血液系統(tǒng)教學(xué)課件：造血細(xì)胞的發(fā)育和調(diào)控

造血細(xì)胞的發(fā)育和調(diào)控1血液-我該怎么形容你？2白血病治療面臨的困難：---化療和放療：復(fù)發(fā)率高---靶向治療：特異性靶點(diǎn)缺乏---造血干細(xì)胞移植：來(lái)源缺乏

白血病嚴(yán)重危害病人的身心健康：

---兒童青少年最為常見惡性疾病：約3-4/10萬(wàn)人,我國(guó)約400萬(wàn)病人---種類繁多：急性/慢性；髓系/淋巴細(xì)胞性---具有很高的致死率和復(fù)發(fā)率20白血病患者：我拿什么拯救你？4（NEnglJMed2011;365:725-733）（

修飾性嵌合性受體T細(xì)胞，CAR-T）5(CAR:chimericantigenreceptors)(Science,2013)腫瘤免疫治療-CAR-T

therapy6(抗體“導(dǎo)彈”）(腫瘤抗原）78201120142014部分臨床開發(fā)階段的免疫哨卡抑制劑910LeipingChen

winsWilliamB.ColeyAward“科學(xué)”雜志曾贊譽(yù)他的工作并確其為2013年的“年度突破”。陳博士對(duì)PD-L1

/

PD-1途徑研究的創(chuàng)新性突破及其在癌癥治療中的應(yīng)用，將使癌癥治療更為簡(jiǎn)便有效。Coley獎(jiǎng)是癌癥研究所年度研討會(huì)議的最高獎(jiǎng)項(xiàng)11大隅良典（YoshinoriOhsumi）：2016諾獎(jiǎng)野口英世（HideyoNoguchi）樋口一葉（

HiguchiIchiyo）16年17位諾貝爾獎(jiǎng)獲得者（2000-2016）12病例：患者，秦某，男，29歲，2014年1月25日以“口腔潰瘍兩月余，頭暈、乏力一月余”為主訴入院?；颊?個(gè)月前開始出現(xiàn)無(wú)明顯誘因口腔潰瘍，創(chuàng)面約1.5x0.8cm，伴頭痛飲食差，一月余前出現(xiàn)頭暈、乏力，伴眩暈，惡心，結(jié)膜蒼白，全身皮膚蒼白，貧血貌，全身散在出血點(diǎn)，無(wú)發(fā)熱，腹瀉胸悶等不適，至當(dāng)?shù)蒯t(yī)院就診診斷為“肺熱”為進(jìn)一步治療至我院。既往史：無(wú)“高血壓、糖尿病、心臟病史、無(wú)家族遺傳病史、無(wú)藥物過敏史”。輔助檢查：血常規(guī)：白細(xì)胞數(shù)0.20x10*9/L；紅細(xì)胞2.04x10*12/L；血紅蛋白24.0g/L；血小板總數(shù)6x10*9/L；骨髓象：骨髓增生嚴(yán)重低下，粒細(xì)增生低下，紅細(xì)增生低下，淋巴細(xì)胞比值增高，漿細(xì)胞比值相對(duì)增高。骨髓活檢顯示：造血組織6%，脂肪組織94%，骨髓組織增生低下，脂肪組織明顯增多，粒細(xì)胞系增生低下，紅細(xì)胞缺如，淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞比值相對(duì)增高，巨核細(xì)胞未見。請(qǐng)問該患者可能診斷是什么疾?。恐委熢瓌t如何？1314主要內(nèi)容一、造血的發(fā)生和場(chǎng)所二、造血發(fā)生的一般規(guī)律三、造血微環(huán)境結(jié)構(gòu)和功能四、造血發(fā)生的調(diào)控五、造血干細(xì)胞的歸巢和動(dòng)員六、骨髓移植和細(xì)胞治療15造血細(xì)胞（hematopoieticcells）16一、造血發(fā)生和場(chǎng)所17造血細(xì)胞：

紅細(xì)胞、粒細(xì)胞、巨核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞等18造血細(xì)胞的壽命和數(shù)量CelltypeApproximatelifespanProductionratecells/dayProductionratecells/secProductionrateKg/yearRedCells100days2x10112.3million7.3Neutrophilst?6hours3x1010350,00010.9Platelets7days1x10111.2million4.6Lymphocytest?10days1x1010116,0003.7Annualtotal26.5Kg產(chǎn)生和支持造血細(xì)胞增殖、分化和成熟的組織和器官：---肝臟---骨髓---脾臟---胸腺---淋巴結(jié)20造血場(chǎng)所（hematopoieticorgans）造血發(fā)生（hematopoiesis）定向造血（definitive)原始造血(primitive)21造血發(fā)生：

各種譜系造血細(xì)胞形成的過程（卵黃囊）（胎盤）（胎肝）（骨髓）（主動(dòng)脈-性腺-中腎區(qū)）胚胎期造血

中胚葉造血期：受孕2周～6周

---卵黃囊：僅原始紅細(xì)胞，即第1代巨幼紅細(xì)胞---主動(dòng)脈-性腺-中腎區(qū)（AGM)：造血干細(xì)胞的出現(xiàn)---胎盤的尿囊部

肝臟造血（主要造血場(chǎng)所）：6周～7個(gè)月---胎肝：紅細(xì)胞為主，即第2代巨幼紅細(xì)胞，胚胎4個(gè)月

后產(chǎn)生粒細(xì)胞和少量巨核細(xì)胞，5個(gè)月后逐漸減少---脾臟：紅細(xì)胞（3個(gè)月）、粒細(xì)胞及單核細(xì)胞（5個(gè)月后）

骨髓造血：6個(gè)月后

---產(chǎn)生紅細(xì)胞、粒細(xì)胞、巨核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞---除血紅蛋白F（HbF)，可合成少量的HbA和HbA2---血細(xì)胞形成的順序：紅細(xì)胞、粒細(xì)胞、巨核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞22造血部位

卵黃囊骨髓

肝臟

脾淋巴結(jié)

12345678910月23出生后造血5歲以下：所有骨骼的骨髓18歲以后：椎骨、胸骨、肋骨、骨骼干骺端等

淋巴器官造血---骨髓：B細(xì)胞發(fā)育成熟的場(chǎng)所，中樞淋巴器官---胸腺：T細(xì)胞發(fā)育成熟的場(chǎng)所---脾臟：大量T、B細(xì)胞構(gòu)成，B細(xì)胞成熟和免疫應(yīng)答---淋巴結(jié)：促進(jìn)T、B記憶細(xì)胞和抗原遞呈細(xì)胞接觸，免疫應(yīng)答髓外造血（extramedullaryhematopoiesis）：

在某些疾病狀態(tài)下（骨髓纖維化），肝、脾、淋巴結(jié)

等組織重新恢復(fù)胎兒期的造血功能

2425骨髓（bonemarrow）血細(xì)胞的主要產(chǎn)生場(chǎng)所：60億細(xì)胞/天/公斤體重海綿狀、膠狀或脂肪性組織組成：由結(jié)締組織、神經(jīng)、血管、基質(zhì)細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)以及造血細(xì)胞組成，約占體重的3.4%-5.9%

1）紅骨髓：造血活躍，造血細(xì)胞島，按區(qū)域造血2）黃骨髓：脂肪組織替代，潛在性造血組織主要造血場(chǎng)所26骨髓示意圖紅骨髓黃骨髓27骨髓（HE染色）28骨髓（HE染色）29淋巴器官可分為一級(jí)和二級(jí)淋巴器官一級(jí)淋巴器官：祖細(xì)胞定居和最初分化的場(chǎng)所---骨髓：B細(xì)胞、T細(xì)胞---胸腺：T細(xì)胞二級(jí)淋巴器官：對(duì)抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答的場(chǎng)所---脾臟---淋巴結(jié)---粘膜相關(guān)淋巴組織：扁桃體30胸腺：T細(xì)胞發(fā)育的場(chǎng)所3132脾臟對(duì)血源性抗原免疫反應(yīng)的主要產(chǎn)所：脾臟的結(jié)構(gòu)：白髓、邊緣帶、紅髓脾臟功能：紅細(xì)胞清除、血容量的調(diào)節(jié)、

免疫功能33脾臟結(jié)構(gòu)3435淋巴結(jié)：對(duì)組織抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答的主要產(chǎn)所3637二、造血發(fā)生的一般規(guī)律

38造血干細(xì)胞與造血發(fā)生39多能祖細(xì)胞髓系TheNobelPrize,1990ThomasE.DonnallfirstsuccsessfulHSCTintreatmentofacuteleukemiasThomasED,LochteHL,LuWC,FerrebeeJW.Intravenousinfusionofbonemarrowinpatientsreceivingradiationandchemotherapy.N.Engl.J.Med.1957;257:491.造血干細(xì)胞（HSC)定義：1）能進(jìn)行自我更新并分化成所有造血細(xì)胞的一群原始造血

細(xì)胞，占有核細(xì)胞的0.1％-0.5％，大部分處于G0期

2）兩大特性（干性或多能性，stemness）：---自我更新（self-renewal）

---分化（differentiation）41造血干細(xì)胞其他特點(diǎn)---對(duì)稱和不對(duì)稱分裂---異質(zhì)性：不同時(shí)期HSC分化潛能不同---類似于小淋巴細(xì)胞，無(wú)法從形態(tài)上區(qū)分

---免疫表型：Lin-CD34+CD38-CD90+Thy-1+

42（對(duì)稱分裂）（不對(duì)稱分裂）造血干細(xì)胞的分離和純化1.免疫表型（immunophenotype）Lineage(CD3,CD4,CD8,B220,Mac-1,Gr-1)HSC

CD34+CD90+CD38-Lin-Thy-1+2.流式細(xì)胞技術(shù)（fluorescence-activatedcellsorting，F(xiàn)ACS）Calibur43體外分析

1）流式分析：頻率、周期、凋亡2）卵石區(qū)形成細(xì)胞分析（cobblestoneareaformingassay,CFAC）:

以基質(zhì)細(xì)胞作為支持細(xì)胞用來(lái)培養(yǎng)HSC。接種后的1-5周內(nèi)，在該培

養(yǎng)體系中，干細(xì)胞和祖細(xì)胞以一種稱為鵝卵石區(qū)的特殊方式生長(zhǎng)，表

現(xiàn)為一個(gè)平的、密集的、與基質(zhì)細(xì)胞緊密相連的細(xì)胞群3）長(zhǎng)期培養(yǎng)起始細(xì)胞培養(yǎng)分析（long-termculture-initiatingcellassay，LTC-IC）:預(yù)先將培養(yǎng)物在基質(zhì)細(xì)胞層上培育5-8周，然后再在半固體

培養(yǎng)體系中培養(yǎng)，能夠形成混合細(xì)胞集落

造血干細(xì)胞的研究技術(shù)44CFACLTC-IC體外培養(yǎng)45體內(nèi)分析

1）骨髓重建分析（SCIDrepopulatingcells,SRC):反映HSC干性的金標(biāo)準(zhǔn)

造血干細(xì)胞的研究技術(shù)DonorHSC250cGyRecipientNOD-SCIDmiceCD34CD454monthslater46骨髓異常增生綜合征正常骨髓再生障礙性貧血造血祖細(xì)胞（progenitorcells）定義：由HSC分化而來(lái)，喪失了自我更新能力，但具有分化成不同譜系細(xì)胞能力的過渡性、增殖性細(xì)胞群多能祖細(xì)胞（multipotentprogenitorcells）：缺乏自我更新能力，但能分化成所有譜系的造血細(xì)胞定向祖細(xì)胞（committedprogenitorcells）：缺乏自我更新能力，僅能定向分化成某一譜系細(xì)胞體外分析手段：1）流式分析技術(shù)2）克隆形成實(shí)驗(yàn)（colony-formingunits，CFU)

48克隆形成實(shí)驗(yàn)1）紅細(xì)胞爆式集落形成單位：（BFU-E）2）紅細(xì)胞集落形成單位：（CFU-E）3）粒細(xì)胞/紅細(xì)胞/單核細(xì)胞/巨核細(xì)胞集落形成單位（CFU-GEMM）4）粒細(xì)胞集落形成單位（CFU-G）5）單核細(xì)胞集落形成單位（CFU-M）6）粒細(xì)胞/單核細(xì)胞集落形成單位（CFU-GM）7）巨核細(xì)胞集落形成單位（CFU-M）8）嗜酸性細(xì)胞集落形成單位（CFU-Eo）9）嗜堿性細(xì)胞集落形成單位（CFU-Bas）10）T淋巴細(xì)胞集落形成單位（CFU-TL）11）B淋巴細(xì)胞集落形成單位（CFU-BL）4950造血祖細(xì)胞的來(lái)源（干細(xì)胞）（多能祖細(xì)胞）（定向祖細(xì)胞）（成熟細(xì)胞）（長(zhǎng)期-造血干細(xì)胞）（短期-造血干細(xì)胞）造血細(xì)胞的增殖、分化和成熟增殖（proliferation)：通過有絲分裂進(jìn)行復(fù)制的過程分化（differentiation）：基因調(diào)控下的一般向特殊的演變，新功能的獲得成熟（maturation）：由原始幼稚細(xì)胞到終末細(xì)胞分化，形態(tài)特征逐漸明確的過程釋放（release）：終末細(xì)胞通過骨髓-血屏障進(jìn)入血液循環(huán)的過程52造血細(xì)胞的增殖有絲分裂（對(duì)稱性增殖）具有分裂能力的細(xì)胞階段長(zhǎng)期干細(xì)胞多能性祖細(xì)胞定向祖細(xì)胞成熟細(xì)胞短期干細(xì)胞前體細(xì)胞53造血細(xì)胞成熟的階段3個(gè)階段：原始幼稚成熟紅系和粒系幼稚階段：早幼中幼晚幼五大系統(tǒng)：紅細(xì)胞系、粒細(xì)胞系、淋巴細(xì)胞系、單核細(xì)胞系、巨核細(xì)胞系

54造血細(xì)胞成熟的一般過程55分化成熟過程的一般規(guī)律細(xì)胞大小:逐漸降低，但巨核細(xì)胞例外核質(zhì)比：逐漸降低核：逐漸變?。t細(xì)胞:缺乏；

巨核細(xì)胞：逐近增加）核形狀：圓形→凹形→分節(jié)狀染色質(zhì)：細(xì)致→粗糙；疏松→致密核仁：數(shù)量和大小逐漸降低→消失核染色：淡紫色→深紫色胞漿：逐漸增加胞質(zhì)染色：藍(lán)色→其他顏色著色顆粒：粒細(xì)胞中逐漸增加血紅蛋白：紅細(xì)胞中逐漸增加有絲分裂能力：逐漸降低（淋巴細(xì)胞除外）56紅細(xì)胞發(fā)育過程血紅蛋白R(shí)NA含量細(xì)胞大小57造血干細(xì)胞原紅細(xì)胞早幼紅中幼紅晚幼紅網(wǎng)織紅成熟紅細(xì)胞58粒細(xì)胞發(fā)育過程原粒細(xì)胞(成髓細(xì)胞）：15-20mM，核細(xì)致疏松，含2-5個(gè)核仁，胞漿少無(wú)顆粒早幼粒細(xì)胞（前髓細(xì)胞）：體積略大，核偏離，開始出現(xiàn)原始嗜苯胺藍(lán)的顆粒中幼粒細(xì)胞（髓細(xì)胞）：體12-18mM

，核致密，核仁消失，開始出現(xiàn)不同特殊顆粒晚幼粒細(xì)胞(后髓細(xì)胞）：核呈腎型桿狀核細(xì)胞：核呈帶狀，直徑均一分葉核細(xì)胞：核呈3葉，含特殊顆粒59巨核細(xì)胞發(fā)育過程60不同階段的造血細(xì)胞造血干細(xì)胞造血祖細(xì)胞成熟的細(xì)胞約占骨髓細(xì)胞的0.05%能進(jìn)行自我更新能分化成所有譜系細(xì)胞處于靜息狀態(tài)比較穩(wěn)定細(xì)胞群無(wú)法從形態(tài)上區(qū)分可通過體內(nèi)功能實(shí)驗(yàn)衡量其干性（自我更新和分化）約占骨髓細(xì)胞的3%不能進(jìn)行自我更新能定向分化為譜系細(xì)胞處于過度階段的細(xì)胞群處于增殖期的細(xì)胞群無(wú)法從形態(tài)上區(qū)分可通過體外克隆形成實(shí)驗(yàn)衡量約占骨髓細(xì)胞的95%以上終末分化的細(xì)胞群有比較確定的壽命時(shí)間可通過形態(tài)辨認(rèn)小結(jié)6162造血細(xì)胞的層級(jí)分化譜6364多能祖細(xì)胞髓系三、造血微環(huán)境結(jié)構(gòu)和功能

定義：對(duì)造血細(xì)胞發(fā)育起關(guān)鍵支持作用的局部微環(huán)境（microenviroment)，又稱龕（niche）組成：由血管系統(tǒng)、神經(jīng)成分、各種類型非造血/造血細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)以及其他結(jié)締組織造血干細(xì)胞(hematopoieticstemcell，HSC)及其微環(huán)境6566血管系統(tǒng)血竇(sinusoid)：骨髓-血屏障，造血索營(yíng)養(yǎng)能量等物質(zhì)交換調(diào)控血細(xì)胞的釋放調(diào)節(jié)組織內(nèi)酸堿度、PO2、PCO267血竇的形態(tài)MECA32血竇小動(dòng)脈68來(lái)自脊神經(jīng)，分布于骨髓動(dòng)脈、骨內(nèi)膜或造血細(xì)胞作用：影響血管擴(kuò)張和收縮，調(diào)節(jié)血細(xì)胞的功能骨髓神經(jīng)（神經(jīng)纖維）（神經(jīng)纖維）691）成骨細(xì)胞2）內(nèi)皮細(xì)胞3）網(wǎng)狀細(xì)胞4）間充質(zhì)干細(xì)胞5）成纖維樣細(xì)胞6）脂肪細(xì)胞7）巨核細(xì)胞8）巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞9）破骨細(xì)胞10）其他類型細(xì)胞細(xì)胞組成（nichecell）（脂肪細(xì)胞）（成骨細(xì)胞）（破骨細(xì)胞）（間充質(zhì)干細(xì)胞）（巨噬細(xì)胞）（內(nèi)皮細(xì)胞）（網(wǎng)狀細(xì)胞）血竇70與造血干細(xì)胞直接接觸并維持其功能形成低氧微環(huán)境分泌CXCL12、TGF-b維持干細(xì)胞增殖和分化可能主要是祖細(xì)胞微環(huán)境？成骨細(xì)胞的功能71（成骨細(xì)胞）內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)免疫組化免疫組化肝臟72與造血干細(xì)胞直接接觸并維持其功能分泌Notch配體、TGF-b維持干祖細(xì)胞增殖和分化分泌E-選擇素調(diào)節(jié)造血細(xì)胞的粘附功能內(nèi)皮細(xì)胞的功能（內(nèi)皮細(xì)胞）73支持作用：合成網(wǎng)狀纖維并交織成網(wǎng)分泌CXCL12調(diào)控造血干細(xì)胞的自我更新和分化，是分泌CXCL12最豐富的細(xì)胞，又稱CAR細(xì)胞表達(dá)SCF、TPO促進(jìn)造血干細(xì)胞的發(fā)育和分化外膜網(wǎng)狀細(xì)胞的功能（網(wǎng)狀細(xì)胞）74（間充質(zhì)干細(xì)胞）（交感神經(jīng)）間充質(zhì)干細(xì)胞的功能分泌CXCL12調(diào)控造血干細(xì)胞的自我更新和分化調(diào)控造血干細(xì)胞生物鐘75Niche

cell功能小結(jié)細(xì)胞直接接觸作用分泌細(xì)胞因子通過中間細(xì)胞的間接作用表達(dá)促進(jìn)歸巢相關(guān)分子產(chǎn)生胞外基質(zhì)76基質(zhì)類型：糖蛋白、蛋白多糖、膠原1）蛋白聚糖2）纖連蛋白3）膠原蛋白4）腱生蛋白5）成粘連蛋白6）玻連蛋白7）血小板反應(yīng)素8）整合素9）其他基質(zhì)蛋白胞外基質(zhì)77主要功能與造血細(xì)胞的粘附有關(guān)調(diào)控造血干祖細(xì)胞和骨髓基質(zhì)細(xì)胞間的重要橋梁細(xì)胞間信息傳遞的基礎(chǔ)調(diào)控干祖細(xì)胞的增殖和分化（層粘連蛋白）（腱生蛋白）（整合素b1）78造血干細(xì)胞骨髓微環(huán)境的類型骨內(nèi)膜微環(huán)境血管周圍環(huán)境7980Nature，2009Angplts通過LILRB2促進(jìn)造血干細(xì)胞的擴(kuò)增AngptlsLILRB2HSC鄭俊克等，Nature(2012)LILRB2屬于一類

免疫抑制性受體維持造血干細(xì)胞和

白血病干細(xì)胞自我更新四、造血發(fā)生的調(diào)控細(xì)胞“誕生”細(xì)胞“離開”造血發(fā)生的調(diào)控內(nèi)在因素：1）重要的信號(hào)通路：Wnt、Notch

2）表觀遺傳：甲基化、乙?；⒘u基化等3）原癌基因和抑癌基因：Ras、p53、Rb等4）轉(zhuǎn)錄因子：---自我更新：HoxB4、Bim1、Meis1等---分化：GATA1（紅系）、C/EBPa（粒系）、Pax5（B細(xì)胞）、GATA3（T細(xì)胞）等84造血發(fā)生調(diào)控的內(nèi)在因素85SclRunx1Bim1/Meis1Hum.Mol.Genet.210-219,2006Osteoblastniche造血發(fā)生調(diào)控的內(nèi)在因素86造血發(fā)生的調(diào)控外在因素（骨髓微環(huán)境）：

1）細(xì)胞因子：SCF、TPO、IL-3、IL6等2）Niche細(xì)胞分泌成分：CXCL12、ANG1、ANGPTLs等3）胞外基質(zhì)：蛋白聚糖、成粘連蛋白、整合素等4）配體-受體的介導(dǎo)的信號(hào)通路87細(xì)胞因子的定義和特性定義：由基因編碼的細(xì)胞外信號(hào)分子，由多種骨髓細(xì)胞和內(nèi)分泌器官產(chǎn)生并調(diào)控細(xì)胞增殖和分化特性：1）低濃度即可發(fā)揮作用、功能多樣

2）不同細(xì)胞因子針對(duì)不同階段發(fā)育階段的細(xì)胞

3）通常可在不同譜系細(xì)胞中發(fā)揮作用4）不同的因子間具有協(xié)同效應(yīng)88干細(xì)胞因子（SCF）fam樣酪氨酸激酶受體3（Flt3-L，F(xiàn)L）集落刺激因子（CSF）白細(xì)胞介素（IL）紅細(xì)胞生成素（EPO）血小板生成素（TPO）轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）腫瘤壞死因子-α、β（TNF-α、β）白血病抑制因子（LIF）干擾素α、β、γ（IFN-α、β、γ）趨化因子（CK）常見的細(xì)胞因子89分類和作用細(xì)胞根據(jù)來(lái)源分類1）近程因子：有骨髓基質(zhì)細(xì)胞分泌：CSF、IL-32）遠(yuǎn)程因子：EPO（腎皮質(zhì)）、TPO（肝臟）根據(jù)作用時(shí)間分類

1）早期作用細(xì)胞因子：SCF、Flt3-L、IL-3、IL-62）晚期作用細(xì)胞因子：G-CSF、M-CSF、EPO、TPO根據(jù)作用方式分類：正向或負(fù)向調(diào)控因子

90細(xì)胞因子作用細(xì)胞SCF、Flt3-LHSCGM-CSFCFU-GMG-CSFCFU-GM-CSFCFU-MMeg-CSFCFU-MegIL-3CFU-GEMMIL-6BcellprogenitorcellsIL-1TcellprogenitorcellsIL-5CFU-EosEPOCFU-ETPO、IL-11CFU-Megandplatelate正向調(diào)節(jié)因子91細(xì)胞因子作用細(xì)胞TGF-β抑制干祖細(xì)胞的增殖TNF-a,b抑制各種祖細(xì)胞的增殖IFN-a,b,g調(diào)節(jié)免疫、抗病毒、抗腫瘤、抗增殖LIF抑制胚胎干細(xì)胞和造血干細(xì)胞的分化PF4抑制巨核細(xì)胞增殖MIP-1α抑制祖細(xì)胞集落形成負(fù)向調(diào)節(jié)因子92細(xì)胞因子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)之小結(jié)93臨床價(jià)值促進(jìn)腎源性貧血病人紅細(xì)胞生成促進(jìn)由于治療導(dǎo)致的骨髓抑制病人的恢復(fù)增強(qiáng)殺傷腫瘤細(xì)胞促進(jìn)惡性細(xì)胞的分化增強(qiáng)免疫系統(tǒng)功能治療骨髓衰竭病人94造血發(fā)生的調(diào)控細(xì)胞“誕生”細(xì)胞“離開”造血細(xì)胞的凋亡（apoptosis）定義：是在基因調(diào)控下細(xì)胞主動(dòng)死亡過程，是生理性過程，即程序性死亡（programmedcelldeath）細(xì)胞凋亡相關(guān)信號(hào)通路9697形態(tài)上改變：1）細(xì)胞膜：胞體變小、胞膜出現(xiàn)不規(guī)則突起2）細(xì)胞核：固縮并破裂為片段3）細(xì)胞質(zhì)：線粒體空泡狀、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)大4）凋亡小體形成生化特征：核酸內(nèi)切酶激活、DNA降解、

細(xì)胞色素c釋放等造血細(xì)胞的凋亡（apoptosis）凋亡和壞死98特征細(xì)胞凋亡細(xì)胞壞死誘發(fā)因素特定的或生理性各種病理性細(xì)胞數(shù)量單個(gè)細(xì)胞丟失成群細(xì)胞死亡細(xì)胞膜完整保持腫脹溶解破壞線粒體腫脹、細(xì)胞色素c釋放腫脹、破裂細(xì)胞器完整損傷細(xì)胞核固縮破裂為片段溶解、破碎染色質(zhì)凝集呈半月狀模糊、疏松核DNA降解為完整倍數(shù)大小的片段隨機(jī)不規(guī)則斷裂凝膠電泳梯狀條帶形分散形態(tài)內(nèi)容物釋放無(wú)有炎癥反應(yīng)無(wú)有細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死的區(qū)別99細(xì)胞凋亡的檢測(cè)和意義常用檢測(cè)方法：1）電子顯微鏡檢查2）流式細(xì)胞分析檢測(cè)：磷脂酰絲氨酸外翻3）線粒體膜電位：線粒體熒光探針4）DNA片段化檢測(cè)：TUNEL生物學(xué)意義：1）清除了無(wú)用、多余、發(fā)育異常的細(xì)胞2）保持造血細(xì)胞數(shù)量和功能的恒定100電鏡和流式圖片PIAnnexinV101五、造血干細(xì)胞的歸巢和動(dòng)員歸巢（homing）：---造血干細(xì)胞從外周血定位到骨髓Niche的過程---有助于造血干細(xì)胞干性維持和血液系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài)動(dòng)員（mobilization）：---造血干細(xì)胞從骨髓Niche遷徙到外周血的過程---有助于維持急性狀態(tài)下機(jī)體造血細(xì)胞的補(bǔ)充---骨髓移植的應(yīng)用102造血干細(xì)胞的歸巢和動(dòng)員模式圖103六、骨髓移植和細(xì)胞治療造血干細(xì)胞的應(yīng)用：

---血液性疾病治療：白血病等

---基因治療：遺傳性疾病異體骨髓移植面臨的嚴(yán)峻挑戰(zhàn)：---造血干細(xì)胞來(lái)源的缺乏

---主要組織相容性復(fù)合物(MHC)配型的低成功率---其他來(lái)源造血干細(xì)胞數(shù)量有限

---移植物抗宿主疾病(GVHD)的高發(fā)生率（bonemarrowtransplantation

andcelltherapy）104造血干細(xì)胞的干性維持：

---自我更新和分化

---以正常造血干細(xì)胞代替異常造血干細(xì)胞---重建造血和免疫功能骨髓移植分類1）按供者細(xì)胞來(lái)源

---自體骨髓移植：造血干細(xì)胞來(lái)源于病人本身---同基因異體移植：造血干細(xì)胞來(lái)源于同卵雙生的雙胞胎---異基因異體移植：造血干細(xì)胞來(lái)源于MHC配體的供著2）按細(xì)胞類型：骨髓移植、外周血干細(xì)胞移植、臍血干細(xì)胞移植骨髓移植的原理和分類105造血干細(xì)胞的動(dòng)員和收集造血干細(xì)胞移植106體外擴(kuò)增后的造血干細(xì)胞？骨髓移植的未來(lái)方向107無(wú)關(guān)供者骨髓移植？骨髓移植的未來(lái)方向1092008年