標準解讀

《GB/T 28981-2012 齒蘭環(huán)斑病毒檢疫鑒定方法》是一項國家標準，主要針對齒蘭環(huán)斑病毒（ORSV）的檢測與鑒定提供了具體的操作指南。該標準適用于進出口花卉、觀賞植物以及相關繁殖材料中齒蘭環(huán)斑病毒的檢疫和監(jiān)測工作。它詳細規(guī)定了從樣本采集到最終結(jié)果報告的一系列流程。

首先，在樣本準備階段，標準明確了如何正確選取待檢樣品，并對不同類型的植物材料提出了具體的取樣要求，確保所取得的樣本能夠準確反映被測對象的實際狀況。

接著是病毒提取過程，這部分內(nèi)容介紹了使用何種試劑及設備進行病毒RNA或DNA的有效分離與純化，為后續(xù)檢測打下基礎。

對于檢測方法，《GB/T 28981-2012》推薦采用RT-PCR技術作為主要手段來識別齒蘭環(huán)斑病毒的存在與否。文中不僅給出了詳細的實驗步驟，還包括了所需引物序列等關鍵信息，以保證實驗操作的一致性和可靠性。

此外，標準還涉及到了陽性對照品的選擇與制備方法，這對于驗證檢測系統(tǒng)的有效性至關重要。同時，也強調(diào)了實驗室安全措施和個人防護的重要性，確保所有操作都在符合生物安全規(guī)范的前提下進行。

最后，在結(jié)果分析部分，標準指導了如何根據(jù)電泳圖譜或其他形式的數(shù)據(jù)來判斷樣品是否感染了齒蘭環(huán)斑病毒，并要求記錄完整的實驗數(shù)據(jù)與結(jié)論，以便于追蹤復查。


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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2012-12-31 頒布
  • 2013-06-01 實施
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文檔簡介

ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標準

GB/T28981—2012

齒蘭環(huán)斑病毒檢疫鑒定方法

Detectionandidentificationofodontoglossumringspotvirus

2012-12-31發(fā)布2013-06-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T28981—2012

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由全國植物檢疫標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標準起草單位中華人民共和國寧波出入境檢驗檢疫局中華人民共和國上海出入境檢驗檢疫

:、

局中國檢驗檢疫科學研究院中華人民共和國浙江出入境檢驗檢疫局

、、。

本標準主要起草人聞偉剛陳先鋒楊翠云郭立新魯潔張永江張明哲徐瑛崔俊霞張慧麗

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T28981—2012

齒蘭環(huán)斑病毒檢疫鑒定方法

1范圍

本標準規(guī)定了齒蘭環(huán)斑病毒血清學和分子生物學特征的檢測方法

。

本標準適用于種子種球花卉和種苗等植物材料中齒蘭環(huán)斑病毒的檢測也適用于蚜蟲等傳播媒

、、,

介中該病毒的檢測

。

2齒蘭環(huán)斑病毒基本信息

中文名齒蘭環(huán)斑病毒

:

學名

:odontoglossumringspotvirus

縮寫

:ORSV

屬煙草花葉病毒屬Tobamovirus齒蘭環(huán)斑病毒其他信息參見附錄

(),A。

3方法原理

利用基于抗原抗體反應的雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附測定

(Doubleantibodysandwichenzyme-linked

體外合成技術的反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應

immunosorbentassay,DAS-ELISA)、DNA(Reverse

實時熒光反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應

transcriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)、(real-time

進行檢測鑒定

fluorescentRT-PCR)。

4儀器設備用具和試劑

、

41儀器設備

.

儀實時熒光儀超凈工作臺電子天平感量電泳儀電泳槽凝膠成像系統(tǒng)

PCR、PCR、、(:0.001g)、、、、

高速冷凍離心機超低溫冰箱高壓滅菌鍋小型食品加工機微波爐酶標儀

、(-80℃)、、、、。

42用具

.

可調(diào)式微量移液器及相應的無吸頭無

(2μL、10μL、100μL、200μL、1000μL、5000μL)RNase、

離心管管和研缽等

RNase、PCR。

43試劑

.

主要試劑和緩沖液見附錄和附錄

BC。

5檢測

51樣品制備

.

取種子種球鱗片或畸形變色癥狀的葉片等植物組織

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