抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座

提綱1什么是抗心磷脂抗體2抗心磷脂抗體檢測(cè)方法3抗心磷脂抗體臨床意義

（抗磷脂綜合征）抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第1頁(yè)什么是抗心磷脂抗體？第一分部抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第2頁(yè)抗心磷脂抗體定義抗心磷脂抗體（anticardiolipin，aCL）是一個(gè)以血小板和內(nèi)皮細(xì)胞膜上帶負(fù)電荷心磷脂作為靶抗原本身抗體。常見(jiàn)于系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）及其它本身免疫性疾病。該抗體與血栓形成、血小板降低、習(xí)慣性流產(chǎn)或?qū)m內(nèi)死胎關(guān)系親密。1.本身抗體是指針對(duì)本身組織，器官、細(xì)胞及細(xì)胞成份抗體；2.人體有完整本身免疫耐受機(jī)制維持；3.本身免疫反應(yīng)，產(chǎn)生本身抗體；4.正常人體血液中能夠有低滴度本身抗體?？剐牧字贵w的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第3頁(yè)*狼瘡抗凝物（Lupusanticoagulants，LA）*抗心磷脂抗體（Anticardiolipinantibodies，aCL)

*抗2-糖蛋白I抗體（Anti-2-glycoprotein-Iantibodies，

a-2-GPI)抗磷脂抗體抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第4頁(yè)抗磷脂抗體抗心磷脂抗體抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第5頁(yè)*抗心磷脂抗體(aCL)

屬于IgG/IgM型本身抗體，通常使用ELISA方法測(cè)定，其中IgG被認(rèn)為與血栓形成和習(xí)慣性流產(chǎn)有很強(qiáng)相關(guān)性。抗心磷脂抗體

抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第6頁(yè)抗心磷脂是pangborn1941年從牛心肌中分離出來(lái)一個(gè)含有抗原性磷脂，并加以命名抗心磷脂抗體免疫學(xué)分型有IgG和IgA和IgM三類(lèi)，其發(fā)生率男女無(wú)顯著差異?？剐牧字贵w

抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第7頁(yè)

研究證實(shí)，許多原因與aCL產(chǎn)生親密相關(guān)，常見(jiàn)原因有：（1）本身免疫性疾?。喝缦到y(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE)、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）、硬皮病等；（2）病毒感染：如腺病毒、風(fēng)疹病毒、水痘病毒、腮腺炎病毒等感染；（3）其它疾病：如支原體系統(tǒng)疾病等；（4）口服一些藥品：如氯丙嗪、吩噻嗪等；（5）少數(shù)無(wú)顯著器質(zhì)性疾病正常人，尤其是老年人?？剐牧字贵w

抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第8頁(yè)抗心磷脂綜合征與aCL抗磷脂綜合征（anti-phospholipidsyndrome,APS）是指由抗磷脂抗體（APL抗體）引發(fā)一組臨床征象總稱(chēng)，主要表現(xiàn)為血栓形成，習(xí)慣性流產(chǎn)，血小板降低等。在同一患者可僅有上述一個(gè)表現(xiàn)，也可同時(shí)有各種表現(xiàn)。APS是一個(gè)本身免疫性疾病，當(dāng)前公認(rèn)診療標(biāo)準(zhǔn)是病人含有以下臨床特點(diǎn)之一：全身各臟器動(dòng)、靜脈血栓：復(fù)發(fā)性流產(chǎn)；胎兒死亡以及因?yàn)樘簩m內(nèi)窘迫提前分娩致新生兒死亡；本身免疫性血小板降低，上述臨床表現(xiàn)同時(shí)伴有病人血清中出現(xiàn)抗心磷脂抗體（aCL）和/或狼瘡凝血因子（LA）。在臨床上因?yàn)榭剐牧字贵w特異性更強(qiáng)，與上述臨床表現(xiàn)關(guān)系更親密，因而也稱(chēng)為抗心磷脂綜合征（anti-cardiolipinsyndrome,ACS)?？剐牧字贵w的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第9頁(yè)第一部分小結(jié)抗心磷脂抗體（aCL）①本身抗體②抗磷脂抗體③與一些疾病相關(guān)抗磷脂綜合征抗心磷脂綜合征≈抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第10頁(yè)抗心磷脂抗體檢測(cè)第二部分抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第11頁(yè)方法學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)采取ELISA法，分為IgG、IgM和IgA型抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第12頁(yè)檢測(cè)流程血清1:201倍稀釋酶結(jié)合物1:10倍稀釋取100微升稀釋后血清加入反應(yīng)孔溫浴30min洗板3次加入稀釋后的酶結(jié)合物100微升溫浴30min洗板3次加入TMB底物液100微升避光溫浴15min加入終止液100微升酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)讀取吸光度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，報(bào)結(jié)果抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第13頁(yè)注意事項(xiàng)1.樣本：血清或EDTA、肝素、檸檬酸鹽抗凝血漿2.酶結(jié)合物使用前需混勻，稀釋后需在4小時(shí)內(nèi)使用3.全部試劑使用前需在室溫（18-25℃）平衡30min4.底物液對(duì)光敏感，需避光顯色抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第14頁(yè)結(jié)果判讀抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第15頁(yè)結(jié)果判讀半定量：按照以下公式將對(duì)照血清或患者樣本吸光度值比上標(biāo)準(zhǔn)品2吸光度值，經(jīng)過(guò)比值半定量預(yù)計(jì)結(jié)果。比值＝對(duì)照或患者樣本吸光度值標(biāo)準(zhǔn)品2吸光度值歐蒙提議按照以下標(biāo)準(zhǔn)解釋結(jié)果：比值＜1.0陰性比值≥1.0陽(yáng)性抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第16頁(yè)結(jié)果判讀定量檢測(cè)：分別以3份標(biāo)準(zhǔn)血清濃度和其吸光度為橫、縱坐標(biāo)，以點(diǎn)對(duì)點(diǎn)方式繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出患者血清中抗體濃度。歐蒙提議對(duì)結(jié)果做以下解釋?zhuān)海?2陰性≥12陽(yáng)性抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第17頁(yè)結(jié)果判讀關(guān)于單位：心磷脂抗體IgA/G/MRU/ml心磷脂抗體IgMPL-IgM-U/ml心磷脂抗體IgGPL-IgG-U/ml心磷脂抗體IgAPL-IgA-U/ml相對(duì)單位百分位經(jīng)親和層析從標(biāo)準(zhǔn)血清純化得到1微克/ml抗心磷脂IgA抗體結(jié)合心磷脂活性抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第18頁(yè)抗心磷脂抗體臨床意義第三部分抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第19頁(yè)全部發(fā)生自發(fā)性靜脈血栓病變者對(duì)于小于50歲人群或沒(méi)有其它顯著危險(xiǎn)原因老年人，發(fā)生中風(fēng)或者外周動(dòng)脈栓塞事件者SLE或其它本身免疫疾病并發(fā)血栓病變者重復(fù)流產(chǎn)或伴有早產(chǎn)妊娠并發(fā)癥患者不明原因血小板降低患者aPL試驗(yàn)室檢測(cè)適應(yīng)癥抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第20頁(yè)

動(dòng)靜脈均可形成血栓，尤以靜脈血栓居多。靜脈血栓發(fā)生率70%，動(dòng)脈血栓30%，動(dòng)靜脈血栓5%。靜脈血栓以下肢深靜脈血栓為最多見(jiàn)。其它還有各種臟器、組織內(nèi)血栓形成。1.血栓形成臨床表現(xiàn)抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第21頁(yè)靜脈血栓多累積下肢深靜脈（水腫）、腎臟、肝臟、視網(wǎng)膜動(dòng)脈血栓多累積腦部（腦卒中）、上下肢（缺血性壞疽）、腎臟、腸系膜、冠狀動(dòng)脈（心肌梗死）抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第22頁(yè)動(dòng)、靜脈血栓*aPL抗體與血栓之間有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性*Love和Santoro對(duì)SLE發(fā)生血栓栓塞性意外綜合報(bào)道抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第23頁(yè)

胎盤(pán)血管血栓形成造成胎盤(pán)功效不全，可引發(fā)宮內(nèi)發(fā)育遲滯、重復(fù)流產(chǎn)。其發(fā)生率可達(dá)10%-25%，普通發(fā)生在妊娠10周以后。在第34周或之前還可發(fā)生先兆子癇或妊高癥以及嚴(yán)重胎盤(pán)功效不足所致早產(chǎn)。2.產(chǎn)科表現(xiàn)臨床表現(xiàn)抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第24頁(yè)3.血液系統(tǒng)表現(xiàn)：

血小板降低有25%~50%病例出現(xiàn)，但程度較輕，常在90x109/L以上，機(jī)制尚不清楚

溶血性貧血臨床表現(xiàn)抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第25頁(yè)4.APS相關(guān)腎病

腎動(dòng)脈血栓/狹窄、腎臟缺血壞死、腎性高血壓、深靜脈血栓、微血管閉塞性腎病和相關(guān)終末期腎病統(tǒng)稱(chēng)為APS相關(guān)腎病臨床表現(xiàn)抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第26頁(yè)4.其它類(lèi)型APS

網(wǎng)狀青斑（80%）

心臟瓣膜病變（晚期）

神經(jīng)精神癥狀——偏頭痛、舞蹈病、癲癇、

格林巴利綜合癥等

缺血性骨壞死（少見(jiàn)）臨床表現(xiàn)抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第27頁(yè)抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第28頁(yè)抗心磷脂抗體的檢測(cè)和臨床意義專(zhuān)家講座第29頁(yè)在抗磷脂抗體檢測(cè)結(jié)果判讀上，應(yīng)該與臨床資料相結(jié)合，同時(shí)要考