血涂片的制作及免疫細(xì)胞的形態(tài)觀察

血涂片的制作及免疫細(xì)胞的形態(tài)觀察第1頁，共12頁，2023年，2月20日，星期日一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康蘑僬莆瘴⒘坎裳把科闹谱鞣椒á趯W(xué)習(xí)使用光學(xué)顯微鏡觀察免疫細(xì)胞第2頁，共12頁，2023年，2月20日，星期日二、實(shí)驗(yàn)原理

血涂片是臨床化驗(yàn)中最常規(guī)的技術(shù)，也是血液學(xué)研究中的最基本技術(shù)。將血液樣品制成單層細(xì)胞的涂片標(biāo)本，經(jīng)瑞氏（Wright）染液染色后，不同免疫細(xì)胞中的顆?？梢猿尸F(xiàn)不同的顏色。根據(jù)細(xì)胞中顆粒的顏色、大小及多少，再結(jié)合細(xì)胞的大小及細(xì)胞核的形態(tài)，就可以將免疫細(xì)胞進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。

第3頁，共12頁，2023年，2月20日，星期日三、實(shí)驗(yàn)器材器材：醫(yī)用一次性采血針、酒精棉球、鑷子、經(jīng)脫脂洗凈的載玻片等試劑：瑞氏（Wright）染液，瑞特氏染料0.1克溶于60ml

甲醇中，過濾。貯褐色瓶中備用。（配置時(shí)，要先將瑞特氏染料置研缽體內(nèi)邊研邊滴加甲醇，使染料溶液得更好。）第4頁，共12頁，2023年，2月20日，星期日四、實(shí)驗(yàn)步驟1．采血采血前用70%酒精棉球消毒人的指腹或耳垂，干后用采血針刺破指腹或耳垂的皮膚；動(dòng)物采血時(shí)先將耳部剪毛，酒精消毒后，刺破動(dòng)物耳部皮膚，擠去第一滴血不要（因含單核細(xì)胞較多）。第5頁，共12頁，2023年，2月20日，星期日第6頁，共12頁，2023年，2月20日，星期日2．涂片擠出第二滴血置于載玻片的一端，再取另一張邊緣光滑的載玻片，斜置于血涂片的前緣，先向后稍移動(dòng)輕輕觸及血滴，使血液沿玻片端展開成線狀，兩玻片的角度以30~40O為宜（角度過大血膜較厚，角度小則血膜薄），輕輕將載玻片向前推進(jìn)，即涂成血液薄膜（如圖），推進(jìn)時(shí)速度要一致，否則血膜成波浪形，厚薄不勻。第7頁，共12頁，2023年，2月20日，星期日第8頁，共12頁，2023年，2月20日，星期日3．染色待涂片在空氣中完全干燥后，滴加數(shù)滴瑞氏染液蓋滿血膜為止，染色1~3min。然后滴加等量的緩沖液（pH6.4）或蒸餾水沖去染液，吸水紙吸干，鏡檢。第9頁，共12頁，2023年，2月20日，星期日4．封片經(jīng)染色的涂片完全干燥后，用中性樹膠封片保存。第10頁，共12頁，2023年，2月20日，星期日5．觀察分別用低倍、高倍和油鏡觀察血涂片，分辨不同的血細(xì)胞類型。第11頁，共12頁，2023年，2月20日，星期日五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告