腫瘤免疫與免疫學(xué)檢驗(yàn)

本章學(xué)習(xí)要點(diǎn)●掌握腫瘤特異性抗原、腫瘤相關(guān)抗原、分化抗原的概念和分類，常用腫瘤標(biāo)志物免疫學(xué)檢測(cè)?！袷煜こＲ娔[瘤標(biāo)志物應(yīng)用原則?！窳私鈾C(jī)體的抗瘤免疫效應(yīng)機(jī)制腫瘤的免疫逃避機(jī)制。第一頁，共85頁。腫瘤免疫學(xué)（tumorImmunology）是研究腫瘤的抗原性、機(jī)體的免疫功能與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的相互關(guān)系，機(jī)體對(duì)腫瘤的免疫應(yīng)答及其抗腫瘤免疫的機(jī)制、腫瘤的免疫診斷和免疫防治的科學(xué)。

腫瘤是在各種致癌因素（化學(xué)物質(zhì)、放射線照射和病毒感染等）作用下，組織細(xì)胞的某些生長(zhǎng)調(diào)控基因發(fā)生突變或異常表達(dá)的結(jié)果第二頁，共85頁。腫瘤免疫學(xué)發(fā)展概述腫瘤免疫學(xué)是免疫學(xué)深入到腫瘤學(xué)研究的一個(gè)分支，它是研究腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與機(jī)體免疫的關(guān)系，以及應(yīng)用免疫學(xué)原理和手段對(duì)腫瘤進(jìn)行診斷、治療和預(yù)防的一門科學(xué)。腫瘤免疫學(xué)是免疫學(xué)中發(fā)展最快的一個(gè)分支。人類的惡性腫瘤是危害人類最嚴(yán)重的疾病之一，其死亡率居各種疾病的第二位，并且在我國(guó)仍呈上升趨勢(shì)。因此對(duì)腫瘤的研究受到廣泛重視。第三頁，共85頁。腫瘤免疫的概念起源于本世紀(jì)初。1909年Ehrlich最早提出了免疫監(jiān)視的構(gòu)想?！吩诒臼兰o(jì)初有人發(fā)現(xiàn)把腫瘤移植同種動(dòng)物后常常發(fā)生腫瘤消退現(xiàn)象。1943年Gross首次證明了用甲基膽蒽誘導(dǎo)的肉瘤可使小鼠免疫，但所用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物還不算純系動(dòng)物。1957年prehn與Main用純系小鼠證實(shí)了Gross的結(jié)論。60年代初，Thomas和Burnet正式提出“免疫監(jiān)視”這一理論。第四頁，共85頁。1909年Ehrlich首先提出，免疫系統(tǒng)不僅負(fù)責(zé)防御微生物侵犯，而且能從肌體內(nèi)清除改變了的宿主成分，此后人們認(rèn)識(shí)到癌細(xì)胞是改變了的宿主成分。第五頁，共85頁。腫瘤免疫的概念起源于本世紀(jì)初。1909年Ehrlich最早提出了免疫監(jiān)視的構(gòu)想?！吩诒臼兰o(jì)初有人發(fā)現(xiàn)把腫瘤移植同種動(dòng)物后常常發(fā)生腫瘤消退現(xiàn)象。1943年Gross首次證明了用甲基膽蒽誘導(dǎo)的肉瘤可使小鼠免疫，但所用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物還不算純系動(dòng)物。1957年prehn與Main用純系小鼠證實(shí)了Gross的結(jié)論。60年代初，Thomas和Burnet正式提出“免疫監(jiān)視”這一理論。第六頁，共85頁。

●腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)是通過免疫學(xué)方法檢測(cè)腫瘤特異性或腫瘤相關(guān)性標(biāo)志物，達(dá)到早期篩選、輔助診斷、病情檢測(cè)和預(yù)后評(píng)估等目的?！裼捎诿庖邔W(xué)方法的特異、簡(jiǎn)便、快速和敏感、腫瘤免疫學(xué)診斷已成為腫瘤的早期普查、輔助診斷和預(yù)后判斷的重要手段。

第七頁，共85頁。

第一節(jié)腫瘤抗原

腫瘤抗原（tumourantigens)——是在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中新出現(xiàn)的或過度表達(dá)的抗原物質(zhì)。

存在于腫瘤細(xì)胞表面或體液。

第八頁，共85頁。

——細(xì)胞癌變過程使原本不表達(dá)的某些基因被激活即細(xì)胞癌變過程中合成的新的蛋白質(zhì)分子——抗原合成過程的某些環(huán)節(jié)發(fā)生異常，如由于糖化等原因?qū)е庐惓＜?xì)胞蛋白質(zhì)的特殊降解產(chǎn)物產(chǎn)生——基因突變：由于突變等使蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變——正常情況下處于隱蔽狀態(tài)的抗原表位暴露出來——多種膜蛋白分子異常聚集——胚胎性抗原或分化性抗原的異常、異位表達(dá)產(chǎn)生機(jī)制第九頁，共85頁。第一節(jié)腫瘤抗原一、根據(jù)腫瘤抗原特異性分類㈠腫瘤特異性抗原（TSA）——指腫瘤細(xì)胞特有的抗原；只表達(dá)于腫瘤細(xì)胞，而不存在于正常組織的抗原。此類抗原最初是通過動(dòng)物間進(jìn)行腫瘤移植所證實(shí)，故曾被稱為腫瘤特異性移植抗原（TSTA）或腫瘤排斥抗原（TRA）。這種多為突變基因產(chǎn)物。TSA可存在于不同個(gè)體的同一組織學(xué)類型的腫瘤中，如黑色素瘤相關(guān)排斥抗原（MARA）,可見于不同個(gè)體的黑色素瘤細(xì)胞，但正常黑色素細(xì)胞不表達(dá)此類抗原；亦可為不同組織學(xué)類型的腫瘤所共有，如突變的ras癌基因產(chǎn)物可見于消化道癌、肺癌等，但其氨基酸順序與正常原癌基因ras表達(dá)產(chǎn)物存在差異，能被機(jī)體免疫系統(tǒng)識(shí)別。

第十頁，共85頁。第十一頁，共85頁。第一節(jié)腫瘤抗原

㈡腫瘤相關(guān)抗原（TAA）——不只存在于腫瘤患者的癌變細(xì)胞或體液中，也微量存在于正常細(xì)胞或體液中，但發(fā)生腫瘤時(shí)，腫瘤細(xì)胞表達(dá)TAA僅表現(xiàn)為量的變化，而無嚴(yán)格腫瘤特異性。1、胚胎抗原2、分化抗原3、其他TAA

第十二頁，共85頁。1.胚胎抗原●是一類在正常情況下在胚胎發(fā)育階段由胚胎組織產(chǎn)生的正常成分，在胚胎后期減少，出生后由于基因被阻遏而逐漸消失，或僅微量表達(dá)，而不表達(dá)在成熟組織上的蛋白，當(dāng)有細(xì)胞癌變時(shí)，此類抗原可重新合成，如（AFP、CEA、FSA）等●可表達(dá)于腫瘤細(xì)胞表面，也可分泌或脫落到體液中，作為診斷的物質(zhì)基礎(chǔ)●此類抗原曾在胚胎時(shí)出現(xiàn)過，機(jī)體已形成免疫耐受，故宿主對(duì)此不產(chǎn)生免疫應(yīng)答●在異種動(dòng)物中具有很強(qiáng)的免疫原性，可利用制備特異性抗血清用于檢測(cè)第十三頁，共85頁。第一節(jié)腫瘤抗原一、根據(jù)腫瘤抗原特異性分類分化抗原是組織細(xì)胞在分化、發(fā)育的不同階段表達(dá)或消失的正常分子。

為特定組織類型以及該組織正常分化的特定階段所特有●腫瘤細(xì)胞從單一細(xì)胞發(fā)源的克隆性擴(kuò)增群體，常過量表達(dá)●來源于特定組織的腫瘤可表達(dá)該組織的分化抗原，如PSA惡腫表達(dá)其他正常組織細(xì)胞特異性分化抗原，如ABO血型抗原某些可表達(dá)未分化的或幼稚細(xì)胞的分化抗原，如（TL）抗原●由于分化抗原是正常細(xì)胞的一部分，不能刺激抗腫瘤的免疫應(yīng)答●可作為免疫治療的靶分子和腫瘤組織來源的診斷標(biāo)志第十四頁，共85頁。第一節(jié)腫瘤抗原一、根據(jù)腫瘤抗原特異性分類3.其他TAA●糖鏈抗原（CA）、組織多肽抗原、免疫抑制酸性蛋白、鐵蛋白、唾液酸、β2M等升高時(shí)可作為相應(yīng)腫瘤的診斷指標(biāo)

表27-2某些組織特異性腫瘤抗原

組織細(xì)胞來源腫瘤抗原

B細(xì)胞B細(xì)胞白血病和淋巴瘤CD10、IgT細(xì)胞T細(xì)胞白血病和淋巴瘤IL-2R、TCR、CD45R、CD4/CD8TL抗原前列腺前列腺癌PSA、PAPPAP神經(jīng)嵴黑色素瘤S-100等黑色素相關(guān)抗原瘤上皮細(xì)胞多種癌細(xì)胞角蛋白第十五頁，共85頁。

第一節(jié)概述

二、根據(jù)腫瘤誘發(fā)和發(fā)生情況分類

腫瘤抗原1.理化因素誘發(fā)的腫瘤●化學(xué)或物理因素●腫瘤的抗原性較弱●表現(xiàn)出高度個(gè)體化

●具有不同的抗原特異性●人類腫瘤大多不屬此類理化因素病毒誘發(fā)自發(fā)性正常細(xì)胞成分的異常表達(dá)甲基膽蒽紫外線氨基偶氮染料X射線二乙基亞硝氨放射性粉塵第十六頁，共85頁。

第一節(jié)概述

二、根據(jù)腫瘤誘發(fā)和發(fā)生情況分類2.病毒誘發(fā)的腫瘤

主要是DNA病毒和RNA病毒，尤其是反轉(zhuǎn)錄病毒?！癫《净蛘系剿拗骷?xì)胞基因中，使其表達(dá)病毒基因編碼蛋白●編碼蛋白經(jīng)處理后形成病毒肽-MHC-I類分子，并表達(dá)在腫瘤細(xì)胞表面刺激機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)腫瘤的特異性免疫應(yīng)答●同一種病毒誘發(fā)的不同類型的腫瘤均可表達(dá)相同的抗原●具有較強(qiáng)的免疫原性，在患者血清中可檢出較高效價(jià)相關(guān)病毒抗體

第十七頁，共85頁。3.自發(fā)性腫瘤的抗原●人類大多數(shù)腫瘤屬于自發(fā)腫瘤，無明顯誘因●一些類似于化學(xué)因素誘發(fā)的腫瘤，有明顯的個(gè)體特異性●一些類似于病毒誘發(fā)的腫瘤具有共同抗原第十八頁，共85頁。（四）正常細(xì)胞成分的異常表達(dá)分化抗原過度表達(dá)的抗原胚胎抗原細(xì)胞突變產(chǎn)生的獨(dú)特型抗原第十九頁，共85頁。第二節(jié)機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)機(jī)制正常人體每天有1011個(gè)細(xì)胞處于分裂狀態(tài)，其中發(fā)生突變的幾率為10-9~10-7。免疫系統(tǒng)能及時(shí)識(shí)別和清除突變細(xì)胞，保護(hù)機(jī)體不發(fā)生腫瘤，這是免疫監(jiān)視功能發(fā)揮的作用。第二十頁，共85頁。一、抗腫瘤的細(xì)胞免疫機(jī)制（一）、T細(xì)胞1.CD4+Th

CD4+Th細(xì)胞被APC遞呈的腫瘤抗原激活，分泌CK、IL-2、IFN-γ、TNF激活Mф、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、CTL殺傷腫瘤細(xì)胞：

2.CD8+CTL

直接識(shí)別腫瘤細(xì)胞表面的腫瘤抗原肽-MHC-I類分子復(fù)合物，被激活并增殖，特異性地殺傷腫瘤細(xì)胞或致其凋亡?；罨腃D8+CTL可分泌細(xì)胞毒介質(zhì)（如穿孔素、顆粒酶和TNFα、β

）和表達(dá)FasL,介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞壞死或凋亡第二十一頁，共85頁。（一）T細(xì)胞3.γδ+T細(xì)胞與CTL相似，可直接殺傷腫瘤，但不受MHC限制；可分泌IL-2、IL-4、IL-5、GM-CSF和TNF等細(xì)胞因子；在IL-2作用下，可以LAK或TIL的形式殺傷腫瘤細(xì)胞。第二十二頁，共85頁。CD8+、CD4+相互輔助作用第二十三頁，共85頁。TcellTumorcellperforinInactiveprocaspaseActivedcaspaseDeadtumorcellCTL細(xì)胞釋放穿孔素和顆粒酶殺傷腫瘤細(xì)胞機(jī)制granzymeCD8+TCells第二十四頁，共85頁。FasLFasTNFTcellTumorcellDeathdomainTNFRInactiveprocaspaseActivedcaspaseDeadtumorcellCTL的FasL細(xì)胞毒作用第二十五頁，共85頁。（二）NK細(xì)胞非特異直接殺傷靶細(xì)胞，不受MHC限制，故NK細(xì)胞被視為機(jī)體抗腫瘤的第一道防線。殺傷機(jī)制：釋放穿孔素、顆粒酶；通過Fas/FasL途徑；釋放NK細(xì)胞毒性因子和TNF；ADCC效應(yīng)；釋放IL-1、IL-2、IFN-γ等細(xì)胞因子。第二十六頁，共85頁。

腫瘤特異性抗體

腫瘤免疫

（ADCC）

腫瘤細(xì)胞死亡

NK細(xì)胞

B/漿細(xì)胞

腫瘤細(xì)胞

Fc受體Fc受體巨噬細(xì)胞第二十七頁，共85頁。（三）巨噬細(xì)胞（Mф）Mф的殺瘤效應(yīng)：ADCC作用；通過非特異性膜受體直接與瘤細(xì)胞結(jié)合；Mф分泌TNF、IFN、IL-I、NO等殺傷瘤細(xì)胞；非特異性的吞噬和殺傷；激活T細(xì)胞釋放SMAF，激活Mф特異性殺傷；處理和提呈腫瘤抗原，協(xié)助T、B細(xì)胞發(fā)揮作用第二十八頁，共85頁。（四）樹突狀細(xì)胞（dendriticcell,DC）可高表達(dá)MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、B7和ICAM-1等免疫相關(guān)分子，參與腫瘤抗原提呈；內(nèi)皮細(xì)胞被TNF-α、IFN-γ等激活后具有細(xì)胞毒作用。第二十九頁，共85頁。DC人腫瘤的免疫組化檢測(cè)揭示，腫瘤組織的DC浸潤(rùn)與腫瘤預(yù)后相關(guān)強(qiáng)有力的APC，腫瘤抗原負(fù)載的DC過繼轉(zhuǎn)輸能誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞應(yīng)答第三十頁，共85頁。二、體液免疫機(jī)制補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒作用ADCC作用抗體的免疫調(diào)理作用抗體封閉腫瘤細(xì)胞表面某些受體抗體干擾腫瘤細(xì)胞粘附其他第三十一頁，共85頁。靶細(xì)胞ADCC作用補(bǔ)體介導(dǎo)的溶解靶細(xì)胞

抗體分子在抗腫瘤免疫應(yīng)答中的作用引起細(xì)胞雕亡或生長(zhǎng)抑制的信號(hào)或封閉作用第三十二頁，共85頁。第三節(jié)腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)是指用免疫學(xué)的方法檢測(cè)腫瘤抗原、抗體等腫瘤標(biāo)志物和腫瘤患者的免疫功能狀態(tài)，為腫瘤的診斷、觀察病情、評(píng)價(jià)療效及預(yù)后具有重要價(jià)值。第三十三頁，共85頁。一、腫瘤標(biāo)志物(tumormarkers，TM)

1978年Herberman在美國(guó)國(guó)立癌癥研究所召開的人類腫瘤免疫診斷會(huì)上提出的。腫瘤標(biāo)記物（tumormarker）又稱腫瘤標(biāo)志物，是指特征性存在于惡性腫瘤腫瘤細(xì)胞，或由惡性腫瘤細(xì)胞異常而產(chǎn)生的物質(zhì)，或是宿主對(duì)腫瘤的刺激反應(yīng)而產(chǎn)生的物質(zhì)，并能反映腫瘤發(fā)生、發(fā)展，監(jiān)測(cè)腫瘤對(duì)治療反應(yīng)的一類物質(zhì)。存在于腫瘤患者的組織、體液和排泄物中，能夠用免疫學(xué)、生物學(xué)及化學(xué)的方法檢測(cè)。在腫瘤患者體液或組織中存在的比正常人更高水平的一類物質(zhì)。（如酶、糖蛋白、等）第三十四頁，共85頁。腫瘤抗原可以是腫瘤標(biāo)志物，但腫瘤標(biāo)志物不一定是腫瘤抗原。腫瘤標(biāo)記物可存在于細(xì)胞表面、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核和細(xì)胞外（血液、體液）中。第三十五頁，共85頁。腫瘤標(biāo)志物發(fā)展概況1845Bence-Jones本周蛋白1930ZondekHCG1959Markert同工酶1963AbelevAFP1965Gold&FreemanCEA1969Hubner&Todaro癌基因1975Kohler&Milstein單克隆抗體1978Herberman提出腫瘤標(biāo)志物概念1979英國(guó)第7屆腫瘤發(fā)生TM被確認(rèn)并應(yīng)用臨床生物學(xué)和醫(yī)學(xué)會(huì)議1980Koprowski CA19-91981BastetalCA1251981ColcheretalCA72-41984KufeetalCA15-3…...第三十六頁，共85頁。腫瘤標(biāo)記物發(fā)展的歷史第一階段，1846年～1928年，發(fā)現(xiàn)本周蛋白第二階段，1929年～1962年，發(fā)現(xiàn)一些激素、酶、同工酶和蛋白在腫瘤發(fā)生時(shí)異常，如：異位激素、促性腺激素、堿性磷酸酶、乳酸脫氫酶第三階段，1963年～1975年，發(fā)現(xiàn)了一些胚胎蛋白性標(biāo)記物，AFP、CEA第四階段，1976年至今，單克隆抗體技術(shù)的建立，大量的腫瘤標(biāo)記物涌現(xiàn)出來，如CA15-3、CA125、CA19-9等第三十七頁，共85頁。理想的腫瘤標(biāo)志物靈敏度高特異性強(qiáng)定位性好反應(yīng)病情監(jiān)測(cè)腫瘤療效監(jiān)測(cè)腫瘤復(fù)發(fā)預(yù)測(cè)腫瘤預(yù)后

至今，還沒有一種腫瘤標(biāo)志物能完全滿足上述各項(xiàng)要求!第三十八頁，共85頁。腫瘤標(biāo)記物的分類由于腫瘤標(biāo)記物的來源和性質(zhì)非常復(fù)雜，至今尚未有一個(gè)統(tǒng)一的分類方法。目前的分類方法有兩種：一是按腫瘤標(biāo)記物的來源，二是按腫瘤標(biāo)記物本身的化學(xué)性質(zhì)和免疫學(xué)特性。第三十九頁，共85頁。按腫瘤標(biāo)記物的來源分類腫瘤的特異性標(biāo)記物，指僅有某一種腫瘤所產(chǎn)生的特異性物質(zhì)。腫瘤輔助標(biāo)記物，在一類組織類型相似而性質(zhì)不同的腫瘤發(fā)生時(shí)，其水平都有升高。第四十頁，共85頁。按腫瘤標(biāo)記物本身的性質(zhì)分類胚胎抗原蛋白類標(biāo)記物糖類標(biāo)記物酶類標(biāo)記物激素類標(biāo)記物基因類標(biāo)記物其他腫瘤標(biāo)記物第四十一頁，共85頁。體液中的腫瘤標(biāo)志物一般分為：胚胎抗原類糖鏈蛋白類激素類酶和同工酶類蛋白質(zhì)類癌基因產(chǎn)物類第四十二頁，共85頁。3.影響血液和其他體液中腫瘤標(biāo)志物濃度的因素：腫瘤的大小和瘤細(xì)胞的數(shù)目瘤細(xì)胞合成和分泌腫瘤標(biāo)志物的速度瘤組織血液供應(yīng)的好壞瘤細(xì)胞是否有壞死和壞死的程度瘤細(xì)胞的分化程度和腫瘤的分期瘤細(xì)胞是否表達(dá)和合成腫瘤標(biāo)志物腫瘤標(biāo)志物在體內(nèi)的降解和排泄速度第四十三頁，共85頁。4.腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用：高危人群的篩查腫瘤的輔助診斷腫瘤治療效果的評(píng)價(jià)腫瘤復(fù)發(fā)的監(jiān)測(cè)和預(yù)后的判斷第四十四頁，共85頁。常用腫瘤標(biāo)志物甲胎蛋白（AFP）癌胚抗原（CEA）β2-微球蛋白（β2-MG）鐵蛋白（SF）細(xì)胞角質(zhì)素片段抗原21-1（CYFRA21-1）鱗狀上皮癌相關(guān)抗原（SCC-Ag）前列腺特異抗原（PSA）組織多肽抗原（TPA）糖類抗原（CA50、CA125、CA15-3、CA199、CA242、CA72-4）神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）前列腺酸性磷酸酶（PAP）激素類腫瘤標(biāo)志物蛋白類腫瘤標(biāo)志物糖脂類腫瘤標(biāo)志物酶及同工酶類腫瘤標(biāo)志物激素類腫瘤標(biāo)志物第四十五頁，共85頁。1.胚胎抗原類腫瘤標(biāo)志物：AFPCEA常見腫瘤標(biāo)志物第四十六頁，共85頁。（一）AFP的臨床應(yīng)用AFP(alpha-fetoprotein)屬糖蛋白抗原。由胚胎肝細(xì)胞合成，其次由卵黃囊合成，腸上皮細(xì)胞少量產(chǎn)生。分泌到血清中。胚胎時(shí)的AFP，1-2個(gè)月合成，3個(gè)月達(dá)高峰，5個(gè)月后合成下降。分娩時(shí)合成停止。主要AFP的生物學(xué)作用;①胚胎時(shí)起白蛋白的作用。②保持胎兒不被排斥。③具有免疫抑制作用。④促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)第四十七頁，共85頁。AFP升高的因素生理?xiàng)l件下，，AFP在卵黃囊的內(nèi)胚層細(xì)胞和胚肝、新生兒肝細(xì)胞中高度表達(dá)，在胃腸道粘膜上皮細(xì)胞中也有見表達(dá)。病理狀況下，見于正常成年個(gè)體的肝細(xì)胞被破壞后的再生（急、慢性肝炎，重癥肝炎恢復(fù)期，肝硬化）、先天性膽管閉塞、畸形胎兒（無腦兒、脊柱裂等）以及原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌、畸胎瘤或部分胃腸道腫瘤第四十八頁，共85頁。正常值：≤25ug/L;＞300ug/L有可能是肝細(xì)胞癌，妊娠<400ug/L;其他疾患：＜100ug/L第四十九頁，共85頁。AFP的臨床意義診斷肝癌：

在我國(guó)60～70％的肝癌病人存在AFP高于正常值。正常人血清AFP值為10～30μg/L，凡AFP>500μg/L持續(xù)1個(gè)月或AFP>200μg/L持續(xù)2個(gè)月，應(yīng)高度懷疑肝癌，同時(shí)應(yīng)有醫(yī)學(xué)影像學(xué)的證據(jù)參與診斷；低濃度（50～200μg/L）持續(xù)時(shí)間超過2個(gè)月的患者，應(yīng)視為肝癌的高危人群。當(dāng)谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）正常，用AFP來診斷肝癌，可取性可達(dá)100％。其他：在進(jìn)行肝癌診斷時(shí)，應(yīng)排除由妊娠、活動(dòng)性肝炎、生殖腺胚胎癌、繼發(fā)性肝癌和少數(shù)消化道腫瘤等引起的AFP升高，通常由非原發(fā)性肝癌引起的AFP升高，一般都不會(huì)高于400μg/L。3.6～5.2％的膽管上皮癌、84％以上的肝母細(xì)胞癌和70％左右的生殖性畸胎瘤及較少比例的胰腺癌、肺癌、腎癌和白血病患者也可出現(xiàn)AFP低濃度的異常升高。良性病變中的AFP升高

升高一般是散在的和暫時(shí)的，肝炎病人，10％升高，水平<50μg/L肝硬化病人，30％升高，水平<500μg/L第五十頁，共85頁。缺點(diǎn)：對(duì)原發(fā)性肝癌的敏感性只有70％左右對(duì)轉(zhuǎn)移性肝癌的診斷效果就更差對(duì)AFP指標(biāo)陰性，臨床可疑的患者應(yīng)結(jié)合其他檢查資料或多項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)，如同時(shí)檢測(cè)γ-GT-Ⅱ、AFU、ALP等，以期優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，減少漏診第五十一頁，共85頁。(二)CEA(carcinoembryonicantigen)的臨床應(yīng)用

CEA1965年由加拿大學(xué)者發(fā)現(xiàn)結(jié)腸腺癌和胎兒結(jié)腸中提取的腫瘤相關(guān)抗原,所以被認(rèn)為是結(jié)、直腸癌的特異性標(biāo)記。CEA屬腫瘤細(xì)胞的結(jié)構(gòu)抗原，在細(xì)胞漿中形成，通過細(xì)胞膜到細(xì)胞外面，然后進(jìn)入周圍的體液，因此從血清、腦脊液、乳汁、胃液、胸水、及排泄物中均可以檢出。

肝臟是CEA分解代謝的場(chǎng)所。應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)無器官特異性，但準(zhǔn)確率較高。第五十二頁，共85頁。

CEA是一種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的可溶性糖蛋白，分子量180kD，主要存在于胎兒消化道上皮組織、胰臟和肝臟。正常情況下CEA進(jìn)入胃腸道，而腫瘤細(xì)胞分泌的CEA則進(jìn)入血液和淋巴液，故血中CEA含量會(huì)增高。

CEA的檢測(cè)：EIA、RIA參考值<5μg/L（97%健康人低于此值）吸煙者可達(dá)5μg/L

第五十三頁，共85頁。血清CEA升高見于：?消化道惡性腫瘤：整個(gè)胃腸道惡性腫瘤均可增高。?非消化道惡性腫瘤：如乳腺癌、卵巢癌、肺癌有不同程度升高。?腸道息肉、憩室炎、結(jié)腸炎、肝病、胰腺炎和肺部疾病。?檢測(cè)胸、腹水或胃液的CEA含量對(duì)鑒別診斷有意義。?CEA與其它腫瘤標(biāo)志物結(jié)合測(cè)定可以提高對(duì)癌癥的檢出率。第五十四頁，共85頁。CEA的優(yōu)勢(shì):CEA是一個(gè)結(jié)腸癌標(biāo)記物，CEA與CA242聯(lián)合應(yīng)用目前被認(rèn)為是對(duì)結(jié)腸癌的最佳標(biāo)記物的搭配。在整個(gè)直腸癌治療其間，CEA是一個(gè)有效的監(jiān)視指標(biāo)，是發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)的理想指標(biāo)，其敏感性高于X線和直腸鏡。CEA的局限性:只在腫瘤的中晚期才有較顯著的升高，也不只局限于某一類腫瘤，因此CEA對(duì)多數(shù)腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)與鑒別診斷并無幫助。CEA具有較高的假陽性和假陰性，并不適合用于腫瘤的普查第五十五頁，共85頁。2、糖鏈抗原類

（carbohydrateantigen,CA）（1）CA15-3：是一種乳腺癌相關(guān)抗原；化學(xué)本質(zhì)：>300kD糖蛋白；分泌(或表達(dá))：正常人血清中濃度極低，乳腺、卵巢癌高表達(dá)，主要是乳腺癌的標(biāo)志；主要臨床意義：乳腺癌診斷、預(yù)后、轉(zhuǎn)歸判斷與CA153同類的多態(tài)性上皮黏蛋白還有MCA、CA27-29、CA549等。第五十六頁，共85頁。血清CA153升高見于：?乳腺癌：早期陽性率<30%,轉(zhuǎn)移后可達(dá)80%。?其他惡性腫瘤：如卵巢癌、胰腺癌、肺癌、胃癌、結(jié)直腸癌、其他婦科腫瘤有不同程度升高。?非惡性腫瘤：肝病、胃腸道、肺、乳腺、卵巢等疾病，陽性率一般<10%。第五十七頁，共85頁。

CA125:1984年應(yīng)用放射免疫技術(shù)建立了CA125的單克隆抗體的檢測(cè)。CA125廣泛分布在漿膜表面上皮（胸膜、腹膜、心包膜)和苗勒氏管的衍生物(如輸卵管內(nèi)皮、子宮、及宮頸內(nèi)膜）。OC12-5單抗

如圖說明CA12-5一種與卵巢癌(ocariancencar)相關(guān)的抗原。素細(xì)胞黑色(±)卵巢漿液細(xì)胞（+）其他腫瘤細(xì)胞(–)胚胎細(xì)胞(–)第五十八頁，共85頁。血清CA125升高見于：?卵巢癌：陽性率約為61.4%。?其他非卵巢惡性腫瘤：如乳腺癌、胰腺癌、肺癌、胃癌、結(jié)直腸癌、其他婦科腫瘤有不同程度升高。?非惡性腫瘤：如子宮內(nèi)膜異位癥、盆腔炎、卵巢囊腫、胰腺炎、肝病等疾病。?妊娠早期。第五十九頁，共85頁。（3）CA19-9是一種與胰腺癌、膽囊癌和胃腸道癌相關(guān)的腫標(biāo)，又稱胃腸癌相關(guān)抗原?；瘜W(xué)本質(zhì)：3000～5000KD粘蛋白型糖蛋白。分泌(或表達(dá))：正常胰膽體液極微量，胚胎期間胎兒的胰腺、膽囊、肝、腸等組織存在這種抗原，消化道腫瘤高表達(dá)。主要臨床意義：消化道腫瘤篩選、檢測(cè)、胰腺癌診斷、預(yù)后判斷的較好指標(biāo)。第六十頁，共85頁。血清CA19-9升高見于：?胰腺癌、膽囊癌、膽管壺腹癌：陽性率約為74.9%，尤其是胰腺癌晚期患者。?胃癌陽性率約為50%，結(jié)直腸癌陽性率約為60%。?非惡性腫瘤：如急性胰腺炎、膽囊炎、膽汁淤積性膽管炎、肝硬化、肝炎等疾病。第六十一頁，共85頁。一、前列腺特異性抗原

（prostatespecialantigen，PSA）分子量約為34000含糖7％的糖蛋白分子由240個(gè)氨基酸組成具有蛋白酶的活性，和緩激肽家族的絲氨酸蛋白酶的氨基酸序列相似正常人PSA主要存在于精液中，其濃度（0.5～5.5g/L）約為血清（<0.4μg/L）的100萬倍，每克前列腺癌組織可使血清中PSA升高3μg/L，每克增生的列腺組織可使血清中PSA升高0.3μg/L。在血清中PSA以兩種生化形式存在，較少（5％～40％）的是游離型PSA（f-PSA），半衰期0.75～1.2小時(shí)；大量（60％～90％）存在的是復(fù)合型PSA（c-PSA），半衰期約2～3天，臨床上測(cè)定的是總PSA前列腺癌成功治療后，高濃度的PSA降到正常值約需2～3周。3.酶類腫瘤標(biāo)志物第六十二頁，共85頁。血清PSA升高見于：?前列腺癌：陽性率約為75%。?非惡性腫瘤：前列腺肥大、前列腺炎和泌尿生殖系統(tǒng)疾病。?采血前進(jìn)行直腸指診、前列腺按摩、導(dǎo)尿等，將導(dǎo)致血清PSA升高。第六十三頁，共85頁。（2）神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuronspecificenolase,NSE)

是烯醇化酶的一種同工酶，根據(jù)α、β、γ三個(gè)亞基的不同，可分為αα、ββ、γγ、αβ、αγ五種二聚體同工酶。α亞基主要存在于肝、腎等組織；β亞基主要存在于骨骼肌和心??；γ亞基主要存在于神經(jīng)組織。γγ同工酶屬神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞特有，故命名為神經(jīng)元特異性烯醇化酶。第六十四頁，共85頁?；瘜W(xué)本質(zhì)：87KD酸性蛋白酶，參與糖酵解。分泌(或表達(dá))：正常腦組織中含量最高，起源于神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞的腫瘤組織有異常表達(dá)。主要臨床意義：SCLC、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞腫瘤的診斷、預(yù)后判斷指標(biāo)。第六十五頁，共85頁。血清NSE升高見于：?SCLC：?神經(jīng)母細(xì)胞瘤、神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞腫瘤。?NSE也存在于正常紅細(xì)胞中，故溶血標(biāo)本影響測(cè)定。第六十六頁，共85頁。（3）α-L-巖藻糖苷酶

(α-L-fucosidase,AFU)

是原發(fā)性肝細(xì)胞癌的標(biāo)志物。化學(xué)本質(zhì)：溶酶體酸性水解酶，參與糖蛋白、糖脂和寡糖的代謝。分泌(或表達(dá))：廣泛分布于人體各種細(xì)胞的溶酶體內(nèi)以及血液和體液中，以往主要用于遺傳性AFU缺乏引起的巖藻糖苷貯積癥。主要臨床意義：原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌的診斷、預(yù)后判斷指標(biāo)。第六十七頁，共85頁。血清AFU升高見于：?原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌：小肝癌患者中AFU陽性率顯著高于AFP。?其他惡性腫瘤：如乳腺癌、肺癌、結(jié)直腸癌、子宮頸癌等有不同程度升高。?非惡性腫瘤：肝炎、肝硬化。?妊娠。第六十八頁，共85頁。（1）人絨毛膜促性腺激素

(humanchorionicgonadotroopin,hCG)本質(zhì)：45kD糖蛋白類激素，有α、β兩個(gè)亞基。分泌(或表達(dá))：胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞，惡性腫瘤異常表達(dá)。主要臨床意義：早孕，生殖細(xì)胞腫瘤的診斷、預(yù)后判斷指標(biāo)。4.激素類腫瘤標(biāo)志物第六十九頁，共85頁。血清hCG升高見于：?滋養(yǎng)層腫瘤和生殖細(xì)胞腫瘤：如葡萄胎、絨毛膜細(xì)胞癌、精原細(xì)胞睪丸癌等，絨癌100%升高。?其他惡性腫瘤：如乳腺癌、肺癌、胃腸道癌、胰腺癌等有不同程度升高。?非惡性腫瘤：如卵巢囊腫、子宮內(nèi)膜異位癥、肝硬化等。第七十頁，共85頁。（2）降鈣素

(calcitonin,CT)

本質(zhì)：3.5kD多肽激素。分泌(或表達(dá))：主要是甲狀腺濾泡旁細(xì)胞即C細(xì)胞分泌，惡性腫瘤異常表達(dá)。主要臨床意義：甲狀腺髓樣癌的診斷、預(yù)后判斷指標(biāo)。第七十一頁，共85頁。血清CT升高見于：?甲狀腺髓樣癌：?其他惡性腫瘤：如乳腺癌、肺癌、胃腸道癌、胰腺癌等有不同程度升高。?非惡性腫瘤：腎功能衰竭。?CT在血液中的半衰期很短約為10min，才標(biāo)本后應(yīng)及時(shí)處理，冷凍保存。第七十二頁，共85頁。（1）β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2M)本質(zhì)：分子量為11800的單鏈低分子量蛋白。分泌(或表達(dá))：人體除成熟紅細(xì)胞和胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞以外，所有的有核細(xì)胞都有β2M，特別是淋巴細(xì)胞表面。主要臨床意義：惡性腫瘤和腎臟疾病的診斷、預(yù)后判斷指標(biāo)。5.蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物第七十三頁，共85頁。血清β2M升高見于：?惡性腫瘤：如肝癌、肺癌、胃腸道癌、MM、淋巴瘤等有不同程度升高。。?腎臟疾病，如急慢性腎盂腎炎、腎小管損害等。?腎移植排斥反應(yīng)時(shí)，尿中β2M升高。?免疫性疾病，如SLE、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、AIDS等。第七十四頁，共85頁。（2）鐵蛋白(ferritin,Fer)

是體內(nèi)含鐵最豐富的蛋白，是判斷體內(nèi)是否缺鐵的敏感指標(biāo)。本質(zhì)：分子量為11800的單鏈低分子量蛋白。分泌(或表達(dá))：主要在肝臟合成，惡性腫瘤合成能力較強(qiáng)。

主要臨床意義：惡性腫瘤的診斷、預(yù)后判斷指標(biāo)。第七十五頁，共85頁。血清鐵蛋白升高見于：?惡性腫瘤：如白血病、淋巴瘤、胰腺、肺或肝臟的實(shí)體腫瘤及乳腺癌復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移時(shí)。?各種炎癥感染，急性心梗、反復(fù)輸血等。肝硬化、肝壞死及其他慢性肝病。?鐵蛋白<1.2ug/L時(shí)即可診斷為缺鐵，是診斷隱形缺鐵的可靠指標(biāo)。

第七十六頁，共85頁。6.其他腫瘤標(biāo)志物CA50——胰腺癌、結(jié)腸癌、胃癌等CA72-4——胃癌、黏液性卵巢癌等CA242——胰腺癌、結(jié)腸癌、胃癌等PAP——前列腺癌SCC——子宮頸癌、肺癌、頭頸部鱗癌唾液酸——肺癌、胃癌、肝癌、結(jié)腸癌、黑色素瘤EB病毒抗原/抗體——鼻咽癌、B細(xì)胞淋巴瘤TPA——前列腺癌、膀胱癌、消化道惡性腫瘤細(xì)胞角蛋白19片段——NSCLC第七十七頁，共85頁。（三）腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的注意事項(xiàng)1.標(biāo)本采集:

各種物理檢查對(duì)TM檢測(cè)的影響藥物對(duì)TM檢測(cè)的影響標(biāo)本保存對(duì)TM檢測(cè)的影響溶血標(biāo)本對(duì)TM檢測(cè)的影響酶類和激素類腫瘤標(biāo)志物的特點(diǎn)第七十八頁，共85頁。2.檢測(cè)方法和試劑：方法學(xué)的差異試劑盒的差異測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)化的問題

因此，在工作中要盡量使用同一種方法，同一種儀器和同一廠家的試劑盒進(jìn)行測(cè)定。第七十九頁，共85頁。

3.TM檢測(cè)的干擾因素⑴攜帶污染(carry-over)⑵“鉤狀效應(yīng)”（hookeffect）⑶嗜異性抗體：可導(dǎo)致在無抗原的情況下，出現(xiàn)腫瘤標(biāo)志物濃度增高的假象。嗜異性抗體可出現(xiàn)在曾被鼠或?qū)櫸镆?/p>