不孕不育相關實驗室檢測專家講座

不孕不育相關試驗室檢測

不孕不育相關實驗室檢測專家講座第1頁內容：免疫性不孕不育相關抗體先天原因引發(fā)不孕不育不孕不育相關實驗室檢測專家講座第2頁不孕不育定義不孕癥：婚后未避孕、有正常性生活、同居二年而未

曾受孕者。不育癥：指性功效正常、未采取避孕辦法一年以上而

不能使女方懷孕者。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第3頁不孕不育疾病現(xiàn)實狀況不孕不育并不是一個單一疾病，而是150各種疾病綜合臨床表現(xiàn)。很多原因都可以造成男女不孕不育，有40%男性出現(xiàn)問題會造成不孕不育，有50%女性出現(xiàn)問題會造成不孕不育，另有10%為不明原因造成不孕不育。WHO/HRD統(tǒng)計顯示，全球不孕不育夫婦已達6000——8000萬對。在中國不孕不育疾病也日漸高發(fā)，據(jù)統(tǒng)計每八對夫妻中就有一對不孕不育夫婦。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第4頁不孕不育分類——女性不孕

依據(jù)不孕性質可分為生理性不孕和病理性不孕。在青春前期、哺乳期和絕經(jīng)期不孕稱為生理性不孕。因為各種疾病引發(fā)不孕稱為病理性不孕。依據(jù)是否有過妊娠史可分為原發(fā)性不孕和繼發(fā)性不孕?；楹蠖陜葟奈慈焉镎叻Q為原發(fā)性不孕。曾有妊娠而以后有規(guī)律性生活未采取避孕辦法，連續(xù)二年不孕者稱繼發(fā)性不孕。依據(jù)是否有懷孕可能分為絕對不孕和相對不孕。夫婦雙方或雙方有先天或后天、解剖或生理方面有缺點且無法糾正而不能妊娠稱為絕對不孕。夫婦一方或雙方因一些原因妨礙受孕，造成暫時不孕，一旦得到糾正仍能受孕者稱為相對不孕。

不孕不育相關實驗室檢測專家講座第5頁不孕不育分類——女性不孕4、依據(jù)引發(fā)女性不孕病變器官不一樣可分為卵巢性不孕、輸卵管性不孕、子宮性不孕、子宮頸性不孕及外陰和異常性不孕。5、先天性生殖系統(tǒng)發(fā)育性不孕。6、免疫性不孕。7、很多降低生育能力原因造成不孕。8、醫(yī)源性不孕。9、非特異性、特異性及性傳輸性感染性不孕。

不孕不育相關實驗室檢測專家講座第6頁不孕不育分類——男性不育按不育病史分類：可分為原發(fā)性不育與繼發(fā)性不育。前者指婚后從未有過生育，后者指曾有一次或幾次生育，以后三年以上，沒有采取避孕辦法，仍未再有生育者；2.按治療可能性分類：可分為絕對性不育和相對性不育。無治療成功希望不育癥稱絕對性不育，有治療成功希望不育癥稱相對性不育；3.按病因性質分類：可分為性不育和病理性不育、品質性不育和功效性不育、先開性不育和后天性不育；4.按引發(fā)不育病因分類：按可分為干擾不一樣生殖步驟性不育及精液檢驗異常狀態(tài)性不育。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第7頁不孕不育排查技術女子十三關排查技術：

陰道檢驗、宮頸檢驗、子宮檢驗、輸卵管檢驗、卵巢檢驗、盆腔檢驗、內分泌檢驗、性激素檢驗、免疫原因檢驗、全身性原因檢驗、精神原因及心理原因檢驗、先天性原因檢驗、排卵功效檢驗、超聲波B超檢驗,四項檢驗不孕不育相關實驗室檢測專家講座第8頁不孕不育排查技術男子十四關排查技術：

尿道檢驗、前列腺檢驗、精囊輸精管檢驗、附睪檢驗、睪丸檢驗、性激素檢驗、性功效檢驗、射精功效檢驗、免疫原因檢驗、內分泌檢驗、精索靜脈曲張檢驗、創(chuàng)傷檢驗、放射原因檢驗、精子質量檢驗、先天性原因檢驗。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第9頁免疫性不孕免疫性不孕癥診療標準：1、不孕期超出3年。2、排除不孕其它原因。3、可靠檢測方法證實體內存在不孕不育抗體。4、體外試驗證實抗生育免疫干擾精卵結合。滿足前3項可做出診療，同時滿足4項可確診。可見，檢測不孕不育抗體是免疫性不孕癥主要診療依據(jù)。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第10頁不孕不育抗體知識—定義定義：精子、精漿、透明帶和卵巢等生殖系統(tǒng)抗原在特定情況下均可產(chǎn)生本身免疫或同種免疫，引發(fā)機體產(chǎn)生對應抗體，妨礙精子與卵子結合或受精卵著床造成不孕；或影響胎盤發(fā)育造成不育。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第11頁不孕不育抗體知識—臨床意義臨床意義：不孕不育抗體對于原發(fā)性與繼發(fā)性不孕癥、重復自然流產(chǎn)、葡萄胎、宮外孕、子宮內膜異位癥、月經(jīng)紊亂、繼發(fā)性閉經(jīng)、卵巢功效早衰等疾病診療治療、預后判斷均含有很高價值。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第12頁相關抗體抗精子抗體抗子宮內膜抗體抗心磷脂抗體抗滋養(yǎng)層細胞膜抗體抗HCG抗體抗卵巢抗體抗透明帶抗體不孕不育相關實驗室檢測專家講座第13頁抗精子抗體ASAb既可在男性體內又可在女性體內產(chǎn)生。ASAb陽性率占不孕不育患者24.4%，而且陽性率女性略大于男性，這可能與女性生殖道更易感染損傷引發(fā)炎癥，使女性生殖道屏障受到破壞原因相關。

不孕不育相關實驗室檢測專家講座第14頁抗精子抗體—ASAb(1)抗精子頭部抗體可干擾精子獲能及頭粒反應。(2)細胞毒抗體在補體參加下使精子細胞膜損傷，精子死亡，抗精子尾干抗體抑制精子活動。(3)抗精子抗體Fc段與宮頸粘液糖蛋白結合，干擾精子穿過排卵期宮頸粘液。(4)抗精子抗體調理作用增強生殖道局部吞噬細胞對精子吞噬作用。(5)抗精子頭部抗體能阻止精子與透明帶及卵細胞膜結合，抑制受精?？咕涌贵w干擾生育步驟不孕不育相關實驗室檢測專家講座第15頁抗子宮內膜抗體—EMAb當女性子宮內膜有炎癥時，可轉化成抗原或半抗原，刺激機體本身產(chǎn)生對應抗體。

人工流產(chǎn)刮宮時，胚囊也可能作為抗原刺激機體產(chǎn)生抗體。便會造成不孕、停孕或流產(chǎn)。

不少女性因在首次妊娠時作了人工流產(chǎn)，而繼發(fā)不孕，這種繼發(fā)不孕患者多數(shù)是因體內產(chǎn)生抗子宮內膜抗體所致不孕。

抗子宮內膜抗體靶抗原是子宮內膜腺上皮激素依賴蛋白，EMAb與靶抗原結合后可干擾受精卵植入，造成不育。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第16頁抗心磷脂抗體—ACLACL抗體確切致病機制不清楚。ACL抗體陽性者發(fā)生重復自然流產(chǎn)多于ACL抗體陰性者在ACL抗體陽性孕婦中，發(fā)生胎兒生長遲緩幾率約為15.0%左右，而在ACL抗體陰性孕婦中，胎兒生長遲緩發(fā)生率僅為1.7%左右。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第17頁抗滋養(yǎng)層細胞膜抗體—TAAb在合體滋養(yǎng)層漿膜上有可被母體識別抗原系統(tǒng)，它們存在影響著孕婦與胎兒之間免疫平衡。研究表明在不明原因流產(chǎn)婦女血清中，抗滋養(yǎng)層細胞膜抗體比正常孕婦顯著增高。

抗滋養(yǎng)層細胞抗體檢測，主要作為重復流產(chǎn)患者輔助診斷指標。假如是曾經(jīng)有流產(chǎn)史女性結果屬于陽性，應該在轉陰之后考慮懷孕。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第18頁抗HCG抗體—HCGAbHCG是由合體滋養(yǎng)細胞層分泌妊娠期特有激素，其

主要功效是維持妊娠黃體。另外，hCG還可預防胎

兒滋養(yǎng)細胞被母體血液中抗體及免疫活性細胞識

別而被排斥，故對胎兒有免疫保護作用。母體淋巴

細胞排斥反應主要是經(jīng)過抑制hCG抗體來實現(xiàn)

,若這種抑制被減弱，造成抗體含量增加，則這種保

護作用將受到破壞，從而引發(fā)不育。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第19頁抗卵巢抗體—AoAb它是由本身免疫系統(tǒng)將患者卵巢組織作為抗原而引發(fā)本身免疫反應。AoAb可多方面影響卵巢功效:(1)包裹卵細胞,影響其排出或阻止精子穿入;(2)AoAb在補體作用下產(chǎn)生細胞毒作用,破壞卵巢細胞,還能干擾孕卵破殼而妨礙著床;(3)影響卵巢內分泌功效;(4)使T淋巴細胞浸潤造成卵巢局部類促性腺樣物質增多,引發(fā)下丘腦-垂體-卵巢軸功效紊亂,間接影響卵泡發(fā)育不孕不育相關實驗室檢測專家講座第20頁抗透明帶抗體抗透明帶抗體經(jīng)過下述路徑干擾生育：①封閉精子受體，妨礙精子與透明帶結合;②使透明帶變硬，有時即使受精，也因透明帶不能自受精卵表面脫落而干擾著床?？捎糜诓辉邪Y、卵巢功效早衰輔助診療。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第21頁先天性原因引發(fā)不育1、染色體核型分析2、Y染色體微缺失不孕不育相關實驗室檢測專家講座第22頁染色體核型分析染色體異常

從11個出版物資料庫統(tǒng)計男性不育患者9766人，染色體異常發(fā)病率為5.8%，其中性染色體異常4.2%，常染色體異常1.5%。少精或者無精者，常見病情為染色體結構或數(shù)目異常，其中有KIinefelter綜合征、四倍體＞8%、染色體畸變率＞6%、微核率＞5‰、核型雖為46XY，但Y染色體＞17號染色體、核型47XY+ESC1等。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第23頁染色體核型分析外周血染色體核型分析——400條帶

標本要求：全血5ml，肝素抗凝。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第24頁Y染色體微缺失一、背景全球不育夫婦占已婚夫婦10%-15%;其中男性原因占25%-50%;遺傳原因占男性不育30%;遺傳原因引發(fā)男性不育可經(jīng)過輔助生殖技術傳遞給下一代;不孕不育相關實驗室檢測專家講座第25頁Y染色體微缺失

染色體是最短近端著絲粒染色體,是男性特有染色體。1976年,研究發(fā)覺Y染色體長臂上存在與精子發(fā)生相關基因,人們把這一區(qū)域稱作無精子因子,亦稱AZF區(qū)；1996年將AZF區(qū)劃分為3個區(qū):AZFa、AZFb、AZFc1999年研究發(fā)覺在AZFb和AZFc間存在AZFd。研究發(fā)覺,在Y染色體AZFa、AZFb、AZFc3個區(qū)最少發(fā)覺15個與精子發(fā)生相關基因，AZFd區(qū)還未發(fā)覺相關基因。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第26頁Y染色體微缺失二、Y染色體微缺失與精液質量無精子基因（AZFaAZFbAZFC)AZFa缺失患者33%為嚴重少精子,67%表現(xiàn)為無精子；AZFb缺失患者9%輕度少精子,23%嚴重少精子,68%無精子；AZFc缺失患者46%嚴重少精子,54%無精子；不孕不育相關實驗室檢測專家講座第27頁Y染色體微缺失臨床檢測應用及結果釋疑：對無精子癥或嚴重少精子癥患者進行AZF檢測1、AZFa大片段缺失病理表現(xiàn)為唯支持細胞綜合癥（SCOS），無精原細胞出現(xiàn),無精子生成。2、AZFb缺失通常表現(xiàn)為精子生成受阻,與無精子或嚴重少精子相關。3、AZFc缺失表現(xiàn)為一些精原細胞出現(xiàn),并有有限精子生成或精子生成極少。

不孕不育相關實驗室檢測專家講座第28頁Y染色體微缺失臨床意義有兩點：第一：經(jīng)過檢驗能夠使這些原因不明無精子癥或嚴重少精子癥患者明確病因，降低一些無謂“治療”；第二：假如上述這些病人希望經(jīng)過輔助生育技術到達生育目標者，是一項必須檢測項目，AZF缺失能夠垂直傳遞給男性后代,其后代也存在不育可能。盡可能選擇女嬰，切斷遺傳路徑。不孕不育相關實驗室檢測專家講座第29頁Y染色體微缺失歐洲男科協(xié)會(EAA)

和歐洲分子遺傳試驗質控網(wǎng)(EMQN)

在1999、年先后頒布了第1版和第2版Y染色體微缺失分子診療指南，規(guī)范了檢測微缺失時Y染色體序列標簽點(sequencetargete