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關(guān)于環(huán)境微生物學(xué)第一章病毒第1頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)病毒的一般特征及其分類(lèi)第二節(jié)病毒的形態(tài)和結(jié)構(gòu)第三節(jié)病毒的繁殖第四節(jié)病毒的培養(yǎng)第五節(jié)病毒對(duì)物理、化學(xué)因素的抵抗力及在污水處理過(guò)程中的去除效果第一章病毒第2頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)病毒的一般特征及其分類(lèi)一、病毒的特點(diǎn)二、病毒的分類(lèi)第3頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月一、病毒的特點(diǎn)1.個(gè)體極小,能通過(guò)細(xì)菌濾器,需借助電子顯微鏡觀察;2.專(zhuān)性寄生,沒(méi)有獨(dú)立的代謝功能,只能在特定的宿主細(xì)胞內(nèi)繁殖;3.沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu),大多數(shù)病毒只是蛋白質(zhì)和核酸組成的大分子,且只含單種核酸(DNA或RNA);4.繁殖方式是依靠宿主的代謝體系進(jìn)行“復(fù)制”;5.它對(duì)一般的抗生素不敏感,但對(duì)于干擾素敏感;6.只有在宿主體內(nèi)才表現(xiàn)出生命的特征,在體外具有生物大分子的特征。第4頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月二、病毒的分類(lèi)隨著對(duì)病毒研究的深入,人們還發(fā)現(xiàn)了類(lèi)病毒因子。所以現(xiàn)在病毒有真病毒、亞病毒和朊病毒之分。通常根據(jù)宿主將病毒分為三大類(lèi):動(dòng)物病毒、植物病毒、細(xì)菌病毒(噬菌體)
據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道統(tǒng)計(jì),已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的人類(lèi)病毒有300多種(1984年),脊椎動(dòng)物病毒有931種(1981年),昆蟲(chóng)病毒有1671種(1990年),植物病毒有600余種(1983年),真菌病毒有近100種(1982年)。
1995年在ICTV上共報(bào)道了4000余種病毒第5頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié)病毒的形態(tài)和結(jié)構(gòu)一、病毒的形態(tài)和大小二、病毒的化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)第6頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月一、病毒的形態(tài)和大小動(dòng)物病毒的形態(tài)有:球形、卵圓形、磚形植物病毒的形態(tài)有:桿狀、絲狀和球狀噬菌體病毒的形態(tài)有:蝌蚪狀和絲狀病毒的形態(tài)第7頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月一、病毒的形態(tài)和大小動(dòng)物病毒的形態(tài)有:球形、卵圓形、磚形植物病毒的形態(tài)有:桿狀、絲狀和球狀噬菌體病毒的形態(tài)有:蝌蚪狀和絲狀病毒的形態(tài)第8頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
細(xì)菌病毒——噬菌體第9頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月植物病毒——煙草花葉病毒第10頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月非典型肺炎元兇——冠狀病毒第11頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月病毒的大小動(dòng)物病毒:大小痘病毒(200~350nm)(200~250nm)口踢役病毒(10~22nm)植物病毒:甜菜黃葉病毒(1250nm)南瓜花病毒(22nm)噬菌體病毒:大腸桿菌噬菌體T2、T4、T6頭部:9060nm尾部:10020nm25nm大腸桿菌噬菌體f2第12頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月二、病毒的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)
病毒的主要化學(xué)組成有蛋白質(zhì)、核酸、少數(shù)較大的病毒含脂類(lèi)和多糖,如痘病毒。脂類(lèi)中磷脂占50~60%,其余則為膽固醇;多糖常以糖脂、糖蛋白形式存在。(一)化學(xué)組成第13頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(二)病毒結(jié)構(gòu)
整個(gè)病毒體可以分成兩部分:蛋白質(zhì)部分和核酸部分病毒的三種結(jié)構(gòu):衣殼粒以對(duì)稱(chēng)的方式,有規(guī)律地排列,構(gòu)成病毒的蛋白質(zhì)外殼,稱(chēng)蛋白質(zhì)衣殼(Capsid);衣殼中包含病毒的核酸,即核髓;有的病毒的核衣殼外還有被膜(Envelope)包圍。第14頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月
核髓和衣殼合稱(chēng)核衣殼。完整的病毒顆粒稱(chēng)病毒粒子(Virion)。裸露的病毒粒子有被膜的病毒粒子衣殼粒衣殼核髓核髓衣殼粒被膜(整個(gè)外層)核衣殼第15頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月1.蛋白質(zhì)衣殼
蛋白質(zhì)衣殼是由一定數(shù)量的衣殼粒(由一種或幾種多肽鏈折疊而成的蛋白質(zhì)亞單位)按一定排列組合構(gòu)成的病毒外殼,稱(chēng)蛋白質(zhì)衣殼。由于衣殼粒的排列組合不同,使病毒有三種對(duì)稱(chēng)性構(gòu)型:立體對(duì)稱(chēng)型、螺旋對(duì)稱(chēng)型和復(fù)合對(duì)稱(chēng)型第16頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月立體對(duì)稱(chēng)型螺旋對(duì)稱(chēng)型復(fù)合對(duì)稱(chēng)型第17頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月蛋白質(zhì)衣殼的功能:蛋白質(zhì)是病毒的主要成分,它主要用于構(gòu)成病毒的外殼。以保護(hù)病毒的核酸。病毒蛋白質(zhì)外殼決定病毒感染的特異性,與易感細(xì)胞表面存在的受體有特異親和力,能促進(jìn)病毒粒子的吸附。病毒的蛋白質(zhì)還決定其抗原性,會(huì)刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。第18頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月2.核酸內(nèi)芯
每種病毒只含有單一類(lèi)型的核酸(DNA或RNA)。動(dòng)物病毒有的是DNA型,有的是RNA型;植物病毒絕大多數(shù)屬RNA型,少數(shù)為DNA型,噬菌體多數(shù)為DNA型,少數(shù)為RNA型。核酸內(nèi)芯的功能:
決定病毒的遺傳、變異和對(duì)敏感宿主細(xì)胞的感染力。第19頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月3.被膜
有的病毒的核衣殼外有一層松散的被膜(囊膜),被膜主要由蛋白質(zhì)(常為糖蛋白)和脂類(lèi)組成。
第20頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月病毒的結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)衣殼核酸被膜第21頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)病毒的繁殖一、病毒的繁殖過(guò)程二、病毒的溶原性第22頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月一、病毒的繁殖過(guò)程病毒復(fù)制研究得較為清楚的是大腸桿菌T系噬菌體。其繁殖過(guò)程包括:吸附(Absorption)——侵入(Penetration)——增殖(Breeding或復(fù)制Replication)——成熟(Maturity或稱(chēng)裝配Assembly)——釋放(Release)。噬菌體蛋白質(zhì)噬菌體DNA吸附侵入增殖成熟釋放第23頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月一、病毒的繁殖過(guò)程噬菌體的結(jié)構(gòu)第24頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(一)吸附吸附是病毒感染宿主細(xì)胞的第一步。以大腸桿菌T系噬菌體的繁殖過(guò)程為例:首先,大腸桿菌T系噬菌體以它的尾部末端吸附到敏感細(xì)胞表面上某一特定的化學(xué)成分,或是細(xì)胞壁,或是鞭毛,或是纖毛。病毒對(duì)宿主細(xì)胞的吸附具有高度的特異性。噬菌體吸附位點(diǎn)是細(xì)菌表面的特定受體,這些受體是細(xì)胞表面的化學(xué)組分。如:流感病毒的受體為糖蛋白。第25頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(二)侵入
病毒侵入的方式以T系噬菌體最復(fù)雜:動(dòng)物病毒往往通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞吞噬(Phagocytosis)或胞飲(Pinocytosis)而進(jìn)入細(xì)胞。病毒進(jìn)入細(xì)胞后,核酸再與蛋白質(zhì)外殼分離。植物病毒通過(guò)表面?zhèn)诨蚪柚ハx(chóng)器進(jìn)入植物體。大腸桿菌T系噬菌體以其尾部吸附到敏感菌的表面后,將尾絲展開(kāi),通過(guò)尾部的突刺固著在細(xì)胞上;然后用尾部釋放的酶水解細(xì)胞壁的肽聚糖,使菌壁產(chǎn)生一小孔;接著尾鞘收縮,將尾髓壓入細(xì)胞。(如左圖)第26頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(三)增殖(復(fù)制)病毒侵入細(xì)胞后,宿主細(xì)胞的代謝將發(fā)生變化,它的生物合成將受到病毒核酸的遺傳信息控制。病毒利用宿主的RNA聚合酶等進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,生成噬菌體的mRNA。再由宿主的蛋白質(zhì)合成體系進(jìn)行翻譯,合成復(fù)制噬菌體DNA所需要的酶類(lèi)。第27頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(四)聚集(裝配)當(dāng)所有噬菌體的成分合成完畢后,就開(kāi)始裝配,形成大量的子代噬菌體。如大腸桿菌噬菌體T4的裝配過(guò)程:先合成含有DNA的頭部,然后合成尾部的尾鞘、尾髓和尾絲,裝配成一個(gè)完整的噬菌體。第28頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(五)釋放噬菌體粒子成熟后,籍細(xì)胞裂解而釋放出來(lái),重新感染新的宿主細(xì)胞。細(xì)胞裂解可導(dǎo)致肉眼可見(jiàn)的培養(yǎng)物溶解,即產(chǎn)生噬菌體斑或使液體培養(yǎng)物由渾濁變清。但是也有例外,如線(xiàn)性噬菌體fd成熟后,并不破壞細(xì)胞壁,而是從宿主細(xì)胞中鉆出來(lái),細(xì)菌細(xì)胞仍可繼續(xù)生長(zhǎng)。第29頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月二、病毒的溶源性烈性噬菌體:感染宿主細(xì)胞后,立即引起細(xì)胞裂解的噬菌體稱(chēng)為烈性噬菌體。溫和性噬菌體:感染宿主細(xì)胞后,并不馬上引起細(xì)胞裂解,而是以“原噬菌體”方式整合在宿主細(xì)胞的DNA中,隨寄主繁殖而延續(xù)傳代的噬菌體稱(chēng)為溫和性噬菌體或溶源性噬菌體。含有溫和噬菌體核酸的宿主細(xì)胞就稱(chēng)作溶原細(xì)胞。噬菌體有烈性噬菌體和溫和性噬菌體兩種類(lèi)型:第30頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月病毒侵入細(xì)胞的兩種反應(yīng)宿主DNA噬菌體DNA裂解反應(yīng)溶原性反應(yīng)第31頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月溶原性是細(xì)菌的遺傳特性,即每個(gè)溶原性細(xì)菌的子細(xì)胞一般也是溶原性的。在溶原性細(xì)菌內(nèi)的溫和噬菌體核酸稱(chēng)原噬菌體。原噬菌體不同于營(yíng)養(yǎng)期的噬菌體,它沒(méi)有感染性,對(duì)宿主一般無(wú)不良影響。細(xì)菌的溶原性第32頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月溶原性細(xì)菌的特征:1.具有產(chǎn)生噬菌體的潛在能力:溶原性細(xì)菌培養(yǎng)時(shí),大多數(shù)原噬菌體不進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)繁殖,但少數(shù)會(huì)自發(fā)脫離染色體,導(dǎo)致細(xì)菌裂解。2.具有抗同原噬菌體感染的“免疫性”。即溶原性細(xì)菌對(duì)其本身產(chǎn)生的噬菌體或外來(lái)的同源性噬菌體不敏感,這些噬菌體雖然可以進(jìn)入溶原性細(xì)菌,但不能增殖,也不能導(dǎo)致溶原性細(xì)菌細(xì)菌的裂解。3.溶原性細(xì)菌的復(fù)愈。溶原性細(xì)菌有時(shí)會(huì)丟失原噬菌體,又成為非溶原性細(xì)菌,稱(chēng)為溶原性細(xì)菌的非溶原化,此時(shí),溶原性細(xì)菌并沒(méi)有發(fā)生裂解。4.獲得新的生理特性。如白喉?xiàng)U菌只有感染了特定的原噬菌體后,才會(huì)產(chǎn)生白喉毒素,引起被感染機(jī)體發(fā)病。第33頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月第四節(jié)病毒的培養(yǎng)一、病毒的培養(yǎng)特征二、病毒的培養(yǎng)基三、病毒的培養(yǎng)第34頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月一、病毒的培養(yǎng)特征(一)病毒在液體中的培養(yǎng)特征將噬菌體的敏感細(xì)菌接種在液體培養(yǎng)基中,經(jīng)培養(yǎng)后敏感細(xì)菌均勻分布在培養(yǎng)基中而使培養(yǎng)基渾濁。然后接種噬菌體,敏感細(xì)菌被噬菌體感染后發(fā)生菌體裂解,原來(lái)渾濁的懸浮液變成透明的溶液。第35頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(二)病毒在固體培養(yǎng)基中的培養(yǎng)特征將噬菌體的敏感細(xì)菌接種在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)形成許多菌落,當(dāng)接種稀釋適度的噬菌體后引起點(diǎn)性感染,在感染點(diǎn)上進(jìn)行反復(fù)的感染過(guò)程,宿主細(xì)菌菌落就一個(gè)個(gè)地被裂解成一個(gè)個(gè)的空斑,這些空斑就叫噬菌斑。第36頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月二、病毒的培養(yǎng)基敏感細(xì)胞要具備如下條件:1.必須是活的敏感動(dòng)物或活的敏感動(dòng)物組織細(xì)胞;2.能提供病毒附著的受體;3.敏感細(xì)胞內(nèi)沒(méi)有破壞特異性病毒的限制性核酸內(nèi)切酶。病毒是專(zhuān)性寄生在活的敏感宿主細(xì)胞內(nèi)才能生長(zhǎng)繁殖的微生物。所以病毒的培養(yǎng)基——活的敏感細(xì)胞。第37頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月三、病毒的培養(yǎng)(一)動(dòng)物病毒的培養(yǎng)動(dòng)物病毒的培養(yǎng)方法有動(dòng)物接種、雞胚接種和組織培養(yǎng)技術(shù)。
現(xiàn)在動(dòng)物接種很少用,僅柯薩奇A病毒組(腸病毒)的分離仍用此法。雞胚接種常用于分離流感病毒,雞胚的羊膜腔和尿囊腔用作常規(guī)注射部位,如痘病毒被注射入絨毛尿囊膜上,以呈現(xiàn)在尿囊膜表面的痘斑或痘皰進(jìn)行計(jì)數(shù)。雞胚注射第38頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月(二)噬菌體的分離培養(yǎng)用雙層瓊脂法培養(yǎng)。首先制作底層瓊脂培養(yǎng)基:適合某種宿主細(xì)菌的生長(zhǎng);再制作含宿主細(xì)菌的軟瓊脂培養(yǎng)基,加入噬菌體,倒入先前制作的瓊脂平板上,凝固后培養(yǎng)。第39頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月第五節(jié)病毒對(duì)物理、化學(xué)因素的抵抗力
及在污水處理過(guò)程中的去除效果一、病毒對(duì)物理因素的抵抗力二、病毒對(duì)化學(xué)因素的抵抗力三、病毒對(duì)抗菌物質(zhì)的抵抗力四、病毒在環(huán)境中的存活和在污水處理過(guò)程中的去除效果第40頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月一、病毒對(duì)物理因素的抵抗力1.溫度
一般情況下,高溫使病毒的核酸和蛋白質(zhì)衣殼受損傷,高溫對(duì)病毒蛋白質(zhì)的滅活比對(duì)病毒核酸的滅活要快。2.光及其他輻射(1)紫外輻射:紫外光可以使病毒的核酸受到損傷。UV促使胸腺嘧啶形成胸腺嘧啶二聚體第41頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月尿嘧啶水合反應(yīng)(2)可見(jiàn)光:日光對(duì)病毒也有滅活作用(3)離子輻射:X射線(xiàn)射線(xiàn)對(duì)病毒也有滅活作用。3.干燥
相對(duì)濕度較低時(shí),病毒存活時(shí)間較短,反之,相對(duì)濕度較高,則病毒容易存活。第42頁(yè),課件共47頁(yè),創(chuàng)作于2023年2月二、病毒對(duì)化學(xué)因素的抵抗力病毒的滅活分為體內(nèi)滅活和體外滅活。體內(nèi)滅活的化
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