生物化學(xué)第三章氨基酸

生物化學(xué)第三章氨基酸第1頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一課件下載：Sheng_wu_hua_xue@126.com密碼：biotech2008第2頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第三章氨基酸

Chapter3

Aminoacid第3頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

本章重點(diǎn)內(nèi)容§3-2氨基酸的結(jié)構(gòu)和分類(lèi)§3-3氨基酸的酸堿化學(xué)§3-4氨基酸的物理和化學(xué)性質(zhì)第4頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一一、氨基酸——蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子★組成蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸（aminoacid）。如將天然的蛋白質(zhì)完全水解，最后都可得到約20種不同的氨基酸?！镞@些氨基酸中，大部分屬于L--氨基酸。其中，脯氨酸屬于L--亞氨基酸，而甘氨酸則屬于-氨基酸。第5頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物即為氨基酸的混合物，不同水解方法各有其優(yōu)缺點(diǎn)（123頁(yè)）。1、酸水解：不引起消旋作用，得到L-氨基酸，但Trp完全被破壞。2、堿水解：引起消旋現(xiàn)象，得到D-和L-氨基酸的混合物，Trp

穩(wěn)定。3、酶水解：不引起消旋作用，也不破壞氨基酸，但水解不徹底。第6頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一二、氨基酸的結(jié)構(gòu)和分類(lèi)手性第7頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第8頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一★除甘氨酸Gly和脯氨酸Pro外，其他均具有如下結(jié)構(gòu)通式。二、氨基酸的結(jié)構(gòu)和分類(lèi)-氨基酸的通式可變部分不變部分第9頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的構(gòu)型

用D/L體系表示——在費(fèi)歇爾投影式中氨基位于橫鍵右邊的為D型，位于左邊的為L(zhǎng)型。

除甘氨酸外，所有的氨基酸分子的α-碳原子都具手性碳原子。因而都具有旋光性。而且發(fā)現(xiàn)主要是L型的（也有D型的，但很少）。第10頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一-氨基酸的分子構(gòu)型第11頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

1、氨基酸的分類(lèi)

各種氨基酸的區(qū)別在于側(cè)鏈R基的不同。

20種蛋白質(zhì)氨基酸按R的極性可分為非極性氨基酸、極性性氨基酸、酸性氨基酸和堿性氨基酸；按R基的結(jié)構(gòu)可分為脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸及雜環(huán)氨基酸3大類(lèi)。

氨基酸的三字母簡(jiǎn)寫(xiě)符號(hào)必背熟，單字母符號(hào)要求認(rèn)識(shí)。

芳香族氨基酸:PheTrpTyr第12頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一1、氨基酸的分類(lèi)

組成蛋白質(zhì)的氨基酸按其α-碳原子上側(cè)鏈R的結(jié)構(gòu)分為20種，20種氨基酸按R的結(jié)構(gòu)和極性的不同有以下兩種分類(lèi)方法。(一)根據(jù)R的結(jié)構(gòu)不同分類(lèi)(二)根據(jù)側(cè)鏈R的極性不同分為非極性和極性氨基酸第13頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

在脂肪族氨基酸中，根據(jù)所含氨基、羧基的多寡及是否含硫或羥基，又可分為一氨基一羧基、一氨基二羧基、二氨基一羧基、含羥基及含硫氨基酸等幾小類(lèi)。含羥基氨基酸有SerThrTyr含硫氨基酸有CysMet第14頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

一氨基一羧基氨基酸又稱(chēng)中性氨基酸，一氨基二羧基氨基酸又稱(chēng)酸性氨基酸(Glu、Asp)，二氨基一羧基氨基酸又稱(chēng)堿性氨基酸(Arg、Lys、His)

。脯氨酸和羥脯氨酸是亞氨酸，因存在于天然蛋白，習(xí)慣上也列入氨基酸。蛋白質(zhì)中存在的氨基酸皆為L(zhǎng)-型，但在微生物體內(nèi)及抗菌素中亦有D-型氨基酸存在(自由或肽結(jié)合形式)。第15頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一甘氨酸

glycine

Gly

G

5.97丙氨酸

alanineAlaA

6.00纈氨酸

valineValV

5.96亮氨酸

leucineLeuL

5.98

異亮氨酸

isoleucineIleI

6.02

苯丙氨酸

phenylalaninePheF

5.48脯氨酸

prolineProP

6.30非極性疏水性氨基酸目錄第16頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一色氨酸

tryptophanTryW

5.89絲氨酸

serineSerS

5.68酪氨酸

tyrosineTryY

5.66

半胱氨酸

cysteineCysC

5.07

蛋氨酸

methionine

MetM

5.74天冬酰胺

asparagineAsnN

5.41

谷氨酰胺

glutamineGlnQ

5.65

蘇氨酸

threonineThrT5.602.極性中性氨基酸目錄第17頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一天冬氨酸

asparticacidAspD

2.97谷氨酸

glutamicacidGluE

3.22賴(lài)氨酸

lysineLysK

9.74精氨酸

arginineArgR

10.76組氨酸

histidineHisH

7.593.酸性氨基酸4.堿性氨基酸目錄第18頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一2、氨基酸的結(jié)構(gòu)

甘氨酸

Glycine

中性脂肪族氨基酸第19頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

中性脂肪族氨基酸甘氨酸

Glycine

丙氨酸

Alanine第20頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

甘氨酸

Glycine

丙氨酸

Alanine纈氨酸

Valine

中性脂肪族氨基酸第21頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

甘氨酸

Glycine

丙氨酸

Alanine纈氨酸

Valine亮氨酸

Leucine

中性脂肪族氨基酸第22頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

甘氨酸

Glycine

丙氨酸

Alanine纈氨酸

Valine亮氨酸

Leucine異亮氨酸

Ileucine

中性脂肪族氨基酸第23頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

甘氨酸

Glycine

丙氨酸

Alanine纈氨酸

Valine亮氨酸

Leucine異亮氨酸

Ileucine脯氨酸

Proline

亞氨基酸第24頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

甘氨酸

Glycine

丙氨酸

Alanine纈氨酸

Valine亮氨酸

Leucine異亮氨酸

Ileucine脯氨酸

Proline甲硫氨酸

Methionine

含硫氨基酸第25頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

甘氨酸

Glycine

丙氨酸

Alanine纈氨酸

Valine亮氨酸

Leucine異亮氨酸

Ileucine脯氨酸

Proline甲硫氨酸

Methionine半胱氨酸

Cysteine

含硫氨基酸第26頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

芳香族氨基酸苯丙氨酸Phenylalanine第27頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

芳香族氨基酸苯丙氨酸Phenylalanine酪氨酸Tyrosine第28頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

芳香族氨基酸苯丙氨酸Phenylalanine酪氨酸Tyrosine色氨酸

Trytophan第29頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

堿性氨基酸精氨酸

Arginine第30頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

堿性氨基酸精氨酸

Arginine賴(lài)氨酸

Lysine第31頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

堿性氨基酸精氨酸

Arginine賴(lài)氨酸

Lysine組氨酸

Histidine第32頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

天冬氨酸

Aspartate

酸性氨基酸第33頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

天冬氨酸

Aspartate

谷氨酸

Glutamate

酸性氨基酸第34頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

絲氨酸

Serine

含羥基氨基酸第35頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

絲氨酸

Serine

蘇氨酸

Threonine

含羥基氨基酸第36頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

天冬酰胺

Asparagine

含酰胺氨基酸第37頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的結(jié)構(gòu)

天冬酰胺

Asparagine谷酰胺

Glutamine

含酰胺氨基酸第38頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

除甘氨酸外，氨基酸均含有一個(gè)手性-碳原子，因此都具有旋光性。比旋光度是氨基酸的重要物理常數(shù)之一，是鑒別各種氨基酸的重要依據(jù)。1、氨基酸的旋光性三、氨基酸的物理性質(zhì)第39頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

構(gòu)成蛋白質(zhì)的20種氨基酸在可見(jiàn)光區(qū)都沒(méi)有光吸收，但在遠(yuǎn)紫外區(qū)(<220nm)均有光吸收。

在近紫外區(qū)(220-300nm)只有酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸有吸收光的能力。酪氨酸

max＝275nm，275=1.4x103;苯丙氨酸

max＝257nm，257=2.0x102;色氨酸

max＝280nm，280=5.6x103;2、氨基酸的光吸收三、氨基酸的理化性質(zhì)第40頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一天然蛋白質(zhì)分子的20種氨基酸，以色氨酸和酪氨酸對(duì)紫外光有較強(qiáng)的光吸收。其吸收峰在280nm左右，以色氨酸吸收最強(qiáng)?？衫么诵再|(zhì)采用紫外分光光度法測(cè)定蛋白質(zhì)的含量。紫外吸收性質(zhì)：第41頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一3、氨基酸的兩性解離和等電點(diǎn)+OH-pH>pI陰離子pH=pI兼性離子+OH-+H+pH<pI陽(yáng)離子+H+第42頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一加酸H+H+H+總電荷“+”H3N+第43頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一加堿H2OH2NCOOˉOH－OH－OH－總電荷“–”第44頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一酸性溶液晶體狀態(tài)堿性溶液或水溶液中即等電點(diǎn)（pI）pI——等電點(diǎn)時(shí)的pH不同氨基酸等電點(diǎn)（pI）不同提問(wèn)：為什么？第45頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一氨基酸的等電點(diǎn)(isoelectricpoint)：氨基酸的等電點(diǎn)指在一定pH條件下,某種氨基酸接受或給出質(zhì)子的程度相等,分子所帶的凈電荷為零,此時(shí)溶液的pH值就稱(chēng)為該氨基酸的等電點(diǎn)(pI)

NH3+NH3+NH2|+OH-|+OH-|H-C-COOH========H-C-COO-======H-C-COO-

|+H+|+H+

|RRR

陽(yáng)離子兩性離子陰離子

pH<pIpH=pIpH>pI第46頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一4、氨基酸的滴定曲線(xiàn)Henderson-Hasselbalch方程pH=pKa+lg[質(zhì)子受體][質(zhì)子供體]酸堿滴定曲線(xiàn)乙酸第47頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第48頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第49頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一★氨基酸等電點(diǎn)的計(jì)算——以甘氨酸為例K1=[Gly±][H+][Gly+]K2=[Gly-][H+][Gly±]pI時(shí)，[Gly+]=[Gly-][Gly±][H+]K1=[Gly±]K2[H+][H+]2=K1K2pH=（pK1+pK2）/2pI=（pK1+pK2）/2pI=（2.34+9.60）/2=5.97Gly第50頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一對(duì)于酸性氨基酸，以Asp為例：第51頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一對(duì)于堿性氨基酸，以L(fǎng)ys為例：第52頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一答案：-R有電性區(qū)別。中性氨基酸pI一般為6.0提問(wèn)：為什么偏酸性？答案：

-COOH解離程度略大于-NH2的得電子能力

提問(wèn)：酸性氨基酸的pI(更偏酸、更偏堿）？答案：更酸（3.0左右）堿性氨基酸pI更堿（7.6—10.7)(

只有三種）提問(wèn)：大多數(shù)氨基酸在中性（pH=7）時(shí)，帶

電？負(fù)第53頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一提問(wèn)：等電點(diǎn)時(shí)的氨基酸特點(diǎn)是？答案：兩性離子，溶解度最小，容易沉淀。提問(wèn)：為什么？答案：同性排斥力小，凝結(jié)沉淀其它：吸光性含苯環(huán)氨基酸大π鍵吸收紫外光，蛋白質(zhì)故也具有紫外吸光性，實(shí)驗(yàn)室利用紫外分光光度儀在280nm處測(cè)定蛋白質(zhì)含量；第54頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一★等電點(diǎn)為電中性而不是中性（即pH=7），在溶液中加入電極時(shí)其電荷遷移為零。中性氨基酸pI=4.8-6.3酸性氨基酸pI=2.7-3.2堿性氨基酸pI=7.6-10.8★等電點(diǎn)時(shí)，偶極離子在水中的溶解度最小，易結(jié)晶析出?？捎谜{(diào)節(jié)氨基酸等電點(diǎn)的方法分離氨基酸的混合物。注意：第55頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一等電點(diǎn)的應(yīng)用1------電泳分離應(yīng)用------氨基酸的分離與分析

氨基酸電泳：帶電顆粒在電場(chǎng)中移動(dòng)的現(xiàn)象稱(chēng)為電泳氨基酸不同（pI不同，大小不同），在電場(chǎng)中泳動(dòng)速度不同，因此可以通過(guò)電泳將氨基酸彼此分開(kāi)當(dāng)pH=pI時(shí)，氨基酸呈兼性離子，在電場(chǎng)中不移動(dòng)當(dāng)pH>pI時(shí)，氨基酸帶負(fù)電荷，在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)當(dāng)pH<pI時(shí)，氨基酸帶正電荷，在電場(chǎng)中向負(fù)極移第56頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一四、幾種重要的不常見(jiàn)氨基酸

在少數(shù)蛋白質(zhì)中分離出一些不常見(jiàn)的氨基酸，通常稱(chēng)為不常見(jiàn)蛋白質(zhì)氨基酸。這些氨基酸都是由相應(yīng)的基本氨基酸衍生而來(lái)的。其中重要的有4-羥基脯氨酸、5-羥基賴(lài)氨酸、N-甲基賴(lài)氨酸、和3,5-二碘酪氨酸等。這些不常見(jiàn)蛋白質(zhì)氨基酸的結(jié)構(gòu)如下。第57頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一五、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)1．-氨基參與的反應(yīng)（1）與甲醛發(fā)生羥甲基化反應(yīng)用途：可以用來(lái)直接測(cè)定氨基酸的濃度。即氨基酸的甲醛滴定P135頁(yè)第58頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一1．-氨基參與的反應(yīng)（2）與亞硝酸反應(yīng)用途：范斯來(lái)克法定量測(cè)定氨基酸的基本反應(yīng)。衡量的放出N2，測(cè)定N2的體積便可計(jì)算出氨基酸中氨基的含量。五、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)第59頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一1．-氨基參與的反應(yīng)（3）?；磻?yīng)用途：用于保護(hù)氨基以及肽鏈的氨基端測(cè)定等。五、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)第60頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一1．-氨基參與的反應(yīng)（4）烴基化反應(yīng)用途：是鑒定多肽N-端氨基酸的重要方法。五、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)第61頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一1．-氨基參與的反應(yīng)（5）生成西佛堿的反應(yīng)用途：是多種酶促反應(yīng)的中間過(guò)程。五、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)第62頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一1．-氨基參與的反應(yīng)（6）脫氨基和轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)用途：酶催化的反應(yīng)。五、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)第63頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

氨基酸與堿作用生成相應(yīng)的鹽。氨基酸的堿金屬鹽能溶于水,而重金屬鹽則不溶于水。2．

-羧基參與的反應(yīng)（1）成鹽反應(yīng)用途：五、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)第64頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一11．-氨基參與的反應(yīng)（2）形成酯的反應(yīng)用途：是合成氨基酸?；苌锏闹匾虚g體。2．-羧基參與的反應(yīng)五、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)第65頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一1（3）形成酰鹵的反應(yīng)用途：這是使氨基酸羧基活化的一個(gè)重要反應(yīng)。五、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)2．-羧基參與的反應(yīng)第66頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一（4）疊氮化反應(yīng)用途：常作為多肽合成活性中間體。五、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)2．-羧基參與的反應(yīng)第67頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一1（5）脫羧反應(yīng)用途：酶催化的反應(yīng)。五、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)2．-羧基參與的反應(yīng)第68頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一1(1)與茚三酮反應(yīng)用途：常用于氨基酸的定性或定量分析。3．-氨基和羧基共同參與的反應(yīng)茚三酮水合茚三酮五、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)第69頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一與茚三酮反應(yīng)（鑒別α-氨基酸的靈敏方法）PH5～7茚三酮N-取代的α-氨基酸如脯氨酸，β-氨基酸、γ-氨基酸都不與茚三酮反應(yīng)。

藍(lán)色或紫紅色第70頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一1（2）成肽反應(yīng)用途：是多肽和蛋白質(zhì)生物合成的基本反應(yīng)。3．-氨基和羧基共同參與的反應(yīng)五、氨基酸的化學(xué)性質(zhì)第71頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一4．側(cè)鏈基團(tuán)的化學(xué)性質(zhì)(1)巰基（-SH）的性質(zhì)1作用：這些反應(yīng)可用于巰基的保護(hù)。第72頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一4．側(cè)鏈基團(tuán)的化學(xué)性質(zhì)(1)巰基（-SH）的性質(zhì)作用：與金屬離子的螯合性質(zhì)可用于體內(nèi)解毒。第73頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一4．側(cè)鏈基團(tuán)的化學(xué)性質(zhì)(1)巰基（-SH）的性質(zhì)作用：氧化還原反應(yīng)可使蛋白質(zhì)分子中二硫鍵形成或端裂。胱氨酸第74頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一4．側(cè)鏈基團(tuán)的化學(xué)性質(zhì)(1)巰基（-SH）的性質(zhì)作用：可用于比色法定量測(cè)定半胱氨酸的含量。硝基苯甲酸二硫化合物(DTNB)第75頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一4．側(cè)鏈基團(tuán)的化學(xué)性質(zhì)（2）羥基的性質(zhì)1作用：可用于修飾蛋白質(zhì)。二異丙基氟磷酸酯第76頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一4．側(cè)鏈基團(tuán)的化學(xué)性質(zhì)（3）咪唑基的性質(zhì)組氨酸含有咪唑基，它的pK2值為6.0，在生理?xiàng)l件下具有緩沖作用。組氨酸中的咪唑基能夠發(fā)生多種化學(xué)反應(yīng)?？梢耘cATP發(fā)生磷?；磻?yīng)，形成磷酸組氨酸，從而使酶活化。組氨酸的咪唑基也能發(fā)生烷基化反應(yīng)。生成烷基咪唑衍生物，并引起酶活性的降低或喪失作用：。第77頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一4．側(cè)鏈基團(tuán)的化學(xué)性質(zhì)（4）甲硫基的性質(zhì)1作用：。第78頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一分配柱層析：支持劑是一些具有親水性的不溶性物質(zhì)，如纖維素、淀粉、硅膠等。濾紙層析：薄層層析：離子交換層析：陰離子交換樹(shù)脂-N(CH3)3OH，陽(yáng)離子交換樹(shù)脂-SO3H電泳：六、氨基酸的分離分析（148頁(yè)）第79頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一Columnchromatography

Ion-exchangechromatographySize-exclusionchromatographyHydrophobicinteractionchromatographyIsoelectricfocusingchromatography

Affinitychromatography:Antibodies,His-tags,Protein-A,Protein-G,GST-,MBP-fusionproteinsetc…,第80頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第81頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第82頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一Ion-exchangeChromatography離子交換第83頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

分離氨基酸常用的是帶有耐酸性非常強(qiáng)的磺酸根SO3－Na＋（以鹽的形式出現(xiàn)）的強(qiáng)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。首先將這種樹(shù)脂填充到柱子中，然后注入含有樣品的流動(dòng)相，樣品中含有陽(yáng)離子成分X＋，通過(guò)靜電吸引，與樹(shù)脂中的帶電基團(tuán)相互作用，結(jié)果X＋與Na＋交換，即發(fā)生陽(yáng)離子交換后，形成SO3－X＋。第84頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一

Size-exclusionChromatography

分子篩第85頁(yè)，共94頁(yè)，2023年，2月20日，星期一Affinit