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文檔簡介
生物分離工程復習題一、名詞解釋凝聚:在電解質作用下,破壞細胞菌體和蛋白質等膠體粒子的分散狀態(tài),使膠體粒子聚集的過程。分派系數(shù):在一定溫度、壓力下,溶質分子分布在兩個互不相溶的溶劑里,達成平衡后,它在兩相的濃度為一常數(shù)叫分派系數(shù)。絮凝:指在某些高分子絮凝劑存在下,在懸浮粒子之間發(fā)生架橋作用而使膠粒形成粗大的絮凝團的過程過濾:是在某一支撐物上放過濾介質,注入含固體顆粒的溶液,使液體通過,固體顆粒留下,是固液分離的常用方法之一。萃取過程:運用在兩個互不相溶的液相中各種組分(涉及目的產(chǎn)物)溶解度的不同,從而達成分離的目的吸附:是運用吸附劑對液體或氣體中某一組分具有選擇性吸附的能力,使其富集在吸附劑表面的過程。反滲析:當外加壓力大于滲透壓時,水將從溶液一側向純水一側移動,此種滲透稱之為反滲透。離心沉降:運用懸浮液或乳濁液中密度不同的組分在離心力場中迅速沉降分層,實現(xiàn)固液分離離心過濾:使懸浮液在離心力場作用下產(chǎn)生的離心力壓力,作用在過濾介質上,使液體通過過濾介質成為濾液,而固體顆粒被截留在過濾介質表面,從而實現(xiàn)固液分離,是離心與過濾單元操作的集成,分離效率更高離子互換:運用離子互換樹脂作為吸附劑,將溶液中的待分離組分,依據(jù)其電荷差異,依靠庫侖力吸附在樹脂上,然后運用合適的洗脫劑將吸附質從樹脂上洗脫下來,達成分離的目的。固相析出技術:運用沉析劑(precipitator)使所需提取的生化物質或雜質在溶液中的溶解度減少而形成無定形固體沉淀的過程。助濾劑:助濾劑是一種具有特殊性能的細粉或纖維,它能使某些難以過濾的物料變得容易過濾色譜技術:是一組相關分離方法的總稱,色譜柱的一般結構具有固定相(多孔介質)和流動相,根據(jù)物質在兩相間的分派行為不同(由于親和力差異),通過多次分派(吸附-解吸-吸附-解吸…),達成分離的目的。有機溶劑沉淀:在具有溶質的水溶液中加入一定量親水的有機溶劑,減少溶質的溶解度,使其沉淀析出。等電點沉淀:調節(jié)體系pH值,使兩性電解質的溶解度下降,析出的操作稱為等電點沉淀。膜分離:運用膜的選擇性(孔徑大小),以膜的兩側存在的能量差作為推動力,由于溶液中各組分透過膜的遷移率不同而實現(xiàn)分離的一種技術?;瘜W滲透破壁法:某些化學試劑,如有機溶劑、變性劑、表面活性劑、抗生素、金屬螯合劑等,可以改變細胞壁或細胞膜的通透性,從而使胞內(nèi)物質有選擇地滲透出來。超臨界流體:超臨界流體是狀態(tài)超過氣液共存時的最高壓力和最高溫度下物質特有的點——臨界點后的流體。反滲透:在只有溶劑能通過的滲透膜的兩側,形成大于滲透壓的壓力差,就可以使溶劑發(fā)生倒流,使溶液達成濃縮的效果,這種操作成為反滲透。樹脂工作互換容量:單位質量干樹脂或單位體積濕樹脂所能吸附的一價離子的毫摩爾數(shù)稱為樹脂互換容量,在充填柱上操作達成漏出點時,樹脂所吸附的量稱為樹脂工作互換容量。色譜阻滯因數(shù):溶質在色譜柱(紙、板)中的移動速率與流動相移動速率之比稱為阻滯因數(shù),以Rf表達。膜的濃差極化:是指但溶劑透過膜,而溶質留在膜上,因而使膜面濃度增大,并高于主體中濃度。超濾:凡是能截留相對分子量在500以上的高分子膜分離過程稱為超濾,它重要是用于從溶劑或小分子溶質中將大分子篩分出來。生物分離技術:是指從動植物與微生物的有機體或器官、生物工程產(chǎn)物(發(fā)酵液、培養(yǎng)液)及其生物化學產(chǎn)品中提取、分離、純化有用物質的技術過程。物理萃取:即溶質根據(jù)相似相溶的原理在兩相間達成分派平衡,萃取劑與溶質之間不發(fā)生化學反映。化學萃取:則運用脂溶性萃取劑與溶質之間的化學反映生成脂溶性復合分子實現(xiàn)溶質向有機相的分派。鹽析:是運用不同物質在高濃度的鹽溶液中溶解度的差異,向溶液中加入一定量的中性鹽,使原溶解的物質沉淀析出的分離技術。有機聚合物沉析:運用生物分子與某些有機聚合物形成沉淀而析出的分離技術稱為有機聚合物沉析。離子互換平衡:當正反映、逆反映速率相等時,溶液中各種離子的濃度不再變化而達平衡狀態(tài),即稱為離子互換平衡。功能基團:離子互換樹脂中與載體以共價鍵聯(lián)結的不能移動的活性基團,又稱功能基團平衡離子:離子互換樹脂中與功能基團以離子鍵聯(lián)結的可移動的平衡離子,亦稱活性離子。樹脂的再生:就是讓使用過的樹脂重新獲得使用性能的解決過程,樹脂的再生反映是互換吸附的逆反映。層析分離:是一種物理的分離方法,運用多組分混合物中各組分物理化學性質的差別,使各組分以不同的限度分布在兩個相中。流動相:在層析過程中,推動固定相上待分離的物質朝著一個方向移動的液體、氣體或租臨界體等,都稱為流動相。正相色譜:是指固定相的極性高于流動相的極性,因此,在這種層析過程中非極性分子或極性小的分子比極性大的分子移動的速度快,先從柱中流出來。反相色譜:是指固定相的極性低于流動相的極性,在這種層析過程中,極性大的分子比極性小的分子移動的速度快而先從柱中流出。吸附層析:是以吸附劑為固定相,根據(jù)待分離物與吸附劑之間吸附力不同而達成分離目的的一種層析技術。分派層析:是根據(jù)在一個有兩相同時存在的溶劑系統(tǒng)中,不同物質的分派系數(shù)不同而達成分離目的的一種層析技術。凝膠過濾:層析是以具有網(wǎng)狀結構的凝膠顆粒作為固定相,根據(jù)物質的分子大小進行分離的一種層析技術。離子互換層析:是以離子互換劑為固定相,根據(jù)物質的帶電性質不同而進行分離的一種層析技術。高效液相色譜:是指選用顆粒極細的高效耐壓新型固定相,借助高壓泵來輸送流動相,并配有實時在線檢測器,實現(xiàn)色譜分離過程所有自動化的液相色譜法。親和層析:是運用生物活性物質之間的專一親和吸附作用而進行的層析方法。是近年來發(fā)展的純化酶和其他高分子的一種特殊的層析技術。疏水層析:是運用表面偶聯(lián)弱疏水性基團(疏水性配基)的疏水性吸附劑為固定相,根據(jù)蛋白質與疏水性吸附劑之間的弱疏水性互相作用的差別進行分離純化的層析技術。介電常數(shù):表達介質對帶有相反電荷的微粒之間的靜電引力與真空對比減弱的倍數(shù)。過濾介質:是指能使固一液混合料液得以分離的某一介面,通常指濾布或膜過濾中所用的膜。等電點:是兩性物質在其質點的凈電荷為零時介質的pH值,溶質凈電荷為零,分子間排斥電位減少,吸引力增大,能互相聚集起來,沉淀析出,此時溶質的溶解度最低。有機酸沉析:含氮有機酸(如苦味酸和鞣酸等)可以與有機分子的堿性功能團形成復合物而沉淀析出。選擇變性沉析:是運用蛋白質、酶與核酸等生物大分子對某些物理或化學因素敏感性不同,而有選擇地使之變性沉析,以達成目的物與雜蛋白分離的技術,稱為選擇變性沉析。二、選擇1.HPLC是哪種色譜的簡稱(C)。A.離子互換色譜B.氣相色譜C.高效液相色譜D.凝膠色譜2.針對配基的生物學特異性的蛋白質分離方法是(C)。A.凝膠過濾B.離子互換層析C.親和層析D.紙層析3.鹽析法沉淀蛋白質的原理是(B)A.減少蛋白質溶液的介電常數(shù)B.中和電荷,破壞水膜C.與蛋白質結合成不溶性蛋白D.調節(jié)蛋白質溶液pH到等電點4.從組織中提取酶時,最抱負的結果是(C)A.蛋白產(chǎn)量最高B.酶活力單位數(shù)值很大C.比活力最高D.Km最?。?適合于親脂性物質的分離的吸附劑是(B)。A.活性炭B.氧化鋁C.硅膠D.磷酸鈣6.下列哪項酶的特性對運用酶作為親和層析固定相的分析工具是必需的?(B)A.該酶的活力高B..對底物有高度特異親合性C.酶能被克制劑克制D.最適溫度高E.酶具有多個亞基7.用于蛋白質分離過程中的脫鹽和更換緩沖液的色譜是(C)A.離子互換色譜B.親和色譜C.凝膠過濾色譜D.反相色譜45.適合小量細胞破碎的方法是(B)高壓勻漿法B.超聲破碎法C.高速珠磨法D.高壓擠壓法8.鹽析法沉淀蛋白質的原理是(B)A.減少蛋白質溶液的介電常數(shù)B.中和電荷,破壞水膜C.與蛋白質結合成不溶性蛋白D.調節(jié)蛋白質溶液pH到等電點9.蛋白質分子量的測定可采用(C)方法。A.離子互換層析B.親和層析C.凝膠層析D.聚酰胺層析10.基因工程藥物分離純化過程中,細胞收集常采用的方法(C)A.鹽析B.超聲波C.膜過濾D.層析11.氨基酸的結晶純化是根據(jù)氨基酸的(A)性質。A.溶解度和等電點B.分子量C.酸堿性D.生產(chǎn)方式12.離子互換劑不合用于提?。―)物質。A.抗生素B.氨基酸C.有機酸D.蛋白質13.人血清清蛋白的等電點為4.64,在PH為7的溶液中將血清蛋白質溶液通電,清蛋白質分子向(A)A:正極移動;B:負極移動;C:不移動;D:不擬定。14.蛋白質具有兩性性質重要因素是(B)A:蛋白質分子有一個羧基和一個氨基;B:蛋白質分子有多個羧基和氨基;C:蛋白質分子有苯環(huán)和羥基;D:以上都對15.使蛋白質鹽析可加入試劑(D)A:氯化鈉;B:硫酸;C:硝酸汞;D:硫酸銨16.凝膠色譜分離的依據(jù)是(B)。A、固定相對各物質的吸附力不同B、各物質分子大小不同C、各物質在流動相和固定相中的分派系數(shù)不同D、各物質與專一分子的親和力不同17.非對稱膜的支撐層(C)。A、與分離層材料不同B、影響膜的分離性能C、只起支撐作用D、與分離層孔徑相同18.下列哪一項是強酸性陽離子互換樹脂的活性互換基團(A)A磺酸基團(-SO3H)B羧基-COOHC酚羥基C6H5OHD氧乙酸基-OCH2COOH19.依離子價或水化半徑不同,離子互換樹脂對不同離子親和能力不同。樹脂對下列離子親和力排列順序對的的有(A)。A、Fe3+﹥Ca2+﹥Na+B、Na+﹥Ca2+﹥Fe3+C、Na+﹥Rb+﹥Cs+D、Rb+﹥Cs+﹥Na+20.乳化液膜的制備中強烈攪拌(C)。A、是為了讓濃縮分離充足B、應用在被萃取相與W/O的混合中C、使內(nèi)相的尺寸變小D、應用在膜相與萃取相的乳化中21.結晶過程中,溶質過飽和度大小(A)。A、不僅會影響晶核的形成速度,并且會影響晶體的長大速度B、只會影響晶核的形成速度,但不會影響晶體的長大速度C、不會影響晶核的形成速度,但會影響晶體的長大速度D、不會影響晶核的形成速度,并且不會影響晶體的長大速度22.假如要將復雜原料中分子量大于5000的物質與5000分子量以下的物質分開選用(D)。A、SephadexG-200B、SephadexG-150C、SephadexG-100D、SephadexG-5023.在蛋白質初步提取的過程中,不能使用的方法(C)。A、雙水相萃取B、超臨界流體萃取C、有機溶劑萃取D、反膠團萃?。?.在液膜分離的操作過程中,(B)重要起到穩(wěn)定液膜的作用。A、載體B、表面活性劑C、增強劑D、膜溶劑25.離子互換法是應用離子互換劑作為吸附劑,通過(A)將溶液中帶相反電荷的物質吸附在離子互換劑上。A、靜電作用B、疏水作用C、氫鍵作用D、范德華力26.真空轉鼓過濾機工作一個循環(huán)通過(A)。A、過濾區(qū)、緩沖區(qū)、再生區(qū)、卸渣區(qū)B、緩沖區(qū)、過濾區(qū)、再生區(qū)、卸渣區(qū)C、過濾區(qū)、緩沖區(qū)、卸渣區(qū)、再生區(qū)D、過濾區(qū)、再生區(qū)、緩沖區(qū)、卸渣區(qū)27.絲狀(團狀)真菌適合采用(A)破碎。A、珠磨法B、高壓勻漿法C、A與B聯(lián)合D、A與B均不行28.用來提取產(chǎn)物的溶劑稱(C)。A、料液B、萃取液C、萃取劑D、萃余液。29.陰離子互換劑(C)。A、可互換的為陰、陽離子B、可互換的為蛋白質C、可互換的為陰離子D、可互換的為陽離子30.分派層析中的載體(C)。A、對分離有影響B、是固定相C、能吸附溶劑構成固定相D、是流動相31.凝膠色譜分離的依據(jù)是(B)。A、固定相對各物質的吸附力不同B、各物質分子大小不同C、各物質在流動相和固定相中的分派系數(shù)不同D、各物質與專一分子的親和力不同32.洗脫體積是(C)。A、凝膠顆粒之間空隙的總體積B、溶質進入凝膠內(nèi)部的體積C、與該溶質保存時間相相應的流動相體積D、溶質從柱中流出時所用的流動相體積33.工業(yè)上強酸型和強堿型離子互換樹脂在使用時為了減少酸堿用量且避免設備腐蝕,一般先將其轉變?yōu)椋ǎ?。A、鈉型和磺酸型B、鈉型和氯型C、銨型和磺酸型D、銨型和氯型34.吸附色譜分離的依據(jù)是(A)。A、固定相對各物質的吸附力不同B、各物質分子大小不同C、各物質在流動相和固定相的分派系數(shù)不同D、各物質與專一分子的親和力不同35.依離子價或水化半徑不同,離子互換樹脂對不同離子親和能力不同。樹脂對下列離子親和力排列順序對的的有(A)。A、Fe3+>Ca2+>Na+B、Na+>Ca2+>Fe3+C、硫酸根>檸檬酸根>硝酸根D、硝酸根>硫酸根>檸檬酸根36.乳化液膜的制備中強烈攪拌(B)。A、是為了讓濃縮分離充足B、應用在被萃取相與W/O的混合中C、使內(nèi)水相的尺寸變小D、應用在膜相與反萃取相的乳化中37.下面哪一種是根據(jù)酶分子專一性結合的純化方法(A)。A.親和層析B.凝膠層析C.離子互換層析D.鹽析38.純化酶時,酶純度的重要指標是:(D)A.蛋白質濃度
B.酶量C.酶的總活力
D.酶的比活力39.鹽析法純化酶類是根據(jù)(B)進行純化。A.根據(jù)酶分子電荷性質的純化方法B.調節(jié)酶溶解度的方法C.根據(jù)酶分子大小、形狀不同的純化方法D.根據(jù)酶分子專一性結合的純化方法40.分子篩層析純化酶是根據(jù)(C)進行純化。A.根據(jù)酶分子電荷性質的純化方法B.調節(jié)酶溶解度的方法C.根據(jù)酶分子大小、形狀不同的純化方法D.根據(jù)酶分子專一性結合的純化方法41.以下哪項不是在重力場中,顆粒在靜止的流體中降落時受到的力(B)A.重力B.壓力C.浮力D.阻力42.以下哪項不是顆粒在離心力場中受到的力(C)A.離心力B.向心力C.重力D.阻力43.顆粒與流體的密度差越小,顆粒的沉降速度(A)A.越?。?越大C.不變D.無法擬定44.工業(yè)上常用的過濾介質不涉及(D)A.織物介質B.堆積介質C.多孔固體介質D.真空介質45.下列物質屬于絮凝劑的有(A)。A、明礬B、石灰C、聚丙烯類D、硫酸亞鐵46.關于用氫鍵形成來判斷各類溶劑互溶規(guī)律,下列(A)項是對的的敘述。A、氫鍵形成是能量釋放的過程,若兩種溶劑混合后形成的氫鍵增長或強度更大,則有助于互溶。B、氫鍵形成是能量吸取的過程,若兩種溶劑混合后形成的氫鍵增長或強度更大,則有助于互溶。C、氫鍵形成是能量釋放的過程,若兩種溶劑混合后形成的氫鍵增長或強度更大,則不利于互溶。D、氫鍵形成是能量吸取的過程,若兩種溶劑混合后形成的氫鍵增長或強度更大,則不利于互溶。47.關于精餾回流比控制,對于一定的分離任務,以下對的的兩項是(A)A、若回流比變大,則精餾能耗增大;B、若回流比變大,則精餾能耗減小;C、若回流比變大,則所需理論塔板數(shù)變大;D、若回流比變小,則所需理論塔板數(shù)變小。48.結晶過程中,溶質過飽和度大小(A)A、不僅會影響晶核的形成速度,并且會影響晶體的長大速度B、只會影響晶核的形成速度,但不會影響晶體的長大速度C、不會影響晶核的形成速度,但會影響晶體的長大速度D、不會影響晶核的形成速度,并且不會影響晶體的長大速度49.下列哪項不是蛋白質的濃度測定的方法(D)。A、凱氏定氮法B.雙縮脲法C.福林-酚法D.核磁共振50.供生產(chǎn)生物藥物的生物資源不涉及(D)A.動物B植物C.微生物D.礦物質51.發(fā)酵液的預解決方法不涉及(C)A.加熱B絮凝C.離心D.調pH52.其他條件均相同時,優(yōu)先選用那種固液分離手段(B)A.離心分離B過濾C.沉降D.超濾53.那種細胞破碎方法合用工業(yè)生產(chǎn)(A)A.高壓勻漿B超聲波破碎C.滲透壓沖擊法D.酶解法54.高壓勻漿法破碎細胞,不合用于(D)A.酵母菌B大腸桿菌C.巨大芽孢桿菌D.青霉55.關于萃取下列說法對的的是(C)A.酸性物質在酸性條件下萃?。聣A性物質在堿性條件下萃取C.兩性電解質在等電點時進行提取D.兩性電解質偏離等電點時進行提?。担叮阂灰狠腿r常發(fā)生乳化作用,如何避免(D)A.劇烈攪拌B低溫C.靜止D.加熱57.在葡聚糖與聚乙二醇形成的雙水相體系中,目的蛋白質存在于(A)A.上相B下相C.葡聚糖相D.以上都有也許58.當兩種高聚物水溶液互相混合時,兩者之間的互相作用不也許產(chǎn)生(D)A.互不相溶,形成兩個水相B兩種高聚物都分派于一相,另一相幾乎所有為溶劑水C.完全互溶,形成均相的高聚物水溶液D.形成沉淀59.超臨界流體萃取中,如何減少溶質的溶解度達成分離的目的(C)A.降溫B升高壓力C.升溫D.加入夾帶劑60.下列關于固相析出說法對的的是(B)A.沉淀和晶體會同時生成B析出速度慢產(chǎn)生的是結晶C.和析出速度無關D.析出速度慢產(chǎn)生的是沉淀61.鹽析操作中,硫酸銨在什么樣的情況下不能使用(B)A.酸性條件B堿性條件C.中性條件D.和溶液酸堿度無關62.有機溶劑沉淀法中可使用的有機溶劑為(D)A.乙酸乙酯B正丁醇C.苯D.丙酮63.有機溶劑為什么可以沉淀蛋白質(B)A.介電常數(shù)大B介電常數(shù)小C.中和電荷D.與蛋白質互相反映64.蛋白質溶液進行有機溶劑沉淀,蛋白質的濃度在(A)范圍內(nèi)適合。A.0.5%~2%B1%~3%C.2%~4%D.65.若兩性物質結合了較多陽離子,則等電點pH會(A)A.升高B減少C.不變D.以上均有也許66.若兩性物質結合了較多陰離子,則等電點pH會(B)A.升高B減少C.不變D.以上均有也許67.生物活性物質與金屬離子形成難溶性的復合物沉析,然后合用(C)去除金屬離子。A.SDSBCTABC.EDTAD.CPC68.那一種膜孔徑最?。–)A.微濾B超濾C.反滲透D.納米過濾69.超濾技術常被用作(C)A.小分子物質的脫鹽和濃縮B小分子物質的分級分離C.小分子物質的純化D.固液分離70.微孔膜過濾不能用來(D)A.酶活力測定BmRNA的測定及純化C.蛋白質含量測定D.分離離子與小分子71.吸附劑和吸附質之間作用力是通過(A)產(chǎn)生的吸附稱為物理吸附。A.范德華力B庫倫力C.靜電引力D.互相結合72.洗脫吸附劑上附著的溶質,洗脫液的極性強弱關系為(A)A.石油醚﹤環(huán)己烷﹤四氯化碳B二氯甲烷﹤乙醚﹤四氯化碳C.乙酸乙酯﹤丙酮﹤氯仿D.吡啶﹤甲醇﹤水73.那一種活性碳的吸附容量最小(B)A.粉末活性碳B錦綸活性碳C.顆?;钚蕴?4.酚型離子互換樹脂則應在(B)的溶液中才干進行反映A.pH>7BpH>9C.pH﹤9D.pH﹤75.羧酸型離子互換樹脂必須在(C)的溶液中才有互換能力A.pH>5BpH﹤7C.pH>7D.pH﹤76.離子互換樹脂合用(B)進行溶脹A.水B乙醇C.氫氧化鈉D.鹽酸77.下列關于離子互換層析洗脫說法錯誤的是(D)A.對強酸性樹脂一般選擇氨水、甲醇及甲醇緩沖液等作洗脫劑B弱酸性樹脂用稀硫酸、鹽酸等作洗脫劑C.強堿性樹脂用鹽酸-甲醇、醋酸等作洗脫劑D.若被互換的物質用酸、堿洗不下來,應使用更強的酸、堿78.陽樹脂在軟化中易受Fe3+污染,可通過(C)清除鐵化合物。A.水B乙醇C.加克制劑的高濃度鹽酸D.高濃度鹽溶液79.下列關于正相色譜與反相色譜說法對的的是(C)A.正相色譜是指固定相的極性低于流動相的極性B正相色譜層析過程中非極性分子或極性小的分子比極性大的分子移動的速度慢C.反相色譜是指固定相的極性低于流動相的極性D.反相色譜層析過程中,極性大的分子比極性小的分子移動的速度慢80.一般來說,可使用正相色譜分離(B)A.酚B帶電離子C.醇D.有機酸81.分子篩層析指的是(C)A.吸附層析B分派層析C.凝膠過濾D.親和層析82.常用的紫外線波長有兩種(B)A.256nm和365nmB254nm和365nmC.254nm和367nmD.256nm和367nm83.以氧化鋁和硅膠為介質進行層析,由于對極性稍大的成分其Rf(B)A.大B?。?中檔D.不一定84.對于吸附的強弱描述錯誤的是(A)A.吸附現(xiàn)象與兩相界面張力的減少成反比B某物質自溶液中被吸附限度與其在溶液中的溶解度成正比C.極性吸附劑容易吸附極性物質D.非極性吸附劑容易吸附非極性物質85.進行梯度洗脫,若用50g吸附劑,一般每份洗脫液量常為(C)A.20rnLB100rnLC.50rnLD.90rnL86.離子互換用的層析柱直徑和柱長比一般為(B)之間A.1:10-1:20B1:10-1:50C.1:10-1:30D.87.離子互換層析的上樣時,上樣量一般為柱床體積的(C)為宜。A.2%-5%B1%-2%C.1%-5%D.3%-7%88.通過改變pH值從而使與離子互換劑結合的各個組分被洗脫下來,可使用(A)A.陽離子互換劑一般是pH值從低到高洗脫B陽離子互換劑一般是pH值從高到低洗脫C.陰離子互換劑一般是pH值從低到高D.以上都不對89.那一種凝膠的孔徑最小(A)A.SephadexG-25BSephadexG-50C.SephadexG-100D.90.那一種凝膠的吸水量最大(D)A.SephadexG-25BSephadexG-50C.SephadexG-100D.SephadexG-20091.葡聚糖凝膠可使用那種溶劑溶脹(C)A.甲醇B乙醇C.緩沖液D.乙酸乙酯92.疏水親和吸附層析通常在(D)的條件下進行A.酸性B堿性C.中D.高濃度鹽溶液93.當硅膠吸水量在(B)以上時,就失去其吸附作用A.13%B17%C.10%D.15%94.氣相色譜的載氣不能用(C)A.氫氣B氦氣C.氧氣D.氮氣95.關于電泳分離中遷移率描述對的的是(A)A.帶電分子所帶凈電荷成正比B分子的大小成正比C.緩沖液的黏度成正比D.以上都不對96.在什么情況下得到粗大而有規(guī)則的晶體(A)A.晶體生長速度大大超過晶核生成速度B晶體生長速度大大低于過晶核生成速度C.晶體生長速度等于晶核生成速度D.以上都不對97.恒速干燥階段與降速干燥階段,那一階段先發(fā)生(A)A.恒速干燥階段B降速干燥階段C.同時發(fā)生D.只有一種會發(fā)生98.珠磨機破碎細胞,合用于(D)A.酵母菌B大腸桿菌C.巨大芽孢桿菌D.青霉99.為加快過濾效果通常使用(C)A.電解質B高分子聚合物C.惰性助濾劑D.活性助濾劑100.不能用于固液分離的手段為(C)A.離心B過濾C.超濾D.雙水相萃取101.最常用的干燥方法有(D)A、常壓干燥B、減壓干燥C、噴霧干燥D、以上都是102.下列哪個不屬于高度純化:(B)A.層析B.吸附法C.親和層析D.凝膠層析103.酶提取液中,除所需酶外,還具有大量的雜蛋白、多糖、脂類和核酸等,為了進一步純化,可用(E)方法除去雜質。A、調pH值和加熱沉淀法B、蛋白質表面變性法C、降解或沉淀核酸法D、運用結合底物保護法除去雜蛋白E、以上都可以104.物理萃取即溶質根據(jù)(B)的原理進行分離的A.吸附B.相似相溶C分子篩D親和105.納米過濾的濾膜孔徑(D)A0.02~10μmB0.001~0.02μmC<2nmD<1nm106.適合小量細胞破碎的方法是(B)A.高壓勻漿法B.超聲破碎法C.高速珠磨法D.高壓擠壓法107.人血清清蛋白的等電點為4.64,在PH為7的溶液中將血清蛋白質溶液通電,清蛋白質分子向(A)A:正極移動;B:負極移動;C:不移動;D:不擬定。108.單寧沉析法制備菠蘿蛋白酶實驗中,加入1%的單寧于鮮菠蘿汁中產(chǎn)生沉淀,屬于(D)沉析原理。A鹽析B有機溶劑沉析C等電點沉析D有機酸沉析109.關于疏水柱層析的操作錯誤(D)A疏水層析柱裝柱完畢后,通常要用品有高鹽濃度的緩沖液進行平衡B疏水層析是運用蛋白質與疏水性吸附劑之間的弱疏水性互相作用的差別進行分離純化的層析技術C洗脫后的層析柱再生解決,可用8mol/L尿素溶液或含8mol/L尿素的緩沖溶液洗滌,然后用平衡緩沖液平衡D疏水柱層析分辨率很高、流速慢、加樣量小110.結晶法對溶劑選擇的原則是(C)A、對有效成分溶解度大,對雜質溶解度?。隆τ行С煞秩芙舛刃?,對雜質溶解度大C、對有效成分熱時溶解度大冷時溶解度小,對雜質冷熱都溶或都不溶D、對有效成分冷熱時都溶,對雜質則不溶E、對雜質熱時溶解度大,冷時溶解度?。?1.合用于分離糖、苷等的SephadexG的分離原理是(C)A、吸附B、分派比C、分子大小D、離子互換E、水溶性大?。保?.關于分派柱層析的基本操作錯誤(D)。A裝柱分干法和濕法兩種B分派柱層析法使用兩種溶劑,事先必須先使這兩個互相相飽和C用硅藻土為載體,需分批小量地倒入柱中,用一端是平盤的棒把硅藻壓緊壓平D分派柱層析合用于分離極性比較小、在有機溶劑中溶解度大的成分,或極性很相似的成分。113.在高效液相色譜中,下列哪種檢測器不適合于在梯度洗脫時使用.(D)A.紫外檢測器B.熒光檢測器C.蒸發(fā)光散射檢測器D.示差折光檢測器114.網(wǎng)格高聚物吸附劑吸附的弱酸性物質,一般用下列哪種溶液洗脫。(D)A.水B.高鹽C.低pHD.高pH115.下列哪項不屬于發(fā)酵液的預解決:(D)A.加熱
B.調pHC.絮凝和凝聚D.層析116.下列哪個不屬于初步純化:(C)A.沉淀法B.吸附法C.離子互換層析D.萃取法117.顆粒與流體的密度差越小,顆粒的沉降速度(A)A.越小B.越大C.不變D.無法擬定118.鹽析法沉淀蛋白質的原理是(B)A.減少蛋白質溶液的介電常數(shù)B.中和電荷,破壞水膜C.與蛋白質結合成不溶性蛋白D.調節(jié)蛋白質溶液pH到等電點119.高效液相色譜儀的種類很多,但是無論何種高效液相色譜儀,基本上由(D)組成。A高壓輸液系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、過濾系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)或色譜工作站等五大部分B進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)或色譜工作站四大部分C高壓輸液系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)四大部分D高壓輸液系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)或色譜工作站等五大部分120.影響電泳分離的重要因素(B)A光照B待分離生物大分子的性質C濕度D電泳時間121.超濾膜通常不以其孔徑大小作為指標,而以截留分子量作為指標。所謂“分子量截留值”是指阻留率達(B)的最小被截留物質的分子量。A80%以上B90%以上C70%以上D95%以上122.在凝膠過濾(分離范圍是5000~400000)中,下列哪種蛋白質最先被洗脫下來(B)A.細胞色素C(13370)B.肌球蛋白(400000)C.過氧化氫酶(247500)D.血清清蛋白(68500)E.肌紅蛋白(16900)123.“類似物容易吸附類似物”的原則,一般極性吸附劑適宜于從何種溶劑中吸附極性物質(B)A.極性溶劑B.非極性溶劑C.水D.溶劑124.可以除去發(fā)酵液中鈣、鎂、鐵離子的方法是(C)A.過濾B.萃取C.離子互換D.蒸餾125.從四環(huán)素發(fā)酵液中去除鐵離子,可用(B)A.草酸酸化B.加黃血鹽C.加硫酸鋅D.氨水堿化126.當向蛋白質純?nèi)芤褐屑尤胫行喳}時,蛋白質溶解度(C)A、增大B、減小C、先增大,后減小D、先減小,后增大127.關于大孔樹脂洗脫條件的說法,錯誤的是:(A)A、最常用的是以高級醇、酮或其水溶液解吸。B、對弱酸性物質可用堿來解吸。C、對弱堿性物質可用酸來解吸。D、如吸附系在高濃度鹽類溶液中進行時,則經(jīng)常僅用水洗就能解吸下來。128.為了進一步檢查凝膠柱的質量,通常用一種大分子的有色物質溶液過柱,常見的檢查物質為藍色葡聚糖,下面不屬于它的作用的是(C)A、觀測柱床有無溝流B、觀測色帶是否平整C、測量流速D、測量層析柱的外水體積129.親和層析的洗脫過程中,在流動相中減去配基的洗脫方法稱作(D)A、陰性洗脫B、劇烈洗脫C、正洗脫D、負洗脫130.下列細胞破碎的方法中,哪個方法屬于非機械破碎法(A)A.化學法B.高壓勻漿C.超聲波破碎D.高速珠磨131.下列哪一項不是常用的濾布材料(C)A.法蘭絨B.帆布C.濾紙D.斜紋布132.超濾膜截留的顆粒直徑為(B)A0.02~10μmB0.001~0.02μmC<2nmD<1nm133.陰樹脂易受有機物污染,污染后,可用(B)解決A檸檬酸B10%NaCl+2%~5%NaOH混合溶液C氨基三乙酸DEDTA134.關于用氫鍵形成來判斷各類溶劑互溶規(guī)律,下列(A)項是對的的敘述。A、氫鍵形成是能量釋放的過程,若溶劑混合后形成的氫鍵增長或強度更大,則有助于互溶。B、氫鍵形成是能量吸取的過程,若溶劑混合后形成的氫鍵增長或強度更大,則有助于互溶。C、氫鍵形成是能量釋放的過程,若溶劑混合后形成的氫鍵增長或強度更大,則不利于互溶。D、氫鍵形成是能量吸取的過程,若溶劑混合后形成的氫鍵增長或強度更大,則不利于互溶。135.HPLC是哪種色譜的簡稱(C)。A.離子互換色譜B.氣相色譜C.高效液相色譜D.凝膠色譜136.洗脫體積是(C)。A、凝膠顆粒之間空隙的總體積B、溶質進入凝膠內(nèi)部的體積C、與該溶質保存時間相相應的流動相體積D、溶質從柱中流出時所用的流動相體積137.分子篩層析純化酶是根據(jù)(C)進行純化。A.根據(jù)酶分子電荷性質的純化方法B.調節(jié)酶溶解度的方法C.根據(jù)酶分子大小、形狀不同的純化方法D.根據(jù)酶分子專一性結合的純化方法138.用于蛋白質分離過程中的脫鹽和更換緩沖液的色譜是(C)A.離子互換色譜B.親和色譜C.凝膠過濾色譜D.反相色譜139.用活性炭色譜分離糖類化合物時,所選用的洗脫劑順序為:(D)A、先用乙醇洗脫,然后再用水洗脫B、用甲醇、乙醇等有機溶劑洗脫C、先用乙醇洗脫,再用其他有機溶劑洗脫D、先用水洗脫,然后再用不同濃度乙醇洗脫140.微濾膜所截留的顆粒直徑為(A)A0.02~10μmB0.001~0.02μmC<2nmD<1nm141.下列哪一項不是陽離子互換樹脂(D)A氫型B鈉型C銨型D羥型142.適合于親脂性物質的分離的吸附劑是(B)。A.活性炭B.氧化鋁C.硅膠D.磷酸鈣143.氣相色譜柱重要有(C)。A填充柱B毛細管柱CA或BDA或B及其他144.關于分派柱層析的基本操作錯誤(D)。A裝柱分干法和濕法兩種B分派柱層析法使用兩種溶劑,事先必須先使這兩個互相相飽和C用硅藻土為載體,需分批小量地倒入柱中,用一端是平盤的棒把硅藻壓緊壓平D分派柱層析合用于分離極性比較小、在有機溶劑中溶解度大的成分,或極性很相似的成分。145.按分離原理不同,電泳可分為(A)A區(qū)帶電泳、自由界面電泳、等速電泳、等電聚焦電泳B紙電泳、醋酸纖維薄膜電泳、瓊脂凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳C區(qū)帶電泳、自由界面電泳、紙電泳、醋酸纖維薄膜電泳D等速電泳、等電聚焦電泳、瓊脂凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳146.在酸性條件下用下列哪種樹脂吸附氨基酸有較大的互換容量(C)A.羥型陰B.氯型陰C.氫型陽D.鈉型陽147.超臨界流體萃取法合用于提取(B)A、極性大的成分B、極性小的成分C、離子型化合物D、能氣化的成分E、親水性成分148.分離純化初期,由于提取液中成分復雜,目的物濃度稀,因而易采用(A)A、分離量大分辨率低的方法B、分離量小分辨率低的方法C、分離量小分辨率高的方法D、各種方法都實驗一下,根據(jù)實驗結果擬定149.蛋白質類物質的分離純化往往是多環(huán)節(jié)的,其前期解決手段多采用下列哪類的方法。(B)A.分辨率高B.負載量大C.操作簡便D.價廉150.親和層析的洗脫過程中,在流動相中減去配基的洗脫方法稱作(D)A.陰性洗脫B.劇烈洗脫C.正洗脫D.負洗脫151.將四環(huán)素粗品溶于pH2的水中,用氨水調pH4.5—4.6,28-30℃A、有機溶劑結晶法B、等電點法C、透析結晶法D、鹽析結晶法152.針對配基的生物學特異性的蛋白質分離方法是(C)。A.凝膠過濾B.離子互換層析C.親和層析D.紙層析153.下列哪項不是常用的樹脂再生劑(D)A1%~10%HClBH2S04、CNaCl、D蒸餾水154.反滲透膜的孔徑小于(C)A0.02~10μmB0.001~0.02μmC<2nmD<1nm155.親和層析的洗脫過程中,在流動相中加入配基的洗脫方法稱作(C)A、陰性洗脫B、劇烈洗脫C、競爭洗脫D、非競爭洗脫156.凝膠層析中,有時溶質的Kd>1,其因素是(B)A、凝膠排斥B、凝膠吸附C、柱床過長D、流速過低157.活性炭在下列哪種溶劑中吸附能力最強?(A)A、水B、甲醇C、乙醇D、三氯甲烷158.將配基與可溶性的載體偶聯(lián)后形成載體-配基復合物,該復合物可選擇性地與蛋白質結合,在一定條件下沉淀出來,此方法稱為(A)A、親和沉淀B、聚合物沉淀C、金屬離子沉淀D、鹽析沉淀159.在一定的pH和溫度下改變離子強度(鹽濃度)進行鹽析,稱作(A)A、KS鹽析法B、β鹽析法C、反復鹽析法D、分部鹽析法160.在超濾過程中,重要的推動力是(C)A、濃度差B、電勢差C、壓力D、重力161.下面關于親和層析載體的說法錯誤的是(B)A、載體必須能充足功能化。B、載體必須有較好的理化穩(wěn)定性和生物親和性,盡量減少非專一性吸附。C、載體必須具有高度的水不溶性和親水性。D、抱負的親和層析載體外觀上應為大小均勻的剛性小球。162.在選用凝膠層析柱時,為了提高分辨率,宜選用的層析柱是(A)A、粗且長的B、粗且短的C、細且長的D、細且短的163.假如用大腸桿菌作為宿主細胞,蛋白表達部位為周質,下面哪種細胞破碎的方法最佳?(C)A.勻漿法B.超聲波法C.滲透壓休克法D.凍融法164.鹽析法與有機溶劑沉淀法比較,其優(yōu)點是(B)A.分辨率高B.變性作用小C.雜質易除D.沉淀易分離165.在萃取液用量相同的條件下,下列哪種萃取方式的理論收率最高(C)A.單級萃取B.三級錯流萃取C.三級逆流萃取D.二級逆流萃取166.磺酸型陽離子互換樹脂可用于分離(E)A、強心苷B、有機酸C、醌類D、苯丙素E、生物堿167.不能用于糖類提取后的分離純化的方法是(B)A、活性炭柱色譜法B、酸堿溶劑法C、凝膠色譜法D、分級沉淀法E、大孔樹脂色譜法168.用大孔樹脂分離苷類常用的洗脫劑是(B)A、水B、含水醇C、正丁醇D、乙醚E、氯仿三、判斷題助濾劑是一種可壓縮的多孔微粒。(×)通過加入某些反映劑是發(fā)酵液進行預解決的方法之一。(√)高級醇能被細胞壁中的類脂吸取,使胞壁膜溶脹,導致細胞破碎。(×)極性溶劑與非極性溶劑互溶。(×)溶劑萃取中的乳化現(xiàn)象一定存在。(×)臨界壓力是液化氣體所需的壓力。(×)進料的溫度和pH會影響膜的壽命。(√)液膜能把兩個互溶但組成不同的溶液隔開。(√)流動相為氣體則稱為氣相色譜。(√)用冷溶劑溶出固體材料中的物質的方法又稱浸煮。(×)用熱溶劑溶出固體材料中的物質的方法又稱浸漬。(×)在生物制劑制備中,常用的緩沖系統(tǒng)有磷酸鹽緩沖液;碳酸鹽緩沖液;鹽酸鹽緩沖液;醋酸鹽緩沖液等。(×)要增長目的物的溶解度,往往要在目的物等電點附近進行提取。(×)應用有機溶劑提取生化成分時,一般在較高溫度下進行。(×)常壓干燥濃縮的缺陷是設備投資及操作維護費用高,生產(chǎn)能力不太大。(×)生物物質中最常用的干燥方法是減壓干燥。(√)冷凍干燥合用于高度熱敏的生物物質。(√)溶劑的極性從小到大為丙醇>乙醇>水>乙酸。(√)蛋白質變性,一級、二級、三級結構都被破壞。(×)蛋白質類的生物大分子在鹽析過程中,最佳在高溫下進行,由于溫度高會增長其溶解度。(×)吸附劑氧化鋁的活性與其含水量無關。(×)酸性、中性、堿性氨基酸在強堿性陰離子互換樹脂柱上的吸附順序是堿性氨基酸>中性氨基酸>酸性氨基酸(×)離子互換劑是一種不溶于酸、堿及有機溶劑的固態(tài)學分子化合物。(√)蛋白質變性后溶解度減少,重要是由于電荷被中和及水膜被去除所引起的。(×)溶劑的極性從小到大為丙醇>乙醇>水>乙酸。(√)當某一蛋白質分子的酸性氨基酸殘基數(shù)目等于其堿性氨基酸殘基數(shù)目時,此蛋白質的等電點為7.0。(√)采用氧化鋁為吸附劑時,用洗脫劑應從高極性開始,逐漸減低,洗脫劑的極性。(×)重蒸餾法常為制備無鹽水的方法。(×)板框壓濾機可過濾所有菌體。(×)高壓勻漿法可破碎高度分枝的微生物。(×)超聲波破碎法的有效能量運用率極低,操作過程產(chǎn)生大量的熱,因此操作需在冰水或有外部冷卻的容器中進行。(√)凍結的作用是破壞細胞膜的疏水鍵結構,減少其親水性和通透性。(×)有機溶劑被細胞壁吸取后,會使細胞壁膨脹或溶解,導致破裂,把細胞內(nèi)產(chǎn)物釋放到水相中去。(√)蛋白質為兩性電解質,改變pH可改變其荷電性質,pH﹥pI蛋白質帶正電。(×)蛋白質為兩性電解質,改變pH可改變其荷電性質,pH﹥pI蛋白質帶負電。(√)蛋白質為兩性電解質,改變pH可改變其荷電性質,pH﹤pI蛋白質帶負電。(×)蛋白質為兩性電解質,改變pH可改變其荷電性質,pH﹤pI蛋白質帶正電。。(√)離心是基于固體顆粒和周邊液體密度存在差異而實現(xiàn)分離的。(√)不同高分子化合物的溶液互相混合可形成兩相或多相系統(tǒng),如葡聚糖與聚乙二醇(PEG)按一定比例與水混合后,溶液先呈渾濁狀態(tài),待靜置平衡后,逐漸提成互不相溶的兩相,上相富含PEG,下相富含葡聚糖。(√)不同高分子化合物的溶液互相混合可形成兩相或多相系統(tǒng),如葡聚糖與聚乙二醇(PEG)按一定比例與水混合后,溶液先呈渾濁狀態(tài),待靜置平衡后,逐漸提成互不相溶的兩相,下相富含PEG,上相富含葡聚糖。(×)超臨界流體溫度不變條件下,溶解度隨密度(或壓力)的增長而增長,而在壓力不變時,溫度增長情況下,溶解度有也許增長或下降。(√).鹽析是運用不同物質在高濃度的鹽溶液中溶解度的差異,向溶液中加入一定量的中性鹽,使原溶解的物質沉淀析出的分離技術。(√)硫酸銨在堿性環(huán)境中可以應用。(×)在低鹽濃度時,鹽離子能增長生物分子表面電荷,使生物分子水合作用增強,具有促進溶解的作用。(√)向具有生化物質的水溶液中加入一定量親水性的有機溶劑,能使生化物質沉淀析出。(√)丙酮沉析作用小于乙醇。(×)有機溶劑與水混合要在低溫下進行。(√)有機溶劑沉析分辨能力比鹽析高。(√)若兩性物質結合了較多陽離子,則等電點pH減少。(×)等電點沉淀在實際操作中應避免溶液pH上升至5以上。(√)納米過濾膜孔徑最小。(×)離子互換速率總是取決于內(nèi)部擴散速率。(×)酚型樹脂則應在pH小于9的溶液中才干進行反映。(×)伯胺基在pH<7的溶液中使用。(√)在70~80℃時鹽型樹脂的分解反映達成初步脫鹽而不用酸堿再生劑的這種樹脂叫熱再生樹脂。(√對強酸性樹脂一般選擇氨水、甲醇及甲醇緩沖液等作洗脫劑。(√)陰樹脂易受有機物污染,可用有機溶劑浸泡或淋洗。(×)如不慎樹脂失水,應先用水浸泡。(×)只有樹脂對被互換離子比原結合在樹脂上的離子具有更高的選擇性時,靜態(tài)離子互換操作才有也許獲得較好的效果。(√)層析分離是一種化學的分離方法。(×)分離純化極性大的分子(帶電離子等)采用反相色譜(或正相柱),(×)而分離純化極性小的有機分子(有機酸、醇、酚等)多采用正相色譜(或反相柱)。(×)吸附力較弱的組分,有較低的Rf值。(×)離子互換劑可以分為3部分:高分子聚合物基質、電荷基團和被互換離子。(×)任何情況都優(yōu)先選擇較小孔隙的互換劑。(×)凝膠柱層析可進行生物大分子分子量的測定。(√)在高濃度鹽溶液中疏水性互相作用減小。(×)色譜分離技術中固定相都是固體。(×)色譜分離技術中被檢測物質的峰越寬越好。(×)制備型HPLC對儀器的規(guī)定不像分析型HPLC那樣苛刻。(√)在聚丙烯酰胺凝膠中加入陰離子去污劑十二烷基硫酸鈉(SDS),影響凝膠的形成。(×)等電聚焦電泳會形成的一個由陽極到陰極逐步遞減的pH梯度。(×)在恒速干燥階段,過程速度由水分從物料內(nèi)部移動到表面的速度即內(nèi)擴散所控制。(×)在降速干燥階段,干燥速度由水的表面汽化速度即外擴散所控制法。(×)滲透壓沖擊是各種細胞破碎法中最為溫和的一種,合用于易于破碎的細胞,如動物細胞和革蘭氏陽性菌。(×)等密度梯度離心中,梯度液的密度要包含所有被分離物質的密度。(√)可以用紙色譜的方法來選擇、設計液-液萃取分離物質的最佳方案。(√)SephadexLH-20的分離原理重要是分子篩和正相分派色譜。(√)酸性、中性、堿性氨基酸在強堿性陰離子互換樹脂柱上的吸附順序是堿性氨基酸>中性氨基酸>酸性氨基酸(×)等密度梯度離心適于分離大小相同密度不同的物質。(√)當氣體的溫度超過其臨界溫度,壓力超過臨界壓力之后,物質的聚集狀態(tài)就介于氣態(tài)和液態(tài)之間,成為超臨界流體。(√)鹽析反映完全需要一定期間,一般硫酸銨所有加完后,應放置30min以上才可進行固-液分離。(√)層析點樣時用一根毛細管,吸取樣品溶液,在距薄層一端1.5^-2cm的起始線上點樣,樣品點直徑小于3mm。(√疏水柱層析可直接分離鹽析后或高鹽洗脫下來的蛋白質、酶等生物大分子溶液(√)某結晶物質經(jīng)硅膠薄層色譜,用一種展開劑展開,顯示單一斑點,所以該晶體為一單體。(×)水提醇沉法時根據(jù)物質溶解度差別進行分離的方法。(√)采用溶劑提取法提取中草藥有效成分時,選擇溶劑的原則是“相似相溶原則”。(√)凝聚與絮凝作用的原理是相同的,只是沉淀的狀態(tài)不同。(×)凍結-融化法凍結的作用是破壞細胞膜的疏水鍵結構,增長其親水性和通透性來破壞細胞的。(√)發(fā)生乳化現(xiàn)象對萃取是有利的。(×)丙酮,介電常數(shù)較低,沉析作用大于乙醇,所以在沉析時選用丙酮較好。(×)由于pH值也許對蛋白的穩(wěn)定性有較大的影響,故一般通常采用改變離子強度的梯度洗脫(√)鹽析作用也能減少有機溶劑在水中的溶解度,使提取液中的水分含量減少??梢源偈股镔|轉入有機相從而提高萃取率。(√)珠磨法中適本地增長研磨劑的裝量可提高細胞破碎率。(×)中性多糖類藥物常用水作溶劑來提取,也可用水浸煮,也可以用冷水浸提。(∨)凝膠層析會使得大分子物質后流出,小分子物質先流出。(×)有機溶劑(如胍、乙醇、尿素和異丙醇等)可以削弱疏水分子間的互相作用??梢杂糜谌魏我?guī)模的細胞破碎。(√)液一液萃取時,常發(fā)生乳化作用,使有機溶濟與水相分層困難。并且無法恢復。(×)蛋白質變性后溶解度減少,重要是由于電荷被中和及水膜被去除所引起的。(×)活性氧化鋁可分三種類型:堿性氧化鋁、中性和酸性氧化鋁。(√)細胞破碎技術是生物分離操作中必需的環(huán)節(jié)。(×)離心操作時,對稱放置的離心管要達成體積相同才干進行離心操作。(×)分派系數(shù)K與溶質的濃度和相體積比無關,它重要取決于相系統(tǒng)的性質、被萃取物質的表面性質和溫度。(√)甲醇沉淀作用與乙醇相稱,但對蛋白質的變性作用比乙醇、丙酮都小,所以應用廣泛。(×)氨基酸、蛋白質、多肽、酶、核酸等兩性物質可用等電點沉析。(√)同時具有酸、堿兩種基團的樹脂叫兩性樹脂(√)氧化鋁和硅膠都為親水性吸附劑,由于對極性稍大的成分吸附力大,所以極性大的成分難以解吸附,Rf小,極性小的成分容易被解吸附,Rf大。同類成分的極性大小重要取決于以下因素。(√)鹽析一般可在室溫下進行,當解決對溫度敏感的蛋白質或酶時,鹽析操作要在低溫下(如0℃~4℃)進行。(蛋白質類的生物大分子在鹽析過程中,最佳在高溫下進行,由于溫度高會增長其溶解度。(×)液膜能把兩個互溶但組成不同的溶液隔開。(√)沉淀法、吸附法、萃取法、超濾法都是進行初步純化。(√)滲透壓沖擊是各種細胞破碎法中最為溫和的一種,合用于易于破碎的細胞,如動物細胞和革蘭氏陰性菌。(√)同一化合物用不同溶劑重結晶,其結晶的熔點也許有差距。(√)化學萃取即溶質根據(jù)相似相溶的原理在兩相間達成分派平衡,萃取劑與溶質之間不發(fā)生化學反映。(×)若兩性物質結合了較多陽離子(如Ca2+、Mg2+、Zn2+等),則等電點pH升高。(√)采用凝膠過濾分離蛋白質重要取決于蛋白質分子的大小,先將蛋白質混合物上柱然后進行洗脫,小分子的蛋白質由于所受排阻力較小一方面被洗脫出來。(×)樹脂使用后不可再回收。(×)四、填空發(fā)酵液常用的固液分離方法有(離心)和(過濾)等。常用的蛋白質沉析方法有(等電點沉淀),(鹽析)和(有機溶劑沉淀)。陽離子互換樹脂按照活性基團分類,可分為(強酸型),(弱酸型)和(中檔強度);其典型的活性基團分別有(磺酸基團),(羧基),(磷酸基)。蛋白質分離常用的色譜法有(凝膠色譜法),(多糖基離子互換色譜法),(高效液相色譜法)和(親和色譜法)。為使過濾進行的順利通常要加入(惰性助濾劑)。離子互換分離操作中,常用的洗脫方法有(pH梯度)和(離子強度(鹽)梯度)。陰離子互換樹脂按照活性基團分類,可分為(強堿型),(弱堿型)和(中檔強度);其典型的活性基團分別有(季氨基)、(伯、仲、叔氨)、(強弱基團都具有)。離子互換樹脂由(載體),(活性基團)和(可互換離子)組成。常用的化學細胞破碎方法有(滲透沖擊),(酶消化法),(增溶法),(脂溶法)和(堿解決法)。DEAESepharose是(陰)離子互換樹脂,其活性基團是(二乙基氨基乙基)。影響離子互換選擇性的因素有(離子化合價),(離子水化半徑),(溶液濃度),(離子強度),(溶液的pH值),(有機溶劑),(樹脂物理結構)和(輔助力)。CMSepharose是(陽)離子互換樹脂,其活性基團是(羧甲基)工業(yè)離心設備從形式上可分為(管式),(套筒式),(碟片式),等型式。膜分離過程中所使用的膜,依據(jù)其膜特性(孔徑)不同可分為(微濾膜),(超濾膜),(納濾膜)和(反滲透膜)。工業(yè)上常用的超濾裝置有(板式),(管式),(螺旋卷式)和(中空纖維式)。影響吸附的重要因素有(吸附劑的性質),(吸附質的性質),(溫度),(溶液pH值),(鹽濃度)和(吸附物濃度和吸附劑用量)。影響鹽析的因素有(溶質種類),(溶質濃度),(pH值)和(溫度)。簡樸地說,離子互換過程事實上只有(外部擴散),(內(nèi)部擴散)和(化學互換反映)三步;反相高效液相色譜的固定相是(非極性)的,而流動相是(極性)的;常用的固定相有(C18)和(C8);常用的流動相有(甲醇)和(乙睛)。超臨界流體的特點是與氣體有相似的(粘度(擴散系數(shù))),與液體有相似的(密度)。等電聚焦電泳法分離不同蛋白質的原理是依據(jù)其(等電點(pI))的不同;根據(jù)分離機理的不同,色譜法可分為(吸附色譜),(離子互換色譜),(凝膠色譜),(分派色譜)和(親和色譜)。典型的工業(yè)過濾設備有(板框壓濾機)和(真空轉鼓過濾機)。常用離心設備可分為(離心沉降)和(離心過濾)兩大類;根據(jù)物化理論,萃取達成平衡時,溶質在萃取相和萃余相中的(濃度的比值)一定;根據(jù)吸附劑與吸附質之間存在的吸附力性質的不同,可將吸附分為(物理)、(化學)、(極性)和(互換)吸附;離子互換操作一般分為(動態(tài))和(靜態(tài))兩種;蛋白質等生物大分子,在溶液中呈穩(wěn)定的分散狀態(tài),其因素是由于(分子表面電荷)和(水化層);鹽析用鹽的選擇需考慮(鹽析作用強)、(溶解度大)、(生物學惰性)和(來源豐富、經(jīng)濟)等幾個方面的因素;影響有機溶劑沉淀的因素有(溫度)、(pH)、(樣品濃度)、(中性鹽濃度)和(金屬離子)。結晶涉及三個過程(過飽和溶液的形成)、(晶核的形成)和(晶體的生長)。過飽和溶液的形成方法有(飽和溶液冷卻)、(部分溶劑蒸發(fā))、(解析)和(化學反映結晶)。物料中所含水分可分為(結合水)和(非結合水)三種;根據(jù)干燥曲線,物料干燥可分為(恒速干燥階段)和(降速干燥階段)兩個階段;液-液萃取從機理上分析可分為(物理萃取)和(化學萃取)兩類;大孔網(wǎng)狀吸附劑有(非極性)、(中檔極性)和(極性)三種重要類型;影響離子互換速度的因素有(樹脂粒度)、(交聯(lián)度)、(溶液流速)、(溫度)、(離子的大?。?離子的化合價)和(離子濃度)。分派色譜的基本構成要素有(載體)、(固定相)和(流動相)。分子篩色譜也稱(凝膠色譜)的重要應用是(脫鹽)和(分級分離)根據(jù)膜結構的不同,常用的膜可分為(對稱性膜)、(非對稱膜)和(復合膜)三類;固體可分為(結晶)和(無定型)兩種狀態(tài);結晶的前提是(過飽和溶液的形成);結晶的推動力是(溶液的過飽和度);根據(jù)晶體生長擴散學說,晶體的生長涉及(溶質借擴散作用從溶液中轉移到晶體的表面)、(溶質長入晶面放出結晶熱)和(結晶熱傳遞回到溶液中)三個過程;影響晶體生長速度的重要因素有(雜質)、(攪拌)、(過飽和度)和(溫度)。五、簡答與問答題1、試述凝膠色譜的原理?答:將混合原料加在柱上并用流動相洗脫,則無法進入孔隙內(nèi)部的大分子直接被洗脫下來,小分子由于可以進入孔隙內(nèi)部而受到很大的阻滯,最晚被洗脫下來,而中檔大小的分子,雖然可以進入孔隙內(nèi)部但并不進一步,受到的阻滯作用不強,因而在兩者之間被洗脫下來。2、在色譜操作過程中為什么要進行平衡?答:1、流速平衡:流速是柱層析操作當中的重要影響因素,流速的快慢直接影響著分離的效果,流速過快,混合物得不到完全的分離,流速過慢,整體分離的時間要延長,因此在分離前一方面要擬定留宿。2、液體環(huán)境:為了保持被分離物質運動的均一性,以及好的吸附和解析效果,因此要保持孔隙內(nèi)部和外部液體環(huán)境的一致,所以進行液體環(huán)境的平衡。3、以羧酸吸附蛋白質為例,簡要說明離子互換樹脂的洗脫方法及其原理?答:1、加堿:重要是調節(jié)蛋白質到達等電點,是蛋白質帶電量減少,吸附力下降從而被洗脫下來。2、加酸:重要是克制羧酸的電離,使活性基團帶電量下降,吸附力下降從而蛋白質被洗脫下來。3、加鹽:依照質量作用定律,把蛋白質洗脫下來。3、在離子互換色譜操作中,如何選擇離子互換樹脂?答:1、對陰陽離子互換樹脂的選擇:正電荷選擇陽離子互換樹脂,負電荷選擇陰離子互換樹脂。2、對離子互換樹脂強弱的選擇:較強的酸性或堿性,選擇選用弱酸性或弱堿性樹脂。3、對離子互換樹脂離子型的選擇:根據(jù)分離的目的,弱酸或弱堿性樹脂不使用H或OH型。4、簡述鹽析的原理及產(chǎn)生的現(xiàn)象?答:當中性鹽加入蛋白質分散體系時也許出現(xiàn)以下兩種情況:(1)“鹽溶”現(xiàn)象—低鹽濃度下,蛋白質溶解度增大(2)“鹽析”現(xiàn)象—高鹽濃度下,蛋白質溶解度隨之下降,因素如下:(a)無機離子與蛋白質表面電荷中和,形成離子對,部分中和了蛋白質的電性,使蛋白質分子之間的排斥力減弱,從而可以互相靠攏;(b)中性鹽的親水性大,使蛋白質脫去水化膜,疏水區(qū)暴露,由于疏水區(qū)的互相作用導致沉淀;5、簡述吸附色譜分離技術的原理?答:運用溶質與吸附劑之間的分子吸附力(范德華力,涉及色散力、誘導力、定向力以及氫鍵)的差異而實現(xiàn)分離6、在運用離子互換技術提取蛋白質時,為什么要使用多糖基離子互換劑?答:由于離子互換樹脂孔徑小,大分子蛋白質難以進入。同時,樹脂內(nèi)部重要為疏水性,對親水性的蛋白質會產(chǎn)生影響。而多糖基離子互換劑沒有上述問題。7、簡述過飽和溶液形成的方法?答:(1)熱飽和溶液冷卻(等溶劑結晶)合用于溶解度隨溫度升高而增長的體系;同時,溶解度隨溫度變化的幅度要適中;(2)部分溶劑蒸發(fā)法(等溫結晶法)合用于溶解度隨溫度減少變化不大的體系,或隨溫度升高溶解度減少的體系;(3)真空蒸發(fā)冷卻法使溶劑在真空下迅速蒸發(fā),并結合絕熱冷卻,是結合冷卻和部分溶劑蒸發(fā)兩種方法的一種結晶方法。(4)化學反映結晶加入反映劑產(chǎn)生新物質,當該新物質的溶解度超過飽和溶解度時,即有晶體析出;8、如何進行離子互換樹脂的預解決及轉型?答:物理解決:水洗、過篩,去雜,以獲得粒度均勻的樹脂顆粒;化學解決:轉型(氫型或鈉型)陽離子樹脂酸—堿—酸陰離子樹脂堿—酸—堿最后以去離子水或緩沖液平衡9、何謂等電點沉析法?答:蛋白質再等電點下的溶解度最低,根據(jù)這一性質,再溶液中加入一定比例的有機溶劑,破壞蛋白質表面的水化層和雙電層,減少分子間斥力,加強了蛋白質分子間的疏水互相作用,使得蛋白質分子得以聚集成團沉淀下來。10、何謂超臨界流體萃取,并簡述其分離原理?答:超臨界流體萃取是運用超臨界流體具有的類似氣體的擴散系數(shù),以及類似液體的密度(溶解能力強)的特點,運用超臨界流體為萃取劑進行的萃取單元操作。其特點是安全、無毒、產(chǎn)品分離簡樸,但設備投資較大。11、簡述結晶過程中晶體形成的條件?答:結晶過程涉及過飽和溶液的形成、晶核的形成及晶體的生長三個過程,其中溶液達成過飽和狀態(tài)是結晶的前提,過飽和度是結晶的推動力。12、簡述凝膠色譜的分離原理?答:凝膠排阻色譜的分離介質(填料)具有均勻的網(wǎng)格結構,其分離原理是具有不同分子量的溶質分子,在流經(jīng)柱床是,由于大分子難以進入凝膠內(nèi)部,而從凝膠顆粒之間流出,保存時間短;而小分子溶質可以進入凝膠內(nèi)部,由于凝膠多孔結構的阻滯作用,流經(jīng)體積變大,保存時間延長。這樣,分子量不同的溶質分子得以分離。13、膜分離過程中,有那些因素會導致膜污染,如何解決?答:(1)膜污染重要有兩種情況:一是附著層被濾餅、有機物凝膠、無機物水垢膠體物質或微生物等吸附于表面;另一種是料液中溶質結晶或沉淀導致堵塞。(3分)(2)膜污染是可以防止或減輕的,措施涉及料液預解決、膜性質的改善、操作條件改變等方式。(2分)(3)膜污染所引起的通量衰減往往是不可逆的,只能通過清洗的解決方式消除,涉及物理方法沖洗和化學藥品溶液清洗等。(2分)14、超臨界萃取的原理及SC-CO2萃取的優(yōu)點?答:原理:溶質在超臨界流體中的溶解度,與其密度有關,密度越大,溶解度越大。在臨界點附近,微小的壓力增長或溫度下降,則溶劑的密度大幅度增長,對溶質的溶解度將大幅度增長,有助于溶質的萃取。而在臨界點附近,微小的壓力下降或溫度上升,則溶劑的密度大幅度減少,對溶質的溶解度將大幅減少,有助于溶質的分離和溶劑的回收。優(yōu)點:無毒無腐蝕性,不可燃燒,價格低廉,傳質好萃取快,臨界溫度和臨界壓力較低適合于熱敏生物制品,可獲萃取物或萃余物15、何謂免疫親和層析,簡述親和免疫層析介質的制備過程?答、免疫親和層析是運用親和技術和色譜分離集成產(chǎn)生的一種高效色譜分離技術,其分離原理是通過抗原-抗體之間特異性的互相作用,從而實現(xiàn)高效的分離。層析介質的制備過程涉及:抗體的制備、抗體提取、載體活化,手臂鏈的連接、抗體的連接等環(huán)節(jié)。16、何謂親和吸附,有何特點?答:親和吸附是吸附單元操作的一種,它是運用親和吸附劑與目的物之間的特殊的化學作用實現(xiàn)的高效分離手段。親和吸附劑的組成涉及:惰性載體、手臂鏈、特異性親和配基。 親和吸附的特點是高效、簡便、合用范圍廣、分離速度快、條件溫和,但載體制備難度大,通用性差,成本較高。17、簡述生物分離過程的特點?答:1、產(chǎn)品豐富:產(chǎn)品的多樣性導致分離方法的多樣性2、絕大多數(shù)生物分離方法來源于化學分離3、生物分離一般比化工分離難度大(1)成分復雜(2)懸液中的目的產(chǎn)物濃度低(3)生物活性,條件相對溫和(4)生物產(chǎn)品規(guī)定高質量(5)獲得高純度的干燥產(chǎn)品(6)衛(wèi)生18、試比較凝聚和絮凝兩過程的異同?答:凝聚和絮凝——在電介質作用下,破壞溶質膠體顆粒表面的雙電層,破壞膠體系統(tǒng)的分散狀態(tài),使膠體粒子聚集的過程。凝聚:簡樸電解質減少膠體間的排斥力。從而范德華引力起主導作用,聚合成較大的膠粒,粒子的密度越大,越易分離。絮凝:指在某些高分子絮凝劑存在下,在懸浮粒子之間發(fā)生架橋作用而使膠粒形成粗大的絮凝團的過程19、簡述有機溶劑沉析的原理?答:1、概念:在具有溶質的水溶液中加入一定量親水的有機溶劑,減少溶質的溶解度,使其沉淀析出。2、原理:(1)減少了溶質的介電常數(shù),使溶質之間的靜電引力增長,從而出現(xiàn)聚集現(xiàn)象,導致沉淀。(2)由于有機溶劑的水合作用,減少了自由水的濃度,減少了親水溶質表面水化層的厚度,減少了親水性,導致脫水凝聚。20、膜分離技術的類型和定義?答:膜分離過程的實質是物質透過或被截留于膜的過程,近似于篩分過程,依據(jù)濾膜孔徑大小而達成物質分離的目的,故而可以按分離粒子大小進行分類:(1)微濾:以多孔細小薄膜為過濾介質,壓力為推動力,使不溶性物質得以分離的操作,孔徑分布范圍在0.025~14μm之間;(2)超濾:分離介質同上,但孔徑更小,為0.001~0.02μm,分離推動力仍為壓力差,適合于分離酶、蛋白質等生物大分子物質;(3)反滲透:是一種以壓力差為推動力,從溶液中分離出溶劑的膜分離操作,孔徑范圍在0.0001~0.001μm之間;(由于分離的溶劑分子往往很小,不能忽略滲透壓的作用,故而成為反滲透);(4)納濾:以壓力差為推動力,從溶液中分離300~1000小分子量的膜分離過程,孔徑分布在平均2nm;(5)電滲析:以電位差為推動力,運用離子互換膜的選擇透過性,從溶液中脫除或富集電解質的膜分離操作;21、影響液-固分離的因素?(一)微生物種類的影響一般真菌的菌絲比較粗大,液一固分離容易,含真菌菌體及絮凝蛋白質的發(fā)酵液,可采用鼓式真空過濾或板框過濾。對于酵母菌體,離心分離的方法具有較好的效果。但是細菌或細胞碎片相稱細小,液一固分離十分困難,用一般的離心分離或過濾方法效果很差,因此應先用預解決的各種手段來增大粒子,才干獲得澄清的濾液。(二)發(fā)酵液的黏度液一固分離的速度通常與黏度成反比。影響發(fā)酵液黏度的因素很多:(1)菌體種類和濃度不同,其黏度有很大差別。(2)不同的培養(yǎng)基組分和用量也會影響?zhàn)ざ?如用黃豆餅粉、花生餅粉作氮源,用淀粉作碳源會使黏度增大。發(fā)酵液中未用完的培養(yǎng)基較多或發(fā)酵后期用油作消沫劑也會使過濾困難。22、影響有機溶劑萃取分離的因素?影響液一液萃取的因素重要有目的物在兩相的分派比(分派系數(shù)K)和有機溶劑的用量
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