分光光度計(jì)的使用

分光光度計(jì)的使用張國(guó)川光源單色器吸收池檢測(cè)系統(tǒng)穩(wěn)壓電源通過(guò)棱鏡或光柵得到一束近似的單色光.波長(zhǎng)可調(diào),故選擇性好,準(zhǔn)確度高.分光光度法的主要部件框架（1）分光光度計(jì)的主要部件光源：發(fā)出所需波長(zhǎng)范圍內(nèi)的連續(xù)光譜，有足夠 的光強(qiáng)度,穩(wěn)定。 可見光區(qū)：鎢燈，碘鎢燈(320～2500nm)

紫外區(qū)：氫燈，氘燈(180～375nm)單色器：將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為單色光的 裝置。棱鏡:玻璃350～3200nm,石英185～4000nm光柵:波長(zhǎng)范圍寬,色散均勻,分辨性能好,使用方便吸收池：(比色皿)用于盛待測(cè)及參比溶液。 可見光區(qū)：光學(xué)玻璃池 紫外區(qū)：石英池檢測(cè)器：利用光電效應(yīng)，將光能轉(zhuǎn)換成電流信號(hào)。 光電池，光電管，光電倍增管指示器： 低檔儀器：刻度顯示

中高檔儀器：數(shù)字顯示，自動(dòng)掃描記錄（2）分光光度計(jì)的類型722型分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)方框圖光源吸收池檢測(cè)系統(tǒng)分光系統(tǒng)分光光度計(jì)的使用

（1）選擇波長(zhǎng)擰動(dòng)此旋鈕至所需波長(zhǎng)（2）將測(cè)試溶液裝入吸收池（操作如下）

手拿毛玻璃面，

先用待裝液漂洗

3

遍，

裝入量為吸收池高度的

3

/

4，

透光面毛面容量的3/4用鏡頭紙擦凈透光面，不要將紙團(tuán)成球，不要來(lái)回擦，而要向同一方向擦。所有關(guān)于吸收池的操作均在實(shí)驗(yàn)臺(tái)面之上的空間進(jìn)行，這樣可保證一旦吸收池滑落時(shí)掉在臺(tái)面上，不至于摔破。通過(guò)手柄將池架推到頭，此時(shí)黑體對(duì)著入射光。遮光黑體2

號(hào)1

號(hào)0

號(hào)放入吸收池架（透光面向著透光窗一側(cè)）。放置順序?yàn)椋?/p>

透光窗然后蓋上蓋子。按

MODE

鍵（3）調(diào)節(jié)投射比為

0.000至投射比（T）燈亮T

方式“0%”鍵按一下“0%”鍵，此時(shí)儀器自動(dòng)校正后顯示“0.000”。（有的分光光度計(jì)沒(méi)有黑體，需要在打開試樣室蓋（起黑體的作用）的情況下調(diào)

T

=

0.000）（4）調(diào)透射比為

100%將手柄向操作者方向拉出一檔（聽到“咔嚓”一聲），此時(shí)參比（0

號(hào)）溶液進(jìn)入光路。按一下“100%T”鍵，此時(shí)儀器顯示“BLA”表示儀器正在自動(dòng)校正，校正完畢后顯示“100.0”。100%

TB

L

A100.0（5）重復(fù)（驗(yàn)證）（3）、（4）兩步，直至透射比為

0.000

和

100%

不變。按“MODE”鍵至“ABSORBANCE”燈亮（此時(shí)轉(zhuǎn)換到測(cè)吸光度功能上）。將手柄向操作者方向再拉出一檔（聽到“咔嚓”一聲），此時(shí)被測(cè)（1

號(hào)）溶液進(jìn)入光路。此時(shí)儀器所顯示的數(shù)值即為

1

號(hào)被測(cè)溶液的吸光度值（記錄下來(lái)）。-0.0000.186再拉出一檔，儀器所顯示的數(shù)值為

2

號(hào)溶液的吸光度值。將

1、2

號(hào)吸收池?fù)Q裝入

3、4

號(hào)溶液（黑體和

0

號(hào)參比溶液不動(dòng)），然后同法測(cè)定各溶液的吸光度、并一一記錄下來(lái)，記錄格式如下表。編號(hào)01234560.0001.002.003.004.005.00未知吸光度（A）×.××××.××××.××××.××××.××××.××××.×××吸光度(A)●●●●●繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：

根據(jù)未知溶液（6

號(hào)溶液）的吸光度從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得試液濃度。原試液含鐵質(zhì)量濃度

=

查得的濃度

×

稀釋倍數(shù)

實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

………二、實(shí)驗(yàn)原理

………三、實(shí)驗(yàn)步驟編號(hào)0123456V標(biāo)準(zhǔn)液/mL0.001.002.003.004.005.000.00V試液/mL0.000.000.000.000.000.005.004444444V磺基水楊酸/mL2.002.002.002.002.002.002.00滴加氨水至黃色后再多加

4

mL

。定容、搖勻，測(cè)吸光度。四、數(shù)據(jù)記錄編號(hào)01234560.0001.002.003.004.005.00未知吸光度（A）×.××××.××