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馬鈴薯微型薯

馬鈴薯營(yíng)養(yǎng)繁殖時(shí)易受病毒浸染,當(dāng)條件適合時(shí),病毒就會(huì)在植株內(nèi)增殖,轉(zhuǎn)運(yùn)和積累,隨著世代傳遞,病毒危害逐年加重,一般造成減產(chǎn)50%以上。研究發(fā)現(xiàn),有30多種病毒易感染馬鈴薯,并引起品種退化,嚴(yán)重影響馬鈴薯的生產(chǎn)。通過(guò)微莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)能從馬鈴薯體內(nèi)脫除PVY、PVA、PAF、PVG、PVM、PSW等病毒。全國(guó)現(xiàn)有馬鈴薯播種面積300多萬(wàn)公頃,且有逐步增加的趨勢(shì),每年需合格種薯45億公斤,脫毒原種4億公斤,脫毒小薯或微型薯45億粒。因此,脫毒馬鈴薯推廣具有廣闊的市場(chǎng)前景。采用組培技術(shù),通過(guò)一定良種繁殖體系,生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)種薯,是保證馬鈴薯高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)的一項(xiàng)有效措施。1.脫毒種薯生產(chǎn)程序

用微莖尖組織培養(yǎng)法,誘導(dǎo)出苗,聯(lián)免疫吸附法或指示植物法鑒定馬鈴薯病毒,經(jīng)鑒定后無(wú)主要病毒的試管苗可定為脫毒試管基礎(chǔ)苗。一、馬鈴薯脫毒技術(shù)

2.莖尖培養(yǎng)脫毒(1)取材和培養(yǎng)

多采用在室內(nèi)發(fā)芽,芽經(jīng)熱處理(38℃)2周。然后取頂芽或側(cè)芽1cm的莖尖,自來(lái)水沖洗干凈,無(wú)菌條件下先用70%酒精浸潤(rùn)30s,再用2%次氯酸鈉液浸4-5min,然后用無(wú)菌水沖洗3次。

消毒芽在解剖鏡下仔細(xì)逐層剝?nèi)ビ兹~,露出圓滑的生長(zhǎng)點(diǎn),可留1-2個(gè)葉原基,0.2-0.3mm,接種于液體培養(yǎng)基:MS+BA0.5+NAA0.1+GA30.2+2%蔗糖,pH值5.8。培養(yǎng)條件:21~25℃、2000-3000lx、12h/d。

3--6月長(zhǎng)成2-3cm小芽。(2)繼代和生根脫毒苗經(jīng)ELISA(試劑盒)鑒定后,采用固、液培養(yǎng)基相結(jié)合方法擴(kuò)繁。取試管苗單節(jié)切段扦插,每瓶插20個(gè)莖段,20d長(zhǎng)成5-10cm高小植株,繼續(xù)切段繁殖,每月可繁5~8倍。試管苗多節(jié)接種進(jìn)行淺層靜止液體培養(yǎng)。培養(yǎng)基:MS+NAA

0.2-0.5+D-泛酸鈣10+3%蔗糖,20-25℃,3000-4000LX,14-16h/d,每3周繼代一次,單芽莖段約1cm,可插也可平放,原則試管苗用2年-3年。(3)馴化移植

3.脫毒苗切繁

基礎(chǔ)苗成活后便可切繁,但切繁量的多少和質(zhì)量的高低,除與水與溫濕度條件有關(guān)外,正確的切繁方法和適宜的切繁苗齡也非常重要。脫毒苗切繁主要是剪取頂部芽尖莖段(主莖芽尖和腋芽芽尖)直接扦插。微型薯生產(chǎn):

網(wǎng)室內(nèi)鋪6cm蛭石,3%撒可富稀釋1倍,噴潮濕即可。插前澆水濕潤(rùn),插后澆透。覆膜7d,濕度80%以上,期間噴水2次。揭膜后噴營(yíng)養(yǎng)液3%撒可富,每周2次,每周噴一次0.5%硫酸銅,中后期噴藥防病蟲,連續(xù)噴2-4次。苗高6-8cm培蛭石防綠薯,1-2cm厚,35-40d出現(xiàn)氣生薯,不斷蓋蛭石。二、馬鈴薯無(wú)病毒苗的鑒定材料1、指示植物鑒定在馬鈴薯的病毒鑒定中,汁液鑒定是最常用的方法,X病毒、S病毒和紡錘塊狀病毒很容易通過(guò)汁液來(lái)接種。2、鑒定寄主的準(zhǔn)備馬鈴薯常用的鑒定寄主植物有莧科的千日紅,茄科的洋酸漿、毛曼佗羅等。寄主植物應(yīng)在無(wú)蟲網(wǎng)室中培養(yǎng)。3.接種液制備及接種放置防蟲室中,一般5-10d可發(fā)病。三、馬鈴薯無(wú)病毒株的繁殖和保存通過(guò)莖尖培養(yǎng)只能得到很少的無(wú)病毒植株,而生產(chǎn)上需要數(shù)以萬(wàn)計(jì)的健康種薯。同時(shí)無(wú)病毒植株并沒(méi)有對(duì)該病毒獲得免疫能力,仍會(huì)在繁殖中再次侵染。如何在以后繁殖中防止受病毒再侵染是很關(guān)鍵的一環(huán)。繁

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