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文檔簡介
人巨細(xì)胞病毒pp抗原檢測第1頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三*人巨細(xì)胞病毒(CMV)感染甚為普遍*人巨細(xì)胞病毒(CMV)感染是免疫功能低下者的常見機(jī)會(huì)感染*器官移植后活動(dòng)性HCMV感染率為20-70%,如發(fā)生CMV肺炎,死亡率可達(dá)80-90%*CMV還有抑制機(jī)體免疫功能的作用,CMV感染可增加真菌和其他機(jī)會(huì)感染發(fā)生率,*還可能造成異基因移植物的損害。*目前對器官移植后CMV病的重點(diǎn)是預(yù)防,包括預(yù)防性抗病毒或針對CMV亞臨床感染(Preemptive)抗病毒治療治療。第2頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三
*早期檢測活動(dòng)性HCMV感染是pre-emptive治療的前提條件*CMV常規(guī)病毒培養(yǎng)(CCC)往往需4周才能獲陽性結(jié)果,對早期診斷幫助不大*CMV特異性抗體IgM,在嚴(yán)重免疫抑制患者可不出現(xiàn)或延遲出現(xiàn)。*人巨細(xì)胞病毒pp65白細(xì)胞抗原血癥較特異性抗體IgM陽性早出現(xiàn)30天1。優(yōu)點(diǎn)是可定量檢測,5小時(shí)內(nèi)可出結(jié)果。第3頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三
研究目的了解HCMVpp65抗原檢測在免疫功能低下者臨床HCMV疾病預(yù)測或早期診斷中的價(jià)值。了解HCMVpp65抗原檢測在監(jiān)測疾病活動(dòng)性和指導(dǎo)CMV““亞臨床感染抗病毒”治療中的價(jià)值。
應(yīng)用HCMVpp65抗原檢測分析免疫抑制病人CMV感染的危險(xiǎn)因素第4頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三
試驗(yàn)原理用免疫熒光標(biāo)記的單克隆抗體檢測CMV的低基質(zhì)磷蛋白pp65。
pp65的特點(diǎn)*CMV病毒復(fù)制的早期蛋白,它出現(xiàn)于病毒感染的早期,在細(xì)胞感染后3-4小時(shí)即開始出現(xiàn)*是CMV病毒含量最豐富的蛋白*其功能是將病毒的DNA錨定在受感染細(xì)胞的核膜上*在胞漿的高爾基體內(nèi)合成,然后運(yùn)回核內(nèi)。
第5頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三
CMVPP65抗原血癥檢測(一)分離白細(xì)胞及制片(二)固定和打孔(三)免疫熒光染色(四)、讀片和結(jié)果判斷第6頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第7頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第8頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三
試驗(yàn)結(jié)果第9頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第10頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第11頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第12頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第13頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第14頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第15頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第16頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第17頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第18頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第19頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第20頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第21頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第22頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第23頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第24頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三討論一pp65抗原血癥檢測直接檢測病毒蛋白的方法不受機(jī)體免疫功能的響,在檢測免疫抑制病人的CMV活動(dòng)性感染時(shí)尤其有用.
其檢出率明顯高于血清學(xué)方法特點(diǎn)為快速(手工操作4-5小時(shí))、敏感性高(活動(dòng)性感染80-90%,CMV病99-100%)和較高的特異性(77-95%)、可以定量測試用其指導(dǎo)治療明顯降低了死亡率
第25頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三
在骨髓移植中,可在發(fā)病早期診斷,亞臨床感染的檢出率偏低,應(yīng)尋求更好的預(yù)測方法,或調(diào)整診斷標(biāo)準(zhǔn)
不能檢測新毒株和抗原決定簇有變異的毒株治療后抗原血癥轉(zhuǎn)陰的病人少部分會(huì)復(fù)發(fā),應(yīng)結(jié)合更好的監(jiān)控療效的方法第26頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三一PP65檢測在監(jiān)測骨髓移植后CMV感染中的應(yīng)用1
---早期診斷*骨髓移植后早期用IGM來診斷CMV感染將貽誤治療*pp65抗原檢測可用于早期診斷,甚至預(yù)測發(fā)病*如果能在骨髓重建的早期檢測到對CMV的細(xì)胞免疫或體液免疫異?;蛞种苿t能更準(zhǔn)確地預(yù)測CMV感染。第27頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三第28頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三PP65檢測在監(jiān)測骨髓移植后CMV感染中的應(yīng)用2
-骨髓移植后CMV感染的危險(xiǎn)因素CD34+細(xì)胞分選GVHD(FK506)TBI
合并其他病原體感染第29頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三PP65檢測在監(jiān)測骨髓移植后CMV感染中的應(yīng)用3
--治療時(shí)間
細(xì)胞數(shù)多者和少者癥狀性感染的發(fā)病率是相近的
90%的癥狀性感染首次陽性抗原血癥的PP65陽性細(xì)胞數(shù)<10個(gè)/1.5×10(1-7)我們認(rèn)為這組病人只要發(fā)現(xiàn)陽性細(xì)胞即應(yīng)治療
第30頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三首次pp65抗原陽性細(xì)胞數(shù)與CMV疾病危險(xiǎn)性首次pp65抗原陽性細(xì)胞發(fā)病/活動(dòng)性感染計(jì)數(shù)例數(shù)
11/12-35/54-105/6>102/2
由于病例數(shù)少,無法進(jìn)行COX‘S比例危險(xiǎn)性分析.第31頁,共33頁,2023年,2月20日,星期三PP65在監(jiān)測自身免疫病病人CMV感染中的應(yīng)用
發(fā)熱的自身免疫病病人出現(xiàn)CMV感染發(fā)病率和死亡率均很高,CMV感染可能是重要的致病原較之白細(xì)胞減少機(jī)體免疫狀態(tài)異常和這種異常未被有效控制,可能是病毒活動(dòng)性復(fù)制的更主要的原因陽性細(xì)胞數(shù)
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