傳染病疫情樣品采樣

傳染病疫情樣品采樣第1頁/共29頁

傳染病疫情病原學(xué)簡介樣本采集標(biāo)本保存和運輸實驗室檢測

主要內(nèi)容第2頁/共29頁傳染病疫情病原學(xué)簡介手足口病疫情：EV71，COXA16等腸道病毒流感樣疫情：流感病毒、腺病毒、肺炎支原體、呼吸道合胞病毒等胃腸炎疫情：諾如病毒、輪狀病毒、霍亂弧菌、志賀菌、沙門氏菌、致瀉性大腸桿菌等H7N9流感疫情：H7N9流感病毒傷寒、副傷寒：傷寒、副傷寒沙門氏菌第3頁/共29頁樣品正確采集、保存、運輸?shù)囊饬x樣品的正確采集、保存與運輸，是獲得正確檢測結(jié)果，采取針對性有效手段控制相應(yīng)傳染病的必要前提。檢測結(jié)果與樣品質(zhì)量密切相關(guān)。第4頁/共29頁影響樣品質(zhì)量的因素采樣時間樣品采集類別選擇合適的保存液保存條件（常溫、低溫、適溫、冷凍）送檢是否及時第5頁/共29頁病毒采樣管第6頁/共29頁細(xì)菌采樣管第7頁/共29頁標(biāo)本采集人員病毒的診斷取決于高質(zhì)量標(biāo)本的采集，及其保存運輸?shù)拳h(huán)節(jié)。醫(yī)療機構(gòu)的醫(yī)生、護(hù)士或疾病預(yù)防控制中心專業(yè)人員負(fù)責(zé)標(biāo)本采集并填寫標(biāo)本登記表，標(biāo)本采集人員按照相關(guān)要求做好個人防護(hù)。第8頁/共29頁標(biāo)本采集登記表第9頁/共29頁個人防護(hù)設(shè)備（PPE）采集前的準(zhǔn)備口罩(N-95orN/P/R-100)手套帽子鞋套防護(hù)服防護(hù)目鏡第10頁/共29頁采集物品包采集前的準(zhǔn)備第11頁/共29頁常用的采樣液/病毒運輸液(VTM）采集前的準(zhǔn)備pH7.4～7.6的Hanks液MEM/DMEM液在采樣液中需加入抗菌素，可用青霉素（終濃度為100U/ml）、慶大霉素（終濃度為1mg/ml）和抗真菌藥物（終濃度為2μg/ml）。在無菌的帶螺旋塑料管分裝2-3ml采樣液。最好儲存在:–20℃,4℃可放48–96h,室溫1–2天。采樣拭子：使用頭部為聚酯纖維的病毒采樣拭子（鼻及口咽型），鋁或塑料做柄，不用木柄棉拭子。第12頁/共29頁上呼吸道標(biāo)本：咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液下呼吸道標(biāo)本：氣管吸取物、肺洗液、肺組織標(biāo)本血清標(biāo)本：急性期血清和間隔2-4周的恢復(fù)期血清全血標(biāo)本：急性期非抗凝血消化道標(biāo)本：糞便、肛拭子、嘔吐物腦脊液標(biāo)本蟲媒標(biāo)本：蚊子、蜱蟲等動物標(biāo)本：血清、組織等、環(huán)境標(biāo)本：糞便等排泄物、環(huán)境表面涂抹物、污水等標(biāo)本種類第13頁/共29頁應(yīng)當(dāng)盡量采集病例發(fā)病早期的呼吸道或糞便標(biāo)本癥狀出現(xiàn)后盡早采集盡量在抗病毒藥物使用前采集血清標(biāo)本應(yīng)采集發(fā)病早期和恢復(fù)期雙份血清環(huán)境標(biāo)本采集要注意溯源性標(biāo)本采集注意點第14頁/共29頁咽拭子標(biāo)本采集用2根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子同時擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將拭子頭浸入含3ml采樣液的管中，尾部棄去，旋緊管蓋?！獭恋?5頁/共29頁標(biāo)本采集2、肛拭子棉拭子應(yīng)插入肛門直腸內(nèi)（約2-5cm），采樣后應(yīng)該在棉拭子上看見糞便,采樣后肛拭子應(yīng)埋入C-B培養(yǎng)基或HANKS保存液中。第16頁/共29頁標(biāo)本采集3、血清采集5ml靜脈血加入消毒試管中，離心分離血清，放入帶螺旋蓋管內(nèi)，于-20℃以下保存。第17頁/共29頁標(biāo)本采集4、物體表面涂抹物用棉拭子先蘸入采樣液，然后在物體表面來回擦拭3-5次，將拭子頭浸入含3ml采樣液的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。第18頁/共29頁盡快運到實驗室24小時內(nèi)可以檢測的可以保存在4℃，超過24小時-70℃凍存。避免反復(fù)凍融血清標(biāo)本暫時存在可在4℃冰箱，長期保存于-20℃冰箱。

標(biāo)本保存第19頁/共29頁流感樣疫情標(biāo)本采集要點樣品種類：咽拭子、鼻拭子、含漱液采集時間：發(fā)病3天內(nèi)（體溫≥38℃）保存條件：24小時內(nèi)存于4℃以下環(huán)境，超過24小時存于-70℃以下環(huán)境（避免反復(fù)凍融）。病毒采樣管：HANKS液（2~3ml/管）及時送檢要求：疫情樣本建議當(dāng)天送檢，監(jiān)測標(biāo)本根據(jù)送檢時間選擇合適的保存條件。標(biāo)本的包裝必需低溫轉(zhuǎn)運且保證標(biāo)本四周帶冰。第20頁/共29頁胃腸炎疫情標(biāo)本采集要點樣品種類：肛拭子、糞便（5~10ml或g，拇指大小）、嘔吐物等采集時間：癥狀出現(xiàn)1~4日內(nèi)糞便或肛拭子；保存條件：24小時內(nèi)存于4℃以下環(huán)境，超過24小時存于-70℃以下環(huán)境。病毒采樣管：HANKS液（2~3ml/管）及時送檢要求：同流感檢測樣品要求第21頁/共29頁手足口病標(biāo)本采集要點樣品：咽拭子、肛拭子、糞便、皰疹液采集時間：發(fā)病7日內(nèi)糞便（5~10ml或g，拇指大小，不用加保存液）或肛拭子；發(fā)病3日內(nèi)咽拭子（或深咳痰）。皰疹液（75%酒精消毒）保存條件：24小時內(nèi)存于4℃以下環(huán)境。超過24小時存于-70℃以下環(huán)境。病毒采樣管：HANKS液（2~3ml/管）及時送檢要求：重癥或暴發(fā)疫情樣本24小時內(nèi)送到實驗室。第22頁/共29頁禽流感外環(huán)境標(biāo)本采集要點樣品種類：禽類籠具擦拭標(biāo)本、宰殺案板擦拭標(biāo)本、禽類糞便、清洗禽類的污水等保存條件：24小時內(nèi)存于4℃以下環(huán)境，超過24小時存于-70℃以下環(huán)境。病毒采樣管：HANKS液（2~3ml/管）第23頁/共29頁傷寒副傷寒病例標(biāo)本采集要點樣品：肛拭子、糞便、血液采集時間：發(fā)病2~3周糞便（5~10ml或g，拇指大小，不用加保存液）或肛拭子；發(fā)病1~2周血液（10ml）保存條件：血液注入血培養(yǎng)瓶及時送實驗室培養(yǎng)；肛拭子埋入C-B培養(yǎng)基中，4℃保存不超過3天。及時送檢要求：重癥或暴發(fā)疫情樣本及時送到實驗室。第24頁/共29頁標(biāo)本包裝和運輸標(biāo)本必須放在密封的帶螺旋蓋的、耐低溫的塑料管內(nèi)，直接在塑料管上用油性記號筆寫明編號、種類、姓名及采樣日期，再放入塑料密封袋內(nèi)，每袋裝一份標(biāo)本同時將標(biāo)本有關(guān)信息填入標(biāo)本送檢單送檢單應(yīng)信息完整，放入另一塑料袋內(nèi)，不能與標(biāo)本放置一起第25頁/共29頁專用標(biāo)本運送箱第26頁/共29頁檢測PCR快速檢測1、RT-PCR2、QRT-PCR血清學(xué)檢測1