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實(shí)驗(yàn)中藥制片技術(shù)第1頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六一、顯微鏡的使用和保養(yǎng)第2頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六顯微鏡的結(jié)構(gòu)鏡座鏡臂鏡筒載物臺(tái)光路系統(tǒng):目鏡、物鏡、集光器、光源第3頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六物鏡低倍鏡:4×、10×——用于觀察整體結(jié)構(gòu)、尋找特定特征。高倍鏡:40×、100×(油鏡)——用于觀察特定細(xì)微結(jié)構(gòu)與組織特征,油鏡較為少用。第4頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六使用注意與技巧先低倍后高倍,即先整體后局部之字形掃描式尋找需要觀察的特征由低倍鏡轉(zhuǎn)成高倍鏡后,只能使用微調(diào)高倍鏡觀察時(shí),應(yīng)通過(guò)控制光源強(qiáng)度、集光器高低、虹彩光闌的張合,并結(jié)合微調(diào),使被觀察物清晰。第5頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六使用過(guò)程及使用后的保養(yǎng)顯微制片必須將多余的裝置液清理干凈,以免沾染鏡頭。如目鏡與物鏡被沾染,則以鏡頭紙從中央向四周以劃圓圈的方式擦拭。必要時(shí)還要使用去污劑擦拭。第6頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六使用完畢后,移去玻片,按上述方法擦拭,將最低倍物鏡轉(zhuǎn)入光路,載物臺(tái)復(fù)位。關(guān)閉電源,拔下插座,蓋上防塵罩。在相應(yīng)使用登記本上簽名。第7頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六二、粉末臨時(shí)制片第8頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六粉末臨時(shí)制片操作要領(lǐng)粉末用量:米粒大小。每次滴加裝置液2~3滴。每次滴加裝置液后需要攪拌均勻??刂茢嚢璺秶s為蓋玻片大小。如加熱透化,則重復(fù)進(jìn)行3~4次,沸即離火,勿燒干、焦。第9頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六加蓋玻片時(shí)應(yīng)先一側(cè)接觸裝置液,緩緩放下,最后抽出鑷子,以排除氣泡。以吸水紙吸去溢出的裝置液。稍放置待涼后,鏡檢。第10頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六水裝片或斯氏液裝片適用于觀察淀粉粒。裝置液:蒸餾水或斯氏液(甘油醋酸)。不可加熱,否則淀粉粒糊化。第11頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六天花粉粉末——淀粉粒第12頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六水合氯醛加熱透化裝片適用于除淀粉粒、菊糖以外的大多數(shù)組織、細(xì)胞、細(xì)胞后含物的觀察。裝置液:水合氯醛(水合三氯乙醛)、稀甘油。需要加熱。第13頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六天花粉粉末——石細(xì)胞第14頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六天花粉粉末——石細(xì)胞第15頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六天花粉粉末——具緣紋孔導(dǎo)管第16頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六水合氯醛或乙醇裝片適用于觀察菊糖。裝置液:水合氯醛或乙醇。不可加熱,否則菊糖溶解。第17頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六黨參菊糖(水合氯醛裝置)第18頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六水合氯醛裝置液的作用使細(xì)胞膨脹,便于觀組織、細(xì)胞及其內(nèi)含物特征。去除細(xì)胞表面或內(nèi)部雜質(zhì)。增強(qiáng)透明度。第19頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六稀甘油裝置液的作用增加透明度。防止氣泡生成。防止水合氯醛結(jié)晶析出。第20頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六三、整體透化裝片第21頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六整體透化裝片的目的與操作目的:避免出現(xiàn)有些組織在粉末中破碎或不完整而影響觀察。材料:多為葉或花。第22頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六操作:切或剪取葉或花約4mm2
,外表朝上,透化后觀察。裝置液:水合氯醛、稀甘油。需要加熱。第23頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六金銀花兩種非腺毛第24頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六金銀花腺毛第25頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六金銀花花粉粒第26頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六四、葉表皮撕片第27頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六葉表皮撕片適用對(duì)象及操作適用對(duì)象:觀察表皮細(xì)胞、氣孔、毛茸。材料:通常為葉下表皮。第28頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六操作:以鑷子自下表面夾住少許葉片,往一側(cè)撕取表皮。將撕下的表皮外表面朝上置于滴有1~2滴水的載玻片上,使其自然展開(kāi),蓋片觀察。第29頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六何首烏葉下表皮組織第30頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六五、徒手制片第31頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六徒手制片的目的及材料目的:觀察組織構(gòu)造、細(xì)胞特征;材料:新鮮、干燥或經(jīng)固定的材料第32頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六常用固定液——FAA固定液:70%乙醇90ml福爾馬林(37%~40%甲醛)5ml冰醋酸5ml第33頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六取材材料分割成適當(dāng)大小,直徑必須小于蓋玻片。材料軟化或沖洗堅(jiān)硬的干燥材料于稀甘油10%醋酸液中煮至表面無(wú)氣泡。固定材料需在流水中沖洗12小時(shí)以上。第34頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六操作:取新鮮或已軟化的中藥材,用拇指及食指和中指夾住材料,下端用無(wú)名指托住,另外一只手持刀片,自左向右移動(dòng)手腕,牽曳切片。操作時(shí)材料的斷面與刀口須經(jīng)常用水濕潤(rùn)。以毛筆將切好的薄片移入在盛水培養(yǎng)皿中浸泡。第35頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六裝片將切片以鑷子夾出,置于滴加了甘油的載玻片上,加上蓋玻片;或滴加水合氯醛加熱透化,滴加稀甘油后加上蓋玻片。第36頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六徒手切片——桑枝橫切面第37頁(yè),共39頁(yè),2023年,2月20日,星期六作業(yè)與思考1、實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)做哪些善后工作?2、由低倍鏡轉(zhuǎn)
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