淋巴細胞亞群檢測在兒科的應用

淋巴細胞亞群檢測在兒科的應用第1頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日為臨床提供更多信息，提高醫(yī)療安全防護措施。篩查免疫缺陷疾病及監(jiān)測藥物對免疫功能的影響。指導臨床合理用藥。淋巴細胞亞群檢測在兒科的應用第2頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日《反復呼吸道感染的臨床概念和處理原則》：

免疫功能測定有助于發(fā)現(xiàn)原發(fā)、繼發(fā)免疫缺陷病。包括體液免疫、細胞免疫；補體、吞噬功能等檢查，也應注意有無頑固濕疹、血小板減少、共濟失調(diào)、毛細血管擴張等異常。第3頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日

在特異性免疫反應中，體液免疫和細胞免疫之間既各有其獨特的作用，又可以相互配合，共同發(fā)揮免疫效應。當細菌、病毒等病原體侵入人體后，首先誘發(fā)體液免疫，因為T細胞不能識別入侵的病毒等抗原，只有當病毒或胞內(nèi)寄生菌侵入宿主細胞，細胞表面出現(xiàn)了來自病毒等病原體的小分子蛋白質(zhì)抗原，并與細胞表面的受體結(jié)合成復合物時，T細胞才能識別，進而引發(fā)細胞免疫，使靶細胞裂解，暴露出隱藏其中的病原體，再通過體液免疫將其清除。假若病原體不是胞內(nèi)寄生物，則只能誘發(fā)體液免疫。體液免疫與細胞免疫的聯(lián)系：

第4頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日

從作用對象上看，體液免疫清除的是游離在寄主細胞外的抗原及其產(chǎn)生的有毒物質(zhì)；細胞免疫則摧毀侵入到寄主細胞內(nèi)的病毒、胞內(nèi)寄生菌或外來的組織團塊、癌變的細胞等。

從作用方式上看，體液免疫是通過效應B細胞（漿細胞）分泌抗體，并與抗原發(fā)生特異性結(jié)合來清除抗原；細胞免疫則是通過效應T細胞（殺傷T細胞）分泌穿孔素使靶細胞溶解死亡。

體液免疫和細胞免疫的區(qū)別：

第5頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日《醫(yī)學綜述》2000年第6卷第7期①艾滋病:免疫功能普遍低下是艾滋病患者最明顯的特征。艾滋病患者外周血中CD4細胞顯著低于正常對照組，而CD8細胞在正常范圍內(nèi)，CD4/CD8比值下降。②慢性乙型病毒性肝炎:慢性肝炎患者CD3、CD4下降，CD8亦稍有下降，CD4/CD8比值正常，說明慢性肝炎患者T細胞輔助性、殺傷性功能下降，引起病毒清除困難，導致慢性遷延性肝損傷；慢活肝、肝硬化組CD3下降，CD4亦明顯下降，CD8增高,CD4/CD8比值下降，造成患者免疫自穩(wěn)功能下降，從而引起自身免疫損傷，肝細胞持續(xù)性、大量損傷，形成慢活肝、肝硬化；乙肝患者CD8細胞增高，CD4/CD8下降，導致過度活化的細胞毒性T細胞對肝細胞產(chǎn)生損害作用。因此，對T細胞亞群的檢測，有助于慢性肝炎類型的鑒別，有助于了解肝炎病毒復制的程度，了解藥物療效，更好地指導治療。

③此外，在傳染性單核細胞增多癥、巨細胞病毒感染、流行性出血熱、麻疹急性期、水痘、猩紅熱和一些上呼吸道感染的患者均可表現(xiàn)為CD4細胞下降，CD8細胞升高以及CD4/CD8比值下降。因此，CD4/CD8比值的倒置被認為是病毒感染性疾病的重要指征。第6頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日在細菌性疾病中的研究表明，結(jié)核性胸膜炎患者胸水中CD4/CD8比值明顯增高，而重癥結(jié)核病患者外周血中該比值下降。不同類型麻瘋患者的T細胞亞群研究發(fā)現(xiàn)，瘤型麻瘋患者CD8細胞下降，CD4細胞上升，而結(jié)核樣型患者CD8細胞則在正常范圍。寄生蟲病：Coney等研究了曼氏血吸蟲病患者外周血T細胞亞群，發(fā)現(xiàn)肝脾大的患者，其CD3和CD4細胞均較正常人顯著下降。另外，弓形體病、瘧疾、利什曼病等都表現(xiàn)為CD8細胞上升，CD4細胞及CD4/CD8比值下降?？傊瑴y定外周血CD3、CD4和CD8細胞亞群的水平可以正確判斷機體的細胞免疫功能，為臨床提供用藥指導和判斷預后的可靠指標。第7頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日第8頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日第9頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日正常人外周血白細胞CD45-SSC及T亞群散點圖CD3+CD4+（Th/Ti細胞）CD3+CD8+（Ts/Tc細胞）第10頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日第11頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日患兒男,5個半月,以“發(fā)熱、腹瀉11天,皮疹7天”為主訴入院。入院后診斷為:(1)腹瀉病;(2)發(fā)熱待查:結(jié)締組織病?(3)營養(yǎng)不良性貧血。入院后給予抗感染、補液,調(diào)整腸道微生態(tài),營養(yǎng)支持治療,腹瀉治愈,仍發(fā)熱,皮疹漸增多,蔓延至上腹部、胸前,皮疹呈棕色或棕黑色。入院第12天對患兒左大腿內(nèi)側(cè)一皮疹下結(jié)節(jié)進行活檢見:表皮角化,真皮脂肪壞死,炎性細胞浸潤,考慮脂膜炎。但療效不顯。體液免疫檢查正常;T細胞亞群:CD3+

2.41%(56%~84%),

CD4+

0.53%(27%~51%),

CD8+

0.50%(15%~44%),

CD4+/CD8+

1.06。追問病史:此患兒生后接種卡介苗部位常有滲液,不久結(jié)痂,結(jié)痂后不久又出現(xiàn)滲液,如此反復。遂對既往骨髓片及組織片進行抗酸染色,均見大量抗酸桿菌。確診為原發(fā)性T細胞免疫缺陷病合并卡介苗接種后播散性結(jié)核病、結(jié)核性結(jié)節(jié)性脂膜炎。后因經(jīng)濟困難家長要求出院隨訪結(jié)果出院2d后死亡。第12頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日《原發(fā)性免疫缺陷病的早期識別和干預》:

2001年11月,美國疾病控制和預防中心在喬治亞洲首府Atland召開了一個專題研討會。會議最終就PID(primaryimmunodeficiency,原發(fā)性免疫缺陷病)的相關(guān)問題達成了四點框架:①公共衛(wèi)生評估:運用傳統(tǒng)公共衛(wèi)生學方法評價PID對社會健康的影響;②以人群為基礎的干預:建立、貫徹和評價針對新生兒篩查實驗和早期識別原發(fā)性免疫缺陷病的方案,以便能早期診斷和治療PID患者;③篩查和診斷手段的評估:以保證PID患者對治療的順應性和提高生活質(zhì)量;④交流:加強醫(yī)療保健者與公眾之間的交流,以促進及時、恰當?shù)貙ID進行診斷和干預。第13頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日目前以人群為基礎的新生兒篩查(newbornscreening,

NBS)主要應用于遺傳性疾病,但尚未開展有關(guān)PID的NBS。SCID是一種嚴重的聯(lián)合免疫缺陷,患兒在出生后處于無癥狀期的時間很短,如果不進行有效的免疫重建,往往在嬰兒期死亡。免疫重建的時間與預后的關(guān)系密切,如果在出生3個月內(nèi)進行造血干細胞移植存活率接近95%,如果在出生3個月后進行移植則存活率降至76%。這是將SCID納入NBS的重要原因。SCID的免疫表型特點主要為嚴重的T淋巴細胞減少，流式細胞儀分析T細胞亞群(包括CD3+、CD4+和CD8+)、B細胞(CD19+)

和NK細胞(CD16+/CD56+)比例是主要的實驗室檢查,可對大多數(shù)患兒作出診斷。第14頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日第15頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日第16頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日

通過流式細胞儀對腎移植術(shù)后受者外周血T細胞亞群進行動態(tài)監(jiān)測，結(jié)果顯示腎移植術(shù)后發(fā)生排斥反應時，CD3,CD4細胞及CD4/CD8比值均升高，經(jīng)激素沖擊治療有效的患者CD3,CD4細胞及CD4/CD8比值逐漸下降，而CD3,CD4細胞及CD4/CD8比值居高不降者說明激素沖擊治療無效。第17頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日

SARS患者T淋巴細胞亞群變化的初步研究

(中西醫(yī)救治專題陳文莉)

SARS患者早期出現(xiàn)CD3+，CD4+，CD8+明顯降低，且CD4+/CD8+比值下降甚至倒置，提示SARS患者早期即存在免疫抑制現(xiàn)象，這一現(xiàn)象提醒我們早期使用免疫抑制作用的治療方法應當慎重，用藥時間不宜長，應避免用超大劑量激素（如甲基強的松龍（MP）＞0.5g/d）沖擊療法。第18頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日

胸腺肽α1對嚴重感染患兒的臨床療效及免疫功能的影響

中國臨床藥學雜志CHINESEJObTINALOFCLINICALPHARMACY2004年第13卷第3期目的：探討兒童嚴重病毒感染和細菌感染中，胸腺肽a1對提高細胞免疫的功能，以及改善預后的作用。方法：臨床表現(xiàn)有多臟器受累的感染病例11例，在原先治療方案不變下，加用胸腺肽a1，觀察用藥后患兒的臨床療效，并采用流式細胞儀檢測用藥前后T淋巴細胞亞群水平。結(jié)果：11例患兒經(jīng)治療后感染癥狀均有明顯的改善，T細胞亞群均有不同程度的改變，降低的CD4+T細胞明顯上升，增高的CD8+T細胞明顯降低，CD4／CD8比值趨于正常。觀察期間未見有明顯的藥物不良反應。結(jié)論：胸腺肽a1對T淋巴細胞亞群的異常具有雙向調(diào)節(jié)作用。第19頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日(1)低碘組(LI):攝碘量<1μg/d;(2)適碘組(NI):攝碘量為6·15μg/d;(3)5倍碘組(5HI):攝碘量為30·75μg/d;(4)10倍碘組(10HI):攝碘量為61·50μg/d;(5)50倍碘組(50HI):攝碘量為307·50μg/d;(6)100倍碘(100HI):攝碘量為615·00μg/d。碘缺乏和碘過量對甲狀腺自身免疫影響的實驗研究第20頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日第21頁，共22頁，2023年，2月20日，星期日對T細胞百分比進行評價時必須掌握3個公式:①正常情況下獲得的流式細胞儀檢測結(jié)果應滿足:(CD3+)%+(CD19+)%+(CD16/56+)%=100%,常規(guī)檢查可有出入。一般認為±5%,如相差過于懸殊,臨床具有一定提示意義。資料顯示以感染和血液腫瘤最易出現(xiàn)等式嚴重偏離;②(CD3+CD4+)%+(CD3+CD8+)%=(CD3+)%,當檢測結(jié)果偏離此等式時提示存在雙陰