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結(jié)核分歧桿菌檢測新技術(shù)——結(jié)核菌分泌蛋白抗原快速檢測2021/5/91我國流行概況是全球22結(jié)核病高負擔(dān)國家之一活動性肺結(jié)核病人數(shù)居世界第二,僅次于印度是我國重點控制疾病之一目前估算全國活動性肺結(jié)核病人450多萬,每年新發(fā)傳染性肺結(jié)核患者150多萬全國約45%的人受過結(jié)核菌的感染,明顯高于全球水平
2021/5/922014年全國法定法定傳染病發(fā)病率2021/5/93煤礦行業(yè)結(jié)核比率據(jù)北京京煤集團總醫(yī)院結(jié)核病科孔冬青主任調(diào)查,肺結(jié)核科住院治療的611例煤工塵肺合并肺結(jié)核患者,經(jīng)篩查,檢出痰菌陽性223例。即三分之一的人均患有肺結(jié)核。該數(shù)據(jù)逐年遞增。2021/5/94危害2021/5/95WHO對結(jié)核個案定義疑似結(jié)核個案有呈現(xiàn)結(jié)核病征與癥狀(低燒、全身乏力或消瘦、夜間盜汗、女性可導(dǎo)致月經(jīng)不調(diào)或停經(jīng))長期咳嗽超過2周確診結(jié)核個案結(jié)核菌培養(yǎng)陽性的病人不能有例行培養(yǎng)結(jié)核菌的國家,痰涂片耐酸染色結(jié)果兩次都呈陽性,亦可考慮為確診病人2021/5/96一般臨床結(jié)核檢測方法1.結(jié)核的常規(guī)檢測2.Y-干擾素檢測技術(shù)
3.T-SPOT.TB檢測技術(shù)4.GeneXpert檢測技術(shù)
2021/5/971.常規(guī)檢測檢測
2021/5/982.Y-干擾素
原理:利用T細胞對結(jié)核菌的記憶,加入結(jié)核菌抗原,產(chǎn)生干擾素的多寡.判定是否為潛伏感染者.缺點檢測標(biāo)本:血液(目前WTO已禁止使用血液標(biāo)本檢測)收費標(biāo)準(zhǔn):500-800元適用于高危險人群檢測.不宜用于普查.操作復(fù)雜.需要專業(yè)人員及設(shè)備.2021/5/993.T-SPOT.TB(體外酶聯(lián)免疫斑點技術(shù))
缺點操作復(fù)雜繁瑣收費價格:500-800元三甲大型實驗室操作2021/5/9104.GeneXpert檢測技術(shù)原理:分子生物檢測技術(shù)缺點目前普及范圍小收費標(biāo)準(zhǔn):約500元配合儀器使用,儀器需約100萬元2021/5/911檢出率低、費用低檢出率高、費用高費用低、檢出率高2021/5/912結(jié)核檢測新技術(shù)——結(jié)核菌分泌蛋白抗原快速檢測試劑2021/5/913結(jié)核菌分泌蛋白抗原快速檢測試劑(膠體金法)是利用重組基因的技術(shù)制造結(jié)核菌的特異性蛋白(抗體),純化后包被吸附于膠體金上,檢測時,當(dāng)樣品有結(jié)核菌分泌性蛋白時,先和包被的膠體金標(biāo)記物結(jié)合,產(chǎn)生反應(yīng)。由于層析作用,其反應(yīng)復(fù)合物會沿著硝酸纖維膜向前移動。原理
81%敏感性
85.9%特異性2021/5/914
痰液檢測結(jié)核桿菌
染色與TB抗原快速檢測試劑之比較痰液耐酸性染色結(jié)核分枝桿菌+非結(jié)核分枝桿菌+培養(yǎng)確認固態(tài)觀看PCR全自動化培養(yǎng)儀結(jié)核分枝桿菌+非結(jié)核分枝桿菌-痰液(未經(jīng)處理)結(jié)核分枝桿菌+非結(jié)核分枝桿菌-培養(yǎng)確認樣品緩衝液結(jié)核分枝桿菌+非結(jié)核分枝桿菌-濟南杏恩結(jié)核菌檢測試劑盒濟南杏恩結(jié)核菌檢測試劑盒2021/5/915結(jié)核菌快速金標(biāo)檢測試劑盒簡易操作步驟2021/5/9162021/5/917優(yōu)勢檢測結(jié)核菌分枝桿菌之特異性分泌性抗原(Secretedspecificprotein)可取代耐酸染色無法區(qū)別分枝(MTB)或非分枝結(jié)核(NTM)桿菌之困擾.取代現(xiàn)行的非特異性純化蛋白抗原(PPD,purifiedproteinderivative).無交叉反應(yīng),故也適用于BCG接種的病人或感染非結(jié)核之病人.高特異性及敏感度.(>80%)2021/5/918可做非肺部結(jié)核病檢驗建立一個快速且精確的檢驗方法(5-15分鐘判讀結(jié)果)廣泛用于一般人群普查(早期診斷,早期治療)可做為培養(yǎng)確認試劑是否為結(jié)核分枝桿菌(MTB)或非結(jié)核分枝桿菌(NTM)之區(qū)別評價結(jié)核臨床療效及治療方案定位:篩查優(yōu)勢2021/5/919注意事項服藥治療的結(jié)核病人,可能會因為藥物抑制蛋白分泌,所以成陰性結(jié)果.若是藥物治療的結(jié)核病人,進行療程中追蹤檢測,成陽性反應(yīng).應(yīng)考慮可能為抗藥性病患.對于痰液的檢測,必須使用未處理的原痰,加入試劑盒中的樣品緩沖液后方可檢測.若是使用高濃度及高堿性的NaOH軟化痰液,則將破壞試紙條中的包被抗體和膠體金,導(dǎo)致錯誤結(jié)果.試劑盒中的樣品緩沖液可以破壞菌體的蛋白酶,使菌體失活,但是不影響試驗結(jié)果及檢測.2021/5/920膠體金免疫數(shù)字測試卡2021/5/921HR201全自動金標(biāo)分析儀特點:定性和模擬定量檢測觸控界面、操作簡單體積小、便于攜帶快速精確(10秒出判讀結(jié)果)數(shù)據(jù)儲存量大內(nèi)置
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