ELISA產(chǎn)品簡(jiǎn)析與探討

ELISA產(chǎn)品簡(jiǎn)析與探討公司技術(shù)服務(wù)中心2011.08目前一頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)一.ELISA的發(fā)展背景與原理簡(jiǎn)析什么是ELISA？ELISA——酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（EnzymeLinkedImmunosorbentAssay）發(fā)展歷程和應(yīng)用？起源于20世紀(jì)60年代：EIH（酶免組織化學(xué)技術(shù)，1966）→EIA（酶免疫測(cè)定，1971）→McAb技術(shù)（單克隆抗體，1975）→基于ELISA技術(shù)的快速檢測(cè)產(chǎn)品（傳染病，妊娠診斷，植物疫病，農(nóng)獸殘等）農(nóng)獸殘小分子藥物ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)原理？

直接競(jìng)爭(zhēng)法：“搶凳子”理論目前二頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)二.術(shù)語(yǔ)抗體？為何能測(cè)定小分子？抗體（Antibody），又稱免疫球蛋白（Immunoglobin，Ig），是一種免疫系統(tǒng)中鑒別與中和外來(lái)物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì)。僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中?？贵w能識(shí)別特定外來(lái)物的一個(gè)獨(dú)特特征，該外來(lái)目標(biāo)被稱為抗原。（“鑰匙與鎖的關(guān)系”）以克倫特羅試劑盒為例：包被板：包被有以半抗原（克倫特羅）經(jīng)過(guò)偶聯(lián)后免疫所獲得的多克隆抗體；該抗體可以識(shí)別克倫特羅或者其類似物Anti-cle抗體：通過(guò)共價(jià)結(jié)合或非公價(jià)吸附到微孔板達(dá)到固相化目的（Coatingtechniques）目前三頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)單克隆抗體技術(shù)和多克隆抗體技術(shù)比較分析：

特別說(shuō)明：不同的技術(shù)平臺(tái)上應(yīng)用的原料雖然名稱一致（比如克倫特羅的酶標(biāo)和金標(biāo)抗原抗體原料），但抗體的來(lái)源屬性可能是不一樣的。某抗體適合做酶標(biāo)產(chǎn)品，但是可能不適合做金標(biāo)產(chǎn)品。單抗技術(shù)特征

名稱單克隆抗體monoclonalantibody

多克隆抗體polyclonalantibody產(chǎn)生1種抗原決定簇+1個(gè)效應(yīng)B細(xì)胞→雜交瘤（增殖+分泌特異性抗體）多種抗原決定簇+效應(yīng)B細(xì)胞或同一種抗原決定簇+不同的效應(yīng)B細(xì)胞特征及優(yōu)點(diǎn)高特異性、高均一性；批間CV??；廣泛應(yīng)用ELISA、WB、IP、IF、ICC、IHC（抗體的用量比較大或者需要長(zhǎng)期使用一致的抗體）制備時(shí)間短、首次制備成本低，特異性和靈敏度取決于制備技術(shù)；識(shí)別多個(gè)抗原表位（不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果）；利用ELISA法可以檢測(cè)類似物缺陷不能進(jìn)行沉淀和凝集反應(yīng)；反應(yīng)強(qiáng)度不如多克隆抗體；制備技術(shù)復(fù)雜而且費(fèi)時(shí)費(fèi)工；無(wú)法進(jìn)行多合一檢測(cè)；（對(duì)于某些藥物的代謝物檢測(cè)上可能存在假陰性）批間CV大；交叉反應(yīng)率高（特異性不強(qiáng)）目前四頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)檢測(cè)（下）限和靈敏度試劑盒靈敏度：試劑盒本身的靈敏度和對(duì)某一具體樣本的檢測(cè)限是不一樣的。試劑盒本身的靈敏度一般是指試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品中除零標(biāo)準(zhǔn)外濃度最小的標(biāo)準(zhǔn)品濃度值。其理論定義為：測(cè)定10孔B0吸光度值，算出平均值X和標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD），計(jì)算出3倍SD值，據(jù)公式X+3SD（X+3SD）得出的結(jié)果即為試劑盒靈敏度（一般招投標(biāo)資料上要求的靈敏度即指標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度最小值）針對(duì)樣本的檢測(cè)（下）限：其理論定義為：按照合理的前處理方法對(duì)20個(gè)陰性樣本進(jìn)行測(cè)定，算出平均檢測(cè)值X和標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD），計(jì)算出3倍SD值，據(jù)公式X+3SD得出的結(jié)果即為該樣本的檢測(cè)（下）限。

目前五頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)注：文件引自農(nóng)業(yè)部備案文件2010目前六頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)

杭州迪恩克倫特羅EIAIC50半對(duì)數(shù)曲線Cubicspline擬合中監(jiān)所備案采用試劑盒靈敏度和檢測(cè)（下）限與曲線的關(guān)系：1.IC50是什么？以競(jìng)爭(zhēng)法為例：～系指在酶免反應(yīng)中藥物產(chǎn)生50%抑制率時(shí)所對(duì)應(yīng)的藥物（標(biāo)準(zhǔn)品）濃度.2.靈敏度怎么表示比較好？用IC50值表示（使用標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度最低點(diǎn)表示缺少統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)且混亂）3.靈敏度和檢測(cè)(下)限的關(guān)系?一般地，靈敏度越高，檢測(cè)限也就越高。在設(shè)定判斷閾值（判斷陰性陽(yáng)性值）時(shí)，閾值應(yīng)可能落在曲線斜率較大處（即形狀較陡處；靠近IC50值）招標(biāo)資料上的所謂靈敏度目前七頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)

相關(guān)系數(shù)（對(duì)數(shù)曲線）

半對(duì)數(shù)曲線，線性擬合大多數(shù)EXCEL軟件就是使用該曲線算法相關(guān)系數(shù)變異系數(shù)（CV）：體現(xiàn)試劑盒的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。CV=SD/X※100%）相關(guān)系數(shù)（Correlation

coefficient）:在概率論和統(tǒng)計(jì)學(xué)中稱相關(guān)系數(shù)或關(guān)聯(lián)系數(shù)。顯示兩個(gè)隨機(jī)變量之間線性關(guān)系的強(qiáng)度和方向

。試劑盒備案要求：

C.C≥0.9920曲線擬合方式：1.線性方程2.四參數(shù)3.Cubicspline目前八頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)特異性（交叉反應(yīng)率）藥物的交叉反應(yīng)率：定義：引起50%抑制的標(biāo)準(zhǔn)物濃度與類似物引起50%抑制的濃度值之比。

比如客戶問(wèn)：克倫特羅試劑盒/檢測(cè)卡對(duì)萊克多巴胺有沒(méi)有交叉（能不能測(cè)）?計(jì)算公式：～=IC50CL/IC50Rac※100%意義：類似物的交叉反應(yīng)率參數(shù)體現(xiàn)試劑盒特異性。物質(zhì)名稱交叉反應(yīng)率（％）Ractopamine100.0(1R,3R)-ractopamine489.0RactopamineglucuronideC384.0(1S,3R)-ractopamine134.0Dobutamine5.3Ritodrine3.6RactopamineglucuronideB3.1(1S,3S)-ractopamine1.9RactopamineglucuronideA1.0(1R,3S)-ractopamine0.9Bamethane0.3Isoxsuprine0.2Salmeterol0.2Fenoterol0.1Clenbuterol<0.01Salbutamol<0.01目前九頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)試劑盒檢測(cè)限：1.檢測(cè)限的意義：對(duì)某一具體藥物和具體樣本來(lái)說(shuō)，并非試劑盒的靈敏度越高越好，理想的狀態(tài)是檢測(cè)范圍的中間值與該藥物在某一樣本的“超標(biāo)值”或“陽(yáng)性值”接近，既可以減少誤差又方便客戶使用（即閾值和IC50接近）2.樣本差異性：結(jié)合樣品前處理的實(shí)際情況，由于方法局限或者雜質(zhì)因素干擾時(shí)需具體分析。比如，某一試劑盒本身最低檢測(cè)限為0.05ppb,而對(duì)尿樣的檢測(cè)限可能是0.15ppb,牛奶為0.15ppb,蝦產(chǎn)品為0.25ppb,飼料為15ppb。3.方法差異性：不同方法檢測(cè)限也可能不一樣（方法檢出限），不同廠家的試劑盒檢測(cè)限也可能不一樣。以克倫特羅試劑盒為例：目前十頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)假陽(yáng)性：

非目標(biāo)成分在酶聯(lián)吸附體系中的的總和。假陰性：在方法符合實(shí)際的情況下，對(duì)目標(biāo)成分未產(chǎn)生響應(yīng)或者響應(yīng)不明顯。試劑盒可以允許一定程度的假陽(yáng)性，但是不允許假陰性的存在。舉例：雙匯集團(tuán)技術(shù)中心質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)要求：克倫特羅ELISA試劑盒：假陰性率0%

假陽(yáng)性率0%克倫特羅金標(biāo)試紙條：假陰性率0%

假陽(yáng)性率3%補(bǔ)充資料《如何區(qū)分瘦肉精檢測(cè)卡好壞》:/newsinfo.asp?id=54&newsort=2一般性招投標(biāo)資料對(duì)假陽(yáng)性假陰性的要求目前十一頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)三.不同反應(yīng)原理ELISA試劑盒的特點(diǎn)比較直接競(jìng)爭(zhēng)法試劑盒特點(diǎn)：1.原理簡(jiǎn)單：抗原抗體反應(yīng)一步法，時(shí)間短；2.試劑構(gòu)成簡(jiǎn)單；3個(gè)核心組分（見(jiàn)右圖）顯色劑采用國(guó)外最新技術(shù)，代替國(guó)內(nèi)的A/B液，同時(shí)提高對(duì)HRP的靈敏度和穩(wěn)定性；3.加樣步驟少且加樣模式較統(tǒng)一，操作簡(jiǎn)單且：50ul樣本+100ul酶標(biāo)物+100ul顯色劑+100ul終止液；4.采用高靈敏度，高親和力的抗體，決定檢測(cè)分析時(shí)間短；20分鐘；且采用進(jìn)口的高吸附力的聚苯乙烯微孔材料固相化抗體，提高試劑盒穩(wěn)定性，確保檢測(cè)分析準(zhǔn)確。5.間接競(jìng)爭(zhēng)法試劑盒特點(diǎn)：1.原理相對(duì)直接競(jìng)爭(zhēng)法要復(fù)雜，二步法；反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)，但可以變換為一步法反應(yīng)2.試劑構(gòu)成成分多：5個(gè)核心組分3.加樣步驟多，試劑盒組分多，易出錯(cuò)，反應(yīng)時(shí)間較長(zhǎng)（一般至少50分鐘）4.顯色劑：國(guó)產(chǎn)試劑盒基本均采用A/B液，增加了加樣量和試劑的復(fù)雜度抗體包被板顯色劑（二合一）酶標(biāo)抗原凍干粉抗原包被板酶標(biāo)二抗顯色劑（A液,B液）抗體工作液直接法間接法杭州迪恩北京勤邦目前十二頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)試劑盒操作圖解

酶標(biāo)抗原標(biāo)準(zhǔn)品/樣品①加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣品和酶標(biāo)物②溫育③洗板④顯色⑤終止顯色劑⑥讀數(shù)目前十三頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)直接競(jìng)爭(zhēng)法試劑盒比較？抗體包被板：進(jìn)口高吸附力聚苯乙烯材料，抗體固相化更穩(wěn)定，采用高靈敏度多抗，確保試劑盒靈敏度酶標(biāo)物凍干粉技術(shù)：確保酶標(biāo)物在運(yùn)輸中和保存中的穩(wěn)定性，即溶即用型反應(yīng)時(shí)間：“10分鐘+10分鐘”模式混合顯色劑：對(duì)HRP響應(yīng)快，二合一，使試劑盒操作更方便，但瓶子的材質(zhì)會(huì)影響其穩(wěn)定性加樣模式的統(tǒng)一化：50ul樣本+100ul酶標(biāo)物+100ul顯色劑+100ul終止液聯(lián)機(jī)軟件：數(shù)據(jù)處理聯(lián)機(jī)化，按“start”鍵既出分析報(bào)告抗體包被板顯色劑（二合一）酶標(biāo)抗原凍干粉抗體包被板酶標(biāo)抗原（濃縮液）顯色劑（A液，B液）直接法直接法顯色劑（TMBwitharedindicator）直接法酶標(biāo)物濃縮液抗體包被板杭州迪恩德國(guó)拜發(fā)華安麥科目前十四頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)直接競(jìng)爭(zhēng)法試劑盒的穩(wěn)定性優(yōu)勢(shì)決定穩(wěn)定性的關(guān)鍵組分優(yōu)勢(shì)：采用進(jìn)口的高吸附力的聚苯乙烯微孔包被多克隆抗體：固相化效果和穩(wěn)定性要?jiǎng)儆谝话銌慰?、包被抗原和?guó)產(chǎn)的低吸附微孔板系列酶標(biāo)物：采用凍干粉形式，直接消除酶標(biāo)物在運(yùn)輸中的不利因素，溶解之后在2～8度仍然穩(wěn)定。顯色劑（含有特殊的穩(wěn)定劑確保顯色劑不變質(zhì)）《關(guān)于加強(qiáng)獸藥殘留檢測(cè)試劑(盒)管理的通知》(農(nóng)辦醫(yī)[2005]3號(hào))目前十五頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)直接競(jìng)爭(zhēng)法試劑盒的穩(wěn)定性上應(yīng)注意事項(xiàng)1.存儲(chǔ)與使用：儲(chǔ)存：低溫2-8℃，忌冷凍。未使用完的試劑盒注意拉緊鋁箔袋封口以避免板條受潮失效使用：回溫后于室溫25±2℃環(huán)境下使用反應(yīng)：反應(yīng)中避免陽(yáng)光直射、空調(diào)或風(fēng)扇直吹。2.標(biāo)準(zhǔn)操作（包括前處理）：熟讀產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)目前十六頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)四.藥物代謝動(dòng)力學(xué)簡(jiǎn)述樣品尿液肌肉肝臟眼球含量10~80ng/ml6.1ng/g39ng/g118ng/g與血漿的比例40倍3~15倍20~90倍107倍資料引自：呂燕，鮑偉華，余曉華，等.GC—MS法研究豬體內(nèi)克侖特羅的殘留消除規(guī)律[J]．中國(guó)獸藥雜志，2009，43(11)26-29目前十七頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)另例：萊克多巴胺的藥代學(xué)規(guī)律萊克多巴胺作為瘦肉精的替代品，濫用趨勢(shì)明顯上升。在萊克多巴胺的檢測(cè)中，常常會(huì)遇到這樣的現(xiàn)象：用ELISA檢測(cè)陽(yáng)性的樣品，用色譜法確證時(shí)卻都為陰性，而且檢測(cè)結(jié)果大相徑庭。不同ELISA試劑盒的檢測(cè)結(jié)果也相差很大。1.萊克多巴胺的快速代謝特性

萊克多巴胺在動(dòng)物體內(nèi)不能穩(wěn)定存在，會(huì)快速代謝，國(guó)外資料表明，在停藥3天后，動(dòng)物體內(nèi)的萊克多巴胺原藥殘留量將很低，而以代謝物的形式存在動(dòng)物體內(nèi)。萊克多巴胺的代謝物主要有三種：萊克多巴胺葡萄糖甘酸A、萊克多巴胺葡萄糖甘酸B、萊克多巴胺葡萄糖甘酸C，而三種代謝物的比例是不確定的。舉例說(shuō)明：如果給一頭豬喂添加萊克多巴胺的飼料，在停藥第0天尿樣中的萊克多巴胺殘留濃度為20ppb，第3天后，萊克多巴胺殘留濃度將<1ppb，而萊克多巴胺葡萄糖甘酸A+萊克多巴胺葡萄糖甘酸B+萊克多巴胺葡萄糖甘酸C的濃度將>19ppb。2.萊克多巴胺的正確檢測(cè)方法根據(jù)上述，要準(zhǔn)確檢測(cè)萊克多巴胺的殘留量有兩個(gè)選擇：

A：除檢測(cè)萊克多巴胺外，增加對(duì)萊克多巴胺代謝物的檢測(cè)。

B：在檢測(cè)前，用酶解的方法將萊克多巴胺代謝物還原成萊克多巴胺原藥，再檢測(cè)萊克多巴胺的含量。但酶解需要16小時(shí)。

對(duì)于ELISA試劑盒，選擇A和B都是可能的，但選擇A依賴于ELISA試劑盒的交叉反應(yīng)特性；對(duì)于色譜方法，由于主要代謝物有三種之多，選擇B更可行和方便。

部分資料引自：強(qiáng)致懿；《豬肝臟、肌肉、尿液和血液中萊克多巴胺殘留檢測(cè)方法及殘留消除的研究》；文章鏈接：/Thesis_Y1107477.aspx目前十八頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)五.樣本前處理淺析

前處理方法目的：

①測(cè)定前排除干擾組分；

②對(duì)樣品進(jìn)行濃縮。

原則：

①消除干擾因素；

②完整保留被測(cè)組分；

③使被測(cè)組分濃縮；方法是怎么建立的？有什么依據(jù)？分析藥物的化學(xué)性質(zhì)→相似相溶原理→分析樣本的性質(zhì)和藥殘的分布規(guī)律→合理的提取和除雜方法→匹配試劑盒體系（結(jié)合靈敏度和檢測(cè)限）說(shuō)明書(shū)上的方法是不是固定不變的？基本原則不變，可以微調(diào)和優(yōu)化不同樣本的前處理方法是不是可以一樣?樣本差異顯著的情況下，不同類型樣本由于引起的干擾不同，在方法設(shè)計(jì)上存在區(qū)別克倫特羅目前十九頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)前處理方法（sampletreatment）

方法的選擇性問(wèn)題：在動(dòng)物組織多殘留檢測(cè)方法研究中，生物樣品成分復(fù)雜，怎樣達(dá)到消除非目標(biāo)成分的干擾且盡可能的完整保留被測(cè)組分；則最關(guān)鍵的一環(huán)取決于前處理。前處理決定著方法的靈敏度和分離度，在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中占據(jù)著90%甚至更多的工作量。樣品前處理一般分為提取、凈化、濃縮和衍生化4個(gè)部分方法的建立思路：分析獸殘分子的理化性質(zhì)和殘留規(guī)律根據(jù)相似相溶和2個(gè)原則：①消除干擾因素②完整保留被測(cè)組分（對(duì)于ELISA試劑盒還需考慮前處理中帶入的組分與試劑盒緩沖液的匹配度）；限制前處理中引入的假陽(yáng)性或假陰性因素合理的方法回收率和添加回收率合理的空白干擾結(jié)果分析注：關(guān)于過(guò)柱和不過(guò)柱，吹干和不吹干（一步法提?。┑膮^(qū)別點(diǎn)：過(guò)柱：好處：將前處理中可能會(huì)給檢測(cè)結(jié)果帶來(lái)負(fù)面影響的干擾因素去掉：比如在樣本色素含量很高時(shí)通過(guò)過(guò)C18柱就可以有效的提高樣本的回收率和降低本底干擾；缺陷：增加了前處理工作的操作步驟；

氮吹濃縮：通過(guò)相似相容原理將樣本中的目標(biāo)物轉(zhuǎn)移和富集，目的是提高回收率和控制方法檢測(cè)限。在采用一步法提取時(shí)本底干擾一般比較難以控制，只適合作為低檢測(cè)限的適用方法。目前二十頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)稀釋倍數(shù)和回收率

依據(jù)相似相溶的原理進(jìn)行分析對(duì)于組織類樣本考慮樣本的實(shí)際含水量：70%當(dāng)成100%并入計(jì)算。以克倫特羅試劑盒檢測(cè)香腸樣本為例計(jì)算稀釋倍數(shù)：回收率：回收率∈[50%，120%]；CV≤20%1、定義：是在空白基質(zhì)中加入一定濃度的藥物，通過(guò)樣本前處理方法處理過(guò)后，檢測(cè)到藥物濃度占實(shí)際添加濃度的比例。生物樣本回收率一般介于60～120%；組織樣本一般介于50%～120%2、公式：回收率=（添加管濃度-空白管濃度）/實(shí)際添加濃度*100%3、濃度單位換算：ppm=ug/ml=

ug/g；ppb=ng/ml=ng/g；ppt

=

pg/ml

=

pg/g；1ppm=1000ppb=1000000ppt舉例Cap添加回收流程：1、選擇已知陰性樣本作空白基質(zhì)。（稱取2管同一個(gè)陰性樣本）2、了解前處理方法。（需稱取3g樣本、樣本稀釋倍數(shù)為1倍）3、了解曲線，確定每克的添加濃度范圍。（曲線濃度：0ppb、0.025ppb、0.05ppb、0.1ppb、0.3ppb、0.6ppb）添加濃度最好選擇在第三點(diǎn)到第四點(diǎn)之間，但必須大于檢測(cè)下限和控制在曲線有效濃度范圍內(nèi)）目前二十一頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)試劑盒的售后工作（相應(yīng)問(wèn)題和關(guān)鍵步驟分析）1.回收率偏低或偏高的原因？方法回收率低+操作+背景信號(hào)干擾（合理范圍：60～120%）2.怎樣加標(biāo)？加哪些濃度？

加標(biāo)濃度取決于：試劑盒對(duì)某樣本的檢測(cè)限+試劑盒靈敏度+方法+操作SOP+MRLs（最大殘留限量）3.檢測(cè)結(jié)果的分析：Cubicspline擬合計(jì)算中會(huì)看IC50值+相關(guān)系數(shù)）+會(huì)操作聯(lián)機(jī)軟件+會(huì)看檢測(cè)結(jié)果4.以及對(duì)于可疑樣本的處理：以萊克多巴胺試劑盒檢測(cè)香腸熟食為例：設(shè)給定的判斷閾值是0.5ppb，A001樣本檢測(cè)值為0.894ppb,要求對(duì)該樣本進(jìn)行復(fù)核。

復(fù)核程序：試劑盒復(fù)核（陽(yáng)性樣本質(zhì)控）陽(yáng)性陰性色譜儀器復(fù)核出檢測(cè)報(bào)告出檢測(cè)報(bào)告可疑樣本目前二十二頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)色譜質(zhì)譜分析檢測(cè)方法簡(jiǎn)介色譜法（Chromatography）

色譜法起源于20世紀(jì)初，1950年代之后飛速發(fā)展。原理：利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中（固定相和流動(dòng)相）的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同來(lái)進(jìn)行分離；將它用于分析化學(xué)并配合適當(dāng)?shù)臋z測(cè)手段，就成為色譜分析法。分類：根據(jù)流動(dòng)相的不同，色譜技術(shù)可以分為液相色譜和氣相色譜。色譜法常見(jiàn)的方法有：柱色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)等。檢測(cè)器原理：熱導(dǎo)系數(shù)氫火焰離子化電負(fù)性物質(zhì)捕獲電子的能力離子荷質(zhì)比（離子源+加速電場(chǎng)+速度色散質(zhì)譜圖）注：HPLC-MS/MS：HPLC-MS是高效液相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用；/MS代表二級(jí)質(zhì)譜，是將經(jīng)過(guò)第一次質(zhì)譜檢測(cè)的離子以某種方式碎裂后再進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)。色譜原理國(guó)內(nèi)外生化分析儀器公司目前二十三頁(yè)\總數(shù)二十八頁(yè)\編于十二點(diǎn)Agile