以EGFR為靶點(diǎn)的抗腫瘤藥物

以EGFR為靶點(diǎn)的抗腫瘤藥物

周晴2023/2/51copyright2006表皮生長因子受體(epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR)是一種廣泛分布于人體各組織細(xì)胞膜上的多功能糖蛋白，是HER/ErbB家族成員之一。該家族包括EGFR、HER2、HER3和HER4。2023/2/52copyright20062023/2/53copyright2006EGFR的蛋白結(jié)構(gòu)由三部分組成：

1.胞外區(qū)：伸出膜外與配體結(jié)合的氨基酸區(qū)域，由621個(gè)氨基酸殘基組成。

2.跨膜區(qū)：錨定在細(xì)胞膜上由23個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成螺旋狀結(jié)構(gòu)的中間跨膜區(qū)域。3.胞內(nèi)區(qū)：具有蛋白激酶結(jié)構(gòu)域的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)羧基端區(qū)域，包含542個(gè)氨基酸殘基。2023/2/54copyright2006

EGFR的配體包括表皮生長因子（EGF）、轉(zhuǎn)化生長因子TGFα

、amphiregulin、肝素結(jié)合表皮生長因子、betacellulin等。其中EGF和轉(zhuǎn)化生長因子TGFα是EGFR最重要的兩個(gè)配體。2023/2/55copyright2006EGFR與其配體結(jié)合后在細(xì)胞表面形成二聚體。這種二聚體包括與其本身形成的同源二聚體和與erbB家族其它成員形成的異源二聚體。2023/2/56copyright2006

表皮生長因子受體(EGFR)在腫瘤生長和分化中起重要作用,其結(jié)構(gòu)如圖a,當(dāng)其被配體EGF活化時(shí),通過二聚化使胞內(nèi)酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域被激活,從而受體被活化(圖b、c)。2023/2/57copyright2006受體二聚體化后，內(nèi)在的蛋白激酶活化，TK磷酸化從而激活其下游的3條主要信號(hào)通路：Ras2/Raf2/MAPK通路、磷脂酰三磷酸肌醇(PI3K)和絲蘇氨酸蛋白激酶(AKT)通路、JAK和STAT通路。3條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路最終介導(dǎo)細(xì)胞分化、生存、遷移、侵襲、黏附和細(xì)胞損傷修復(fù)等一系列過程。2023/2/58copyright20062023/2/59copyright2006表皮生長因子受體(EGFR)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的生長、損傷修復(fù)和生存、新生血管生成、侵襲和轉(zhuǎn)移中具有重要的作用，同時(shí)在相當(dāng)一部分的人類腫瘤中都有表達(dá)。

2023/2/510copyright2006

表皮細(xì)胞生長因子受體（EGFR）廣泛存在于多種表皮來源的惡性腫瘤細(xì)胞當(dāng)中：非小細(xì)胞肺癌乳腺癌結(jié)直腸癌胃癌前列腺癌卵巢癌頭頸部腫瘤

2023/2/511copyright2006

以

EGFR為靶點(diǎn)的藥物主要有:

1.作用于受體胞內(nèi)區(qū)的小分子酪氨酸激酶抑制劑(TKI)吉非替尼、erlotinib、EKB-569、PKI-166、GW-2016及CI-1033

2.作用于受體胞外區(qū)的單克隆抗體(MAb)西妥昔單抗(cetuximab)、ABX-EGF及EMD

72000等。

3.其他類：如免疫導(dǎo)向治療、基因治療等。2023/2/512copyright2006酪氨酸激酶抑制劑

(TKI)

2023/2/513copyright2006酪氨酸激酶（TK）抑制劑是一種靶向作用于細(xì)胞內(nèi)酪氨酸信號(hào)通路的小分子物質(zhì)。酪氨酸激酶（TK）抑制劑能競爭性地與ATP結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合從而阻斷配體激活表皮生長因子受體（EGFR）。他們的小分子結(jié)構(gòu)使其能輕松地進(jìn)入腫瘤并且能通過口服用藥。2023/2/514copyright2006多種酪氨酸激酶抑制劑在開發(fā)中，其中最常用的為：

1.喹唑啉類2.pyralo-/吡咯并-/吡啶并嘧啶類2023/2/515copyright2006喹唑啉

喹唑啉類分子能高選擇性地與EGFR結(jié)合，并且是強(qiáng)效的酪氨酸激酶抑制劑。臨床前的研究顯示這類藥物能使細(xì)胞停留在G1期。

2023/2/516copyright2006Gefitinib（ZD1839，Iressa）--一種選擇性，可逆性的EGFR酪氨酸激酶抑制劑。Erlotinib（OSI-774，Tarceva）--能夠高度特異性和可逆性的與細(xì)胞EGFR的TK結(jié)合，在我國目前已被批準(zhǔn)用于NSCLC、胰腺癌。Lapatinib(GW572016)是一口服吸收酪氨酸激酶抑制劑，可同時(shí)作用于EGFR和Her2的TK部分的兩個(gè)靶點(diǎn)，主要不良反應(yīng)有腹瀉、皮疹、胃痛、肝功異常。。2023/2/517copyright2006Gefitinib于2003年5月被美國FDA批準(zhǔn)，用于治療化療失敗的晚期非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)，并已于2005年3月在中國獲準(zhǔn)上市。2023/2/518copyright2006Gefitinib（ZD1839，Iressa）能抑制多種人類腫瘤異種移植物的生長，包括非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）、前列腺癌、卵巢癌、乳腺癌、結(jié)腸癌和外陰癌。Gefitinib可競爭性結(jié)合于細(xì)胞表面的表面生長因子受體-酪氨酸激酶（EGFR-TK ）催化區(qū)域Mg-ATP結(jié)合位點(diǎn)上，截?cái)郋GFR生成信號(hào)傳到至細(xì)胞內(nèi)，從而起到抗腫瘤作用。2023/2/519copyright2006在與不同作用方式的化療藥物聯(lián)合應(yīng)用抑制腫瘤細(xì)胞時(shí)，

Gefitinib

表現(xiàn)出劑量依賴性的協(xié)同作用。同樣的，

Gefitinib

在與放射治療同時(shí)應(yīng)用時(shí)，也具有累加和協(xié)同作用。2023/2/520copyright2006pyralo-/吡咯并-/吡啶并嘧啶

這類化合物對(duì)EGFR酪氨酸激酶也具有高度的選擇性。2023/2/521copyright2006CI-1033—一種不可逆的EGFR酪氨酸激酶抑制劑。PKI166--在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，口服應(yīng)用并能抑制腫瘤異種移植物的生長，與EGFR酪氨酸激酶具有很高的親和力。PD158780--吡啶并嘧啶的一種衍生物，能有效地對(duì)抗EGFR家族的所有成員。

2023/2/522copyright2006單克隆抗體(MAb)2023/2/523copyright2006

與天然的配體相比，抗表皮生長因子受體（EGFR）的單克隆抗體與EGFR結(jié)合時(shí)，具有更高的親和力，因此阻斷EGFR介導(dǎo)的細(xì)胞通路是一種具有極高特異性的作用方式。2023/2/524copyright2006表達(dá)EGFR的健康細(xì)胞具有較低的更新率，單克隆抗體在這類正常細(xì)胞上的作用是很小的。

單克隆抗體能與配體競爭性結(jié)合EGFR，抑制配體激活EGFR的酪氨酸激酶活性，并促進(jìn)EGFR的內(nèi)吞和降解，從而起到抗腫瘤效應(yīng)。2023/2/525copyright2006EGFR靶向抗體：C225(又名Cetuximab,Erbitux)為目前唯一獲準(zhǔn)上市的新型人-鼠單克隆嵌合抗EGFR抗體

2023/2/526copyright2006體外研究資料表明，C225能阻斷EGF誘導(dǎo)的EGFR磷酸化，并促進(jìn)EGFR的內(nèi)吞降解，進(jìn)而減弱下游信號(hào)通路的傳遞。同時(shí)它還可以通過下調(diào)VEGF等相關(guān)因子間接抑制血管生成和腫瘤轉(zhuǎn)移。

C225與其它化療藥物還有相加或協(xié)同作用。2023/2/527copyright2006I期臨床試驗(yàn)顯示，C225能達(dá)到與EGFR完全結(jié)合的效應(yīng)。II期臨床試驗(yàn)顯示，C225單藥或與放化療聯(lián)合治療EGFR高表達(dá)腫瘤如腎細(xì)胞癌、頭頸癌、胰腺癌、結(jié)腸癌具有顯著療效。2023/2/528copyright2006其他尚在研究的EGFR靶向抗體包括：

ABX-EGF、MDX447、EMD72000（Matuzumab）、Mab425及MINT5等。2023/2/529copyright2006其它1.免疫導(dǎo)向療法配體-毒素和免疫毒素聯(lián)結(jié)物2.基因治療反義核苷酸策略2023/2/530copyright2006配體-毒素和免疫毒素聯(lián)結(jié)物2023/2/531copyright2006

配體-毒素和免疫毒素聯(lián)結(jié)物分別由抗表皮生長因子受體（EGFR）的抗體或EGFR配體與強(qiáng)效的細(xì)胞毒素（例如：假單胞菌外毒素A或蓖麻毒素）通過聯(lián)結(jié)反應(yīng)而生成。這些聯(lián)結(jié)物與EGFR結(jié)合后進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)抑制蛋白合成并誘導(dǎo)細(xì)胞死亡。

2023/2/532copyright2006

能直接作用于EGFR的配體-毒素聯(lián)結(jié)物包括heregulin/neu分化因子、EGF或轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）-α與多種毒素而通過結(jié)合反應(yīng)而生成的產(chǎn)物。這些合成物在體外實(shí)驗(yàn)、裸鼠和人類惡性腫瘤異種移植物實(shí)驗(yàn)中都表現(xiàn)出抑制腫瘤的作用。

2023/2/533copyright2006進(jìn)一步的引起關(guān)注的發(fā)展是一種融合蛋白的開發(fā)，這種蛋白是一種EGFR配體與酪氨酸激酶（TK）抑制劑的合成物。例如，人類表皮生長因子（EGF）與genestein的合成物，genestein是一種天然的酪氨酸激酶抑制劑，它能在低濃度的條件下快速地發(fā)動(dòng)細(xì)胞凋亡。2023/2/534copyright2006

反義核苷酸策略

2023/2/535copyright2006

反義寡聚核苷酸是人工合成的小片段單鏈DNA或RNA，它具有與某些mRNA互補(bǔ)的序列并與之結(jié)合從而抑制其翻譯成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，例如：表皮生長因子（EGFR）或它的某一個(gè)配體。這種方法具有很高的敏感性并有可能用于疾病的治療，包括抗癌治療。2023/2/536copyright2006EGFR靶向的反義寡聚核苷酸與細(xì)胞毒性藥物同時(shí)應(yīng)用于人類結(jié)腸細(xì)胞株時(shí)，可以抑制細(xì)胞增生，誘導(dǎo)凋亡。同樣在體外實(shí)驗(yàn)中，抗EGFR寡聚核苷酸也能抑制乳腺癌和胃癌細(xì)胞株的生長，同時(shí)在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中EGFR反義RNA能抑制人類頭頸部的鱗狀細(xì)胞癌（SCCHN）。2023/2/537copyright2006轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）-α，雙調(diào)蛋白和表皮生長因子相關(guān)肽（cripto）寡核苷酸能在體外實(shí)驗(yàn)中抑制一些人類腫瘤細(xì)胞株的增生，包括卵巢癌、結(jié)腸癌和頭頸部鱗癌。在應(yīng)用化療藥物處理卵巢癌細(xì)胞株后，使細(xì)胞繼續(xù)暴露在反義核苷酸中，可以得到累加的細(xì)胞抑制作用。2023/2/538copyright2006

當(dāng)EGF樣生長因子靶向的反義核苷酸