C反應(yīng)蛋白檢測與臨床應(yīng)用

CRP的結(jié)構(gòu)CRP是環(huán)狀五球體蛋白，屬于鈣結(jié)合蛋白，相對分子量約為120000，由五個相同的亞基依靠非共價鍵構(gòu)成，在細(xì)胞因子IL-6家族誘導(dǎo)下由肝臟上皮細(xì)胞迅速合成。1目前一頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP的表達(dá)與功能CRP是人體非特異性免疫機(jī)制的一部分。CRP不能通過胎盤，在體內(nèi)分布甚廣，除血液外、胸水、腹水、心包液及關(guān)節(jié)液中均可測出。CRP作為有免疫防御特性的鈣結(jié)合蛋白,其最主要生物學(xué)功能是在Ca2+存在下與磷酸膽堿、DNA、組蛋白等結(jié)合。CRP能夠與體內(nèi)凋亡壞死的細(xì)胞或者外部入侵的細(xì)菌、真菌、寄生蟲等的細(xì)胞壁中的磷酸膽堿結(jié)合,從而激活補(bǔ)體,調(diào)理吞噬,促使內(nèi)源性或外源性配體物質(zhì)的清除。2目前二頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP的參考值正常值<10mg/L中值約為0.7mg/L細(xì)菌感染時>10mg/L新生兒生出生后3d內(nèi)測CRP無特異性，因?yàn)榉置涫笴RP應(yīng)激性升高。3目前三頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)正常人群CRP值4目前四頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP參考范圍成人和兒童0.068～8.2mg/L出生后第4天至1個月的嬰兒≤1.6mg/L分娩母親≤47mg/LCRP臨床應(yīng)用參考范圍5目前五頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP的穩(wěn)定性比較室溫4℃－18℃全血1d3d－血清/血漿1d7d6M溶血液3h內(nèi)穩(wěn)定CRP的穩(wěn)定性6目前六頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP的檢測80年代以前作為炎癥和組織損傷的非特異性標(biāo)志物大量應(yīng)用于臨床。但是由于過去CRP的檢測方法較為落后，假陽性和假陰性很高，影響了它在臨床上的價值，而逐漸被臨床所忽視。近年來由于檢測技術(shù)不斷更新，用于檢測CRP的快速、簡便、可靠的方法已迅速建立。使CRP的臨床應(yīng)用大大增加。其在醫(yī)學(xué)上的價值也真正得到了廣泛的承認(rèn)和認(rèn)可。7目前七頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP檢測方法比較方法靈敏度參考文獻(xiàn)試管內(nèi)沉淀試驗(yàn)毛細(xì)管內(nèi)沉淀試驗(yàn)改良平板雙擴(kuò)散法改良瓊脂柱擴(kuò)散法改良單擴(kuò)散法瓊脂糖凝膠電泳法放射電免疫擴(kuò)散法補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)?zāi)z乳凝集試驗(yàn)?zāi)z乳增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)熒光抗體法放射免疫測定法—10～20mg/L10～20mg/L3.0mg/L1.0mg/L1.0mg/L10μg/L0.6mg/L1.0mg/L0.35mg/ml—3μg/LJExpMed，1930;52∶561AmJMed，1950;8∶445IntArchAllergy，1962ProcSocExpBiol，1955ActaPatholMicrobiolScandClinChimActa1，969JClinLabInvest，1973ProcSocExpBiol，1954Nature(London)，1961DadeGermany，2000Nature(London)，1961LabClinMed，19768目前八頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)單向免疫擴(kuò)散法1膠乳凝集試驗(yàn)2免疫比濁法3膠乳增強(qiáng)試驗(yàn)4免疫標(biāo)記測定5CRP檢測方法簡介：9目前九頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP檢測方法—（1）單向免疫擴(kuò)散法優(yōu)點(diǎn)：特異性高，重復(fù)性好，操作簡單，價格低廉，不需要特殊儀器檢測等。缺點(diǎn)：此法最大的缺點(diǎn)是在抗原過量時易出現(xiàn)假陰性，因此用該方法檢測CRP，若未出現(xiàn)沉淀環(huán)時，必須稀釋標(biāo)本后復(fù)檢，以避免漏診。此外，由于該法的敏感性較差，制約了其臨床上的廣泛應(yīng)用。10目前十頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP檢測方法—（2）膠乳凝集試驗(yàn)優(yōu)點(diǎn)：

簡單快速，敏感性、特異性較高

缺點(diǎn)：易受補(bǔ)體、類風(fēng)濕因子（RF）等因素的干擾，產(chǎn)生假陽性結(jié)果。因此，為了提高結(jié)果的準(zhǔn)確性，檢測時應(yīng)對待測標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理，以去除干擾因素。11目前十一頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP檢測方法—（3）免疫比濁法此法是一種抗原抗體結(jié)合反應(yīng)的動態(tài)測定法，可快速、準(zhǔn)確地測量樣品中抗原的含量，并且可在多種自動化檢測儀上應(yīng)用。目前應(yīng)用較廣泛的Quik-Read快速CRP定量檢測，就是以免疫比濁法為基本原理。研究顯示：免疫比濁法在檢測時間、操作方法、結(jié)果精確度、重復(fù)性、靈敏度方面均優(yōu)于單擴(kuò)法與膠乳凝集法。

12目前十二頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP檢測方法—（4）膠乳增強(qiáng)試驗(yàn)在上述的比濁法中，檢測CRP的敏感性方面仍不夠理想。這就需要建立更敏感、更精確、在血清CRP濃度較低的情況下（0.1～10mg/L）仍具有較高準(zhǔn)確度的檢測方法。膠乳增強(qiáng)免疫透射比濁法測定超敏CRP(Hs-CRP)是一種新型的檢測方法，具有快速、方便、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。利用該方法檢測Hs-CRP在預(yù)測和預(yù)防冠心病、動脈粥樣硬化等心血管疾病中起重要作用。13目前十三頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP檢測方法—（5）免疫標(biāo)記測定ELISA、免疫發(fā)光法和化學(xué)發(fā)光法等都可用于CRP的測定?；瘜W(xué)發(fā)光法的靈敏度和定量精確度可與RIA媲美,而無同位素污染,試劑穩(wěn)定,分析速度快。CRP-POCT(床邊試驗(yàn))法－ELISA干片法。把磷脂酰膽堿(PC)化學(xué)交聯(lián)固定于載體。樣品中待檢測的CRP與載體的PC結(jié)合。被酶標(biāo)記的抗CRP單抗結(jié)合。可靈敏、特異性檢測CRP,約5分鐘可得結(jié)果。14目前十四頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP的臨床應(yīng)用感染的鑒別病情的監(jiān)測療效的判定15目前十五頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP在細(xì)菌與病毒感染的患者之間存在明顯差異，細(xì)菌感染時快速升高。CRP的持續(xù)升高也可發(fā)生在慢性炎癥，包括自身免疫性疾病以及腫瘤中。CRP在絕大多數(shù)病毒感染的血清濃度變化不大或不變,這是由于大多數(shù)病毒感染是在細(xì)胞內(nèi)增殖進(jìn)行,而完整的細(xì)胞膜上缺乏暴露的磷脂蛋白質(zhì),故不能觸發(fā)CRP的產(chǎn)生和結(jié)合。（1）CRP用于感染的鑒別16目前十六頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)血清CRP在感染發(fā)生后5～8h即開始升高,48h達(dá)到峰值，血漿半衰期19h，高峰值可達(dá)正常的數(shù)百倍。隨著感染控制它可在24～48h迅速下降,1w內(nèi)恢復(fù)正常。CRP的水平和持續(xù)時間與感染程度呈正相關(guān)。CRP持續(xù)升高或再度升高提示臨床應(yīng)重視病情的變化。（1）CRP用于感染的鑒別17目前十七頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP的臨床應(yīng)用18目前十八頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP應(yīng)用—（2）評估病情CRP為10～50mg/L表示輕度炎癥。CRP升至100mg/L表示較嚴(yán)重的疾病，它的嚴(yán)重程度在必要時需靜脈注射。CRP>100mg/L表示嚴(yán)重的疾病過程并常表示細(xì)菌感染的存在。19目前十九頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP應(yīng)用—（3）抗生素的治療監(jiān)測

CRP可作為抗生素療效觀察的參考指標(biāo)。CRP下降至正常時，建議中斷抗生素治療。當(dāng)高危人群缺少微生物學(xué)診斷時，CRP檢測結(jié)果可為抗生素治療的指引。20目前二十頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP應(yīng)用—（4）外科術(shù)后患者施行手術(shù)后24～72h,血中CRP水平明顯升高,約在第5～7天恢復(fù)正常。凡驟升后持續(xù)高水平多預(yù)示合并感染。對中、大手術(shù)患者,建議在術(shù)前和術(shù)后3～7天各做常規(guī)檢測一次。凡術(shù)后5～7天CRP仍持續(xù)高水平者,理應(yīng)懷疑合并感染,并配合治療作隨訪監(jiān)測。21目前二十一頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP應(yīng)用—（5）癌癥對于癌癥患者，已升高或正在升高的CRP預(yù)示著預(yù)后不良及常提示轉(zhuǎn)移。結(jié)腸癌是導(dǎo)致死亡人數(shù)第二多的癌癥。研究顯示，血液CRP含量最高的那些人患結(jié)直腸癌的危險(xiǎn)，是CRP含量最低者的兩倍。22目前二十二頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP應(yīng)用—（6）心血管疾病CRP水平可預(yù)測將來心肌梗塞及中風(fēng)的危險(xiǎn)性。在痛疼開始后數(shù)小時內(nèi)CRP升高，3-4d達(dá)高峰，在CK-MB回到正常后7-10d也降至正常。CRP含量>2.1mg/L的人與<1mg/L者比較將來發(fā)生心肌梗塞的危險(xiǎn)性為后者的2.9倍發(fā)生缺血性中風(fēng)的危險(xiǎn)性為后者的1.9倍；發(fā)生外周動脈血管性疾病的危險(xiǎn)性為后者的4.1倍。23目前二十三頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)快速CRP的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用最短的檢測時間最好采用末梢血或全血與大型特定蛋白分析儀有可比性定量測定24目前二十四頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP樣品前處理存在問題25目前二十五頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)最新CRP檢測流程減少9個步驟改善2個步驟消除人為誤差減少1800步驟(每天200個標(biāo)本)26目前二十六頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)CRP是一種五球體結(jié)構(gòu)的高度保守的急時相蛋白，它作為模式識別分子，與特殊的分子結(jié)構(gòu)結(jié)合而發(fā)揮作用。CRP作為宿主先天性免疫應(yīng)答的一部分，在機(jī)體平衡和自身保護(hù)中起著重要貢獻(xiàn)。CRP的檢測：對于普通的炎癥用常敏CRP檢測即可，而對于心血管疾病、代謝綜合征、自身免疫性疾病、新生兒疾病檢測等則需用超敏CRP檢測方法。CRP對機(jī)體許多疾病的早期診斷、鑒別診斷、療效觀察、預(yù)后評估以及指導(dǎo)臨床抗生素的合理應(yīng)用等有重要的意義。速度快、簡便實(shí)用、可靠性強(qiáng)的CRP檢測手段，值得在臨床臨床上推廣應(yīng)用。小結(jié)27目前二十七頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)Thanks!28目前二十八頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)練習(xí)題：1.CRP作為急性期反應(yīng)蛋白，與WBC、ESR等指標(biāo)相比在臨床疾病的診療方面有何優(yōu)勢？2.請簡要說明CPR的臨床應(yīng)用主要體現(xiàn)在哪些方面？29目前二十九頁\總數(shù)三十一頁\編于十二點(diǎn)

降鈣素原PCT（降鈣素原，procalcitonin）也是一種炎癥標(biāo)志物質(zhì)，當(dāng)嚴(yán)重細(xì)菌、真菌、寄生蟲感染以及膿毒癥和多臟器功能衰