非發(fā)酵菌的學(xué)習(xí)材料

非發(fā)酵菌的學(xué)習(xí)材料第1頁(yè)/共50頁(yè)O-F試驗(yàn)發(fā)酵型（F）氧化型(O)產(chǎn)堿型(-)第2頁(yè)/共50頁(yè)

非發(fā)酵革蘭陰性桿菌包括假單胞菌屬、產(chǎn)堿桿菌屬、無(wú)色桿菌屬、不動(dòng)桿菌屬、莫拉菌屬、金氏桿菌屬、黃桿菌屬、艾肯菌屬、土壤桿菌屬、黃單胞菌屬、叢毛單胞菌屬等。分類第3頁(yè)/共50頁(yè)分群依據(jù)氧化酶試驗(yàn)葡萄糖氧化發(fā)酵試驗(yàn)動(dòng)力試驗(yàn)第4頁(yè)/共50頁(yè)二、

非發(fā)酵初步分群第5頁(yè)/共50頁(yè)假單胞菌屬

假單胞菌屬為需氧、有鞭毛、無(wú)芽胞、無(wú)莢膜的革蘭陰性桿菌，氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性，DNAG+C為58～71mol％，包括200余種菌。多數(shù)為腐生菌，少數(shù)為植物和動(dòng)物寄生菌，大多為條件致病菌。代表菌株為銅綠假單胞菌第6頁(yè)/共50頁(yè)

假單胞菌屬分布廣泛，土壤、水和空氣中均有存在，人類非發(fā)酵菌感染中，假單胞菌占70％～80％，主要為銅綠假單胞菌，其他較為常見(jiàn)的菌種有嗜麥芽窄食單胞菌、熒光假單胞菌、惡臭假單胞菌、產(chǎn)堿假單胞菌等。這些菌種也是醫(yī)院感染的主要病原菌。臨床意義第7頁(yè)/共50頁(yè)微生物特性

共性:G-桿菌，無(wú)芽孢，有莢膜，多數(shù)菌有鞭毛，專性需氧菌，生長(zhǎng)溫度范圍廣，最適35度，普通培養(yǎng)基上可以生長(zhǎng)，可產(chǎn)各種水溶性色素。抵抗力強(qiáng)，多種抗生素耐藥第8頁(yè)/共50頁(yè)微生物檢驗(yàn)2.鑒定：氧化分解葡萄糖、產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，觸酶氧化酶陽(yáng)性，吲哚、甲基紅、VP陰性。

第9頁(yè)/共50頁(yè)微生物檢驗(yàn)3.藥敏試驗(yàn)A組：頭孢他定、慶大霉素、美洛西林、替卡西林、哌拉西林B組：頭孢吡肟、頭孢哌酮、氨曲南、亞胺培南、阿米卡星、妥布霉素、環(huán)丙沙星C組：頭孢噻肟、氯霉素U組：羧芐西林、頭孢唑肟、四環(huán)素、諾氟沙星、SMZ第10頁(yè)/共50頁(yè)

銅綠假單胞菌第11頁(yè)/共50頁(yè)

銅綠假單胞菌廣泛存在環(huán)境中，加之多種傳播途徑和污染，因此易感染,特別是免疫力低下的患者。引起:1.皮膚感染、呼吸道感染、泌尿道感染、燒傷感染2.菌血癥、心內(nèi)膜炎、囊性纖維變性3.感染眼部的銅綠假單胞菌，可以合成膠原酶，以致引起角膜穿孔而失明。臨床意義第12頁(yè)/共50頁(yè)生物學(xué)性狀形態(tài)與染色：G-桿菌，多形性，有鞭毛、菌毛、莢膜，無(wú)芽孢,產(chǎn)熒光素和綠膿素培養(yǎng)特性：專性需氧，4℃不生長(zhǎng)42℃生長(zhǎng)，在血平板上經(jīng)35—37℃，18—24h培養(yǎng)可表現(xiàn)為：菌落大而扁平、濕潤(rùn)、邊緣不齊,有金屬光澤,有生姜樣芳香氣味,菌落周圍有寬大的蘭綠色透明溶血環(huán)。第13頁(yè)/共50頁(yè)生物學(xué)性狀普通瓊脂培養(yǎng)基上能產(chǎn)生水溶性綠色素，使整個(gè)培養(yǎng)基變?yōu)榫G色。MAC培養(yǎng)基上，18-24h可形成微小無(wú)光澤半透明的菌落。SS平板上可行成類似沙門(mén)菌的菌落。第14頁(yè)/共50頁(yè)生物學(xué)性狀生化反應(yīng)：氧化酶陽(yáng)性，觸酶陽(yáng)性，O/F氧化型，精雙（+）還原硝酸鹽?？乖瓨?gòu)造和分型：菌體O,鞭毛H,粘液S和菌毛抗原。抵抗力:耐潮濕、干燥、紫外線，不耐熱和消毒劑，臨床分離的菌株多耐藥。第15頁(yè)/共50頁(yè)

銅綠假單胞菌檢驗(yàn)

1．標(biāo)本采集

按疾病和檢查目的，分別采取不同的標(biāo)本：患者的血液、腦脊液、胸(腹)水、膿液、分泌液、痰、尿液、十二指腸引流液、糞便等；醫(yī)院病區(qū)或手術(shù)室的空氣、水、地面、把手、醫(yī)療診斷器械及生活用品。

第16頁(yè)/共50頁(yè)檢驗(yàn)程序第17頁(yè)/共50頁(yè)檢驗(yàn)方法直接鏡檢：G-桿菌分離培養(yǎng)：在普通培養(yǎng)基生長(zhǎng)良好，經(jīng)18—24h形成圓形、扁平隆起、濕潤(rùn)菌落。瓊脂被染成綠色或黃綠色，約80％-90％產(chǎn)生綠膿素或熒光素。在血平板上表現(xiàn)為：菌落大而扁平、濕潤(rùn)、邊緣不齊；有金屬光澤；有生姜樣芳香氣味；菌落周圍有寬大的蘭綠色透明溶血環(huán)。第18頁(yè)/共50頁(yè)檢驗(yàn)方法鑒定：氧化酶陽(yáng)性，觸酶陽(yáng)性，O-F試驗(yàn)氧化型、木糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，液化明膠，還原硝酸鹽產(chǎn)生氮?dú)?，吲哚陰性，利用枸櫞酸鹽，精氨酸雙水解酶陽(yáng)性。第19頁(yè)/共50頁(yè)

銅綠假單胞菌快速鑒定要點(diǎn)：1、能產(chǎn)生綠色素。2、血平板上菌落大而扁平、濕潤(rùn)、邊緣不齊；有金屬光澤；有生姜樣氣味；菌落周圍有寬大的蘭綠色透明溶血環(huán)。3、氧化酶陽(yáng)性第20頁(yè)/共50頁(yè)檢驗(yàn)結(jié)果分析與報(bào)告1.結(jié)合感染癥狀，在血、尿及無(wú)菌體液中檢出特別是重復(fù)檢出即可確定為病原菌。2.若無(wú)感染癥狀，特別是兒童，檢出的革蘭陰性桿菌可視為正常菌群。3.注意銅綠假單胞菌的耐藥性。第21頁(yè)/共50頁(yè)

嗜麥芽窄食單胞菌第22頁(yè)/共50頁(yè)分類

分類曾經(jīng)過(guò)兩次反復(fù)，最終定為假單胞菌屬。第23頁(yè)/共50頁(yè)臨床意義分布廣泛，為條件致病菌，可引起抵抗力低下患者呼吸道、泌尿道、傷口等部位的感染，嚴(yán)重者可出現(xiàn)菌血癥和心內(nèi)膜炎。假單胞菌的感染中居第二位，非發(fā)酵菌所致的感染中居第三位。第24頁(yè)/共50頁(yè)微生物特性G-桿菌，具有端鞭毛1-8根，有動(dòng)力，無(wú)芽孢無(wú)莢膜。第25頁(yè)/共50頁(yè)微生物檢驗(yàn)標(biāo)本采集：血液標(biāo)本先增菌后分離培養(yǎng)，其他標(biāo)本直接接種。分離培養(yǎng)：營(yíng)養(yǎng)需求不高，在血平板和普通瓊脂平板上生長(zhǎng)良好，經(jīng)35℃培養(yǎng)18-24h后可形成中等大小、圓形、光滑、濕潤(rùn)、不溶血的菌落，并可產(chǎn)黃色色素。4℃不生長(zhǎng)，42℃近半數(shù)生長(zhǎng)。并在MAC平板上生長(zhǎng)良好。第26頁(yè)/共50頁(yè)微生物檢驗(yàn)鑒定：氧化酶（-），明膠液化試驗(yàn)（+），七葉苷（+），賴氨酸脫羧酶（+），氧化分解葡萄糖。第27頁(yè)/共50頁(yè)藥敏試驗(yàn)含內(nèi)酰胺酶。臨床治療首選磺胺類和奎諾酮類抗生素。對(duì)亞胺培南天然耐藥不用K-b法做藥敏試驗(yàn)。第28頁(yè)/共50頁(yè)嗜麥芽窄食單胞菌初步鑒定要點(diǎn)在血平板和MAC上生長(zhǎng)良好氧化酶（-）

OF試驗(yàn)氧化型賴氨酸脫羧酶陰性可產(chǎn)黃色色素抗生素的敏感方式第29頁(yè)/共50頁(yè)

不動(dòng)桿菌屬第30頁(yè)/共50頁(yè)分類定義：為一群不發(fā)酵糖類、氧化酶陰性、不能運(yùn)動(dòng)的G-桿菌。屬奈瑟菌科

17個(gè)雜交群臨床分離最多的為鮑曼不動(dòng)桿菌，排在非發(fā)酵菌的第二位，僅次于銅綠假單胞菌。第31頁(yè)/共50頁(yè)臨床意義分布廣泛條件致病菌醫(yī)院感染的常見(jiàn)病原菌第32頁(yè)/共50頁(yè)微生物特性G-球桿菌，常成對(duì)排列，也可單個(gè)存在。無(wú)芽孢，無(wú)鞭毛，粘液型菌株有莢膜。營(yíng)養(yǎng)要求一般，在普通瓊脂平板和MAC平板上均能生長(zhǎng)。SS平板上部分菌株可生長(zhǎng)。第33頁(yè)/共50頁(yè)微生物檢驗(yàn)檢驗(yàn)程序：第34頁(yè)/共50頁(yè)微生物檢驗(yàn)標(biāo)本采集：對(duì)于含菌量較多的標(biāo)本采取直接接種血平板和麥康凱平板，含菌量較少的標(biāo)本需增菌后再培養(yǎng)。直接鏡檢：標(biāo)本經(jīng)革蘭染色后鏡檢可見(jiàn)G-球桿菌常成雙排列，并可見(jiàn)白細(xì)胞吞噬現(xiàn)象。抗原檢測(cè)和分型：第35頁(yè)/共50頁(yè)微生物檢驗(yàn)分離培養(yǎng)：血平板形成圓形、灰白色、光滑、邊緣整齊、直徑2-3mm的菌落。洛菲不動(dòng)桿菌菌落小，1-1.5mm。溶血不動(dòng)桿菌可出現(xiàn)溶血。MAC平板生長(zhǎng)良好，鮑曼不動(dòng)桿菌可呈輕微紅色。鑒定：氧化酶（-）、動(dòng)力（-）、硝還（+）第36頁(yè)/共50頁(yè)藥敏試驗(yàn)和結(jié)果解釋

可采用K-B法藥敏試驗(yàn)鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)全部氨基青霉素、一代二代頭孢菌素和一代奎諾酮類抗生素天然耐藥。第37頁(yè)/共50頁(yè)鮑曼不動(dòng)桿菌初步鑒定要點(diǎn)OF試驗(yàn)：O/-MAC上生長(zhǎng)良好，菌落呈輕微粉紅色氧化酶（-）快速分解葡萄糖和乳糖無(wú)動(dòng)力對(duì)青霉素耐藥第38頁(yè)/共50頁(yè)產(chǎn)堿桿菌屬1.與臨床有關(guān)的有糞產(chǎn)堿桿菌及亞型、皮喬特產(chǎn)堿桿菌、木糖氧化產(chǎn)堿桿菌及亞種，DNAG+Cmol%為56～70，典型菌種為糞產(chǎn)堿桿菌。2.人體的正常菌群，是醫(yī)院感染的病原菌，可引起抵抗力低下患者發(fā)生敗血癥，并可從患者呼吸道、尿液、血液及腦脊液中分離出來(lái)。

第39頁(yè)/共50頁(yè)產(chǎn)堿桿菌屬3.為G-桿菌，呈鏈狀、周鞭毛、有動(dòng)力，無(wú)莢膜。4.在普通培養(yǎng)基上18～24h形成無(wú)色透明菌落。氧化酶及觸酶均陽(yáng)性，不分解任何糖類，O-F試驗(yàn)堿性，脲酶陰性，不液化明膠。

第40頁(yè)/共50頁(yè)黃桿菌屬1.為一群無(wú)動(dòng)力和芽胞、氧化酶陽(yáng)性的G-桿菌。與臨床相關(guān)菌種有短黃桿菌、腦膜炎敗血性黃桿菌、芳香黃桿菌、水田黃桿菌、嗜糖黃桿菌、嗜醇黃桿菌、嗜溫黃桿菌。模式菌種為水田黃桿菌。2.本菌有兩個(gè)特點(diǎn)：產(chǎn)生黃色素,菌落多數(shù)呈黃色；分解碳水化合物產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。DNAG+Cmol%含量31～42。第41頁(yè)/共50頁(yè)

3.存在于水、土壤和蔬菜中，還可從口腔、上呼吸道、皮膚中檢出，是條件致病菌，也是引起醫(yī)院感染的常見(jiàn)菌。可引起術(shù)后感染、菌血癥、在新生兒及嬰幼兒的化膿性腦膜炎中分離出腦膜敗血性黃桿菌比例較高。黃桿菌屬第42頁(yè)/共50頁(yè)4.Ｇ-桿菌，需氧代謝，血瓊脂培養(yǎng)基生長(zhǎng)良好，典型菌落為淡黃色，氧化酶、觸酶、磷酸酶陽(yáng)性。黃桿菌屬第43頁(yè)/共50頁(yè)5.臨床上常見(jiàn)的腦膜炎敗血性黃桿菌及芳香黃桿菌對(duì)廣譜抗菌藥(如氨基糖甙類、β-內(nèi)酰胺酶類、四環(huán)素類、氯霉素)有耐藥性，應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)選擇用藥。黃桿菌屬第44頁(yè)/共50頁(yè)莫拉菌屬1.與臨床有關(guān)的有缺陷莫拉菌、犬莫拉菌、非液化莫拉菌、亞特蘭大莫拉、林肯莫拉菌、苯丙酮酸莫拉菌、奧斯陸莫拉。DNAG+Cmol％為40～47．5。

2.本菌能引起眼結(jié)膜炎、氣管炎、肺炎、腦膜炎、腦膿腫、心炎、心內(nèi)膜炎及泌尿生殖系統(tǒng)炎癥。近年來(lái)非液化莫拉菌引起腦膜炎及嬰幼兒菌血癥者日益多，應(yīng)引起高度重視。第45頁(yè)/共50頁(yè)3.為Ｇ-球桿菌，雙短鏈狀排列，具有多形性。

4.本菌營(yíng)養(yǎng)要求較高，血瓊脂平板上生長(zhǎng)，無(wú)色不溶血的菌落。本菌氧化酶陽(yáng)性，觸酶陽(yáng)性，無(wú)動(dòng)力，不分解糖類，吲哚試驗(yàn)陰性。

5.對(duì)青霉素類敏感，對(duì)頭孢類、四環(huán)素類、氨基糖甙類藥物均為敏感。莫拉菌屬第46頁(yè)/共50頁(yè)軍團(tuán)菌屬1976年新發(fā)現(xiàn)的菌屬。各種天然水源及冷、熱水管道系統(tǒng)（如自來(lái)水、空調(diào)系統(tǒng)、冷卻水塔）是本菌的儲(chǔ)存場(chǎng)所。所致疾?。很妶F(tuán)病。有流感型和肺炎型兩種類型。主要癥狀：發(fā)熱、寒顫、咳嗽、咳痰、胸痛、呼吸困難及腹瀉等。主要通過(guò)呼吸道吸入帶菌飛沫而感