三萜類化合物的結(jié)構(gòu)測定

三萜類化合物的結(jié)構(gòu)測定第1頁/共22頁二、三萜的波譜特征

1、紫外光譜(UV)結(jié)構(gòu)中有一個孤立雙鍵:205-250nm

處有微弱吸收;α、β不飽和羰基λmax:242-250nm；異環(huán)共軛雙烯λmax:240、250、260nm；同環(huán)共軛雙烯λmax:285nm。多數(shù)三萜類化合物不產(chǎn)生紫外吸收，但以濃硫酸為試劑測定五環(huán)三萜類化合物時，可在310nm處觀察到最大吸收，且不受母核上的取代基影響。第2頁/共22頁2、質(zhì)譜三萜類化合物質(zhì)譜裂解有較強的規(guī)律：1）當有環(huán)內(nèi)雙鍵時，一般都有較特征的RDA裂解；2）如無環(huán)內(nèi)雙鍵時，常從C環(huán)斷裂成兩個碎片；3）在有些情況下，可同時產(chǎn)生RDA裂解和C環(huán)斷裂。四環(huán)三萜類化合物裂解的共同規(guī)律是失去側(cè)鏈。第3頁/共22頁第4頁/共22頁第5頁/共22頁皂苷難揮發(fā)，所以，EI-MS和CI-MS技術(shù)在三萜皂苷的應(yīng)用受以限制。但FD-MS、ESI－MS和FAB-MS在皂苷的結(jié)構(gòu)檢測中卻得到了廣泛應(yīng)用，這些質(zhì)譜的應(yīng)用可以得到皂苷的準分子離子峰（quasi-molecularionpeaks）[M+H]+、[M+Na]+和[M+K]+等，或[M-H]-峰；第6頁/共22頁3.、1H-NMR1）環(huán)內(nèi)雙鍵質(zhì)子的δ值一般大于5，如齊墩果酸類和烏蘇酸類C12烯氫在δ4.93～5.50處出現(xiàn)分辨不好的多重峰。環(huán)外烯鍵的δ值一般小于5，如羽扇豆烯的C29位兩個同碳氫信號多出現(xiàn)在δ4.30～5.00。第7頁/共22頁2）乙?；|(zhì)子的δ值在1.82-2.07。對于絕大多數(shù)齊墩果烷型和烏蘇烷型三萜，當-COOCH3位于C28位時，其甲酯的δ值小于3.795，否則就大于3.795。這一規(guī)律常用于推定齊墩果烷和烏蘇烷母核中C28位的羧基。

第8頁/共22頁大多數(shù)三萜化合物C3上有羥基或其它含氧基團，此時，C3質(zhì)子的信號多為dd峰。以3-乙酰氧基取代的三萜衍生物為例，C3-H為豎鍵(α-H,β-Oac)時，其δ值在4.00-4.75之間，最大偶合常數(shù)為12Hz左右；C3-H若為橫鍵（β-H,α-OAc），δ值在5.00-5.48之間，最大偶合常數(shù)約為8Hz，二者均為寬峰。

δ3-H：4.00-4.75,J=12Hzδ3-H：5.00-5.48,J=8Hz

第9頁/共22頁3）三萜中甲基的信號一般出現(xiàn)在δ0.50-1.20之間，以吡啶為溶劑時，可以得到分辨較好的單峰。對于齊墩果烷型和烏蘇烷型的三萜，其最高場甲基的δ值與C28的取代基有關(guān)。當C28為COOCH3時最高場甲基的δ值小于0.775，反之則大于0.775。羽扇豆烯型的C30甲基因與雙鍵相連，且有烯丙偶合，δ值在較低場1.63-1.80之間，且呈寬單峰。第10頁/共22頁4、13C-NMR

角甲基一般出現(xiàn)在δ8.9～33.7，其中23-

CH3和29-CH3為e鍵甲基出現(xiàn)在低場，δ

值依次為28和33左右。苷元和糖上與氧相連的碳的δ值為60～90;烯碳在δ109—160;羰基碳為δ170-220。第11頁/共22頁1．雙鍵位置及結(jié)構(gòu)母核的確定根據(jù)碳譜中苷元的烯碳的個數(shù)和化學(xué)位移值不同，可推測一些三萜的雙鍵位置。多數(shù)齊墩果烷、烏蘇烷、羽扇豆烷類三萜主要烯碳化學(xué)位移如下表：第12頁/共22頁三萜及雙鍵位置烯碳δ值其他特征碳Δ12-齊墩果烯C12:122～124，C13:143～14411-oxo,Δ12-齊墩果烯C12:128～129，C13:155～16711-C=O,199～200Δ1l-13,28-epoxy-齊墩果烯C11:132～133，C12:131～132Δ1l,13（18）齊墩果烯C11:126～127，C12:126～13-C:84～85.5（異環(huán)雙烯）C13:136～137，C18:133～Δ9（11）,12齊墩果烯C9:154～155，C11:116～117同環(huán)雙烯C12:121～122，C13:143～147Δ12-烏蘇烯C12:124～125，C13:139—140Δ20（29）羽扇豆烯C29:109～，C20:150～第13頁/共22頁2．苷化位置的確定三萜3-OH苷化，一般C-3向低場位移8-10，而且會影響C-4的δ值。糖之間連接位置的苷化位移約為+3～8。但糖與28-COOH成酯苷，苷化位移是向高場位移，羰基碳苷化位移約為-2，糖的端基碳一般位移至δ95～96。第14頁/共22頁3.羥基取代位置及取向的確定羥基取代可引起α-碳向低場移34～50，β-碳向低場移2～10，而γ-碳則高場移0～9。第15頁/共22頁4．糖上乙?；拇_定糖上乙酰化可能發(fā)生在任一羥基上，有的還出現(xiàn)雙羥基乙酰化，一般乙?；?，連接乙酰化位置的碳值向低場位移(+0.2～1.6)，其鄰位碳向高場位移(2.2-3.5)，但鄰位雙乙?；瘯r，乙?；捌溧徫惶家话憔蚋邎鑫灰?。第16頁/共22頁(三)其他核磁共振技術(shù)H-Hcosy主要通過分析相鄰質(zhì)子的偶合關(guān)系，用于苷元及糖上質(zhì)子的歸屬;DEPT用于確定碳的類型(CH3、CH2、CH、C);C,H-cosy和為提高靈敏度已發(fā)展的通過氫檢測的異核多量子相關(guān)譜HMQC進行碳連接質(zhì)子的歸屬，測試HMQC譜所用化合物樣品量較少。第17頁/共22頁苷中糖的連接位置可由苷化位移確定，或采用NOE實驗，照射糖的端基質(zhì)子可觀察到與糖連接位置的碳上質(zhì)子增益。或采用由氫檢測異核多鍵相關(guān)實驗HMBC，在HMBC譜中糖的端基氫與連接位置的碳有明顯的相關(guān)點。全相關(guān)譜TOCSY(HOHAHA)對于糖環(huán)的連續(xù)相互偶合氫的歸屬特別有用，特別是在糖上氫信號互相重疊時，往往可以通過任何一個分離較好的信號(如端基氫)，得到所有該信號偶合體系中的其他質(zhì)子信號，進行歸屬。第18頁/共22頁第八節(jié)生物活性抗炎活性如齊墩果酸用于治肝炎，甘珀酸鈉用于抗?jié)儯坠儆糜谥委燁愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等?？鼓[瘤活性如烏蘇酸?？咕涂共《净钚匀琮R墩果酸、甘草次酸等。降低膽固醇作用如甘草酸。殺軟體動物活性抗生育作用其他如溶血活性等。第19頁/共22頁小結(jié)：第一節(jié)概述掌握三萜及三萜皂苷的定義，了解三萜類化合物在自然界中的分布情況，及存在形式。第二節(jié)三萜類化合物的生物合成了解環(huán)狀三萜的一般生物合成途徑。第三節(jié)四環(huán)三萜掌握四環(huán)三萜的結(jié)構(gòu)分類，每種類型的主要結(jié)構(gòu)特點及代表化合物。第20頁/共22頁第四節(jié)五環(huán)三萜的結(jié)構(gòu)類型掌握五環(huán)三萜的結(jié)構(gòu)分類，