標準解讀

《GB/T 4789.36-2008 食品衛(wèi)生微生物學檢驗 大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗》是一項國家標準,專門用于食品中大腸埃希氏菌O157:H7及非運動型(NM)大腸埃希氏菌的檢測。該標準詳細規(guī)定了從樣品采集到結(jié)果報告的一系列操作步驟和技術(shù)要求,確保檢測過程科學、準確。

首先,在樣品處理方面,標準提出了具體的取樣方法和數(shù)量要求,并指出了如何進行樣品稀釋以及培養(yǎng)基的選擇與制備。對于不同的食品類型,如肉類、蔬菜等,可能需要采用不同的預處理方法以保證后續(xù)實驗的有效性。

接著,標準描述了增菌培養(yǎng)的過程,包括使用哪種增菌液、培養(yǎng)條件(溫度、時間)等關(guān)鍵參數(shù)設(shè)置。此階段旨在提高目標菌株在樣本中的濃度,以便于下一步驟中更容易被識別出來。

然后是選擇性分離步驟,通過將經(jīng)過增菌后的液體接種到特定的選擇性瓊脂平板上進行培養(yǎng),利用這些平板能夠抑制其他雜菌生長而促進目標菌種繁殖的特點來實現(xiàn)對O157:H7/NM大腸桿菌的選擇性分離。

之后是對疑似陽性菌落進行鑒定的過程,這通常涉及生化反應測試和其他分子生物學技術(shù)的應用,如聚合酶鏈式反應(PCR),用以確認是否為真正的大腸埃希氏菌O157:H7或NM型別。

最后,根據(jù)實驗結(jié)果填寫相應的報告表單,并按照規(guī)定的格式記錄所有相關(guān)信息,包括但不限于樣品來源、檢測日期、所用方法及其依據(jù)的標準編號等,確保整個檢測流程透明可追溯。

該標準還特別強調(diào)了實驗室安全和個人防護措施的重要性,在執(zhí)行任何實驗之前都必須嚴格遵守相關(guān)的生物安全指南,以防止?jié)撛诘奈:Πl(fā)生。


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  • 2008-05-16 頒布
  • 2008-11-01 實施
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GB/T 4789.36-2008食品衛(wèi)生微生物學檢驗大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗_第1頁
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文檔簡介

犐犆犛07.100.30

犆53

中華人民共和國國家標準

犌犅/犜4789.36—2008

食品衛(wèi)生微生物學檢驗

大腸埃希氏菌犗157:犎7/犖犕檢驗

犕犻犮狉狅犫犻狅犾狅犵犻犮犪犾犲狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犳狅狅犱犺狔犵犻犲狀犲—

犈狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犈狊犮犺犲狉犻犮犺犻犪犮狅犾犻犗157:犎7/犖犕

20080516發(fā)布20081101實施

中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

犌犅/犜4789.36—2008

前言

本標準分為四法,分別為:

———第一法:常規(guī)培養(yǎng)法;

———第二法:免疫磁珠捕獲法;

———第三法:全自動酶聯(lián)熒光免疫分析儀篩選法;

———第四法:全自動病原菌檢測系統(tǒng)篩選法。

本標準的第一法修改采用了美國食品藥品管理局(FDA)《細菌分析手冊》第4A章(2002年)(Bac

teriologicalAnalyticalManual,Chapter4A,2002);第二法修改采用了北歐食品分析委員會(NMKL)

No.164,1999;第三法修改采用了國際分析家學會(AOACINTERNATIONAL)AOACRIPerform

anceTestedMethodsVIDAS犈.犆狅犾犻O157(ECO)Test,No.010502;第四法修改采用了AOACRIPer

formanceTestedMethodsBAX犈.犆狅犾犻O157:H7,No.050501。

本標準的第一法與美國FDA/BAM方法相比主要差異如下:

———增菌培養(yǎng)基以mEC+n肉湯替代了EEB肉湯。

———增加了CHROMagarO157顯色培養(yǎng)基。

本標準的第二法與NMKL,No.164,1999的方法相比主要差異如下:

———增菌培養(yǎng)基以mEC+n肉湯替代了mTSB肉湯。

———修改增菌培養(yǎng)溫度41.5℃±0.5℃為36℃±1℃。

———增加了CHROMagarO157顯色培養(yǎng)基。

本標準的第三法與AOACRIPerformanceTestedMethodVIDAS犈.犆狅犾犻O157(ECO)Test,No.

010502的方法相比主要差異為增菌培養(yǎng)基以mEC+n肉湯替代了mTSB肉湯。

本標準的第四法與AOACRIPerformanceTestedMethodsBAX犈.犆狅犾犻O157:H7,No.050501的

方法相比主要修改為生肉以外的其他食品增菌培養(yǎng)基以mEC+n肉湯替代了EEB肉湯。

本標準的附錄A為規(guī)范性附錄。

本標準由中華人民共和國衛(wèi)生部提出并歸口。

本標準起草單位:中國疾病預防控制中心營養(yǎng)與食品安全所。

本標準參與起草單位:河南省疾病預防控制中心、北京市疾病預防控制中心、浙江省疾病預防控制

中心、吉林省疾病預防控制中心、湖北省疾病預防控制中心、中華人民共和國上海出入境檢驗檢疫局、中

國檢驗檢疫科學研究院。

本標準主要起草人:劉秀梅、廖興廣、張秀麗、陳倩、程蘇云、劉桂華、謝茂慧、李曉虹、田靜。

犌犅/犜4789.36—2008

食品衛(wèi)生微生物學檢驗

大腸埃希氏菌犗157:犎7/犖犕檢驗

1范圍

本標準規(guī)定了食品中大腸埃希氏菌O157:H7和O157:NM的檢驗方法。

本標準適用于食品和食物中毒樣品中大腸埃希氏菌O157:H7和O157:NM的檢驗。

2設(shè)備和材料

除微生物實驗室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外,其他設(shè)備和材料如下。

2.1天平:感量0.1g、0.01g。

2.2均質(zhì)器。

2.3冰箱:2℃~5℃。

2.4恒溫培養(yǎng)箱:36℃±1℃。

2.5恒溫水浴箱:46℃±0.5℃,100℃。

2.6生物顯微鏡:10×~100×。

2.7細菌濃度比濁管:MacFarland0.5號或濁度計。

2.8無菌錐形瓶:500mL,250mL。

2.9無菌平皿:直徑90mm。

2.10無菌試管:10mm×75mm。

2.11無菌吸管:1mL(具0.01mL刻度),10.0mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸頭。

2.12pH計或pH比色管或精密pH試紙。

2.13長波紫外光燈:366nm,功率≤6W。

2.14磁板、磁板架、DynalMX1樣品混合器1)。

2.15全自動微生物鑒定系統(tǒng)(VITEK)2)。

2.16全自動酶聯(lián)熒光免疫分析儀(miniVIDAS或VIDAS)2)。

2.17全自動病原菌檢測系統(tǒng)(BAX系統(tǒng))3)。

3培養(yǎng)基和試劑

3.1改良EC肉湯(mEC+n):見第A.1章。

3.2改良山梨醇麥康凱(CTSMAC)瓊脂:見第A.2章。

3.3亞碲酸鉀(AR級)。

3.4頭孢克肟(Cefixime)。

3.5三糖鐵(TSI)瓊脂:見第A.3章。

1)由挪威Dynal公司提供的產(chǎn)品的商品名。給出這一信息是為了方便本標準的使用者,并不表示對該產(chǎn)品的認

可。如果其他等效產(chǎn)品具有相同的效果,則可使用這些等效的產(chǎn)品。

2)

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