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文檔簡介
一、轉(zhuǎn)基因成果令人嘆為觀止轉(zhuǎn)基因生物的分類:
轉(zhuǎn)基因微生物轉(zhuǎn)基因植物轉(zhuǎn)基因動物第一頁,共63頁。1
轉(zhuǎn)基因食品的特征轉(zhuǎn)基因食品(GeneticallyModifiedFood)是指利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將獲得的外源基因?qū)雱游铩⒅参锖臀⑸?,并將其加工生產(chǎn)的食品。第一代轉(zhuǎn)基因食品是以增加農(nóng)作物抗性和耐貯藏性的轉(zhuǎn)基因植物源食品,其主要特征是轉(zhuǎn)入抗除草劑基因、抗蟲基因、延遲成熟基因等,以增加農(nóng)作物的抗逆性和耐貯藏性。第二頁,共63頁。1
轉(zhuǎn)基因食品的的特征第二代轉(zhuǎn)基因食品是以改善食品品質(zhì)和增加食品營養(yǎng)為特征。第三頁,共63頁。1
轉(zhuǎn)基因食品的的特征第三代轉(zhuǎn)基因食品是以增加食品中的功能因子和免疫功能為主要特征。第四頁,共63頁。
(一)微生物方面:通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值的各種重組微生物。
第五頁,共63頁。1.清除石油污染,例如假單胞桿菌。2.生產(chǎn)稀缺的生化藥品(胰島素生長激素疫苗),轉(zhuǎn)基因工程菌。3.轉(zhuǎn)基因細(xì)菌可治癌癥
英國醫(yī)學(xué)專家日前將轉(zhuǎn)基因大腸桿菌與一種抗癌藥相結(jié)合,成功殺死了實(shí)驗(yàn)鼠體內(nèi)的癌細(xì)胞。這種抗癌藥無法單獨(dú)發(fā)揮作用,但是一種由轉(zhuǎn)基因大腸桿菌分泌的酶能將此藥物“激活”,形成一種有效的毒素,將其周圍的癌細(xì)胞殺死,而不傷害其它組織器官。
第六頁,共63頁。(二)轉(zhuǎn)基因動物方面:受到轉(zhuǎn)基因巨型小鼠獲得成功的鼓舞,科學(xué)家培育了生長迅速、營養(yǎng)品質(zhì)優(yōu)良的轉(zhuǎn)基因家畜、家禽,同時(shí),科學(xué)家還把轉(zhuǎn)基因動物變成乳腺生物反應(yīng)器。第七頁,共63頁。(三)轉(zhuǎn)基因植物方面:目前,科學(xué)家已經(jīng)培育出了大批具有抗蟲、抗病、抗除草劑、抗逆等全新形狀的農(nóng)作物和更有觀賞價(jià)值的花卉。第八頁,共63頁。第九頁,共63頁。英國劍橋先正達(dá)公司開發(fā)的富含胡蘿卜素的“金大米”。轉(zhuǎn)基因的重要成果展
第十頁,共63頁。改變花色的轉(zhuǎn)基因矮牽?;ǖ谑豁?,共63頁。藍(lán)色玫瑰一直是人類美麗的夢想基因工程正在將它變?yōu)楝F(xiàn)實(shí)轉(zhuǎn)基因的重要成果展
第十二頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因西紅柿抗乙肝西紅柿導(dǎo)入了轉(zhuǎn)基因疫苗,人如果每周生吃1-2個(gè),每年吃2-3個(gè)月就能達(dá)到去醫(yī)院注射乙肝疫苗的效果。(中國)轉(zhuǎn)基因的重要成果展
第十三頁,共63頁。二轉(zhuǎn)基因食品的安全性隨著人口增長和農(nóng)作物生產(chǎn)面積的下降,食品安全問題越來越突出。轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以通過改良動植物、微生物的生長性能、抗病、抗逆性、營養(yǎng)品質(zhì)等,提高產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量,從而為人類發(fā)展提供可靠的食品安全保障。
1轉(zhuǎn)基因食品是保障食品安全的重要環(huán)節(jié)第十四頁,共63頁?;蛞坏┍桓膭右环矫婵赡芤鹕矬w內(nèi)一系列未知的結(jié)構(gòu)與功能的變化;另一方面,轉(zhuǎn)基因操作對生物體的影響會通過遺傳傳遞。轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性問題
在轉(zhuǎn)基因生物中,有時(shí)候會出現(xiàn)一些人們意想不到的后果.引發(fā)人們在三個(gè)方面發(fā)生了激烈的爭論:食物安全、生物安全、環(huán)境安全。轉(zhuǎn)基因食品是否安全?有人說YES.有人說NO.你同意哪種觀念?依據(jù)是什么?第十五頁,共63頁。1.1轉(zhuǎn)基因食品的食用安全性轉(zhuǎn)基因的實(shí)質(zhì)是先克隆某一優(yōu)良性狀的目的基因,將其插入到目標(biāo)生物的染色體中,使目標(biāo)生物具有一些優(yōu)良性狀,如高產(chǎn)、抗病、高營養(yǎng)等。經(jīng)過對目的基因的、載體和抗性標(biāo)記的嚴(yán)格選擇,對生產(chǎn)過程進(jìn)行跟蹤檢測,并對轉(zhuǎn)基因食品進(jìn)行實(shí)質(zhì)等同性分析鑒定,生產(chǎn)的轉(zhuǎn)基因食品是安全的,與傳統(tǒng)食品沒有差別。第十六頁,共63頁。1.2轉(zhuǎn)基因食品對人體健康的影響一般來說,轉(zhuǎn)基因食品是安全的,但如果長期食用轉(zhuǎn)基因食品,對人體健康會產(chǎn)生那些不良影響呢?
首先,轉(zhuǎn)基因食品中潛在的過敏原對人體的影響。
食品過敏是指食品中含有某些能引起人產(chǎn)生不適反應(yīng)的抗原分子,這些抗原分子主要為蛋白質(zhì),具有對T-細(xì)胞和B-細(xì)胞的識別區(qū),可以誘導(dǎo)人免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫球蛋白E抗體(IgE)。第十七頁,共63頁。由IgE介導(dǎo)引起過敏反應(yīng)最常見的食物是花生、大豆、小麥、魚類等。
目的基因的產(chǎn)物如果是潛在的過敏原,則該轉(zhuǎn)基因食品有可能引起人體的過敏反應(yīng)。1.2轉(zhuǎn)基因食品對人體健康的影響
如果對可能存在的潛在過敏原進(jìn)行詳盡的檢測,則轉(zhuǎn)基因食品中不會對人體健康造成不良影響。
第十八頁,共63頁。其次,抗生素抗性對人體的影響。轉(zhuǎn)基因食品中存在一些具有抗生素抗性的標(biāo)記基因,有可能在動物腸道中轉(zhuǎn)移給微生物,從而影響抗生素治療的效果。目前在植物中使用抗生素抗性標(biāo)記基因是安全的。食用轉(zhuǎn)基因作物飼料的家禽、牲畜、魚類等水生動物體內(nèi),有可能累積抗生素抗性。有人認(rèn)為,食用這些肉類產(chǎn)品可能會使人體具有抗生素抗性,但這種可能性非常小。1.2轉(zhuǎn)基因食品對人體健康的影響第十九頁,共63頁。第三,食品營養(yǎng)品質(zhì)的改變對人體健康的影響。轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的目的基因可能帶來了一些有利性狀,如高產(chǎn)、抗逆性好等,但也可能引起食品的營養(yǎng)成分或品質(zhì)發(fā)生改變,甚至產(chǎn)生一些抗?fàn)I養(yǎng)因子。導(dǎo)致了食品營養(yǎng)品質(zhì)下降,對人體健康產(chǎn)生不良影響。另外,轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的目的基因表達(dá)時(shí),可能會促使一些天然毒素的表達(dá)率提高,如豆科蛋白酶抑制劑、馬鈴薯的茄堿等。轉(zhuǎn)基因食品中的這些毒素含量的提高對人體健康肯定是不利的。1.2轉(zhuǎn)基因食品對人體健康的影響第二十頁,共63頁。1、轉(zhuǎn)基因生物與食物安全
a.擔(dān)心轉(zhuǎn)基因食物安全性的理由b.不必?fù)?dān)心轉(zhuǎn)基因食物安全性的理由反對“實(shí)質(zhì)性等同”安全性檢測問題滯后效應(yīng)擔(dān)心出現(xiàn)新的過敏原擔(dān)心營養(yǎng)成分的改變把動物蛋白基因轉(zhuǎn)入農(nóng)作物,是否侵犯了宗教信仰或素食者的權(quán)益多環(huán)節(jié)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)陌踩栽u價(jià),可以保證轉(zhuǎn)基因食物的安全科學(xué)家的負(fù)責(zé)態(tài)度可以防止新過敏原的產(chǎn)生至今尚未發(fā)現(xiàn)食用轉(zhuǎn)基因食品而影響人體健康的事例沒能足夠的證據(jù)證明轉(zhuǎn)基因食物有問題。第二十一頁,共63頁。2轉(zhuǎn)基因食品對生態(tài)的影響轉(zhuǎn)基因技術(shù)打破了基因的種屬限制,動物、植物、微生物及人工合成的基因均可以轉(zhuǎn)入某一種生物。轉(zhuǎn)基因食品在生產(chǎn)和加工過程中,是否會對環(huán)境產(chǎn)生影響,帶來生態(tài)災(zāi)難?這些問題在轉(zhuǎn)基因時(shí)就應(yīng)該充分考慮到。環(huán)境影響主要包括轉(zhuǎn)基因生物作為外來物種是否帶來生態(tài)風(fēng)險(xiǎn),食品中的轉(zhuǎn)基因是否轉(zhuǎn)移到野生生物中,是否會破壞自然生態(tài)環(huán)境,轉(zhuǎn)基因成分在環(huán)境中的殘留及可能造成的基因污染,轉(zhuǎn)基因成分對土壤生態(tài)系統(tǒng)的影響。第二十二頁,共63頁。2.1基因漂移的風(fēng)險(xiǎn)轉(zhuǎn)基因食品的重要原料之一是轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物?;蚩赏ㄟ^雜交途徑在生物群體中傳播。轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的花粉與近緣種屬的植物雜交,將基因轉(zhuǎn)移到非轉(zhuǎn)基因植物上。轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物在生產(chǎn)過程中,種子通過運(yùn)輸或昆蟲、鳥類、野生動物攜帶等途徑擴(kuò)散到新的生態(tài)環(huán)境中,繁殖或?qū)⒒蜣D(zhuǎn)移到其它植物上。第二十三頁,共63頁。經(jīng)過對轉(zhuǎn)Bt基因棉花和轉(zhuǎn)基因玉米的基因漂移進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)均存在基因漂移現(xiàn)象。基因漂移到非目的植物上,可能形成超級雜草,對生態(tài)環(huán)境造成不可估量的損失。2.1基因漂移的風(fēng)險(xiǎn)轉(zhuǎn)基因生物通過基因漂移,會破壞野生近緣種的遺傳多樣性。第二十四頁,共63頁。2.2對生物多樣性的影響墨西哥是玉米的原產(chǎn)地,擁有豐富的種質(zhì)資源。近年來引進(jìn)美國的轉(zhuǎn)基因玉米,已經(jīng)對玉米的遺傳多樣性有所影響。中國農(nóng)科院棉花研究所研究發(fā)現(xiàn):在種植轉(zhuǎn)Bt基因棉花的農(nóng)田中,由于Bt毒蛋白對棉鈴蟲的殺滅作用,導(dǎo)致棉鈴蟲的寄生性天敵的數(shù)量明顯減少。某種生物種群數(shù)量的減少或滅絕直接影響到天敵的生存、生物多樣性甚至整個(gè)生物鏈。第二十五頁,共63頁。2.3對土壤微生態(tài)的影響轉(zhuǎn)Bt基因作物的殘茬和根部滲出物中含有Bt毒蛋白。Bt毒素不易被生物降解,在土壤環(huán)境中可長時(shí)間保持殺蟲活性,殺死土壤中的生物。不但降低了土壤中的生物多樣性,而且對土壤的微生態(tài)循環(huán)造成影響。第二十六頁,共63頁。
2、轉(zhuǎn)基因生物與生物安全
a.擔(dān)心引起生物安全的理由b.不擔(dān)心引起生物安全的理由轉(zhuǎn)基因植物可能會擴(kuò)散到種植區(qū)以外,成為雜草轉(zhuǎn)基因生物可能成為“入侵的外來物種”威脅生態(tài)系統(tǒng)其他生物的生存外源基因可能與感染轉(zhuǎn)基因生物的某些細(xì)菌獲病毒雜交,重組出對人類或其他生物有害的病原體形成“超級病毒”。有可能使雜草成為除不掉的“超級雜草”擴(kuò)散到種植區(qū)以外的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物很快死亡。轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物新性狀必須有一定的條件和種植技術(shù)。由于存在生殖隔離,轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物很難與其他植物雜交。花粉傳播的距離有限,時(shí)間有限。第二十七頁,共63頁。不是同一種類,甚至?xí)游锘蜣D(zhuǎn)到植物上Iworryabout第二十八頁,共63頁。Iworryabout第二十九頁,共63頁。3對環(huán)境的污染目前,抗除草劑的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物種植面積不斷增加。隨之而來的是除草劑使用量的持續(xù)增長。除草劑隨雨水、水土流失等轉(zhuǎn)移到其它地方,造成連續(xù)的土壤、水質(zhì)和環(huán)境污染。同時(shí),由于除草劑的大量使用,降低了農(nóng)田的生物多樣性。第三十頁,共63頁。
Bt棉的大規(guī)模種植破壞了棉鈴蟲在華北地區(qū)季節(jié)性多寄主轉(zhuǎn)換的食物鏈,不僅有效控制了棉鈴蟲對棉花的危害,而且還減少了周邊沒有進(jìn)行Bt遺傳改良的農(nóng)作物的蟲害。結(jié)論:Bt棉將是未來控制農(nóng)作物病蟲害、提高農(nóng)作物產(chǎn)量、改善農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境的新途徑。第三十一頁,共63頁。3、轉(zhuǎn)基因生物與環(huán)境安全a.引起環(huán)境安全的理由:
b.不引起環(huán)境安全的理由:打破自然物種的原有界限,改變了生態(tài)系統(tǒng)中能量流動和物質(zhì)循環(huán)。重組微生物在降解某些化合物過程中所產(chǎn)生的中間產(chǎn)物,可能對人類的生活環(huán)境造成二次污染。重組DNA與微生物雜交,可能產(chǎn)生有害的病原微生物。轉(zhuǎn)基因植物花粉中的有毒物質(zhì)可通過蜜蜂進(jìn)入蜜蜂,再經(jīng)過食物鏈傳遞,有可能進(jìn)入其他動物和人體內(nèi)。
轉(zhuǎn)基因不會改變生物原有的分類地位,不會破壞生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性。轉(zhuǎn)基因抗蟲作物的種植,減少了農(nóng)藥的使用量??钩輨┺r(nóng)作物的種植,減輕了農(nóng)田管理的負(fù)擔(dān),保護(hù)了農(nóng)田的土壤環(huán)境。新聞報(bào)道不實(shí),增加了公眾對轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的恐懼感。第三十二頁,共63頁。三、理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)
a.趨利避害,而不能因殪廢食
b.建立相應(yīng)的法規(guī)。
如1993年制定的<基因工程安全管理辦法>和2002年頒布的<農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物標(biāo)識管理辦法>,要求對轉(zhuǎn)基因生物產(chǎn)品加貼標(biāo)注,維護(hù)消費(fèi)者對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的知情權(quán)和選擇權(quán)。
第三十三頁,共63頁。我國于2001年5月9日通過了《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理?xiàng)l例》,這是我國在轉(zhuǎn)基因生物管理方面的核心法規(guī)。主要有六個(gè)方面的內(nèi)容:1.農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物的含義;2.農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全,指防范潛在風(fēng)險(xiǎn);3.國務(wù)院農(nóng)業(yè)行政主管部門負(fù)責(zé);4.國務(wù)院建立部際聯(lián)席會議制度;5.國家對農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全實(shí)行分級管理評價(jià)制度、安全評價(jià)制度、實(shí)行標(biāo)識制度;6.對研究與試驗(yàn)、生產(chǎn)與加工、經(jīng)營、進(jìn)出口、監(jiān)督與檢查、罰則等作了詳細(xì)的規(guī)定。第三十四頁,共63頁。生物安全過程中體現(xiàn)的一系列原則:預(yù)防原則(precautionaryprinciple)實(shí)質(zhì)等同性審慎原則(substantialequivalence)事先知情同意(AdvanceInformedAgreement)第三十五頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因利弊OR第三十六頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因食品的優(yōu)點(diǎn):1、解決糧食短缺問題2、減少農(nóng)藥使用,避免環(huán)境污染3、節(jié)約生產(chǎn)成本,降低食物售價(jià)4、增強(qiáng)食物營養(yǎng),提高附加價(jià)值5、增加食物種類,提高食品品質(zhì)6、促進(jìn)生產(chǎn)效率,帶動相關(guān)產(chǎn)業(yè)第三十七頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因的風(fēng)險(xiǎn):1、可能破壞生物多樣性,并造成生態(tài)災(zāi)難2、可能產(chǎn)生新的病毒疾病3、可能降低食品的營養(yǎng)價(jià)值,使其營養(yǎng)結(jié)構(gòu)失衡4、可能對有益生物產(chǎn)生直接或間接影響5、可能導(dǎo)致一些非目標(biāo)生物的不適應(yīng)或消亡第三十八頁,共63頁。群眾對轉(zhuǎn)基因食品的看法:——無所謂!分解后東西都一樣!
——轉(zhuǎn)基因作物就像以前吹得神乎其神的珍奧核酸一樣,進(jìn)了胃里就全部被分解了,哪有什么不同。
——為什么韓國和日本都拒絕轉(zhuǎn)基因食品進(jìn)口呢?我覺得是不是這些國家都心存疑慮呢?至少到底轉(zhuǎn)基因食品是好是壞還沒有定論吧?
——在湖北等地區(qū),種植過轉(zhuǎn)基因作物的田,幾乎都不長雜草,而且也無法種植其他作物。——管他啥!只要吃了不死人!都快餓死了!能吃飽就好了——有的選我還是選擇傳統(tǒng)食品第三十九頁,共63頁。斑蝶事件
1999年5月康奈爾大學(xué)一個(gè)研究組報(bào)道,說一種斑蝶食用轉(zhuǎn)蘇云金桿菌的殺蟲蛋白基因(Bt)玉米花粉后44%死亡,表明轉(zhuǎn)基因食品可能存在安全隱患。此事件引起科學(xué)家對轉(zhuǎn)基因食品的廣泛爭論。第四十頁,共63頁??瓜x玉米與大花斑紋蝴蝶農(nóng)藥的過度使用第四十一頁,共63頁。在加拿大的油菜地里發(fā)現(xiàn)了個(gè)別油菜植株可以抗1-3種除草劑,因而有人稱此為“超級雜草”。加拿大“超級雜草”事件基因漂流第四十二頁,共63頁。對轉(zhuǎn)基因質(zhì)疑的原因何在?第四十三頁,共63頁。1、時(shí)間短:轉(zhuǎn)基因的應(yīng)用時(shí)間短,才短短的十幾年,就將它搬上我們的餐桌,實(shí)為不妥。而且也沒有一定的科學(xué)研究證明它是利還是弊。2、見效慢:食用轉(zhuǎn)基因食物,無法在短期內(nèi)對它進(jìn)行評估。那些弊端的顯現(xiàn)是需要一定時(shí)間的,也許危害的是下一代。3、有些國家或地區(qū)的人食用轉(zhuǎn)基因食物后,生育能力下降,對于孕婦及孩子的危害是不可估量的第四十四頁,共63頁。國內(nèi)轉(zhuǎn)基因食品類農(nóng)作物清單轉(zhuǎn)cry1Ab/cry1Ac基因抗蟲水稻華恢1號華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
轉(zhuǎn)cry1Ab/cry1Ac基因抗蟲水稻Bt汕優(yōu)63華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
轉(zhuǎn)植酸酶基因玉米BVLA430101中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所
轉(zhuǎn)基因抗黃瓜花葉病毒甜椒PK-SP01北京大學(xué)
轉(zhuǎn)基因抗黃瓜花葉病毒番茄PK-TM8805R北京大學(xué)
轉(zhuǎn)基因抗黃瓜花葉病毒甜椒“雙豐R”北京大學(xué)
抗CMV和TMV轉(zhuǎn)基因線辣椒中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所
轉(zhuǎn)基因貯藏番茄大東9號中科院微生物所
轉(zhuǎn)番木瓜環(huán)斑病毒復(fù)制基因的番木瓜華農(nóng)1號華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
耐除草劑轉(zhuǎn)基因大豆GTS40-3-2孟山都公司
耐除草劑轉(zhuǎn)基因玉米GA21孟山都公司
抗蟲轉(zhuǎn)基因玉米MON810孟山都公司
耐除草劑轉(zhuǎn)基因油菜GT73孟山都公司
抗蟲轉(zhuǎn)基因玉米MON863孟山都公司
耐除草劑轉(zhuǎn)基因玉米NK603孟山都公司第四十五頁,共63頁。國內(nèi)轉(zhuǎn)基因食品類農(nóng)作物清單抗農(nóng)達(dá)大豆GTS40-3-2孟山都公司
抗除草劑油菜GT73孟山都公司
抗農(nóng)達(dá)玉米GA21孟山都公司
抗蟲耐除草劑玉米MON88017孟山都公司
抗農(nóng)達(dá)大豆MON89788孟山都公司
抗農(nóng)達(dá)甜菜H7-1孟山都公司
抗蟲和耐除草劑轉(zhuǎn)基因玉米Bt176先正達(dá)種子有限公司
抗蟲和耐除草劑轉(zhuǎn)基因玉米Bt11先正達(dá)種子有限公司
抗農(nóng)達(dá)玉米GA21瑞士先正達(dá)農(nóng)業(yè)服務(wù)亞洲公司
抗蟲玉米MIR604瑞士先正達(dá)農(nóng)業(yè)服務(wù)亞洲公司
抗蟲和耐除草劑轉(zhuǎn)基因玉米TC1507杜邦中國集團(tuán)有限公司陶氏益農(nóng)中國有限公司
抗蟲耐除草劑玉米59122杜邦中國集團(tuán)有限公司陶氏益農(nóng)中國有限公司第四十六頁,共63頁。國內(nèi)轉(zhuǎn)基因食品類農(nóng)作物清單耐除草劑轉(zhuǎn)基因玉米T25拜耳作物科學(xué)公司
轉(zhuǎn)基因油菜Ms1Rf1拜耳作物科學(xué)公司
轉(zhuǎn)基因油菜Ms1Rf2拜耳作物科學(xué)公司
轉(zhuǎn)基因油菜Ms8Rf3拜耳作物科學(xué)公司
耐除草劑轉(zhuǎn)基因油菜T45拜耳作物科學(xué)公司
耐除草劑轉(zhuǎn)基因油菜Topas19/2拜耳作物科學(xué)公司
耐除草劑轉(zhuǎn)基因油菜Oxy-235拜耳作物科學(xué)公司
抗除草劑大豆A2704-12拜耳作物科學(xué)公司第四十七頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因食品安全檢測轉(zhuǎn)基因過程的每一個(gè)環(huán)節(jié)都有可能對食品的安全性產(chǎn)生影響。針對轉(zhuǎn)基因技術(shù)各個(gè)環(huán)節(jié)的特點(diǎn),相應(yīng)的轉(zhuǎn)基因食品的檢測方法主要有兩大類:一類是蛋白質(zhì)水平的檢測,另一類是核酸水平的檢測。第四十八頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因食品安全檢測:蛋白質(zhì)水平1)蛋白質(zhì)印跡法(Westernblot)蛋白質(zhì)印跡法將電泳較高的分離能力、抗體的特異性和顯色酶反應(yīng)的靈敏性結(jié)合起來,是檢測復(fù)雜混合物中特異蛋白質(zhì)的最有力的工具之一。普遍用于分離、檢測特異的目的蛋白質(zhì),靈敏度為1ng~5ng。它可確定一個(gè)樣品中是否含有低于或超過預(yù)定限值水平的目的蛋白質(zhì),特別用于不可溶蛋白質(zhì)的分析。
vanDuijn等用蛋白質(zhì)印跡法檢測RoundupReady大豆中的CP4合成酶,檢測限在0.5%~1%。驗(yàn)證該方法可對大豆蛋白質(zhì)產(chǎn)品進(jìn)行檢測。第四十九頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因食品安全檢測:蛋白質(zhì)水平2)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)
ELISA檢測是將抗原與抗體反應(yīng)的特異性與酶對底物的高效催化作用結(jié)合起來,根據(jù)酶作用于底物后的顯色反應(yīng)。當(dāng)抗原與抗體結(jié)合時(shí),借助于比色或熒光反應(yīng)鑒定轉(zhuǎn)基因成分。酶與底物反應(yīng)的顏色與樣品中抗原的含量呈正比。這是目前比較常用的兩種檢測轉(zhuǎn)基因食品方法之一。酶聯(lián)免疫吸附檢測方法具有高度選擇性和靈敏性。
Rogan等用ELISA法檢測出傳統(tǒng)大豆加工產(chǎn)品中混有2%RoundupReady大豆中的CP4EPSPS蛋白質(zhì)。第五十頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因食品安全檢測:蛋白質(zhì)水平3)“側(cè)流”型免疫測定(LateralFlow)。“側(cè)流”型免疫測定是在最近15年發(fā)展起來的,該方法之前主要用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。與ELISA相似,這種測定方法也是基于三明治夾心式技術(shù)原理,但該法是在一種膜支持物上,而不是在管子里進(jìn)行的,標(biāo)識的抗原一抗體復(fù)合物側(cè)向遷移,直至遇到在一種固定表面上的抗體。整個(gè)操作相對簡單,目前市場上出現(xiàn)了用于側(cè)流分析并能用于野外測試的試劑盒。第五十一頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因食品安全檢測:核酸水平1)普通PCR檢測技術(shù)普通PCR檢測技術(shù)是在包括DNA模板、TaqDNA聚合酶、擴(kuò)增引物、dNTP、緩沖液(包含MgCl2等)的反應(yīng)混合物中,利用PCR儀對DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增,PCR產(chǎn)物以指數(shù)方式增加。第五十二頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因食品安全檢測:核酸水平2)逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)逆轉(zhuǎn)錄PCR(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)的原理是提取總RNA,以其中的mRNA為模板,利用依賴RNA的DNA聚合酶(逆轉(zhuǎn)錄酶)反轉(zhuǎn)錄成cDNA。再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增,獲得目的基因。RT-PCR檢測的靈敏性很高,可檢測極為微量的RNA樣品。RT-PCR廣泛應(yīng)用于遺傳病診斷,食品安全檢測等領(lǐng)域。第五十三頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因食品安全檢測:核酸水平3)巢式PCR巢式PCR(nestedPCR)是指利用兩套PCR引物進(jìn)行兩輪PCR擴(kuò)增反應(yīng)。在第一輪擴(kuò)增中,外引物用以產(chǎn)生擴(kuò)增產(chǎn)物,此產(chǎn)物在在內(nèi)引物的存在下進(jìn)行第二輪擴(kuò)增。巢式PCR有兩對PCR引物與檢測模板配對,增加了可靠性和敏感性,缺點(diǎn)是容易被污染。第五十四頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因食品安全檢測:核酸水平4)多重PCR多重PCR(multiplexPCR)原理與普通PCR基本一致,是在同一PCR反應(yīng)體系中加入多對引物,多種目的基因同時(shí)擴(kuò)增的檢測方法。多重PCR技術(shù)保留了普通PCR的特異性和敏感性,可同時(shí)檢測多個(gè)目的基因,具有快速、靈敏、特異、經(jīng)濟(jì)高效等優(yōu)點(diǎn)。不足之處是擴(kuò)增效率不高,引物間干擾等。第五十五頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因食品安全檢測:核酸水平5)定量PCR定量PCR(QuantitativePCR)是指通過監(jiān)測PCR過程,分析PCR產(chǎn)物,精確定量PCR起始模板量的一種技術(shù)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-timeflurescentquantitivePCR)是通過對PCR擴(kuò)增反應(yīng)中產(chǎn)物的熒光信號進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測,對起始模板進(jìn)行定量或定性分析。隨著循環(huán)進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷增加,熒光信號強(qiáng)度也隨之增強(qiáng)。通過熒光強(qiáng)度的變化分析PCR產(chǎn)物量的變化,得到一條相關(guān)曲線。第五十六頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因食品安全檢測:核酸水平6)免疫PCR免疫PCR(ImmunoPCR)是將抗原抗體反應(yīng)和PCR擴(kuò)增反應(yīng)相結(jié)合而建立的一種微量抗原檢測技術(shù)。免疫PCR是在ELISA的基礎(chǔ)上建立起來,用PCR擴(kuò)增代替酶催化底物顯色,將與抗原結(jié)合的特異抗體通過連接分子與DNA結(jié)合,再經(jīng)PCR擴(kuò)增,定量檢測抗原,靈敏性高。第五十七頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因食品安全檢測:核酸水平7)變性梯度凝膠電泳PCR變性梯度凝膠電泳PCR(PCR-denaturinggradientgelelectrophoresis,PCR-DGGE)是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和變性梯度凝膠電泳相結(jié)合的方法,用于分析食品樣品中微生物的動態(tài)變化、菌落多樣性,廣泛應(yīng)用于生態(tài)學(xué)、食品微生物學(xué)等領(lǐng)域。PCR-DGGE技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是可同時(shí)檢測多種微生物,方便快速,準(zhǔn)確可靠,靈敏度高,缺點(diǎn)是在樣品處理時(shí)可能造成偏差,影響結(jié)果分析。第五十八頁,共63頁。轉(zhuǎn)基因食品安全檢測:核酸水平8)熱起動PCR熱起動PCR(HotStartPCR)是在PCR反應(yīng)中通過抑制非特異性擴(kuò)增,提高反應(yīng)特異性,優(yōu)化目的擴(kuò)增產(chǎn)物的方法。其原理是利用物理或化學(xué)方法控制PCR反應(yīng)體系中的DNA聚合酶,引物,dNTP,鎂離子等,直到反應(yīng)混合物被加熱到可阻止與引物的非特異結(jié)合的溫度,然后開始PCR反應(yīng),擴(kuò)增目的產(chǎn)物。第五十九頁,共63頁。轉(zhuǎn)基
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