艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范HIV抗體檢測(cè)章節(jié)月

（優(yōu)選）艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范年版HIV抗體檢測(cè)章節(jié)年月現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五HIV抗體檢測(cè)HIV抗體檢測(cè)的目的HIV抗體檢測(cè)可用于監(jiān)測(cè)、診斷、血液篩查：現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五以監(jiān)測(cè)為目的的檢測(cè)是為了解不同人群HIV感染率及其變化趨勢(shì)，包括各類高危人群、重點(diǎn)人群和一般人群。以診斷為目的的檢測(cè)是為了確定個(gè)體HIV感染狀況，包括臨床檢測(cè)、自愿咨詢檢測(cè)、術(shù)前檢測(cè)、根據(jù)特殊需要進(jìn)行的體檢等。以血液篩查為目的的檢測(cè)是為了防止輸血傳播HIV，包括獻(xiàn)血員篩查和原料血漿篩查。HIV抗體檢測(cè)的目的現(xiàn)在是3頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五1、根據(jù)目的選擇檢測(cè)方法及檢測(cè)策略。2、嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室SOP。3、篩查試驗(yàn)陽(yáng)性，須作確證實(shí)驗(yàn)。4、篩查試驗(yàn)陰性，不應(yīng)做確證實(shí)驗(yàn)。5、篩查及確證試驗(yàn)陽(yáng)性均應(yīng)做好咨詢工作。HIV抗體檢測(cè)的要點(diǎn)現(xiàn)在是4頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五以診斷為目的的檢測(cè)策略常規(guī)HIV抗體檢測(cè)分為篩查試驗(yàn)（包括初篩和復(fù)檢）和確證試驗(yàn)現(xiàn)在是5頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五篩查試劑必須是經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)、在有效期內(nèi)的試劑，其中酶聯(lián)免疫試劑應(yīng)批批檢合格。推薦使用臨床質(zhì)量評(píng)估敏感性和特異性高的試劑?，F(xiàn)在是6頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五篩查樣品HIV抗體篩查可采用血清、血漿、濾紙干血斑、唾液和尿液樣品?，F(xiàn)在是7頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五篩查方法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)快速檢測(cè)（RT）及其它檢測(cè)試驗(yàn)明膠顆粒凝集試驗(yàn)(PA)免疫滲濾試驗(yàn)免疫層析試驗(yàn)現(xiàn)在是8頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五(1)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）可使用血液、唾液、尿液樣品，ELISA多為單純HIV抗體檢測(cè)試劑。HIV抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑可同時(shí)檢測(cè)血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗體。HIV抗原或抗體包被于固相載體，加入待檢樣品和酶標(biāo)記的HIV抗原或抗體，加底物顯色，用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果。有效試驗(yàn)的陰性和陽(yáng)性對(duì)照必須符合試劑盒規(guī)定?，F(xiàn)在是9頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確性高、價(jià)格低廉、判斷結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)客觀、結(jié)果便于記錄和保存用途：流行病學(xué)監(jiān)測(cè)及臨床大量標(biāo)本的檢測(cè)現(xiàn)在是10頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五(2)化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)采用發(fā)光或熒光底物，既可檢測(cè)抗體，也可聯(lián)合檢測(cè)抗原抗體。HIV抗原或抗體包被于固相載體，加入待檢樣品和酶或熒光標(biāo)記的HIV抗原或抗體，加發(fā)光或熒光底物，用發(fā)光或熒光儀測(cè)定結(jié)果。有效試驗(yàn)的陰性和陽(yáng)性對(duì)照必須符合試劑盒規(guī)定。

現(xiàn)在是11頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五(3)快速檢測(cè)（RT）及其它檢測(cè)試驗(yàn)明膠顆粒凝集試驗(yàn)（PA）：是HIV血清抗體檢測(cè)的一種簡(jiǎn)便方法。將HIV抗原致敏明膠顆粒作為載體，與待檢樣品作用。當(dāng)待檢樣品含有HIV抗體時(shí)，明膠顆粒與抗體發(fā)生凝集反應(yīng)，根據(jù)凝集情況判讀結(jié)果。PA試劑有兩種：同時(shí)檢測(cè)HIV-1和HIV-2抗體以及分別檢測(cè)HIV-1和HIV-2抗體。有效試驗(yàn)必須有陰性和陽(yáng)性質(zhì)控。免疫滲濾試驗(yàn)：斑點(diǎn)ELISA和斑點(diǎn)免疫膠體金（或膠體硒）快速試驗(yàn)：均以硝酸纖維膜為載體，HIV抗原點(diǎn)狀固定在膜上，加待檢樣品。陽(yáng)性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色斑點(diǎn)。反應(yīng)時(shí)間在10分鐘以內(nèi)。有效試驗(yàn)的質(zhì)控點(diǎn)必須顯色。免疫層析試驗(yàn)：以硝酸纖維膜為載體，HIV抗原線狀固定在膜上，待檢樣品（血液或唾液）沿著固相載體遷移，陽(yáng)性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色條帶。有效試驗(yàn)的質(zhì)控帶必須顯色?，F(xiàn)在是12頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五優(yōu)點(diǎn):試驗(yàn)簡(jiǎn)便快速，不需專門設(shè)備和人員培訓(xùn),適用于應(yīng)急檢測(cè)、門診急診檢測(cè)。一般可在10～30分鐘內(nèi)得出結(jié)果。缺點(diǎn):肉眼判斷較主觀、價(jià)格較貴、結(jié)果不易保存。現(xiàn)在是13頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五全血樣品加50ul樣品于樣品墊中手指血方法靜脈血方法加一滴緩沖液15分鐘內(nèi)讀取結(jié)果硒標(biāo)法圖示現(xiàn)在是14頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五篩查程序初篩試驗(yàn)根據(jù)檢測(cè)目的選用符合要求的篩查試劑對(duì)樣品進(jìn)行初篩檢測(cè)，對(duì)呈陰性反應(yīng)的樣品，可出具HIV抗體陰性（-）報(bào)告；對(duì)呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品，需要進(jìn)一步做復(fù)檢試驗(yàn)和確證試驗(yàn)?，F(xiàn)在是15頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五篩查程序復(fù)檢試驗(yàn)對(duì)初篩呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品，應(yīng)使用原有試劑和另外一種不同原理（或廠家）的試劑，或另外兩種不同原理或不同廠家的試劑進(jìn)行復(fù)檢試驗(yàn)。如果初篩檢測(cè)使用抗原抗體聯(lián)合試劑，則復(fù)檢必須包括一種抗原抗體聯(lián)合試劑。如果抗原抗體聯(lián)合試劑檢測(cè)呈陽(yáng)性反應(yīng)，而抗體試劑檢測(cè)為陰性反應(yīng)，則應(yīng)考慮進(jìn)行HIV-1p24抗原或核酸檢測(cè)，必要時(shí)進(jìn)行隨訪。

艾滋病檢測(cè)篩查實(shí)驗(yàn)室復(fù)檢判定為陽(yáng)性反應(yīng)的樣品，確證實(shí)驗(yàn)室可以直接進(jìn)行確證試驗(yàn)。現(xiàn)在是16頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五樣品初篩試驗(yàn)一陰一陽(yáng)均陽(yáng)性反應(yīng)報(bào)告陰性確證試驗(yàn)復(fù)檢試驗(yàn)報(bào)告陰性均陰性反應(yīng)陽(yáng)性反應(yīng)原有試劑＋另一不同原理（或廠家）試劑或另外兩種不同原理（或廠家）試劑選用篩查試劑陰性反應(yīng)HIV抗體篩查檢測(cè)流程圖現(xiàn)在是17頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五篩查程序篩查試驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告HIV抗體初篩試驗(yàn)用附表1進(jìn)行報(bào)告，陰性反應(yīng)報(bào)告為“HIV抗體陰性（-）”；陽(yáng)性反應(yīng)報(bào)告為“HIV抗體待復(fù)檢”。HIV抗體復(fù)檢試驗(yàn)用附表2進(jìn)行報(bào)告，兩次檢測(cè)均陽(yáng)性或一陰一陽(yáng)報(bào)告為“HIV抗體待確證”；兩次檢測(cè)均陰性報(bào)告為“HIV抗體陰性（-）”。現(xiàn)在是18頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五篩查程序篩查試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)樣品的轉(zhuǎn)送如需送上級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行復(fù)檢，需要核對(duì)身份，補(bǔ)充個(gè)人信息（如姓名和身份證號(hào)碼），必要時(shí)采集第二份血樣，持HIV抗體篩查報(bào)告，送當(dāng)?shù)匕滩『Y查中心實(shí)驗(yàn)室，或直接送確證實(shí)驗(yàn)室復(fù)檢。HIV抗體復(fù)檢試驗(yàn)用附表2進(jìn)行報(bào)告，兩次檢測(cè)均陽(yáng)性或一陰一陽(yáng)報(bào)告為“HIV抗體待確證”；兩次檢測(cè)均陰性報(bào)告為“HIV抗體陰性（-）”。HIV抗體復(fù)檢報(bào)告需由1名檢驗(yàn)人員和1名審核人員簽字。現(xiàn)在是19頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五現(xiàn)在是20頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五現(xiàn)在是21頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五HIV抗體確證試驗(yàn)確證試劑：必須是經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)、在有效期內(nèi)的試劑。確證樣品：可采用血清、血漿、濾紙干血斑確證方法：包括免疫印跡試驗(yàn)(WB)、條帶免疫試驗(yàn)(LIATEKHIVⅢ)、放射免疫沉淀試驗(yàn)(RIPA)及免疫熒光試驗(yàn)(IFA)。

國(guó)內(nèi)常用的確證試驗(yàn)方法是WB?，F(xiàn)在是22頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五確證流程

使用HIV-1/2混合型試劑進(jìn)行檢測(cè)，如果呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告HIV抗體陰性（－）；如果呈陽(yáng)性反應(yīng)，則報(bào)告HIV-1抗體陽(yáng)性（＋）；如果不是陰性反應(yīng)，但又不滿足陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)，則報(bào)告HIV抗體不確定（±）。結(jié)合流行病學(xué)資料，可以在4周后隨訪檢測(cè)，如帶型沒(méi)有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告陰性；如隨訪期間出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，則報(bào)告陽(yáng)性；如隨訪期間帶型有進(jìn)展，但不滿足陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)繼續(xù)隨訪到8周。8周后如帶型沒(méi)有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)則報(bào)告陰性；滿足HIV抗體陽(yáng)性診斷標(biāo)準(zhǔn)則報(bào)告陽(yáng)性，不滿足陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)可視情況決定是否繼續(xù)隨訪。隨訪期間可根據(jù)需要，檢測(cè)病毒核酸或P24抗原作為輔助診斷。如果出現(xiàn)HIV-2型的特異性指示條帶，根據(jù)實(shí)際情況需用HIV-2型免疫印跡試劑再做HIV-2的抗體確證試驗(yàn)或HIV-2核酸檢測(cè)，以進(jìn)一步明確HIV-2感染狀態(tài)，疑難樣品送國(guó)家艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步分析。現(xiàn)在是23頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五HIV抗體確證檢測(cè)流程圖確證試劑篩查試驗(yàn)陽(yáng)性反應(yīng)樣品根據(jù)具體情況進(jìn)一步檢測(cè)HIV-2報(bào)告陰性出現(xiàn)HIV-2指示條帶陰性反應(yīng)不確定反應(yīng)報(bào)告HIV-1陽(yáng)性HIV-1陽(yáng)性反應(yīng)結(jié)合流行病學(xué)資料，可以在4周后隨訪檢測(cè)，如帶型沒(méi)有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告陰性；如隨訪期間出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，則報(bào)告陽(yáng)性；如隨訪期間帶型有進(jìn)展，但不滿足陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)繼續(xù)隨訪到8周。如帶型沒(méi)有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)則報(bào)告陰性；滿足HIV抗體陽(yáng)性診斷標(biāo)準(zhǔn)則報(bào)告陽(yáng)性，不滿足陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)可視情況決定是否繼續(xù)隨訪?，F(xiàn)在是24頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五HIV抗體確證試驗(yàn)結(jié)果的判定注：①HIV-1抗體特異帶包括：env帶：gp160/gp120、gp41；gag帶：p55、p24、p17（或p18）；pol帶：p66（或p65）、p51、p31。②HIV-2抗體特異條帶包括：env帶：gp140/gp105、gp36；gag帶：p56、p26、p16；pol帶：p68、p53、p34。（由于使用的毒株不同，HIV-2env帶也可為gp125/gp80、gp36）?，F(xiàn)在是25頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五HIV抗體確證實(shí)驗(yàn)結(jié)果a強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照（HIV-1和HIV-2）b弱陽(yáng)性對(duì)照（HIV-1）c陰性對(duì)照d典型的HIV-2血清陽(yáng)性反應(yīng)abcdgp160gp120p66p55p51gp41p39p31P24p17血清對(duì)照HIV-2特異帶現(xiàn)在是26頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五HIV抗體確證試驗(yàn)結(jié)果的判定

（1）HIV-1抗體陽(yáng)性同時(shí)符合以下2條標(biāo)準(zhǔn)可判為HIV-1抗體陽(yáng)性：①至少有2條env帶（gp41和gp160/gp120）出現(xiàn)，或至少1條env帶和p24帶同時(shí)出現(xiàn)；②符合試劑盒提供的陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)?，F(xiàn)在是27頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五試劑盒提供的陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)是

2條env（

Gp160/gp41＋gp120）andpol（p66、p51、p31）

orgag（p55、p24、p17）

Gp160

＋

gp120

＋

p66/p51/p31/p55/p24/p17或

Gp41

＋

gp120

＋

p66/p51/p31/p55/p24/p17

Gp160

＋

gp120

＋

p24現(xiàn)在是28頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五HIV抗體確證試驗(yàn)結(jié)果的判定（2）HIV-2抗體陽(yáng)性出現(xiàn)HIV-2型特異性指示帶的樣品：如果同時(shí)呈HIV-1抗體陽(yáng)性反應(yīng)，報(bào)告HIV-1抗體陽(yáng)性，不推薦進(jìn)一步做HIV-2抗體確證試驗(yàn)；如果同時(shí)呈HIV-1抗體不確定或陰性反應(yīng)，需用HIV-2型確證試劑再做HIV-2的抗體確證試驗(yàn)。同時(shí)符合以下二條標(biāo)準(zhǔn)，即出現(xiàn)至少2條env帶（gp36和gp140/gp105），和試劑盒提供的陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)，可判為HIV-2抗體陽(yáng)性?，F(xiàn)在是29頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五HIV抗體確證試驗(yàn)結(jié)果的判定3）HIV抗體不確定出現(xiàn)HIV抗體特異帶，但不足以判定陽(yáng)性?，F(xiàn)在是30頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五（4）HIV抗體陰性無(wú)HIV抗體特異帶出現(xiàn)。HIV抗體確證試驗(yàn)結(jié)果的判定現(xiàn)在是31頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五HIV抗體確證試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告HIV抗體確證試驗(yàn)結(jié)果用附表3報(bào)告。（1）符合HIV-1/HIV-2抗體陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)，報(bào)告“HIV-1/HIV-2抗體陽(yáng)性（＋）”，并按規(guī)定做好檢測(cè)后咨詢、保密和疫情報(bào)告工作。（2）符合HIV抗體陰性判斷標(biāo)準(zhǔn)，報(bào)告“HIV抗體陰性（－）”。如疑似“窗口期”感染，建議進(jìn)一步做HIV核酸檢測(cè)，盡早明確診斷。（3）符合HIV抗體不確定判斷標(biāo)準(zhǔn)，報(bào)告“HIV抗體不確定（±）”，在備注中應(yīng)注明“4周后復(fù)檢”?，F(xiàn)在是32頁(yè)\一共有34頁(yè)\編輯于星期五發(fā)出確證報(bào)告的同時(shí)要做好檢測(cè)后咨詢。HIV