微24病毒感染的檢查方法與防治原則

目的與要求了解病毒的診斷，抗病毒治療，病毒感染的預防。第一節(jié)病毒感染的檢查方法病毒感染的檢查檢測內容查病毒查特異性抗體病毒顆粒病毒抗原病毒核酸病毒酶類：如逆轉錄酶電鏡干脆視察光鏡檢查包涵體分別培育一、標本的采集與送檢原則基本與細菌相像，但應留意：1.標本用“雙抗”或兩性霉素B處理2.低溫保存，盡快送檢3.血清學診斷采雙份血清二、病毒的分別與鑒定（一）病毒的分別培育細胞培育（cellculture）雞胚接種（egginoculation）動物接種（animalinoculation）1.雞胚培育接受孵化9～14天的雞胚絨毛尿囊膜痘苗病毒、人類皰疹病毒尿囊腔接種部位流感病毒、腮腺炎病毒羊膜腔流感病毒的初次分別卵黃囊嗜神經(jīng)病毒1、雞胚培育優(yōu)點：易管理，不帶微生物，成本較低缺點：操作程序困難2.動物接種應用：尚無敏感細胞的病毒培育動物：兔、鼠、黑猩猩、猴等優(yōu)點：結果易視察，可建立動物模型缺點：有飼養(yǎng)條件要求，費用高，動物體內常帶有潛藏病毒病毒的分別培育3.細胞培育單層細胞培育（monolayercellculture）分類懸浮細胞培育（suspendedcellculture）原代細胞（primarycell）細胞種類二倍體細胞（diploidcell）傳代細胞系（continuouscellline）病毒的細胞培育細胞培育瓶單層細胞1．病毒增殖鑒定(1)細胞病變效應（cytopathiceffect,CPE）①細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等（多數(shù)病毒）；②形成多核巨細胞或稱融合細胞（麻疹病毒、巨細胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；③在培育細胞中形成包涵體（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。（二）病毒的鑒定

①細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落麻疹病毒感染細胞呼吸道合胞病毒感染細胞②形成多核巨細胞或稱融合細胞(1)細胞病變效應(cytopathiceffect,CPE)③形成包涵體(inclusionbody)(1)細胞病變效應(cytopathiceffect,CPE)腮腺炎病毒感染細胞(2)紅細胞吸附（hemadsorption）病毒囊膜表面血凝素(HA)＋紅細胞表面HA受體(3)干擾現(xiàn)象（interference）風疹病毒＋人胚腎細胞病毒增殖，CPE(－)?？刹《荆伺吣I細胞病毒增殖，CPE(＋)＋人胚腎細胞風疹病毒？?？刹《綜PE(-)—風疹病毒(+)

?？刹《?-)CPE(+)—風疹病毒(-)

?？刹《?+)2.病毒數(shù)量與感染性測定1.蝕斑形成試驗

（plaqueformationtest）

2.50％組織細胞感染量（50％tissueculture

infectiousdose,TCID50）感染性病毒量2.病毒形態(tài)學鑒定電子顯微鏡：設備、操作困難，應用受限光學顯微鏡：可見大病毒（痘類病毒），對一般病毒檢測意義不大3.病毒血清學鑒定

用已知的抗體，鑒定病毒種、型、亞型

(1)血凝抑制試驗--—正粘病毒型與亞型鑒定病毒＋雞紅細胞＝凝集（血凝試驗）病毒＋特異性抗體＋雞紅細胞＝不凝集

（血凝抑制試驗）

(2)免疫標記法（FIA、EIA、RIA）

——多種病毒鑒定三、病毒分子生物學鑒定抗原變異病毒基因的鑒定核酸擴增核酸雜交基因芯片基因測序四、病毒感染的血清學診斷應用：①實行標本分別病毒為時已晚②目前尚無分別此病毒的方法或難以分別的病毒③為證明所分別的病毒的臨床意義④進行血清流行病學調查等1.中和試驗（neutralizingtest）病毒＋中和抗體病毒失去感染性

特點：特異性高，抗體維持時間長應用：人群免疫狀況的調查臨床診斷少用五、病毒感染的快速診斷數(shù)小時內出結果病毒顆粒病毒成分（抗原或核酸）早期抗體檢測（IgM）病毒的快速診斷光鏡-----包涵體電鏡免疫熒光ELISA分子生物學技術雜交SouthernblotPCRNorthernblot其次節(jié)病毒感染的防治原則滅活疫苗（inactivatedvaccine）活疫苗（livingvaccine）重組載體疫苗（recombinantcarriervaccine