質(zhì)譜技術(shù)及其在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用 南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)部 彭永正

南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)部彭永正2019.03.19

廣州主要內(nèi)容?

一、質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用的發(fā)展歷程?

二、質(zhì)譜技術(shù)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用?

三、質(zhì)譜技術(shù)在藥物代謝研究中的應(yīng)用?

四、質(zhì)譜技術(shù)在法醫(yī)和毒物學(xué)研究中的應(yīng)用?

五、質(zhì)譜技術(shù)的現(xiàn)場(chǎng)和手術(shù)室的應(yīng)用?

六、質(zhì)譜技術(shù)在蛋白質(zhì)檢測(cè)中的應(yīng)用?

七、質(zhì)譜技術(shù)在心血管疾病中的應(yīng)用精準(zhǔn)醫(yī)療?

本質(zhì)是通過基因組、蛋白質(zhì)組等組學(xué)技術(shù)和醫(yī)學(xué)前沿技術(shù)，對(duì)于大樣本人群與特定疾病類型進(jìn)行生物標(biāo)記物的分析與鑒定、驗(yàn)證與應(yīng)用，從而精確尋找到疾病的原因和治療的靶點(diǎn)，并對(duì)一種疾病不同狀態(tài)和過程進(jìn)行精確分類，最終實(shí)現(xiàn)對(duì)于疾病和特定患者進(jìn)行個(gè)性化精準(zhǔn)治療的目的，提高疾病診治與預(yù)防的效益。精準(zhǔn)診斷?

精準(zhǔn)診斷的兩大技術(shù)平臺(tái)：基因測(cè)序生物質(zhì)譜：質(zhì)譜技術(shù)在臨床中的應(yīng)用也越來越深入和廣泛。代謝組學(xué)—研究和應(yīng)用的熱點(diǎn)DNA細(xì)胞-最大潛能什么是可能發(fā)生的信息物質(zhì)RNA細(xì)胞-發(fā)展方向什么是將要發(fā)生的蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)物細(xì)胞-執(zhí)行功能什么是賴以發(fā)生的細(xì)胞-終極功能什么是正在發(fā)生的5質(zhì)譜技術(shù)的發(fā)展歷程?

質(zhì)譜技術(shù)是分離和檢測(cè)帶電粒子質(zhì)荷比的分析技術(shù)。因設(shè)備、人員和標(biāo)準(zhǔn)化問題，以前只應(yīng)用于有實(shí)力的科研機(jī)構(gòu)。?

隨著離子源及質(zhì)量分析器技術(shù)的變革、質(zhì)譜儀器設(shè)計(jì)的快速改進(jìn)等，質(zhì)譜技術(shù)已成為化學(xué)分析領(lǐng)域和生命科學(xué)領(lǐng)域非常有效的分析工具，尤其在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用。國

外?

2010年，LC-MS/MS廣泛應(yīng)用于歐美臨檢參考實(shí)驗(yàn)室。由于第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)的推動(dòng)，從大型醫(yī)院臨檢實(shí)驗(yàn)室向中小型、甚至社區(qū)醫(yī)院擴(kuò)展迅速。近年來，在歐美等發(fā)達(dá)國家，質(zhì)譜技術(shù)已廣泛應(yīng)用于檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，基于該技術(shù)開發(fā)出的臨床檢測(cè)項(xiàng)目已有數(shù)百項(xiàng)。?

在蛋白組學(xué)：正在研究如何從科研轉(zhuǎn)化到臨床應(yīng)用。?

美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)已發(fā)布臨床質(zhì)譜的應(yīng)用指南。國

內(nèi)?

我國質(zhì)譜技術(shù)最早始于治療藥物監(jiān)測(cè)。隨后大范圍應(yīng)用于遺傳代謝病檢測(cè)、維生素檢測(cè)和微生物鑒定等。因其具有良好的發(fā)展前景，有望成為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域下一個(gè)革命性技術(shù)而被廣泛關(guān)注。?

我國目前仍處于起步階段，檢測(cè)項(xiàng)目目前也只有70余項(xiàng)。?

潘柏申.迎接質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)入檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,

2017,40

(10)

:733-736.?

中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會(huì),

衛(wèi)生計(jì)生委臨床檢驗(yàn)中心.液相色譜-質(zhì)譜臨床應(yīng)用建議.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,

2017,

40

(10)

:770-779.優(yōu)

點(diǎn)?

與傳統(tǒng)的免疫檢測(cè)相比，質(zhì)譜檢測(cè)在檢測(cè)的靈敏度、特異性、多指標(biāo)同時(shí)檢測(cè)等方面具有非常強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)，其在新生兒遺傳代謝病篩查、維生素及激素、治療藥物監(jiān)測(cè)、微生物鑒定、核酸測(cè)定、微量元素檢測(cè)等領(lǐng)域擁有廣闊的應(yīng)用前景。舉例：先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥-以

21羥化酶缺陷癥最常見可通過質(zhì)譜技術(shù)，我們就可以通過上游、下游和旁路來檢測(cè)代謝，通過多維度檢測(cè)可以一次檢測(cè)確定疾病，提高了效率。不

足?

1、所需的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、試劑、耗材和儀器的維修服務(wù)等成本高；質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備昂貴，技術(shù)人才匱乏，臨床應(yīng)用的門檻高。?

2、自動(dòng)化程度較低，對(duì)人依賴性較大；同時(shí)在數(shù)據(jù)處理和報(bào)告發(fā)放環(huán)節(jié)，仍未實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化；?

3、對(duì)于質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用較成熟的項(xiàng)目，檢測(cè)數(shù)據(jù)仍缺乏統(tǒng)一的應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)，而且結(jié)果易受干擾，存在較大的風(fēng)險(xiǎn)；?

4、

目前均為自建方法檢測(cè)，尚未標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化。?

5.、國內(nèi)監(jiān)管尚不成熟，部分檢測(cè)項(xiàng)目無收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。美國臨床質(zhì)譜學(xué)會(huì)主席

David

Herold?

中國質(zhì)譜技術(shù)在整體檢測(cè)項(xiàng)目上的應(yīng)用差異和美國并不大，更多的是技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化和自動(dòng)化的差距。而這跟各個(gè)實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員的水平和設(shè)施條件都密切相關(guān)。要真正把質(zhì)譜在臨床進(jìn)行推廣，就需要進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化和自動(dòng)化管理，包括試劑生產(chǎn)、系統(tǒng)開發(fā)或者試劑盒的準(zhǔn)備等過程。?

“這扇大門已經(jīng)打開，未來將讓所有的醫(yī)院都可以做質(zhì)譜?！?

2018.10.28國家戰(zhàn)略?

自然科學(xué)基金委醫(yī)學(xué)部“精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)背景下的檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)：機(jī)遇與挑戰(zhàn)”學(xué)科戰(zhàn)略研討會(huì)?

2017.11.20-21

廣州精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)是醫(yī)療健康領(lǐng)域未來的重要發(fā)展方向?

對(duì)風(fēng)險(xiǎn)的“精準(zhǔn)”預(yù)測(cè)?

對(duì)疾病的“精準(zhǔn)”診斷?

對(duì)疾病的“精準(zhǔn)”分型?

對(duì)預(yù)后的“精準(zhǔn)”評(píng)估?

對(duì)藥物的“精準(zhǔn)”應(yīng)用精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)?

對(duì)個(gè)體的“精準(zhǔn)”營養(yǎng)DNA雙螺旋單基因克隆物種進(jìn)化孟德爾遺傳規(guī)律染色體遺傳機(jī)制大數(shù)據(jù)分析多組學(xué)現(xiàn)在物種進(jìn)化個(gè)體水平亞細(xì)胞水平分十九世紀(jì)以前190019101952003未來13多組學(xué)的發(fā)展?

基因組學(xué)?

蛋白質(zhì)組學(xué)?

代謝組學(xué)?

免疫組學(xué)?

腸道微生物組學(xué)發(fā)現(xiàn)神經(jīng)氨酸酶是冠心病防治新靶標(biāo)中國藥科大學(xué)

齊煉文

教授臨床代謝組學(xué)中心Targeted

quantification

ofmetabolic

marker

Neu5Ac

by

LC-MS/MS

in500

CAD

patients’

plasma

(100

fromeach

group)Wei

T

T,

…,ZhuW*,LiP*,QiLW*,

Circulation,

2017,

Accepted.提出“臨床代謝組學(xué)“概念臨床代謝組學(xué)，是指結(jié)合臨床大樣本，采用代謝組學(xué)和生物信息學(xué)等手段，從整體上描繪內(nèi)源性代謝臨

床代

謝

組

學(xué)小分子集合在疾病擾動(dòng)下的穩(wěn)態(tài)失衡及藥物干預(yù)下的轉(zhuǎn)歸機(jī)制，揭示疾病潛在的診療生物標(biāo)志物和可干預(yù)靶標(biāo)的一門學(xué)科。17代謝組學(xué)研究方法非靶向代謝組學(xué)（

Untargeted

metabolomics

）發(fā)現(xiàn)測(cè)定生物樣本中的所有代謝物，尋找在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中豐度改變有顯著變化的代謝特征，鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)新的分子用于疾病早期診斷和研究，解釋與生物過程或生物狀態(tài)之間的關(guān)聯(lián)靶向代謝組學(xué)（Targeted

metabolomics）定量測(cè)定已知的代謝物，

需要用分析標(biāo)準(zhǔn)品/內(nèi)標(biāo)進(jìn)行定量分析定量工具：高靈敏度、高特異性、高準(zhǔn)確性、高通量LC/MS/MS；GC/MS質(zhì)譜技術(shù)，檢驗(yàn)人的另一雙“眼睛”！色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)-1?

1.氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)（GC-MS）：電子轟擊電離（electron

impactionization,EI）給樣品較大能量化學(xué)電離（chemical

ionization,CI）給樣品較小能量2.液相色譜-質(zhì)譜技術(shù)（LC-MS）HPLC

分離化合物范圍最廣、準(zhǔn)確度高、對(duì)化合物破壞性小的快速分離方法。質(zhì)譜儀

靈敏度最高、對(duì)未知化合物的結(jié)構(gòu)分析及定性最準(zhǔn)確、要求相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)樣品或?qū)y(cè)定化合物的了解最少的定性手段。高效液相色譜-質(zhì)譜儀聯(lián)用

它以液相色譜作為分離系統(tǒng)，質(zhì)譜為檢測(cè)系統(tǒng);

液質(zhì)聯(lián)用體現(xiàn)了色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢(shì)的互補(bǔ)，將色譜對(duì)復(fù)雜樣品的高分離能力，與MS具有高選擇性、高靈敏度及能夠提供相對(duì)分子質(zhì)量與結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點(diǎn)結(jié)合起來。色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)-2?

3.串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)

目前生命科學(xué)研究的質(zhì)譜儀器

兩級(jí)或多級(jí)串聯(lián)優(yōu)點(diǎn)：（1）獲得更多有關(guān)待測(cè)離子的結(jié)構(gòu)信息，適合未知化合物的結(jié)構(gòu)解析；（2）對(duì)相同分子量的化合物共流出物區(qū)分開來；（3）提高子離子的選擇性、提高信噪比、降低檢測(cè)限利于復(fù)雜基質(zhì)樣品分析，提高定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。最常見：三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜

MS/MS

2個(gè)四級(jí)桿分析器，1個(gè)碰撞室。質(zhì)譜解析?

1.分子量的確定

分子離子的質(zhì)荷比。?

2.分子式的確定?

3.分子結(jié)構(gòu)的確定?

4.軟電離源質(zhì)譜的解釋質(zhì)譜技術(shù)的臨床應(yīng)用?

一、質(zhì)譜技術(shù)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用?

二、質(zhì)譜技術(shù)在蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用?

三、質(zhì)譜技術(shù)在藥物代謝研究中的應(yīng)用?

四、質(zhì)譜技術(shù)在法醫(yī)和毒物學(xué)研究中的應(yīng)用?

五、質(zhì)譜技術(shù)的其它應(yīng)用質(zhì)譜技術(shù)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用?

（一）同位素稀釋質(zhì)譜技術(shù)（ID-MS）?

（二）電感耦合等離子體質(zhì)譜技術(shù)（ICP-MS）?

（三）質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)1.新生兒疾病篩查2.治療藥物監(jiān)測(cè)3.激素水平測(cè)定4.維生素

D測(cè)定5.微生物鑒定（一）同位素稀釋質(zhì)譜技術(shù)（ID-MS）?

它是一種最有效、最準(zhǔn)確的測(cè)量痕量及超痕量物質(zhì)的方法。檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)溯源聯(lián)合委員會(huì)（Joint

Committee

onTraceability

inLaboratory

Medicine，JCTLM）所建立的參考測(cè)量程序中，有機(jī)小分子檢驗(yàn)項(xiàng)目57種參考方法的52種采用了ID-MS。優(yōu)點(diǎn)：高精度（同位素質(zhì)譜測(cè)量）、高準(zhǔn)確度（化學(xué)計(jì)量）缺點(diǎn)：儀器、試劑和運(yùn)行成本很高，處理樣品時(shí)需加入的同位素稀

釋劑制備成本較高、試劑來源較困難等。同位素稀釋質(zhì)譜測(cè)定ApoA-Ⅰ同位素稀釋質(zhì)譜測(cè)定ApoA-Ⅰ?

The

IFCC

hasnow

developed

a

lyophilized

serum

reference

materialfor

apoA-I，the

World

Health

Organization-IFCC

First

IntemationalReference

Reagent

for

Apolipoprotein

A-I

.?

We

selected

BCR

CRM

393

for

use

ina

modelassessment

oftheproposedenzymatic

hydrolysis-chromatographic-ID-MS

method.Determinations

of

peptide

molecular

mass

by

FAB-MS

coupled

withLC-MS

techniques,

suchas

cf-FAB-MS

andsequence

analysisbytandem

MS,

were

usedfor

the

structural

characterization

ofapoA-I.ClinicalCheinistiy1996,42(

10),

1676-1682（二）電感耦合等離子體質(zhì)譜技術(shù)(ICP-MS)?

可以同時(shí)測(cè)定痕量多元素的無機(jī)質(zhì)譜技術(shù)，克服了傳統(tǒng)方法的大多數(shù)缺點(diǎn)，被稱為當(dāng)代分析技術(shù)的重大發(fā)展。?

傳統(tǒng)元素分析方法的缺點(diǎn)：樣品前處理復(fù)雜，需萃取、濃縮富集或抑制干擾；或是不能進(jìn)行多組分或多元素同時(shí)測(cè)定，耗時(shí)費(fèi)力；或是儀器的檢測(cè)限或靈敏度達(dá)不到指標(biāo)要求等。?

ICP-MS

的特點(diǎn)：靈敏度高、分析速度快、方法可靠、易與其它技術(shù)聯(lián)用；但樣品制備和樣品導(dǎo)入仍然是目前最薄弱的環(huán)節(jié)。?

應(yīng)用范圍：無機(jī)元素測(cè)定，穩(wěn)定同位素示蹤研究，元素形態(tài)分析。（三）質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)-新生兒疾病篩查1?

遺傳代謝?。╥nbornerrorofmetabolism,IEM）是一類涉及氨基酸、有機(jī)酸、脂肪酸、尿素循環(huán)、碳水化合物、類固醇等多種物質(zhì)代謝的疾病。其種類繁多，是兒科的疑難雜癥。雖然其單一病種患病率較低，但總體發(fā)病率高，對(duì)人口素質(zhì)、家庭乃至社會(huì)的發(fā)展構(gòu)成了極大威脅。其診斷主要依賴實(shí)驗(yàn)室的特異性檢查。?

1966年，Tanaka運(yùn)用GC-MS發(fā)現(xiàn)首例異戊酸血癥GC-MS

有機(jī)酸尿癥的主要診斷方法常規(guī)篩查—新生兒篩查或高危篩查氨基酸代謝病—尿液GC-MS分析（三）質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)-新生兒疾病篩查2?

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜：液質(zhì)聯(lián)用體現(xiàn)了色譜和質(zhì)譜的優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，結(jié)合了色譜對(duì)復(fù)雜樣品的高分離能力和質(zhì)譜的高選擇性，高靈敏度及能夠提供相對(duì)分子量和結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點(diǎn)。?

隨著串聯(lián)質(zhì)譜儀在我國的應(yīng)用，越來越多的遺傳性代謝疾病可以在新生兒時(shí)期被篩查出來，目前可一次篩查40多種疾病。CurrMed

Chem.

2012;19(26):4511-22（三）質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)-新生兒疾病篩查-3?

串聯(lián)質(zhì)譜為新生兒篩查帶來了巨大發(fā)展，實(shí)現(xiàn)了“一種方法檢測(cè)多種疾病”。串聯(lián)質(zhì)譜有更高的準(zhǔn)確性，且有更高的實(shí)效性。?

它可以同時(shí)檢測(cè)包括氨基酸病、有機(jī)酸代謝紊亂、脂肪酸氧化缺陷在內(nèi)的50種遺傳代謝病，大大提高了篩查效率。?

Curr

Med

Chem.

2012;19(26):4511-22（四）質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)-治療藥物監(jiān)測(cè)1?

Oneofthefirst

usesofquantitative

LC-MS/MS

was

for

thetherapeutic

drug

monitoring

(TDM)

of

immunosuppressants.Cyclosporin

and

tacrolimus

werethe

first

assays

to

be

developed,and

many

ofthe

methods

inusehave

changed

little

since

they

werefirst

reported.?

There

are

still

at

least

seven

immunoassaysinuse

as

reflected

inEQA

schemes.

Some

immunoassays

also

demonstrate

highbetween-laboratory

CVs,

upto

around15%,

whereas

MSisapproximately

halfofthisat

around

8%

even

though

differentinstruments.（五）質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)-激素水平測(cè)定-1?

Theuse

ofLC-MS/MS

insteroid

hormonemeasurement

has

achievedrecognition

by

clinical

peer-reviewed

journals

suchas

theJournal

ofClinical

Endocrinology

andMetabolism

whopublished

apositionstatement

in2013

requiring

that

any

manuscriptspresented

to

theirjournal

from2015

onwards

will

onlybeconsidered

for

publicationifany

sex

steroid

hormone

determination

isperformed

by

MS-basedmethods.Liquidchromatography

tandem

massspectrometry

inthe

clinicallaboratory.

Downloaded

onOctober

30,

2014（五）質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)-激素水平測(cè)定-2?

Despite

itsgenerally

accepted

advantages,

the

measurement

ofsteroid

hormones

by

LC-MS/MS

is

not

withoutproblems.

Somesteroids

have

the

same

massandfragment

to

give

the

same

productionsandcouldtherefore

causeanisobaric

interference（同種異序干擾）.

An

example

ofthisis11-deoxycortisol,

21-deoxycortisol

andcorticosterone（皮質(zhì)酮）。?

In

these

cases,careful

attention

to

chromatography

should

beapplied

to

ensureadequate

resolution

ofthese

compounds.Fanelli

F,

et

al.Steroids.

2011

Feb;76(3):244-53（五）質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)-激素水平測(cè)定-3Fig.

1.

Chromatographic

peak

with

its

retentiontime

forcortisol(A),

corticosterone

(B),

11deoxycortisol

(C)。（五）質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)-激素水平測(cè)定-4androstenedione

雄烯二酮(D),deoxycorticosterone

DOC(E),

testosterone

(F)（五）質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)-激素水平測(cè)定-517OH

progesterone(G),

dehydroepiandrosterone

脫氫表雄酮DHEA(H)

andprogesterone

(I).質(zhì)譜技術(shù)在法醫(yī)和毒物學(xué)研究中的應(yīng)用法醫(yī)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室都開始采用LC/MS

作為篩查的重要工具。液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)無論是在靈敏度、專一性和定量準(zhǔn)確性方面，還是在成本消耗和更廣泛的化合物覆蓋方面，均優(yōu)于傳統(tǒng)的免疫學(xué)方法。Bruker

將其超高性能的飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)和離子阱質(zhì)譜技術(shù)應(yīng)用于法醫(yī)毒物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域，開發(fā)出ToxScreener?

和ToxTyper?

兩種解決方案，實(shí)現(xiàn)了從樣品到報(bào)告一鍵式標(biāo)準(zhǔn)控制和管理，完全滿足法醫(yī)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的要求。質(zhì)譜技術(shù)在法醫(yī)和毒物學(xué)研究中的應(yīng)用?

對(duì)于搶救處于昏迷狀態(tài)的中毒者，質(zhì)譜在靈敏速和速度方面，都有無可比擬的優(yōu)點(diǎn)。一般的辦法是：抽取中毒人的胃液或血液，過濾或離心除去沉淀物，用有機(jī)溶液抽取，作為色—質(zhì)譜分析的樣品，在計(jì)算機(jī)的外存貯器中，事前存貯數(shù)百種毒物的譜圖，對(duì)質(zhì)譜的結(jié)果進(jìn)行自動(dòng)檢索，這樣可以在半小時(shí)之內(nèi)，對(duì)數(shù)百種毒物作出判斷。質(zhì)譜技術(shù)的其它應(yīng)用?

便攜式質(zhì)譜儀是新型質(zhì)譜儀的研究熱點(diǎn)之一，便攜式質(zhì)譜儀的研究主要集中在離子化技術(shù)、質(zhì)量分析技術(shù)方面。?

應(yīng)用范圍：現(xiàn)場(chǎng)

反恐手術(shù)室質(zhì)譜分析在手術(shù)室的應(yīng)用用質(zhì)譜技術(shù)來評(píng)估腦腫瘤手術(shù)的邊界?

In

brain

cancer

surgery,

surgical

margin

evaluationiscriticalbecausesparing

normal

marginal

tissue

may

significantly

impactpostoperative

quality

oflife.?

Cooks’

laboratory

at

Purdue

University

described

the

useof

anemerging

technology,

desorption

electrospray

ionization

massspectrometry

(DESI-MS),

to

analyze

the

lipid

and

metabolite

profilesofhumanbrain

tumorswiththe

perspective

of

usingthis

techniqueintraoperatively

for

tumormarginevaluation.腦組織腫瘤代謝物的質(zhì)譜分析?

Interestingly,

when

exploring

metabolic

profiles,

N-acetyl-asparticacid

(NAA,N-乙酰-天冬氨酸),

detected

at

m/z174,

was

found

toenable

clear

discriminationofnormalbrain

from

gliomas.

Thisfindingsupports

previous

MRIstudies

that

indicated

the

significanceofNAA

indiscriminating

normal

and

diseased

neural

tissues.

Thiswas

the

first

study

to

describe

the

detection

of

the

oncometaboliteNAA

inbrain

tissue

by

MS.desorptionelectrospray

ionizationmassspectrometry

(DESI-MS)的特點(diǎn)?

Because

ambient

ionization

MS

provides

great

analyticalsensitivity,

specificity,

and

animmense

depth

andrichness

ofmolecular

information

in

real

time,directly

from

tissue

samples,

theprospect

ofusing

thistechnologyinand

outside

ofthe

ORisbroadandvery

exciting.

We

foresee

real-time

preoperative

diagnosisofbiofluidsandbiopsy

samples

as

apromisingapplication

yet

to

bemore

carefully

explored

using

ambient

ionization

MS。LC-MS/MS用于蛋白質(zhì)檢測(cè)?

Oneof

the

first

clinically

relevant

proteins

to

bequantifiedby

LC-MS/MSwas

thyroglobulin

(Tg).甲狀腺球蛋白免疫分析法測(cè)定甲狀腺球蛋白的不足?

Tg

is

aserum

tumormarker

that

isused

clinically

to

monitorpatients

treated

for

thyroid

carcinoma

.Current

immunoassaysforthyroglobulin

have

sufficientfunctional

sensitivity(<0.1

ng/mL)butonlyinthe

absence

ofthyroglobulin

autoantibodies

(Tg-Ab).

Theseautoantibodies

are

present

inapproximately

10%

ofthegeneralpopulation

but

that

increases

to

approximately

25%

inpatientstreated

for

thyroid

carcinoma.The

presence

of

Tg-Ab

renders

Tg?

immunoassaysinaccurate

by

either

causing

falsely

lowor

falselyhighresults。質(zhì)譜技術(shù)在心血管疾病中的應(yīng)用?

心血管疾病是心臟病，中風(fēng)和影響心臟和血管等其它疾病的總稱，這是導(dǎo)致死亡的主要原因。根據(jù)世界衛(wèi)生組織的數(shù)據(jù)，每年全球約有1800萬人因心血管疾病死亡。這些疾病通常源于動(dòng)脈粥樣硬化。傳統(tǒng)的動(dòng)脈粥樣硬化血脂類檢驗(yàn)指標(biāo)

總膽固醇（FC、CE）

甘油三酯（FG、TG、

DG）

低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）

高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）三油酸甘油酯膽固醇棕櫚酸酯載脂蛋白概述?

載脂蛋白與動(dòng)脈粥樣硬化密切相關(guān)，是心血管疾病的重要標(biāo)志物。?

目前臨床應(yīng)用的載脂蛋白檢測(cè)項(xiàng)目非常有限。?

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜可實(shí)現(xiàn)同時(shí)檢測(cè)多種載脂蛋白，特異，定量。?

EXPERTREVIEWOFPROTEOMICS,2017

VOL.

14,

NO.

10,

869–880用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜定量測(cè)定載脂蛋白Apolipoprotein

B48

as

a

marker

of

postprandialmetabolism

and

its

relation

to

cardiovascular

risk?

Plasmaconcentration

of

apoB48

correlated

with

postprandiallipaemia.

Importantly,

postprandial

elevation

of

TG,

chylomicronsand

chylomicron

remnants,

andalso

ofapoB48,

occursin

obesity,insulin

resistance

and

diabetes

mellitus.?

Smith

D,

et

al.

EurJClin

Invest

1999;29:204–9?

Dominiczak

MH,et

al.Ann

Clin

Biochem2011;

48:

498–515.LC-MS/MS定量測(cè)定人血清載脂蛋白的第一篇文獻(xiàn)建立的LC-MS/MS方法的特點(diǎn)?

同時(shí)測(cè)定載脂蛋白

Apo(

apolipoproteins

),

包括Apo

AⅠ,

AⅡ,

AIV,?

CⅠ,

CⅡ,

CⅢ,

D,

FandM。?

不需要抗體。LC-MRM/MS與免疫法測(cè)定Apo-Ⅰ和ApoB分析速度及展望?

每天15個(gè)標(biāo)本；傳統(tǒng)非靶向蛋白質(zhì)組分析

每天≤3個(gè)標(biāo)本?

With

improvements

in

the

work

flowusingautomation

and

shorterApolipoprotein

Quantification

by

LC-MRM/MS

chromatographicruntimes,

multiplexed

LC-MRM/MS

protein

assays

may

be

translated

tolarge

clinicalstudies

andeventually

to

regular

clinical

laboratoryoperations.LC-MS/MS用于載脂蛋白檢測(cè)?

1.隨著自動(dòng)化和色譜分析分析時(shí)間的縮短，最終可常規(guī)用于臨床實(shí)驗(yàn)室。?

2.單次運(yùn)行可以同時(shí)檢測(cè)多種載脂蛋白。?

3.

2017年，IFCC

（國際臨床化學(xué)和檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)聯(lián)合會(huì)）科學(xué)部成立了工作組，對(duì)臨床相關(guān)載脂蛋白A-Ⅰ、B、C-Ⅰ、C-Ⅱ、C-Ⅲ、E及apo(a)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，并建立上述載脂蛋白的LC-MS/MS的參考測(cè)量系統(tǒng)。Apolipoproteins

byMassSpectrometry

(WG-APOMS)?

MembershipNamePositionChairCountryNLDEFRDEFRUSUSNLTerm1stTimeinOffice201701

-201912C.CobbaertU.

CeglarekV.DelatourJ.DittrichMemberMemberMemberMemberMemberMemberMemberMemberC.HirtzA.HoofnagleZ.KuklenyikL.R.

RuhaakH.W.VesperH.

AlthausUSIVDRepresentative/Siemens

DEU.

PrinzingIVDRepresentative/RocheDEG.M.KostnerH.

SchimmelI.ZegersConsultantConsultantConsultantATBEBE工作目標(biāo)（Terms

of

Reference）?

1、To

achieve

standardization

ofa

panel

ofclinically

relevant

serumapolipoproteins

(apo)

A-I,

B,

C-I,

C-II

,C-III,

Eandapo(a)

(includingqualitative

phenotyping

where

needed).

Standardization

isdone

insuchaway

that

measurement

results

are

traceable

to

SIasoutlinedinISO

17511.

Other

traceability

chains

willbe

used

incases

wheretraceability

to

SI

cannot

be

achieved.?

2、To

evaluate

clinical

performance

and

clinical

utility

ofserumapolipoprotein

panel(s)

for

CVD

risk

stratification

and

treatment,

incomparisonto

ortogether

with

contemporary

blood

lipids.目前的工作-1?

Define

theanalytes

/measurands

intended

to

be

measured.?

Development

ofprimary

and

secondary

reference

materials,including

evaluation

ofcommutability.?

Development

ofan

LC-MS/MS-based

reference

method

for

theabove

mentionedanalytes

that

are

unaffected

by

genetic

variants,post-translational

modifications

and

other

factors.

The

referencemethod

will

meet

relevant

ISOstandards

(i.e.,

ISO

15195).?

Evaluation

ofthe

analytical

performance

ofthe

LC-MS/MS

referencemethod.目前的工作-2?

Assessment

ofthe

performance

ofcommercially

availableapolipoprotein

assays

compared

to

the

reference

method

usingcommutable

reference

materials

aswell

assingle

donationsamples.?

Any

reference

materials

and

reference

measurement

proceduresdeveloped

will

besubmitted

to

JCTLM（Joint

Committee

forTraceability

in

Laboratory

Medicine，國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)溯源性聯(lián)合委員會(huì)）

for

review

and

listing

onthe

JCTLM

database.未來的工作?

Evaluation

ofclinical

performance

and

clinical

utility

ofthemultiplexed

apolipoprotein

test

according