GMP質(zhì)量體系純化水檢驗(yàn)操作規(guī)程

目的：闡述飲用水和純化水的質(zhì)量檢測程序，確保生產(chǎn)用水符合要求。范圍：純化水。責(zé)任人：檢驗(yàn)員。程序：1定義：為蒸餾法、離子交換法、反滲透法或其他適宜的方法制得供藥用的水，不含任何附加劑。2性狀：本品為無色的澄明液體；無臭，無味。3檢驗(yàn)方法3.1酸堿度3.1.1概述：檢查制備與貯存過程中引入的酸性雜質(zhì)如二氧化碳、氯化氫，或堿性雜質(zhì)如氨等。3.1.2檢查方法：取本品10ml，加甲基紅指示液2滴，不得顯紅色；另取10ml，加溴麝香草酚蘭指示液5滴，不得顯蘭色。3.1.3保存方法：用玻璃瓶盛裝，在2～5℃暗處冷藏，并充滿容器，可保存24h。3.2氯化物、硫酸鹽與鈣鹽3.2.1原理：在酸性條件下Cl-與Ag＋生成白色凝乳狀沉淀，Ba2＋與SO42-、Ca2＋與C2O42-均生成白色沉淀而使溶液渾濁。3.2.2檢查方法：取本品，分置3個(gè)試管中，每管各50ml，第一管中加硝酸5滴與硝酸銀試液1ml，第二管中加氯化鋇試液2ml，第三管中加草酸銨試液2ml，均不得發(fā)生渾濁。3.3硝酸鹽3.3.1概述：由水源帶入，是一種對(duì)人體健康有危害的化學(xué)物質(zhì)。反應(yīng)原理：NO3－還原成NO，NO與K3SO4作用反應(yīng)呈色。3.3.2檢查方法：取本品5ml置試管中，于冰浴中冷卻，加10％氯化鉀溶液0.4ml與0.1％二苯胺硫酸溶液0.1ml，搖勻，緩緩滴加硫酸5ml，搖勻，將試管于50℃水浴中放置15分鐘，溶液產(chǎn)生的藍(lán)色與標(biāo)準(zhǔn)硝酸鹽溶液〔取硝酸鉀0.163g，加水溶解并稀釋至100ml，搖勻，精密量取1ml，加水稀釋成100ml，再精密量取10ml，加水稀釋成100ml，搖勻，即得（每1ml相當(dāng)于1μgNO3）〕0.3ml，加無硝酸鹽的水4.7ml，用同一方法處理后的顏色比較，不得更深（0.000006％）。3.4亞硝酸鹽3.4.1概述：由水源帶入，是一種對(duì)人體健康有危害的化學(xué)物質(zhì)。反應(yīng)原理：NO3－還原成NO2－，與對(duì)氨基苯磺酸－α－萘胺反應(yīng)呈色。3.4.2檢查方法：取本品10ml，置納氏管中，加對(duì)氨基苯磺酰胺的稀鹽酸溶液（1→100）1ml及鹽酸萘乙二胺溶液0.1％二苯胺硫酸溶液（0.1→100）1ml，產(chǎn)生的粉紅色，與標(biāo)準(zhǔn)亞硝酸鹽溶液〔取亞硝酸鈉0.750g（按干燥品計(jì)算），加水溶解，稀釋至100ml，搖勻，精密量取1ml，加水稀釋成100ml，搖勻，再精密量取1ml，加水稀釋成50ml，即得（每1ml相當(dāng)于1μgNO2）〕0.2ml，加無亞硝酸鹽的水9.8ml，用同一方法處理后的顏色比較，不得更深（0.000002％）。3.5氨3.5.1反應(yīng)原理：氨與碘化汞鉀反應(yīng)即顯黃棕色。3.5.2檢查方法：取本品50ml。加堿性碘化汞鉀試液2ml，放置15分鐘，如顯色，與氯化銨溶液（取氯化銨31.5mg，加無氨水適量使溶解并稀釋成1000ml）1.5ml，加無氨水48ml與堿性碘化汞鉀試液2ml制成的對(duì)照液比較，不得更深（0.00003％）。3.6二氧化碳3.6.1原理：由水源帶入或放置過程中吸收空氣中的CO2。如有CO2存在與氫氧化鈣反應(yīng)，生成碳酸鈣而呈渾濁。Ca（OH）2＋CO2→CaCO3↓+H2O3.6.2檢查方法：取本品25ml，置50ml塞量筒中，加氫氧化鈣試液25ml，密塞，振搖，放置，1小時(shí)內(nèi)不得發(fā)生渾濁。3.7易氧化物3.7.1原理：不揮發(fā)性有機(jī)物質(zhì)與還原性物質(zhì)的污染。如有存在，則在酸性條件下，可使高錳酸鉀液還原退色。3.7.2檢查方法：取本品100ml加稀硫酸10ml，煮沸后，加0.02mol/L高錳酸鉀滴定液（0.02mol/L）0.10ml，再煮沸10分鐘，粉紅色不得完全消失。3.8不揮發(fā)物3.8.1概述：檢查可溶性無機(jī)物及不揮發(fā)性有機(jī)物。3.8.2檢查方法：取本品100ml置105℃恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干，并在105℃干燥至恒重，遺留殘?jiān)坏眠^1mg。3.9重金屬3.9.1概述：檢查在實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺作用顯色的金屬雜質(zhì)。3.9.2檢查方法：取本品40ml加醋酸鹽緩沖液（PH3.5）2ml與硫代乙酰胺試液2ml，搖勻，放置2分鐘，與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液2.0ml加水38ml用同一方法處理后的顏色比較，不得更深（0.00005％）。3.10細(xì)菌總數(shù)檢驗(yàn)3.10.1原理：根據(jù)細(xì)菌的特性，應(yīng)用不同的營養(yǎng)條件及其他生理?xiàng)l件（如溫度、培養(yǎng)時(shí)間、PH、需氧性質(zhì)）去滿足其要求，培養(yǎng)細(xì)菌。3.10.2操作步驟:以無菌操作方法用滅菌吸管吸取1ml充分混勻的水樣，注入滅菌平皿中，傾注約15ml已融化并冷卻到45℃左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，并立即旋轉(zhuǎn)平皿，使水樣與培養(yǎng)基充分混勻。每次檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)做一平行接種，同時(shí)另用一個(gè)平皿只傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基作為空白對(duì)照。待冷卻凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，使底面向上，置37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h，進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，即為水樣1ml中的細(xì)菌總數(shù)。3.10.3注意事項(xiàng)及建議：3.10.3.1防止菌落的蔓延生長。皿內(nèi)瓊脂凝固后，不要長久放置才翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)，而應(yīng)于瓊脂凝固后數(shù)分鐘內(nèi)將平皿翻轉(zhuǎn)進(jìn)行培養(yǎng)。3.10.3.21ml水樣內(nèi)未有菌落生長即照寫，或1ml水樣內(nèi)菌落數(shù)＜1。3.10.3.3檢驗(yàn)水樣用消毒玻璃瓶存放并于4h內(nèi)測定。建議取氯化或溴化過的水樣時(shí)，所用的玻璃瓶消毒之前，按每125ml加0.1ml10％硫代硫酸鈉以消除氯或溴對(duì)細(xì)菌的抑制作用。3.11總大腸桿菌3.11.1原理：根據(jù)總大腸桿菌群應(yīng)有的生物特性，如革蘭氏陰性無芽胞桿菌，在37℃24h內(nèi)能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣，能在選擇性培養(yǎng)基上產(chǎn)生典型菌落。3.11.2操作步驟：取膽鹽乳糖培養(yǎng)基3份，每份100ml，2份分別加入規(guī)定量的供試液，其中1份加入對(duì)照菌50～100個(gè)作陽性對(duì)照，第3份加入與供試液等量的稀釋液作陰性對(duì)照。培養(yǎng)18～24h（必要時(shí)可延至48h）。陰性對(duì)照應(yīng)無菌生長。取上述3份的培養(yǎng)物各0.2ml，分別接種至5mlMUG培養(yǎng)基管內(nèi)培養(yǎng)，分別于5h與24h時(shí)，取未接種的MUG培養(yǎng)基管作本底對(duì)照，將各管置365nm紫外光下觀察。陽性對(duì)照管呈現(xiàn)熒光，MUG陽性。供試液的MUG管呈現(xiàn)熒光，MUG陽性；無熒光，MUG陰性。然后加數(shù)滴靛基質(zhì)試液于MUG管內(nèi)，液面呈玫瑰紅色為陽性，呈試劑本色為陰性。當(dāng)陰性對(duì)照呈陰性，陽性對(duì)照正常生長，供試液膽鹽乳糖培養(yǎng)基培養(yǎng)液澄明，并證明無菌生長，判未檢出大腸桿菌。供試液MUG陽性，靛基質(zhì)陽性，判檢出大腸桿菌；MUG陰性，靛基質(zhì)陰性，判未檢出大腸桿菌。如MUG陽性、靛基質(zhì)陰性或MUG陰性、靛基質(zhì)陽性，菌應(yīng)取供試液膽鹽人乳糖培養(yǎng)基培養(yǎng)物劃線于曙紅亞甲藍(lán)瓊脂平板或麥康凱瓊脂平板，培養(yǎng)18～24h，如上述供試液培養(yǎng)物的分離平板無菌落生長，判未檢出大腸桿菌。或有菌落生長，陰挑選2～3可疑菌落作靛基質(zhì)試驗(yàn)（Ⅰ）、甲基紅試驗(yàn)（M）、乙酰甲基甲醇生成試驗(yàn)（V-P）、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)（C）及革蘭氏染色、鏡檢，按表1規(guī)定判斷結(jié)果。3.13注意事項(xiàng)：3.13.1培養(yǎng)基的保存不得超過一周。3.13.2檢驗(yàn)水樣用消毒玻璃瓶存放并于4h內(nèi)測定。建議取氯化或