《藥物免疫毒性非臨床研究技術指導原則（征求意見稿）》

一、概述 3二、一般原則 4三、基本內(nèi)容 4(一)證據(jù)權重分析評價策略 4(二)免疫毒性非臨床評價關注點 6 2、免疫增強 73、超敏反應 84、自身免疫反應 95、免疫系統(tǒng)發(fā)育毒性 9(三)與臨床研究相關的免疫毒性非臨床試驗的時間安排 10四、附錄 12 3組成，包括固有免疫(非特異性免疫)和適應性免疫(特異疫11的風險增加。免疫增強則表現(xiàn)為機體的免疫應答作用上調(diào)，14誘發(fā)抗藥反應，后續(xù)再次接觸該藥物也可能導致超敏反應。15因此，藥物免疫毒性評估應該納入標準的藥物研發(fā)進程中。16藥物和/或代謝產(chǎn)物免疫毒性非臨床研究應包括對免疫系統(tǒng)19本指導原則旨在為藥物免疫毒性非臨床研究評價策略20和所涉及的試驗方法提供一般性的技術指導和參考。21本指導原則適用于化學藥物和治療用生物制品的免疫25藥物免疫毒性非臨床研究可為臨床試驗風險-獲益分析26提供信息，應采用證據(jù)權重分析評價策略，遵循創(chuàng)新藥物研0析設計并開展非臨床研究，綜合評估潛在風險-獲益。31藥物免疫毒性非臨床安全性研究一般應在經(jīng)過藥物非32臨床研究質量管理規(guī)范(GLP)認證的機構開展，并遵守藥33物非臨床研究質量管理規(guī)范。對于某些采用特殊的病原體、34特殊的試驗設施(如宿主抵抗力試驗等)、特殊指標檢測等非36保證數(shù)據(jù)的真實、完整、可溯源。37三、基本內(nèi)容38(一)證據(jù)權重分析評價策略41藥物的結構、藥理作用及機制、適應癥、靶點表達模式、藥42物暴露器官或組織、給藥方案、目標用藥人群、臨床研究信43息、同類藥物的數(shù)據(jù)等信息初步評估免疫毒性風險；可在人44或動物細胞、組織中進行的體外或離體試驗獲得靶向和非靶47制、目標用藥人群、常規(guī)一般毒性研究結果等因素進行證據(jù)48權重分析，以考慮是否需要開展附加免疫毒性研究。如上述50加免疫毒性研究。當有兩個或多個因素的研究結果提示藥物55基于整合策略盡可能評估免疫器官與相關組織改變、免疫細免疫活性物質等的改變。57應基于附錄中推薦的常規(guī)附加免疫毒性研究結果評估63獲益分析提示免疫毒性的風險可以接受和/或能夠通過臨床64風險管理計劃予以控制，則可能無需開展進一步研究。65(二)免疫毒性非臨床評價關注點67具有潛在誘導免疫抑制的藥物一般通過直接抑制或殺69調(diào)節(jié)因子等間接作用抑制免疫系統(tǒng)活性。71學試驗和/或常規(guī)一般毒性試驗中觀察到的效應/反應可以直73當藥物的潛在免疫抑制作用在已有常規(guī)一般毒性研究中不76T淋巴細胞依賴性抗體反應(TDAR)檢測；評估對關鍵的免77疫細胞(如NK細胞、T淋巴細胞、B淋巴細胞、抗原提呈78細胞等)的數(shù)量、比例和/或功能的影響。當藥物擬在臨床中79長期用藥，應考慮開展宿主抵抗力研究等附加研究。2致癌性試驗。2、免疫增強84具有增強免疫系統(tǒng)活性的藥物一般通過直接刺激免疫85相關信號通路或通過抑制/激活免疫相關調(diào)節(jié)因子等間接作，可能引起免疫毒性。物質90應答存在差異，非臨床動物種屬可能無法充分暴露藥物的潛96對于潛在引起細胞因子風暴綜合征的治療性藥物，應采用未因99不需要進行其他形式的檢測。當藥物不直接結合到參與免疫102具有免疫增強毒性風險的藥物在擬定臨床試驗起始劑103量時，基于毒性耐受終點估算的起始劑量可能過高，從而帶104來較大的臨床試驗風險。為確保受試者安全，應基于最小預105期生物學效應劑量(MABEL)或藥理效應劑量(PEL)估算106起始劑量。PEL111風暴綜合征的治療性藥物，應根據(jù)EC值或范圍預測引起細118除了上述靶向或藥理作用相關的免疫激發(fā)/免疫增強外，119非靶向的免疫刺激可能會激發(fā)超敏反應，如由IgE介導的I介導的IV型超敏反應等，可通過多種方法評估此種免疫刺122激作用。對于可明顯增強二次或記憶應答且具有潛在長期作125肥大細胞脫顆粒，引起類過敏反應。雖然目前尚無公認的能126可靠預測上述反應的非臨床模型，但仍有必要綜合各項安全133和重癥肌無力)、藥物引起的伴嗜酸性粒細胞增多和系統(tǒng)癥DRESS應的內(nèi)源蛋白138毒性研究中獲得的相關數(shù)據(jù)、用藥人群等因素對潛在自身免139疫反應進行評估。405、免疫系統(tǒng)發(fā)育毒性供143支持時，應在藥物生殖和發(fā)育毒性研究或幼齡動物研究中對種屬，146年齡相適應，根據(jù)所采用動物種屬靈活調(diào)整給藥方案。具體148動物增強的圍產(chǎn)期發(fā)育(ePPND)毒性試驗中，應科學合理149選擇免疫指征，考察時間點應設置在發(fā)育的最早節(jié)點。應關153當圍產(chǎn)期發(fā)育毒性研究可充分暴露免疫系統(tǒng)發(fā)育毒性155根據(jù)臨床用藥人群等因素需要開展幼齡動物研究時，應關注157案，以涵蓋免疫系統(tǒng)的重要發(fā)育期以及入組兒科患者的預期158年齡。應根據(jù)藥物的藥理作用或在成年動物中觀察到的免疫162建議采用整合策略，在早期臨床試驗開展前，盡早在的免164疫相關風險評價信息。對于免疫增強/激發(fā)類藥物，通常應165在早期臨床試驗開展前進行體外細胞因子釋放等研究，有166助于臨床起始劑量擬定以及設計更為嚴謹?shù)呐R床風險管理167計劃。在臨床試驗研究期間，應基于前期研究結果、免疫168毒性風險以及臨床試驗類型考慮開展更多的免疫毒性研170統(tǒng)監(jiān)測指標。一般應在藥物應用于大規(guī)模人群(通常為Ⅲ171期臨床試驗)之前完成常規(guī)的附加免疫毒性研究。如果常175低下狀態(tài)的患者，免疫毒性研究也應在藥物開發(fā)的早期進176行。177四、附錄178免疫毒性評價方法180常規(guī)一般毒性研究中需包括下表中所列的免疫毒性評胸腺、脾臟(可選：淋巴結)1821當出現(xiàn)無法解釋的球蛋白水平變化時，需檢測免疫球蛋白。1832無法解釋的外周血細胞變化或造血相關的組織病理學改變提示可能184需要對骨髓細胞進行評價，如骨髓涂片檢查等。1853僅限于經(jīng)口給藥。1864僅限于吸入劑或鼻腔給藥。1871.1血液學和血液生化188推薦將白細胞總數(shù)和絕對白細胞分類計數(shù)用于免疫毒191其他因素的影響(如肝腎毒性)。1921.2大體病理學觀察和臟器重量193剖檢時應盡可能評價所有淋巴組織的大體病理學改變。195錄脾臟和胸腺的重量。為盡量減少非嚙齒類動物脾臟重量的1981.3組織病理學檢查199脾臟和胸腺的組織病理學改變應被視為系統(tǒng)免疫毒性200的指征。應對引流淋巴組織或接觸給藥部位(暴露于最高濃201度藥物)的淋巴組織進行檢查。經(jīng)口給藥時這些淋巴組織包202括Peyer’s結和腸系膜淋巴結；吸入給藥時包括支氣管相關203淋巴組織(BALT)；吸入或鼻腔給藥(如果可能)時包括鼻204相關淋巴組織(NALT)；經(jīng)皮、肌肉、皮內(nèi)、鞘內(nèi)或皮下給207臟可被視為引流淋巴組織。209對淋巴組織不同區(qū)室的改變進行病理學分區(qū)室半定量描述。2101.4應激相關改變的解釋212劑量能夠導致與應激相關的免疫系統(tǒng)的改變(如放大的藥理213學作用)。這些對免疫系統(tǒng)的作用可能由皮質酮或皮質醇釋214放增加或其他介質引起。通常觀察到的應激相關的免疫學改215變包括外周血中性粒細胞增加、淋巴細胞減少、胸腺重量減217和淋巴結的細胞構成的改變。此外，還可能觀察到腎上腺重218量增加和/或腎上腺皮質增生的組織學變化。伴有臨床癥狀219(如體重減輕和活動減少)的胸腺重量減輕也?？蓺w因于應220激所致。上述指標的單獨改變并不能充分證明出現(xiàn)應激相關225免疫毒性非臨床研究。2262.1免疫細胞數(shù)量和比例檢測228用流式細胞術、免疫組織化學(IHC)或免疫熒光(IF)方法。229流式細胞術為常用的對全血、外周血單個核細胞(PBMC)或B234和CD8+T淋巴細胞或其它亞群的數(shù)量及比值。免疫表型分2372.2免疫細胞功能和免疫活性物質檢測238通常采用離體組織或細胞模型、體外人源細胞等模型評T240細胞(CTL)活性、自然殺傷細胞(NK)活性，抗體依賴的241細胞毒性(ADCC)和補體依賴的細胞毒性(CDC)，體外淋243等。244可考慮選擇體內(nèi)、體外多種水平進行免疫活性物質的檢247至轉錄水平的改變等。體外細胞因子釋放的具體評價方法可2522.3免疫系統(tǒng)整體功能檢測253T細胞依賴性抗體反應(TDAR)評價藥物對巨噬細胞/254樹突狀細胞和/或B細胞的抗原遞呈功能、輔助T淋巴細胞257檢測免疫增強作用。可單獨開展TDAR試驗，但從遵循3R259行。可采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、電化學發(fā)光分析法260(ECLA)或其他方法測定血