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PAGEPAGE1教學(xué)實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)真菌的保藏教學(xué)實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)真菌的保藏隨著醫(yī)學(xué)科技的不斷發(fā)展和進(jìn)步,微生物學(xué)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用逐漸擴(kuò)大,其中真菌的保藏也越來(lái)越受到人們的重視。教學(xué)實(shí)驗(yàn)室中的真菌保藏對(duì)于醫(yī)學(xué)生物學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的教學(xué)和研究起著至關(guān)重要的作用。本文將介紹教學(xué)實(shí)驗(yàn)室中醫(yī)學(xué)真菌的保藏方法。一、真菌的選擇在保藏真菌前,首先要選擇優(yōu)良的真菌株。一般來(lái)說(shuō),選擇具有代表性的、來(lái)源清晰的、病原菌株的真菌株系。根據(jù)真菌的生長(zhǎng)特點(diǎn)、形態(tài)學(xué)等多方面的考慮,如菌落形態(tài)、色、致病性、菌株的來(lái)源等,選擇最為適宜的真菌株系。二、真菌的保存方式教學(xué)實(shí)驗(yàn)室中,真菌的保存方式主要有以下幾種:1.低溫冷凍保存低溫冷凍保存是目前較為常用的真菌保藏方式之一,其可將真菌凍存于-70℃以下溫度下,不會(huì)影響真菌的形態(tài)和生長(zhǎng)特點(diǎn)。在冷凍過程中,應(yīng)使用保險(xiǎn)的玻璃管或瓊脂瓶進(jìn)行保存,以避免細(xì)菌或外界污染對(duì)其產(chǎn)生影響。2.干燥法保存干燥法保存是將真菌在適當(dāng)?shù)臏囟认赂稍?,并放入干燥劑盒中進(jìn)行保存。其主要優(yōu)點(diǎn)在于可以有效地防止菌株間的污染和變異,同時(shí)保存時(shí)間也比較長(zhǎng)。不過,在使用該方法時(shí),需注意保存干燥劑的干燥程度,以及干燥后真菌的含水量和保管溫度,以免對(duì)真菌產(chǎn)生負(fù)面影響。3.液氮冷凍保存液氮冷凍保存是在真菌生長(zhǎng)良好的情況下將其培養(yǎng)基或菌株體凍于液氮中,保存在-196℃以下。使用該方法保存真菌時(shí),應(yīng)先進(jìn)行預(yù)處理,如浸泡、脫水,以提高真菌抗凍性??傮w而言,液氮冷凍保存方法適用于無(wú)法進(jìn)行接續(xù)培養(yǎng)的真菌株。4.培養(yǎng)基凍存保存培養(yǎng)基凍存保存是將真菌接種在加入凍保劑的培養(yǎng)基上,在-20℃以下的低溫下保存。在保存前需對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行無(wú)菌處理,以避免污染,同時(shí)對(duì)菌種的適時(shí)冷卻可以延長(zhǎng)冷藏時(shí)間。三、真菌的喚醒和復(fù)蘇在進(jìn)行真菌保藏時(shí),難免會(huì)出現(xiàn)菌株死亡或變異等情況。為了保證實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行,喚醒和復(fù)蘇真菌成為了必不可少的步驟。喚醒和復(fù)蘇方法主要有以下幾種。1.接續(xù)法喚醒接續(xù)法喚醒是將冷凍或冷藏的真菌菌絲插入到含有適宜培養(yǎng)條件的培養(yǎng)基上,通過一定時(shí)間的接續(xù)來(lái)恢復(fù)生長(zhǎng)狀況。在接續(xù)過程中,需注意接續(xù)時(shí)機(jī)以及氧氣供應(yīng)充足。2.溫度變化法喚醒溫度變化法喚醒將冷藏或冷凍的真菌在逐步升溫的過程中逐漸喚醒。在喚醒過程中,真菌的升溫速度和溫度增量的大小非常重要,需要嚴(yán)格控制。在喚醒前還應(yīng)進(jìn)行預(yù)處理,使得真菌能夠更好地適應(yīng)環(huán)境變化。3.長(zhǎng)光照射喚醒法長(zhǎng)光照射喚醒法是在一定光照下喚醒真菌,光照可刺激菌落生長(zhǎng),促進(jìn)菌株活化。該方法需要光源條件,且喚醒后需進(jìn)行接續(xù)處理,以保證菌株生長(zhǎng)狀況。綜上所述,真菌的保藏對(duì)于教學(xué)實(shí)驗(yàn)室中的微生物學(xué)教
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