動物細胞培養(yǎng)

動物細胞培養(yǎng)第一頁，共十九頁，2022年，8月28日動物細胞工程常用的技術手段：動物細胞培養(yǎng)、動物細胞核移植、動物細胞融合、單克隆抗體思考：植物細胞工程常用的技術手段有哪些？植物組織培養(yǎng)、

植物體細胞雜交強調(diào)：動物細胞培養(yǎng)技術是其他動物細胞工程技術的基礎。第二頁，共十九頁，2022年，8月28日動物細胞培養(yǎng)發(fā)展歷史

20世紀初，人們不知道神經(jīng)纖維是由神經(jīng)細胞的細胞質(zhì)向外突出形成的，還是由神經(jīng)細胞周圍的其他細胞融合而成的。生物學家們就這個問題展開了激烈的爭論。1907年，美國生物學家哈里森(Harrison)從蝌蚪的脊索中分離出神經(jīng)組織，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培養(yǎng)。蝌蚪的神經(jīng)組織存活了好幾周，并且從神經(jīng)細胞中長出了神經(jīng)纖維。哈里森的實驗不僅解決了神經(jīng)纖維的起源問題，而且開創(chuàng)了動物組織培養(yǎng)的先河。此后，在許多科學家的不懈努力下，動物組織培養(yǎng)不斷改進并逐漸發(fā)展成為動物細胞培養(yǎng)。補充：第三頁，共十九頁，2022年，8月28日問題討論:

燒傷病人的治療通常是取燒傷病人的健康皮膚進行自體移植，但對于大面積燒傷病人來講，健康皮膚很有限，請同學們想一想如何來治療該病人？取該患者的皮膚進行細胞培養(yǎng),獲得足量的細胞后再移植第四頁，共十九頁，2022年，8月28日你知道嗎?第五頁，共十九頁，2022年，8月28日探究1、植物組織培養(yǎng)過程要將組織分散成單個細胞嗎？２、動物細胞培養(yǎng)過程將組織分散成單個細胞嗎？３、為何動物細胞培養(yǎng)過程將組織分散成單個細胞的呢？４、如何將動物組織分散成單個的細胞呢？５、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可說明細胞間的物質(zhì)是什么成份？沒有是成塊的組織細胞靠在一起,彼此限制了細胞的生長和增殖先用剪刀剪碎,后用蛋白酶處理胰蛋白酶水解蛋白質(zhì)細胞間的成份是蛋白質(zhì)第六頁，共十九頁，2022年，8月28日６、細胞膜的主要成份是什么？７、胰蛋白酶能將細胞消化掉嗎？８、既然胰蛋白酶能將細胞消化掉，那將動物組織分散成單個細胞要注意什么問題呢？９、能夠用胃蛋白酶代替胰蛋白酶嗎？為什么？１０、動物細胞培養(yǎng)取材時，一般是取胚胎組織或幼齡動物的組織或器官，請解釋原因？蛋白質(zhì)和磷脂能注意時間的控制不能，因為動物細胞培養(yǎng)適宜的PH為7.2—7.4，此環(huán)境下胃蛋白酶（2.0）沒有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性較高。胚胎組織或幼齡動物的組織或器官分裂、增殖旺盛探究第七頁，共十九頁，2022年，8月28日11、動物細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)表面為何要光滑、無毒？12、培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)到什么時候就不再分裂、增殖？13、如此時細胞數(shù)量并未達到人們的需求，應該怎樣辦？易于培養(yǎng)細胞貼壁，進行生長增殖當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞分裂就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象叫接觸抑制。將貼滿細胞壁的細胞用胰蛋白酶處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細胞繼續(xù)增殖。這樣的過程叫做傳代培養(yǎng)探究第八頁，共十九頁，2022年，8月28日14、如何理解原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？15、傳代培養(yǎng)的細胞都能一直傳代下去嗎？16、有些為何能一直傳下去嗎？17、動物細胞培養(yǎng)就是為了得到這些細胞嗎？18、人類一般保存的是哪類細胞呢？為什么？上述過程中，在第一培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)就是原代培養(yǎng)，之后轉(zhuǎn)移到其它培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)就是傳代培養(yǎng)不都能發(fā)生突變，朝著癌細胞方向發(fā)展不是保存10代以內(nèi)的細胞，因為10－50代部分細胞的細胞核型可能發(fā)生變化，有少部分遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，發(fā)生突變向癌細胞方向發(fā)展。探究第九頁，共十九頁，2022年，8月28日一、動物細胞培養(yǎng)

動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體內(nèi)取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。1、概念：第十頁，共十九頁，2022年，8月28日2、過程

幼齡動物取動物器官和組織剪碎組織胰蛋白酶處理細胞培養(yǎng)單個細胞第十一頁，共十九頁，2022年，8月28日有關概念原代培養(yǎng)：從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞為原代細胞。培養(yǎng)的第1代細胞與傳10代以內(nèi)的細胞稱為原代細胞培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：將原代細胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細胞懸浮液，分裝到兩個或兩個以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。第十二頁，共十九頁，2022年，8月28日

細胞株：原代細胞一般傳至10代左右細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數(shù)細胞存活到40~50代，這種傳代細胞為細胞株。

細胞系：細胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細胞為細胞系。

細胞株和細胞系的區(qū)別：細胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。有關概念第十三頁，共十九頁，2022年，8月28日探究：多細胞動物和人體的細胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學的知識，認為體外培養(yǎng)細胞應該模擬內(nèi)環(huán)境的哪些內(nèi)容呢？第十四頁，共十九頁，2022年，8月28日1、無菌、無毒

2、全部的營養(yǎng)物質(zhì)

3、適宜的溫度和PH值

4、必要的氣體條件（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）（葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等。）保證細胞順利的生長增殖36.5+（-）0.5度O2和CO2（95%空氣和5%CO2）3、條件：維持培養(yǎng)液的PH第十五頁，共十九頁，2022年，8月28日細胞的全能性細胞株、細胞系植株培養(yǎng)結果獲得細胞或細胞產(chǎn)物快速繁殖、培育無病毒植株等培養(yǎng)目的葡萄糖、動物血清蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質(zhì)細胞增殖原理動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項目植物細胞和動物細胞培養(yǎng)的比較第十六頁，共十九頁，2022年，8月28日

4、應用大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品（病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體）作為基因工程中的受體細胞培養(yǎng)的動物細胞可以用于檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預防疾病提供理論依據(jù)第十七頁，共十九頁，2022年，8月28日小結一、動物細胞培養(yǎng)

1、概念

2、過程

3、條件

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