版“人類精液及精子—宮頸精液實(shí)驗(yàn)實(shí)檢驗(yàn)手冊(cè)”(生育調(diào)節(jié))1987年出版第二版(生育調(diào)節(jié)、不育癥的診治)1992年出版第三版(生育調(diào)節(jié)、不育癥的診治、環(huán)境污染)1999年出版第四版(輔助生育技術(shù)-ICSI、環(huán)境污染)目前三頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)背景以往精液分析存在問(wèn)題:檢測(cè)方法不一結(jié)果帶有主觀性、不客觀、不真實(shí)精確度低、重復(fù)性差對(duì)男性生育力的評(píng)估、臨床診斷應(yīng)用價(jià)值很有限因此,需要一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化的手冊(cè)目前四頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)2010年出版第五版隨著近年來(lái)男科學(xué)和生殖醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展,基于循證醫(yī)學(xué)的證據(jù),不少原有的概念和診療建議需要修訂;為此,WHO組織成立了專門的委員會(huì)來(lái)負(fù)責(zé)這項(xiàng)工作,編寫制訂了新一版的手冊(cè),以期達(dá)到更好的標(biāo)準(zhǔn)化,提高精液分析的質(zhì)量。目前五頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)修改WHO人類精液檢查手冊(cè)的目的提高精液分析各參數(shù)的準(zhǔn)確性簡(jiǎn)化方法,提高可操作性提供質(zhì)控結(jié)果不良時(shí)的應(yīng)對(duì)提示及細(xì)節(jié)利于實(shí)驗(yàn)室間的標(biāo)準(zhǔn)化提高精液分析各參數(shù)的臨床應(yīng)用價(jià)值(結(jié)果判斷評(píng)述)提高療效評(píng)估的準(zhǔn)確性目前六頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)第5版《手冊(cè)》提綱一、精液分析標(biāo)準(zhǔn)程序:常規(guī)分析、抗體包被精子、非精子成分;可供選擇的試驗(yàn):精子多發(fā)性缺陷指數(shù)、白細(xì)胞免疫細(xì)胞化學(xué)染色、精子宮頸粘液相互作用、精漿生化、CASA;研究試驗(yàn):活性氧、頂體反應(yīng)、精子卵細(xì)胞相互作用作用、精子透明帶結(jié)合、去透明帶倉(cāng)鼠卵穿透試驗(yàn)、精子染色質(zhì)檢測(cè)等。目前七頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)“精液分析”部分的修訂主要涉及:精子濃度和精子總數(shù)的測(cè)定;精子活動(dòng)力分級(jí);精子形態(tài)學(xué)評(píng)估;精液參考值范圍。目前八頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)精液采集和體積測(cè)定根據(jù)重量間接計(jì)算精液體積,假定精液比重為1g/ml(實(shí)際為1.014g/ml)來(lái)計(jì)算。(首選方法)1.秤取容器的重量,2.秤取裝有精液的容器的重量,3.計(jì)算重量之差(g=ml)精確測(cè)量精液體積(精度為0.1mL)目前九頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)精液采集和體積測(cè)定不推薦方法(在收集管中的轉(zhuǎn)移)目前十頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)精子濃度和精子總數(shù)的測(cè)定簡(jiǎn)化精液稀釋方法及增加計(jì)數(shù)池的面積,每份標(biāo)本均采用兩次取樣、兩次稀釋和兩次計(jì)數(shù),每次計(jì)數(shù)至少200個(gè)精子,且兩次計(jì)數(shù)在95%可信區(qū)間內(nèi)。一次射精中的精子總數(shù)能夠提供反映睪丸功能的更為精確的信息,因此,新版手冊(cè)強(qiáng)調(diào)必須精確地測(cè)定精液體積。目前十一頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)精子濃度和精子總數(shù)的測(cè)定棄用精子密度的概念,改為精子濃度精子濃度:每毫升精液中的精子數(shù)參考值下限:精子濃度(106/L):15原因:濃度:指一定體積的精液中所含的精子數(shù)目密度:?jiǎn)挝惑w積所具有的精子質(zhì)量目前十二頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)精子濃度和精子總數(shù)的測(cè)定強(qiáng)調(diào)一次射精的總精子數(shù)—更能反映睪丸的生精功能。精子總數(shù):每次射出精液中的精子總數(shù)(精子濃度*精液量)參考值下限:精子總數(shù)(106/次射精):39目前十三頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)精子濃度和精子總數(shù)的測(cè)定年輕人老年人差異精子濃度(106/mL)7364NS精液量(mL)3.21.8P<0.05精子數(shù)量(106/ejac)20674P<0.052004年臨床意義:總精子數(shù):反映睪丸精子產(chǎn)出量的直接指標(biāo)精子濃度:受精囊腺和前列腺分泌液量的影響目前十四頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)精子濃度和精子總數(shù)的測(cè)定顯微鏡的要求:精子濃度和活力必須用相差顯微鏡無(wú)論是手工方法還是CASA都要求使用原因:相差顯微鏡下:精子頭部呈亮色普通顯微鏡下:精子頭部呈灰色發(fā)亮的精子頭部容易與灰色的雜質(zhì)區(qū)分目前十五頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)精子濃度和精子總數(shù)的測(cè)定20倍正相差物鏡下精子圖像目前十六頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)精子濃度和精子總數(shù)的測(cè)定精子計(jì)數(shù)的質(zhì)控要求:每份標(biāo)本重復(fù)取樣2次,各自計(jì)數(shù)200個(gè)精子;且兩次計(jì)數(shù)在95%可信區(qū)間內(nèi)。結(jié)果可以接受(取兩次的均值);超過(guò)誤差范圍的必須重新取樣重復(fù)計(jì)數(shù)2次。目前十七頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)檢查注意事項(xiàng)1、禁欲時(shí)間:第3-7天2、環(huán)境:?jiǎn)为?dú)取精室,安靜,舒適3、取精方式:手淫或取精器4、不要太勞累5、詢問(wèn):是否排出全部精液是否收集全部精液目前十八頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)精子活動(dòng)力檢測(cè)精子前向運(yùn)動(dòng)的情況與受孕具有密切的關(guān)聯(lián);新版手冊(cè)中一個(gè)重要的修訂是精子活動(dòng)力的分類方法。精子活動(dòng)力的分類前向運(yùn)動(dòng)精子(PR)——a+b

非前向運(yùn)動(dòng)精子(NP)——c

不運(yùn)動(dòng)精子(IM)——d參考值下限:前向運(yùn)動(dòng)精子(PR,%):32目前十九頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)每份標(biāo)本制備雙份涂片進(jìn)行重復(fù)分析每張圖片至少分析200個(gè)精子且兩次結(jié)果差異在95%可信區(qū)間內(nèi)。結(jié)果可以接受(取兩次的均值);超過(guò)誤差范圍的必須重新讀片(不必重新制片)。參考值下限:正常精子形態(tài)(%):4精子形態(tài)學(xué):目前二十頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)WHO不同版本精子形態(tài)學(xué)相關(guān)內(nèi)容的比較版本篇幅染色方法觀察方法參考值第一版10頁(yè)改良勃-利氏染色;巴氏染色40倍物鏡觀察80.5±19.4%第二版13頁(yè)吉姆薩染色;改良巴氏染色;勃-利氏染色40倍相差顯微鏡100倍油鏡50%第三版13頁(yè)濕片法吉姆薩染色;改良巴氏染色;勃-利氏染色;Shorr染色100倍明場(chǎng)物鏡下觀察30%第四版15頁(yè)改良巴氏染色;Shorr染色;Diff-Quick染色100倍油鏡及至少10倍目鏡15%第五版49頁(yè)改良巴氏染色;Shorr染色;Diff-Quick染色100倍油鏡及至少10倍目鏡4%目前二十一頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)精子形態(tài)學(xué):染色方法推薦采用Papanicolaou、Shorr或Diff-Quik染色法使用光學(xué)顯微鏡觀察,精子頭部頂體區(qū)為淺藍(lán)色,頂體后區(qū)為深藍(lán)色,中段略呈紅色,尾部為藍(lán)色或紅色。殘余的胞漿小滴染成粉紅色或橙紅色。目前二十二頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)精子畸形:

①頭部畸形:錐形頭,梨形頭,圓形頭(無(wú)頂體,?。?,無(wú)定形頭,空泡樣頭,頂體區(qū)域小的等。②頸和中段畸形:不對(duì)稱、中斷和頭部連接點(diǎn)粗、細(xì)③尾部畸形:短尾,成角彎折,卷尾④過(guò)多的胞漿殘余體:>精子頭部大小的1/3精子形態(tài)學(xué):目前二十三頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)精子形態(tài)學(xué):目前二十四頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)精液的參考值范圍新版手冊(cè)對(duì)正常生育男性額精液參考值范圍進(jìn)行了修訂。為了制訂參考值范圍,采納了3大洲8個(gè)國(guó)家的400~1900分最近使女方生育的男性的精液標(biāo)本的原始數(shù)據(jù)。在數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方面,由于各項(xiàng)精液參數(shù)的高值都不太可能對(duì)生育產(chǎn)生危害,所以采用單側(cè)參考值區(qū)間,并以第5百分位數(shù)作為參考值下限對(duì)于精液常規(guī)分析參數(shù)來(lái)說(shuō)更為合適,而不需要像一般的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析那樣采用雙側(cè)參考值區(qū)間和第2.5百分位數(shù)。目前二十五頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)新版手冊(cè)制定的參考值范圍WHO版本2345

年1987199219992010

參考值正常正常參考下限精液量.(ml)2.02.02.0

1.5總數(shù)(m)

404040

39精子深度(M/ml)202020

15前向運(yùn)動(dòng)(%)505050

32存活(%)507575

58正常形態(tài)(%)5030(15)4

目前二十六頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)新版手冊(cè)制訂的參考值范圍參數(shù)參考值下限精液體積(ml)1.5(1.+1.7)精子總數(shù)(106/次射精)39(33-46)精子深度(106/ml)15(12-16)總活動(dòng)率(PR+NP,%)40(38-42)前向活動(dòng)率(PR,%)32(31-34)存活率(存活精子。%)58(55-63)精子形態(tài)學(xué)(正常形態(tài),%)4(3.0-4.0)其它參數(shù)PH≧7.2過(guò)氧化物酶陽(yáng)性白細(xì)胞(106/ml)<1.0MAR試驗(yàn)(附著粒上的活動(dòng)精子,%)<50免疫珠試驗(yàn)(附著珠上的活動(dòng)精子,%)<50精漿鋅(∪mol/射精)≧2.4精漿果糖(∪mol/射精)≧13精漿中性葡糖苷本酶(mU射精)≧20目前二十七頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)常見的精液異常少精子癥的分類精子濃度輕度少精子癥≧10,<20(15)×106/ml中度少精子癥≧5,<10×106/ml嚴(yán)重少精子癥≧1,<5×106/ml極度少精子癥<1×106/ml引用WHO指南目前二十八頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)常見的精液異常弱精子癥的分類精子活力(a+b)輕度弱精子癥≧30(20)%<50(32)%中度弱精子癥≧10%,<30(20)%嚴(yán)重弱精子癥≧1,<10%極度弱精子癥<1%或死精子癥引用WHO指南目前二十九頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)常見的精液異?;尉影Y的分類精子正常形態(tài)率輕度畸形精子癥≧10(3)%<5(4)%中度畸形精子癥≧5(2)%,<10(3)%嚴(yán)重畸形精子癥≧1,<5(2)%極度畸形精子癥<1%引用WHO指南目前三十頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)無(wú)精子癥:精液內(nèi)無(wú)精子(2次或以上精液分析)處理:離心力3000時(shí)間:15min鑒別:隱匿性無(wú)精子癥:可以看到精子無(wú)精子癥:始終未見精子常見的精液異常目前三十一頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)丈夫精液人工授精適應(yīng)癥1、男方因少精、弱精、精液液化異常、性功能障礙、生殖功能器畸形,逆行射精等原因引起的不育;2、免疫性不育。輔助生殖——男方適應(yīng)癥目前三十二頁(yè)\總數(shù)三十四頁(yè)\編于十七點(diǎn)體外授精及胚胎移植(

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