新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求專家講座

新生兒遺傳代謝病篩查

采血技術試驗技術規(guī)范化要求四川省南充市婦幼保健院四川省新生兒疾病篩查南充分中心陳生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第1頁2新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第2頁篩查標本到達試驗室時間（平均）3新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第3頁年篩查量分布篩查數(shù)量篩查中心百分比（%）<1萬1813.641-<3萬3123.48>=3-<10萬6952.27>=10-20萬139.85>20萬10.764新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第4頁5新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第5頁6新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第6頁7新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第7頁8新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第8頁9新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第9頁新生兒遺傳代謝病篩查血片

采集技術規(guī)范血片采集是新生兒遺傳代謝病篩查技術流程中最主要步驟。血片質量直接影響試驗室檢測結果，開展新生兒遺傳代謝病血片采集及送檢醫(yī)療機構應該按本技術規(guī)范要求完成血片采集工作。10新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第10頁一、基本要求（一）采血機構設置。設有產(chǎn)科或兒科診療科目標醫(yī)療機構均應該開展新生兒遺傳代謝病篩查血片采集。（二）采血人員要求。1.含有與醫(yī)學相關中專以上學歷，從事醫(yī)學臨床工作2年以上。2.接收過新生兒遺傳代謝病篩查相關知識和技能培訓并取得技術合格證書。培訓內(nèi)容包含：新生兒遺傳代謝病篩查目標、標準、方法及網(wǎng)絡運行；濾紙干血片采集、保留、遞送相關知識；新生兒遺傳代謝病篩查相關信息和檔案管理。11新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第11頁二、采血機構和人員職責（一）主動開展新生兒遺傳代謝病篩查宣傳教育工作。（二）加強對本機構血片采集人員管理和培訓。（三）負擔本機構新生兒遺傳代謝病篩查相關信息搜集、統(tǒng)計、分析和上報工作。（四）血片采集人員在實施血片采集前，應該將新生兒遺傳代謝病篩查目標、意義、篩查疾病病種、條件、方式、靈敏度和費用等情況如實通知新生兒監(jiān)護人，并取得書面同意。（五）認真填寫采血卡片，做到字跡清楚、登記完整?？ㄆ瑑?nèi)容包含：采血單位、母親姓名、住院號、居住地址、聯(lián)絡電話、新生兒性別、孕周、出生體重、出生日期、采血日期和采血者等。12新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第12頁二、采血機構和人員職責

（六）嚴格按照新生兒遺傳代謝病篩查血片采集步驟采集足跟血，制成濾紙干血片，并在要求時間內(nèi)遞送至新生兒遺傳代謝病篩查試驗室檢驗。（七）因特殊情況未按期采血或不合格標本退回需要重新采血者，應該及時預約或追蹤采集血片。（八）對可疑陽性病例應該幫助新生兒遺傳代謝病篩查中心，及時通知復查，方便確診或采取干預辦法。（九）做好資料登記和存檔保管工作，包含掌握活產(chǎn)數(shù)、篩查數(shù)、新生兒采血登記信息、反饋檢測結果及確診病例等資料，保留時間最少10年。13新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第13頁三、血片采集步驟（一）血片采集人員清洗雙手并佩戴無菌、無滑石粉手套。（二）按摩或熱敷新生兒足跟，并用75%乙醇消毒皮膚。（三）待乙醇完全揮發(fā)后，使用一次性采血針刺足跟內(nèi)側或外側，深度小于3毫米，用干棉球拭去第1滴血，從第2滴血開始取樣。（四）將濾紙片接觸血滴，切勿觸及足跟皮膚，使血液自然滲透至濾紙后面，防止重復滴血，最少采集3個血斑。（五）手持消毒干棉球輕壓采血部位止血。（六）將血片懸空平置，自然晾干呈深褐色。防止陽光及紫外線照射、烘烤、揮發(fā)性化學物質等污染。（七）及時將檢驗合格濾紙干血片置于密封袋內(nèi)，密閉保留在2～8℃冰箱中，有條件者可0℃以下保留。（八）全部血片應該按照血源性傳染病標本對待，對特殊傳染病標本，如艾滋病等應該作標識并單獨包裝。14新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第14頁四、采血工作質量控制（一）血片采集濾紙應該與試劑盒標準品、質控品血片所用濾紙一致。（二）采血針必須一人一針。（三）正常采血時間為出生72小時后，7天之內(nèi)，并充分哺乳；對于各種原因（早產(chǎn)兒、低體重兒、正在治療疾病新生兒、提前出院者等）未采血者，采血時間普通不超出出生后20天。（四）合格濾紙干血片應該為：1.最少3個血斑，且每個血斑直徑大于8毫米。2.血滴自然滲透，濾紙正反面血斑一致。3.血斑無污染。4.血斑無滲血環(huán)。（五）濾紙干血片應該在采集后及時遞送，最遲不宜超出5個工作日。（六）有完整血片采集信息統(tǒng)計。15新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第15頁新生兒遺傳代謝病篩查濾紙血片采集（CLSI)16新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第16頁注意事項當采集血標本時應恪守注意事項。病人標本可能感染了人類免疫缺點病毒（HIV）或乙型肝炎病毒（HBV）。應恪守恰當血樣采集技術來盡可能降低試驗室人員危險性，而且要戴手套。17新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第17頁1.2 標本可接收性

本標準并不是解釋假如沒有完全按照標準采集全部血斑標本定為不可接收（即是不能進行檢測）。只是證實拒絕分析標本及表明其是不可接收，假如進行檢測話對于特定分析物會產(chǎn)生不可靠、誤解或臨床上不準確結果。既然，因為這一定義，不可接收標本產(chǎn)生無用信息，就不應分析檢測這么標本，并應通知負責采集血樣人員盡快地重新采集可接收標本。假如檢測了標本，實際上，試驗室認可標本適當性，以及負擔負責分析結果可靠性。18新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第18頁2.1 足（后）跟（Heel）新生兒篩查時，推薦使用足跟采血，應從足跟掌側中間或側面采集。“中間”是指盡可能地靠近人體中線，“側面”是指盡可能地遠離人體中線。“掌側”是指足部行走側。不能使用以前使用穿刺部位或足跟曲面?zhèn)取?9新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第19頁3.濾紙血樣采集技術

3.1腳跟穿刺3.1.1準備步驟3.1.2預防辦法3.1.3位置準備3.1.4采血部位消毒3.1.5穿刺3.1.6直接應用3.1.6.1擠壓3.1.6.2多層3.1.7采集血樣3.1.8干燥3.1.9堆積3.1.10運輸3.1.11保留20新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第20頁3.1.8 干燥

應防止接觸或污染血斑。血標本應放置在室溫(15oCto22oC)并防止陽光直照（非直接室內(nèi)光線通常不會有害），周圍無吸附物質水平支架上最少三個小時。濾紙上血斑不應加熱、堆積在一起、或在干燥過程中接觸到其它表面。21新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第21頁3.1.9 堆積在一起

當不可防止地將暴露干血斑成批地堆積在一起時，應采取以下程序。在將標本放置在運輸容器中之前，除非標本有其它物理屏障隔開，如隔紙，玻璃紙，不然，應將采樣卡片上干血斑旋轉180o后再放置。22新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第22頁3.1.10運輸（郵寄）

除非篩查試驗室有別指導，應在采集標本后24小時內(nèi)將采集血樣卡片運輸?shù)交蜞]寄到試驗室，并保留適當跟蹤統(tǒng)計文件。應防止在采集血樣場所耽擱，相對于可能耽擱其運輸環(huán)境應結構化來最大程度地提升運輸效率。23新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第23頁3.1.11保留

假如試驗室要保留剩下干血斑標本到更長時間，必須保管好它們確保保留后其狀態(tài)未受到損害。一個方法是將標本保留在含有干燥劑和濕度指示卡不漏氣、可封口塑料袋中。濕度應維持在低于30%。假如可能話，陽性和陰性血斑質控品應與剩下標本放置在一起，這么，當從保留環(huán)境中取出標本時能夠經(jīng)過檢測質控品情況來檢驗標本完整性。24新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第24頁4.4 運輸和包裝預防辦法標本不應放置在密封不透氣容器中（塑料或橡皮信封）。必須恪守郵遞和地方運輸法規(guī)[17]。假如地方法規(guī)要求用防水容器包裝用于運輸，則必須包含足夠量包裝好干燥劑和濕度指示卡來確保干血片未暴露在過量濕氣中。濕度和濕氣對干血斑標本穩(wěn)定性和分析物回收是有害。含有生物危險標本在運輸中應含有特殊防護辦法。25新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第25頁4.4.2 包裝

包裝不應造成濾紙受壓。在血斑標本運輸中在同一容器中不應放置化學或其它類型標本。26新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第26頁4.4.3 堆積放置

因為標本之間濾?。ń徊嫖廴荆┛赡馨l(fā)生，標本與標本之間接觸是不恰當。假如堆積放置不可防止話，可有幾個方法：(1) 對采集血樣表格加上遮蓋紙片。(2) 將暴露干血斑旋轉180度。(3) 標本之間放置玻璃紙。27新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第27頁4.4.4 運輸時間

標本應在采集24小時內(nèi)送或郵寄到篩查試驗室。28新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第28頁5.1 最少預先打印信息

下面列出是到達篩查目標要求最少所需信息。為了滿足其特殊要求，依據(jù)篩查計劃可包含一些額外信息。(1) 新生兒姓名,母親姓名,病人識別號(選擇:地址和電話號碼)。(2) 出生日期。(3) 出生體重。(4) 性別。(5) 喂奶情況。(6) 標本采集時間和新生兒年紀（小時）。(7) 提供血樣單位和地址。(8) 醫(yī)生姓名和電話號碼。(9) 篩查計劃或試驗室和地址。(10)填寫分析試驗結果位置。(11)含有一定數(shù)量1/2寸（13mm）內(nèi)徑在濾紙一側印有破折或點狀線圈(選擇：在兩側印好圈)。75uL血液可填滿標本采集圈，而100uL血液會稍微超出印好圈。(12)在濾紙部分標出濾紙廠家和批號。29新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第29頁5.2.3 標本卡片編號

每一標本采集卡片連續(xù)編號應預先打印在卡片每一信息部分，假如血斑部分從卡片上分開。應考慮標本識別號連續(xù)唯一性。為了到達這一識別及干血片標本與新生兒資料表聯(lián)絡，條形碼是一適當方法。30新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第30頁怎樣采集可接收血片標本

A1 準備A1.1洗手A1.2戴消毒無滑粉手套以及不一樣新生兒要更換手套A1.3確認新生兒身份A2 采樣技術戴手套31新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第31頁

A2.1用70%酒精消毒新生兒足跟A2.2讓足跟自然干燥32新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第32頁

A2.3針刺部位應在如上圖所表示陰影區(qū)域

33新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第33頁

A2.4用推薦長度柳葉刀 進行如圖所表示針刺（深度小于2.0m）

34新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第34頁

A2.5用消毒棉球輕輕地拭去第一滴血（第一滴血含有組織液可能會稀釋樣本）A2.6等候形成大血滴A2.7可用拇指進行溫柔擠壓及間斷性地放松易于形成血滴

35新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第35頁

A2.8輕輕地將濾紙卡片接觸血滴，用每一滴血滴在每一預先定好圈內(nèi)。觀察每一圈血流透過濾紙情況。 A2.9全部使用過用具均應放置在適當生物危害容器中。36新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第36頁37新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第37頁

A2.10采集完標本后，應將新生兒足抬高，使用消毒棉球壓著針刺位置。但不要使用膠粘帶。 A2.11讓血標本完全自然干燥，放置在水平支架上，如塑料試管架，在室溫中放置最少3小時（不能堆積在一起或加熱）。A2.12標本干燥后，放置在同意運輸容器中38新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第38頁

A3 易犯錯誤A3.1殘留酒精未能自然干燥可能稀釋標本，影響到試驗結果。A3.2在后彎曲足后跟進行穿刺將使得血液從穿刺部位流出，使得正常血斑難以形成。不能使用以前穿刺部位。A3.3擠壓穿刺部位可能造成溶血，使得組織液混合到標本中去。39新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第39頁

A3.4不能在目標血斑上連續(xù)滴上幾滴血（比如A）。假如血流降低以至不能完全地填滿圈，則需要重復采血技術A2.1到A2.11步驟。注意血樣B因為不足血液所至低質量標本。A3.5防止接觸在采血前圈子區(qū)域或采集完血樣后血斑。不能讓水、牛奶、消毒液、手套上粉狀物或其它物質接觸標本卡片。A3.6在標本干燥之前不要將標本放置在運輸容器之中。A3.7如血斑未能完全干燥將會影響到試驗結果40新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第40頁附錄E血片采集及干燥設備41新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第41頁利器損傷42新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第42頁銳器刺傷引發(fā)職業(yè)感染

接觸各種病原體及傳染病，進行各種侵入性操作時接觸血液、體液，被各種銳器刺傷等。而種種污染針頭刺傷是醫(yī)院內(nèi)傳染乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）及人類免疫缺點病毒（HIV）等主要路徑。據(jù)世界衛(wèi)生組織報道:被HIV陽性病人針刺傷后取得HIV可能性是0.2%～0.4%；受針刺傷感染HCV可能性是0.2%～6.0%；受刺傷感染HBV可能性是19%～40%。據(jù)國內(nèi)幾家醫(yī)院調查資料顯示:大約有78.4%～81.9%醫(yī)務人員工作中有被銳器刺傷歷史，針刺傷5次以上者達17.9%。43新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第43頁血液傳輸主要病原菌：HBV，HCV，HDV，HIV1994年美國CDC報道職業(yè)傳輸HIV，17例確定，15例可能，主要原因是針刺引發(fā)感染。尚無證據(jù)證實HIV可經(jīng)過氣溶膠傳輸。10個臨床和研究試驗室進行HBV表面抗原調查，從3個試驗室11個工作臺檢測到31個陽性/800個環(huán)境標本。44新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第44頁新生兒遺傳代謝病篩查

試驗室檢測技術規(guī)范本規(guī)范適合用于負擔新生兒苯丙酮尿癥和先天性甲狀腺功效減低癥等新生兒遺傳代謝病篩查試驗室檢測醫(yī)療機構。45新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第45頁一、基本要求（一）機構設置。省、自治區(qū)、直轄市人民政府衛(wèi)生行政部門按照本區(qū)域規(guī)劃指定含有能力醫(yī)療機構為新生兒遺傳代謝病篩查中心,其試驗室年篩查檢測量應該達3萬人次以上。（二）人員要求。1.試驗室責任人：與醫(yī)學相關本科以上學歷，高級職稱，含有兒科或臨床檢驗工作經(jīng)驗，從事新生兒遺傳代謝病篩查工作5年以上，掌握新生兒遺傳代謝病篩查網(wǎng)絡運作和管理。2.試驗室技術人員：中專以上學歷，從事檢驗工作2年以上，含有技師以上職稱，接收過省級以上衛(wèi)生行政部門組織新生兒遺傳代謝病篩查相關知識和技能培訓并取得技術合格證。3.文案人員46新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第46頁一、基本要求（三）設備要求。（四）房屋要求。1.試驗室用房2間，使用面積最少40平方米以上。2.綜適用房2間，最少20平方米以上，用于濾紙干血片驗收、計算機錄入和資料登記保留。3.血片儲備室或冷庫1間，用于濾紙干血片長久保留。4.房屋面積應該依據(jù)篩查量及篩查病種適當增加。47新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第47頁二、實施標準與職責（一）必須符合《新生兒疾病篩查管理方法》及《醫(yī)療機構臨床試驗室管理方法》。（二）收到標本應該在24小時內(nèi)登記，不符合要求標本應該馬上退回重新采集。（三）采取國家要求試驗方法，且含有國家同意文號試劑和設備進行檢測。（四）必須接收衛(wèi)生部臨床檢驗中心質量監(jiān)測和檢驗。（五）檢測結果及時反饋，發(fā)覺漏檢病例，須尋找原因。48新生兒遺傳代謝病篩查采血技術實驗技術規(guī)范化要求第48頁二、實施標準與職責（六）必須建立以下試驗室規(guī)章制度：1.人員分工責任制度。2.各種技術操作程序。3.質量控制管理制度。4.儀器管理及校準制度。5.試劑材料管理制度。6.標本登記保留制度。7