第一節(jié)植物細(xì)胞工程北師大演示文稿

第一節(jié)植物細(xì)胞工程北師大演示文稿第一頁(yè)，共三十五頁(yè)。優(yōu)選第一節(jié)植物細(xì)胞工程北師大第二頁(yè)，共三十五頁(yè)。第三頁(yè)，共三十五頁(yè)。一、植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物細(xì)胞核移植技術(shù)第四頁(yè)，共三十五頁(yè)。1、植物組織培養(yǎng)技術(shù)

理論上，具有某種生物全部的遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞，都具有發(fā)育成完整生物體的潛能。原理：植物細(xì)胞的全能性第五頁(yè)，共三十五頁(yè)。

但是，在生物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞并不會(huì)表現(xiàn)出全能性，而是分化成各種組織和器官。

這是因?yàn)樵谔囟ǖ臅r(shí)間和空間條件下，細(xì)胞中的基因會(huì)有選擇性地表達(dá)出各種蛋白質(zhì)，從而構(gòu)成生物體不同的組織和器官。表達(dá)全能性的條件：離體第六頁(yè)，共三十五頁(yè)。胡蘿卜的組織培養(yǎng)第七頁(yè)，共三十五頁(yè)。實(shí)驗(yàn)原理

植物體的活細(xì)胞一般都具有全能性，在一定的營(yíng)養(yǎng)和激素的等條件下，可以脫分化形成愈傷組織。將愈傷組織轉(zhuǎn)接到含有不同激素成分的培養(yǎng)基上，就可以誘導(dǎo)其再分化產(chǎn)生胚狀體或叢芽，從而發(fā)育成完整的幼苗。第八頁(yè)，共三十五頁(yè)。植物組織離體培養(yǎng)，經(jīng)過(guò)脫分化，然后再分化，這時(shí)有兩種情況，一是分化成胚狀體，其次就是叢芽了。區(qū)別是：胚狀體經(jīng)過(guò)生長(zhǎng)發(fā)育就可以發(fā)育成植株，相當(dāng)于胚（具有胚芽、胚軸和胚根）。

而叢芽還需要誘導(dǎo)生根后才能發(fā)育成完整植株，相當(dāng)于一部分器官。第九頁(yè)，共三十五頁(yè)。消毒超凈工作臺(tái)第十頁(yè)，共三十五頁(yè)。切取形成層無(wú)菌操作第十一頁(yè)，共三十五頁(yè)。接種無(wú)菌操作第十二頁(yè)，共三十五頁(yè)。培養(yǎng)箱23~26℃恒溫避光在有光時(shí)，往往容易形成維管組織，而不易形成愈傷組織。第十三頁(yè)，共三十五頁(yè)。愈傷組織的形成14天。。。第十四頁(yè)，共三十五頁(yè)。將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上，一段時(shí)間后。。。。。。試管苗光照第十五頁(yè)，共三十五頁(yè)。煉苗在保護(hù)地育苗的情況下，采取放風(fēng)、降溫、適當(dāng)控水等措施對(duì)幼苗強(qiáng)行鍛煉的過(guò)程，使其定植后能夠迅速適應(yīng)露地的不良環(huán)境條件，縮短緩苗時(shí)間，增強(qiáng)對(duì)低溫、大風(fēng)等的抵抗能力。主要方法有：停止加溫，放風(fēng)降溫，將玻璃溫室的放風(fēng)口全部打開(kāi)，塑料溫室拱棚的上下放風(fēng)口揭開(kāi)。第十六頁(yè)，共三十五頁(yè)。移栽第十七頁(yè)，共三十五頁(yè)。切取形成層無(wú)菌接種誘導(dǎo)愈傷組織的形成試管苗的形成移栽脫分化再分化植物激素第十八頁(yè)，共三十五頁(yè)。愈傷組織：離體的植物器官、組織或細(xì)胞，在培養(yǎng)一段時(shí)間以后，通過(guò)細(xì)胞分裂，形成一種高度液泡化，由無(wú)定形狀態(tài)薄壁細(xì)胞組成的排列疏松無(wú)規(guī)則的組織。第十九頁(yè)，共三十五頁(yè)。脫分化的實(shí)質(zhì)和結(jié)果分別是什么？實(shí)質(zhì)是

。結(jié)果是

。植物細(xì)胞的再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織在培養(yǎng)過(guò)程中重新分化成根或芽等器官的過(guò)程?；謴?fù)細(xì)胞的全能性過(guò)程形成愈傷組織植物細(xì)胞的脫分化：由高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程，又稱去分化。第二十頁(yè)，共三十五頁(yè)。

當(dāng)細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素共同使用時(shí)，能刺激愈傷組織的形成，而通過(guò)調(diào)節(jié)二者的濃度比，就可以調(diào)控植物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中芽和根的形成，稱為“激素杠桿”。第二十一頁(yè)，共三十五頁(yè)。細(xì)胞分裂素類：IAA（吲哚乙酸）、IBA（吲哚-3-丁酸）、NAA（萘乙酸）和2，4-D（2,4-二氯苯乙酸）生長(zhǎng)素類：誘導(dǎo)細(xì)胞的分裂和根的分化促進(jìn)組織細(xì)胞的分裂或從愈傷組織和器官分化出芽。6-BA（6-芐基腺嘌呤）、KT（激動(dòng)素）和玉米素第二十二頁(yè)，共三十五頁(yè)。生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素＞主要誘導(dǎo)植物組織的脫分化和根原基的形成生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素＜主要誘導(dǎo)植物組織再分化和芽原基的形成生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素＝形成愈傷組織促進(jìn)生根促進(jìn)生芽第二十三頁(yè)，共三十五頁(yè)。植物組織培養(yǎng)：

無(wú)菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織和細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。第二十四頁(yè)，共三十五頁(yè)。原理離體的植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織根、芽幼苗脫分化一定的營(yíng)養(yǎng)和激素(細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素)再分化植物組織培養(yǎng)過(guò)程植物細(xì)胞的全能性外植體第二十五頁(yè)，共三十五頁(yè)。植物組織培養(yǎng)的條件①離體②給予一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（如蔗糖、維生素、礦質(zhì)元素等）和激素③無(wú)菌④適宜的環(huán)境條件（如適宜的溫度和pH等）。第二十六頁(yè)，共三十五頁(yè)。(1)在組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，為什么要強(qiáng)調(diào)所用器械的滅菌和實(shí)驗(yàn)人員的無(wú)菌操作？

植物組織培養(yǎng)中用到的培養(yǎng)基含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，有利于培養(yǎng)物的生長(zhǎng)，然而各種雜菌同樣也可以在上面迅速生長(zhǎng)，所以植物組織培養(yǎng)過(guò)程中污染現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生。培養(yǎng)基一旦被污染，迅速生長(zhǎng)的各種雜菌不但會(huì)和培養(yǎng)物爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)，而且這些雜菌生長(zhǎng)的過(guò)程中會(huì)生成大量對(duì)培養(yǎng)物有害的物質(zhì)，導(dǎo)致培養(yǎng)物迅速死亡。造成培養(yǎng)基污染的因素有很多，一般包括：外植體帶菌、培養(yǎng)瓶和各種器械滅菌不徹底、操作人員操作不規(guī)范等。所以在組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中用到的植物材料和各種器械都要進(jìn)行徹底地滅菌，實(shí)驗(yàn)人員操作一定要規(guī)范，避免帶入雜菌。第二十七頁(yè)，共三十五頁(yè)。(2)在本實(shí)驗(yàn)中，切取胡蘿卜塊根時(shí)強(qiáng)調(diào)要切取含有形成層部分，原因是這部分容易誘導(dǎo)形成愈傷組織。請(qǐng)思考一下，胡蘿卜的其他部分（如莖、葉、花），是否也能培養(yǎng)成小植株，你能用實(shí)驗(yàn)的方法進(jìn)行驗(yàn)證嗎？胡蘿卜的其他部分（如莖、葉、花）也能培養(yǎng)再生形成小植株，只是誘導(dǎo)愈傷組織比較困難。第二十八頁(yè)，共三十五頁(yè)。一、植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物細(xì)胞核移植技術(shù)第二十九頁(yè)，共三十五頁(yè)。生殖隔離雜交？第三十頁(yè)，共三十五頁(yè)。2、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)

植物體細(xì)胞雜交就是將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合形成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。（1）定義：第三十一頁(yè)，共三十五頁(yè)。1．你認(rèn)為兩個(gè)來(lái)自不同植物的體細(xì)胞完成融合，遇到的第一個(gè)障礙是什么？2．有沒(méi)有一種溫和的去壁方法呢？3．為什么兩個(gè)原生質(zhì)體能發(fā)生融合，這與細(xì)胞膜的什么特性有關(guān)？4．如果兩個(gè)來(lái)源不同的原生質(zhì)體發(fā)生了融合，下一步該做何處理？5．如何將雜種細(xì)胞培育成雜種植株？請(qǐng)思考：第三十二頁(yè)，共三十五頁(yè)。細(xì)胞壁纖維素酶