植物激素提取項目總結(jié)

植物激素提取項目總結(jié)第一頁，共9頁。一、實驗內(nèi)容二、實驗結(jié)果三、突破方向第二頁，共9頁。通過2013年植物激素提取方法的摸索，初步確定提取過程為：樣品→組織搗碎→離心→超聲浸提→浸提→過濾測定，2014年工作目的是要改進(jìn)或者完善方法，提高提取液中植物激素的含量，工作內(nèi)容主要包括以下兩個方面：一、實驗內(nèi)容第三頁，共9頁。1、樣品前處理。樣品前處理包括，直接采用鮮海藻酶解處理、將鮮海藻進(jìn)行酶解處理后冷凍干燥、及將鮮海藻反復(fù)凍融三種方法：①對比干燥樣品，將鮮海藻研磨后加入碳酸氫鈉和發(fā)酵液后在組織搗碎機(jī)中搗碎反應(yīng)三十分鐘，反應(yīng)后將樣品離心，下層固體用純甲醇超聲浸提一小時，再放入冰箱中浸提16小時，過濾，待測。②改進(jìn)鮮海藻處理方法，將鮮海藻在冷凍干燥之前進(jìn)行酶解處理，然后將此干燥樣品研磨后加入碳酸氫鈉和發(fā)酵液后在組織搗碎機(jī)中搗碎反應(yīng)三十分鐘，反應(yīng)后將樣品離心，下層固體用純甲醇超聲浸提一小時，再放入冰箱中浸提16小時，過濾，待測。③根據(jù)文獻(xiàn)，改變鮮海藻處理方法，將鮮海藻進(jìn)行反復(fù)凍融，所得海藻樣品加入甲醇，超聲一小時，再放入冰箱中浸提16小時，過濾，待測。（一）、超聲浸提第四頁，共9頁。

2、提取前處理。提取前處理是將酶解所用鹽進(jìn)行改變，考察前期處理中不同鹽對提取結(jié)果的影響，采用磷酸二氫鉀與發(fā)酵液做酶解處理，組織搗碎干燥樣品，離心然后浸提，過濾，待測。

3、濃縮處理。提取液濃縮采用兩種方法，減壓蒸餾和冷凍干燥：①將樣品反復(fù)浸提，合并多次提取液，然后將提取液進(jìn)行減壓蒸餾，考察蒸餾濃縮對提取的影響。②對比減壓蒸餾，擬采用冷凍干燥方法濃縮提取液，制備一定體積的植物激素提取液，進(jìn)行冷凍干燥。第五頁，共9頁。（二）、超臨界提取

1、采用超臨界萃取方法提取植物激素，提取條件：壓力27.5Mpa、溫度40℃、夾帶劑100%甲醇（500mL）、樣品為冷凍干燥鮮海藻粉碎(150g)、提取時間5小時。

2、改變提取條件：壓力27.5Mpa、溫度35℃、夾帶劑80%甲醇水溶液（250mL）、樣品為冷凍干燥鮮海藻粉碎(171g)、提取時間6小時。

3、改變提取樣品，樣品為冷凍干燥二次發(fā)酵液(112g)，其他條件：壓力27.5Mpa、溫度35℃、夾帶劑80%甲醇水溶液（250mL）、提取時間5.5小時。

4、改變提取樣品，樣品為冷凍干燥酶解處理干燥鮮海藻(160g)，其他條件：壓力27.5Mpa、溫度35℃、夾帶劑80%甲醇水溶液（200mL）、提取時間5.5小時。第六頁，共9頁。二、實驗結(jié)果提取液(ppm)玉米素玉米素核苷異戊烯基腺嘌呤異戊烯基腺嘌呤核苷鮮海藻酶解浸提鮮海藻酶解凍干浸提鮮海藻凍融浸提鉀鹽酶解處理浸提減壓蒸餾鈉鹽酶解處理浸提100%甲醇超臨界提取80%甲醇超臨界提取凍干發(fā)酵液超臨界提取凍干酶解海藻超臨界提取ND0.0240.1500.450ND0.395ND0.0130.0800.056ND0.040ND0.232ND0.164NDND0.2200.200ND0.057ND0.132ND0.4360.0850.1500.1480.030ND0.270ND0.570ND0.2660.0710.0590.0300.2071、對比檢測結(jié)果，鮮海藻不經(jīng)過冷凍干燥處理，提取效果不佳，原因可能是細(xì)胞壁破壞程度不夠，直接導(dǎo)致提取效果差；鮮海藻凍干前進(jìn)行酶解處理也未能改進(jìn)提取結(jié)果，而且凍干前的酶解過程可能對植物激素造成一定程度的破壞；反復(fù)凍融鮮海藻對細(xì)胞壁破壞程度不夠，直接導(dǎo)致提取結(jié)果不佳。

2、對比鈉鹽，采用鉀鹽進(jìn)行凍干海藻進(jìn)行酶解前處理，二者差異不大。

3、但減壓蒸餾到一定程度，提取液體積保持不變，蒸餾過程未達(dá)到預(yù)期目標(biāo)，而且蒸餾過程可能對提取液中激素造成破壞。

4、但由于冷凍過程無法達(dá)到提取液凝固點，濃縮中斷，因此未達(dá)到濃縮目的。

5、超臨界提取時，選用80%甲醇水溶液較純甲醇提取效果好，因此之后實驗以80%甲醇水溶液做夾帶劑，凍干發(fā)酵液和凍干酶解處理海