《藥物分析》實驗指導書

《藥物分析》試驗指導書《藥物分析》試驗指導書》(供藥學專業(yè)使用)0一三年一月編目 錄試驗二《中國藥典》一部、二部的查閱試驗三藥物的雜質(zhì)檢查試驗五芳酸及其酯類藥物的鑒別試驗六阿司匹林制劑容量分析的綜合性試驗試驗七有關物質(zhì)的色譜檢查試驗八槐花藥材中總黃酮的質(zhì)量分析試驗十雙波長分光光度法測定復方制劑含量試驗十一考核:藥物的區(qū)分、鑒別試驗試驗一 試驗要求與分析中常用儀器的根本操作要點【試驗目的】1、了解藥物分析試驗要求。2、學習并把握分析中常用儀器的根本操作要點?！驹囼炓蟆堪唇虒W人綱規(guī)定,試驗課教學應做到:認真驗證明驗教材指定的藥物分析理論,加深對本學科專業(yè)學問的理解。正確把握試驗教材中各類代表性藥物的分析方法,嫻熟各種分析方法的操作技術,培育獨立開展藥物分析工作的力量。全面了解藥物分析工作的性質(zhì)與內(nèi)容,培育嚴峻認真、實事求就是的科學態(tài)度與工作作風。為提高試驗課教學質(zhì)量,參與試驗課學習者應努力做到:認真預習,明確試驗目的,弄懂原理與操作要點,預先安排好試驗進程,估量試驗中可能發(fā)生的問題及處理方法。嚴格按試驗規(guī)程操作,操作應力求正規(guī),細心觀看試驗現(xiàn)象。準時做好完整、精準的原始記錄。原始紀錄不得記于紙條上、手上或其她本上再撰寫,應直接記于試驗記錄本上。防止試劑、藥品污染,取用時應認真觀看標簽與取用工具上的標志,杜絕錯蓋或不蓋瓶塞的現(xiàn)象。公用試劑、藥品應在指定位置取用,不得隨便挪動。,,須經(jīng)教師同意,用畢登記簽名。試驗時確保安全、時刻留意防火、防爆。覺察事故苗頭準時報告,不懂時不要擅自動手處理。疼惜公物,節(jié)約水電、藥品、試劑。試驗完畢認真清理試驗臺,儀器洗凈后放回原位,鎖好柜子,經(jīng)教師同意后,面整理試驗室衛(wèi)生。認真總結(jié)試驗結(jié)果,按指定恪式寫好試驗報告,并按時交出。【試驗內(nèi)容】1、常用儀器的根本操作要點,正確地使用這些儀器就是做好定量分析試驗的根本技能。為此須特別留意這三種儀器的性能及其使用方法。(一)滴定管的使用留意事項常量分析承受的就是常量滴定管,50ml25ml,0、1ml;讀數(shù)時,兩小恪之間可以估量出一位數(shù),0、01ml。滴定管按其用途可分為酸式與堿式兩種,下端帶有玻璃磨塞的稱酸式滴定管。下端用一個橡皮管,酸式滴定管就是用于盛放酸性溶液與氧化性溶液,由于磨口簡潔被堿性溶液腐蝕。而堿式滴定管則用于盛放堿性溶液,不能盛放與橡皮管作用的酸,I、MnOAgNO

等溶液。2 4 3滴定管使用前應檢查就是否漏水,玻璃活塞旋轉(zhuǎn)就是否自如(或玻璃珠就是否適宜)。給活塞涂凡士林汕需認真認真,使成透亮狀。滴定管的洗滌須依次用鉻酸洗液,自來水,蒸餾水與操作溶液洗滌。洗液放出后,先用自來水沖干凈,2～3次,每次10～15ml,用蒸餾水洗滌后,洗凈的滴定管其內(nèi)壁應完全被水均勻地潤濕而不拌水珠,然后用待裝入的操作溶液(即標準溶液或被標定的溶液)洗滌2～3次,每次約5～10ml以除去管內(nèi)殘留的水分,確保操作溶液的濃度不變,然后倒入操作溶液至“0”刻線以上,再檢查滴定管下端有無氣弋泡,將其排解。滴定管刻度在讀數(shù)時應遵守以下規(guī)章:(1)裝滿溶液或放出溶液后,必需等l～2分鐘,待附著在內(nèi)壁上的溶液流下,再讀數(shù)。(2)讀數(shù)時,滴定管可以夾在滴定管架上,也可以用拇指與食指拿住滴定管最上端處。兩種方濁均使滴定管保持垂直。(3)讀數(shù)時,視線應與彎月向卜緣最低處的液向稱水平。初讀與終讀應用同一標準。(4)必需讀到小數(shù)點后其次位,0、0lml。留意每次滴定最終從0.0lml刻度開頭。不允許用滴管滴加溶液來調(diào)整液面以免轉(zhuǎn)變?nèi)芤旱臐舛?。剛剛加添溶液或剛剛滴定完?不要馬上調(diào)整零點或讀數(shù),而應當?shù)萳～2min,以使管壁附著的溶液流下來,而不致影響讀數(shù)的牢靠性,滴定管使用完畢后,倒去管內(nèi)剩余溶液,用自來水洗凈后,再裝滿水,套上套管,這樣下次使用前可不必再用洗液清洗。酸式滴定管如長期不用,活塞局部應墊上紙。甭則時間一久,活塞不易翻開。劃于其她帶磨塞的儀器都應如此。(二)容量瓶使用的留意事項容量瓶就是用來配制標準溶液或稀釋溶液用的,與移液管協(xié)作使用。通常自25、50、100、250、500與1000ml等規(guī)恪。在使用容量瓶之前應先檢查(1)瓶塞就是否己用繩系在瓶頸上;(2)標線位置距離瓶口遠近如何,假設太近則不宜使用;(3)磨口瓶塞就是否配套,要求密閉,不漏水。容量瓶的洗滌與滴定管一樣。用容量瓶配制標準溶液時,依據(jù)所需溶液的濃度與體積,計算基準試劑的需要量,在分析天平上準確稱取,置于小燒杯中。依據(jù)基準試劑的性質(zhì),用水、酸或其她溶劑溶解。假設基準試劑易溶于水,則將玻璃棒下端緊靠燒杯內(nèi)壁,沿玻璃倒入少量蒸餾水,,可蓋上外表皿,稍加熱,但須冷卻后寸能定量轉(zhuǎn)移至容量瓶中。轉(zhuǎn)移時,右手拿玻棒,左手拿燒杯,玻棒插入容量瓶內(nèi)。玻棒下端靠著瓶頸內(nèi)壁,燒杯嘴緊靠玻棒使溶液沿玻棒漸漸流入。待溶液流完后,用洗瓶吹洗玻棒與燒杯內(nèi)壁,按同法轉(zhuǎn)入容量瓶中。重復洗滌5～6次。當溶液稀釋到容量瓶的四分之三左右時,夾住瓶塞,拿起容量瓶搖幾周,使溶液人體混勻。連續(xù)加蒸餾水接近標線l～2cml～2min,待粘剛在瓶頸內(nèi)壁的溶液流下后,用滴管逐,用食指壓住瓶塞,另一只手握住容量瓶的底部,不斷轉(zhuǎn)動,待氣泡上升至頂部時,再倒轉(zhuǎn)搖動,如此反復幾次使溶液充分混合均勻。依據(jù)基準試劑的稱取量及容量瓶的容積,計算所配置標準溶液的濃度,,沖稀到刻度,搖勻,可得準確濃度的稀溶液。留意:(1)溶液必需冷至室溫后,寸能稀釋到標線否則造成體積誤差。(2)不要用容量瓶長期存放溶液,尤其堿溶液會浸蝕瓶壁_并使瓶塞粘住,無法打丌,配好的溶液如需保存,應轉(zhuǎn)移到磨口中。(3)容量瓶不能在烘箱中烘烤,也不許用任何方式對其加熱(包括用熱水溫熱)。(三)移液管與吸量管移液管就是一根瘦長而中間有一膨大局部的玻璃管,在管頸上端刻有標線。球部標有在肯定溫度下溶液流出的體積。如“25ml,20℃”的標記,它表示在20℃時該移液管移取溶液到彎月面下緣與標線相切,然后讓此溶液自然流出,流出溶液的體積等于管上所標示的體積為25ml,因毛細管作用,最終總有少量溶液留在管口。不要將這局部溶液吹出,由于移液管所指示的容積就是依據(jù)自然流出的溶液體積來確定。5、10、2550ml等規(guī)格。常用的吸量管有1、2、5、與10ml等規(guī)格。量取整數(shù)如5、10、25……等ml的溶液時,應當用大小相應的移液管,而不用吸量管。移液管與吸量管的洗滌同樣需要洗液,自時還需較長時間浸泡,洗液洗過的移液管與吸量管用自來水充分沖洗后,再用少量蒸餾水洗三次。使用移液管移取溶液前,需用吸水紙將移液管的尖端內(nèi)外吸干然后再用少量要移取的溶液洗滌三次,但留意吸出的溶液不要流回,以防稀釋溶液,用移液管自瓶中移取溶液時,右手拇指及中指拿住管頸標在線方。將移液管尖端插入瓶內(nèi)液向以下l~2ml的深度。左手拿洗耳球,排解空氣后,緊按移液管上口,借吸力使液向上升。當管內(nèi)液面上升到標線以上時,快速用右手食指按緊管口,將移液管提高液面。食指輕輕按住管口,使液向緩慢平穩(wěn)地卜降。待管中溶液的彎月面與標線相切時,按緊食指,使溶液不再流出。將移液管放入預備承受溶液的容器中,使出口尖端接觸容器內(nèi)壁,容器稍斜,,讓溶液自然地流出,待全部溶液流盡后,再等15秒取出。不要吹出殘留溶液。吸量管的使用與移液管一樣,為削減誤差,吸量管每次都應從最上向刻度為起點,往下放出所要體積。而不就是放出多少體積就吸取多少體積。,,但不吹出最終殘留的溶液。留意試驗完畢后要用自來水沖洗干凈。移液管與吸量管均不能在烘箱里烘干。試驗二《中國藥典》(2023版)一部、二部的查閱【試驗目的】1、生疏《中國藥典》的根本構(gòu)造。2、把握查閱《中國藥典》的根本方法?！驹囼瀮?nèi)容】依據(jù)以下工程,查閱《中國藥典》2023版一部、二部,記錄所在頁碼及括號中內(nèi)容的查閱結(jié)果。挨次 查閱工程 頁碼 查閱結(jié)果人參(鑒別)銀杏葉提取物(制法)地奧心血康膠囊(含量測定)銀黃口服液(處方)阿司匹林片(游離水楊酸雜質(zhì)限量)頭孢拉定(比旋度)布洛芬(制劑)地西泮片(含量測定)依諾沙星(類別)魚肝油(貯藏方法)維生素C注射液(pH值)重金屬檢查法高效液相色譜法氫氧化鈉滴定液的配制(標定的基準物)氨制硝酸銀試液的配制【留意事項】藥品可在品名目次中,按藥品名稱筆劃為序查閱。也可在英文索引或中文索引(按漢語拼音的挨次)中查閱。制劑通則、一般鑒別試驗、物理常數(shù)測定法、一般雜質(zhì)檢查法、分光光度法、色譜法等多種分析方法以及試液、試紙、指示液與指示劑、緩沖液等的配制、滴定液的配制及標定與指導原則等其她內(nèi)容在附錄中查閱。試驗三藥物的雜質(zhì)檢查【試驗目的】1、把握藥物的一般雜質(zhì)檢查原理與試驗方法。2、把握雜質(zhì)限度試驗的概念及計算方法。3、生疏一般雜質(zhì)檢查工程與意義?！驹囼炘怼克釅A度、氯化物、硫酸鹽、不揮發(fā)物、重金屬的檢查原理參見教材第三章中雜質(zhì)檢查局部。【試驗材料】試藥:葡萄糖、氯化鈉原料藥。儀器:50mL納氏比色管、刻度吸管、100mL測砷瓶,藥物天平。【試驗內(nèi)容】(一)葡萄糖1、酸度20g,20mL溶解后,3滴與氫氧化鈉滴定液(002mol/L)020mL,應顯粉紅色。2、溶液的澄清度與顏色5g,加熱水溶解后,放冷,10mL,溶液應澄清無色;如顯渾濁,1號濁度標準液(附錄H)比較,不得更濃;如顯色,與比照液(3mL3mL與比色用硫酸銅液6mL,50mL)1、0mL10mL比較,不得更深。3、乙醇溶液的澄清度1、0g,90%30mL,10分鐘,溶液應澄清。4、氯化物0、6g,25mL,10mL;溶液如不澄清,應濾過;50mL納氏比色管中,加40mL,搖勻,即得供試溶液。另取標準氯化鈉溶液6、0mL,50mL納氏比色管中,10mL,加水使成40mL,搖勻,即得比照溶液。于供試溶液與比照溶液中,分別參加硝酸銀試液1、0mL,用水稀釋,使50mL,搖勻,5分鐘,同置黑色背景上,(A)濁度不得較比照液更濃(0、01%)。5、硫酸鹽20g,40mL;溶液如不澄清,應濾過;50mL納氏比色管中,2mL,搖勻,20mL,50mL納氏比色管中,40mL,2mL,搖勻,即得比照溶液。于供試溶液與比照溶液中,25%5mL,50mL,充分搖勻,放置10分鐘,同置黑色背景上,(附錄B)(0、01%)。6、亞硫酸鹽與可溶性淀粉1、0g,10mL溶解后,1滴,應即顯黃色。7、枯燥失重取本品,105℃枯燥至恒重,9、5%(附錄E)。8、熾灼殘渣0、1%(附錄F)。9、鐵鹽2、0g,20mL溶解后,3滴,5分鐘,放冷,45mL,加硫氰酸銨溶液(30→100)3mL,搖勻,如顯色,2、0mL用同一方法制成的比照液比較,不得更深(0、001%)。10、重金屬取25mL納氏比色管兩支,(pH3、5)2mL后,加水稀釋成25mL。取本品4、0g,置乙管中,加水適量溶解后,加醋酸鹽緩沖液(pH3、5)2mL,加水使成25mL;假設供試液帶顏色,可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其她無干擾的有色溶液,使之與乙管顏色全都。再在甲乙兩管中2mL,搖勻,放置2分鐘,同置白紙上,自上向下透視,乙管中顯出的顏色與甲管比較,不得更深(附錄C),含重金屬不得過百萬分之五。11、砷鹽2、0g,5mL溶解后,5mL0、5mL,20分鐘,使保持稍過量的溴存在,必要時,再補加溴化鉀溴試液適量,并隨時補充蒸散的水分,放冷,加鹽酸5mL與水適量使成28mL,置測砷瓶中,2mL,照供試品制備項下方法,自“加水5mL溶解后“起,至“置測砷瓶中“,同法處理,作為標準液。取供試溶液與標準液分別進展以下操作:加碘化鉀試液5mL與酸性氯化亞錫試液5滴,在室溫放置10分鐘后,2g,馬上將裝妥的導氣管密塞于測砷瓶上,25~40℃水浴中,45分鐘,取出溴化汞試紙,比較。供試溶液生成的砷斑與標準砷斑比較(D),不得更深(0、0001%)?！驹囼炚f明】1、比色管的正確使用——選擇配對的兩支納氏比色管,用清潔液蕩洗除去污物,再用水沖洗干凈。承受旋搖的方法使管內(nèi)液體混合均勻。2、正確選用量具——依據(jù)檢查試驗一般允許誤差為±10%的要求與藥品、試劑的取用量,選擇適宜的容量儀器。3、平行操作——標準與樣品必需同時進展試驗,參加試劑量等均應全都。觀看時,兩管受光照的程度應全都,使光線從正面照入,比色時置白色背景上,比濁時置黑色背景上,自上而下地觀看。4、留意刻度吸管的正確使用與觀看。5、限量計算:雜質(zhì)限量%=((V標準×C標準)/W樣)×100%V標準為標準液體積,C標準為標準液濃度,W樣為樣品取樣量。試驗四葡萄糖注射液分析【試驗目的】1、把握pH值測定原理與pH計的正確操作。2、把握比旋度的概念、求算方法與旋光法測定旋光性物質(zhì)含量的原理與計算。3、把握剩余碘量法測定葡萄糖注射液的操作要點。4、了解注射液雜質(zhì)檢查的一般工程【試驗原理】[鑒別]取本品,緩緩滴入溫熱的堿性酒石酸銅試液中即生成紅色沉淀。[雜質(zhì)檢查]葡萄糖注射液在高溫加熱滅菌時,5-羥甲基糠醛:5-[雜質(zhì)檢查]葡萄糖注射液在高溫加熱滅菌時,5-羥甲基糠醛:5-羥甲基糠醛在284nm的波特長有吸取,而葡萄糖無吸取,將樣品配制成肯定濃度的溶液,284nm[含量測定]12、0852相乘,計算出葡萄糖在供試品中的百分比濃度與標示量的百分比。2,與有氧化性的碘發(fā)生反響,剩余的碘用硫代硫酸鈉回滴,從而計算糖的含量?！驹囼灢牧稀吭囁?(005mol/L)2mol/L(01mol/L)、淀粉指示劑、葡萄糖注射液。儀器:旋光度測定儀、小錐型瓶(100ml)、、酸式滴定管、燒杯、洗耳球、量筒?！驹囼瀮?nèi)容】本品為葡萄糖或無水葡萄糖的滅菌水溶液。含葡萄糖(C6H12O6·H2O)應為標示量的95、0%~105、0%。[鑒別]取本品,緩緩滴入溫熱的堿性酒石酸銅試液中,即生成氧化亞銅的紅色沉淀。[檢查] pH值應為3、2~5、5(附錄A)。羥甲基糠醛周密量取本品適量(10g),100mL量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,284nm的波特長測定,0、32。重金屬取本品適量(約相當于葡萄糖3g),必要時,蒸發(fā)至約20mL,放冷,加醋酸鹽緩沖液(pH3、5)2mL與水適量使成25mL,置25mL納氏比色管中。另取標準鉛溶液肯定量與醋酸鹽緩沖液(pH3、5)2mL后,加水稀釋成25mL,置另一25mL納氏比色管中。假設供試液帶顏色,可在標準管中滴加少量的稀焦糖溶液或其她無干擾的有色溶液,使之與樣品管顏色全都;2mL,搖勻,放置2分鐘,同置白紙上,自上向下透視,樣品管所顯顏色與標準管比較,不得更深(見試驗一附錄C),含重金屬不得過百萬分之五。[含量測定]1、旋光法(附錄B)D原理:葡萄糖分子中含不對稱碳原子,具有旋光性,在肯定條件下,其水溶液的比旋度[a]t 為＋525o～＋D53、0o,依據(jù)旋光度與濃度C的比例關系可進展含量測定:L為液層厚度(dm),C為溶液的百分濃度(g/mL,按枯燥品或無水物計算)。所以:方法:周密量取本品適量(約相當于葡萄糖10g),置100mL量瓶中,加氨試液0、2mL(10%10%以下規(guī)格的本品可直接取樣測定),用水稀釋至刻度,搖勻,10分鐘,測定旋光度。用讀數(shù)至0、01°L為液層厚度(dm),C為溶液的百分濃度(g/mL,按枯燥品或無水物計算)。所以:方法:周密量取本品適量(約相當于葡萄糖10g),置100mL量瓶中,加氨試液0、6 12 6 2、0852相乘,100mL供試液中含有CHO、HO的重量(g)。測定前用水校正零點,測定后再用水核對零點,假設零點變動,6 12 6 2周密量取本品適量(75mg),置于碘量瓶中,5ml,加含碳酸鈉14、3%4、0%25ml,0、05mol/L25ml,密塞,2030分鐘后,2mol/L35ml,0、1mol/L硫代硫酸鈉滴定液滴定,至近終點,加淀粉指示液,續(xù)滴定至藍色消逝,并將滴定結(jié)果用空白試驗校正?！驹囼炚f明】1、pH值測定時,每次更換標準緩沖液或供試液前,應用純化水充分洗滌電極,然后將水吸盡,也可用所換的標準緩沖液或供試液洗滌,應就是沸過的冷蒸餾水,pH5、5~7、0。2、旋光儀接通電源后需預熱5～20,均應調(diào)整溫度至20℃±05℃(除另有規(guī)定外),如顯渾濁或含有混懸的小粒,應預先濾過,并棄去初濾液。旋光管裝樣時應留意光路中不應有氣泡,使用后應馬上用水洗凈晾干,切勿用刷子刷,也不能用高溫烘烤。3、用旋光度法測定葡萄糖的含量時,要加氨試液,就是加速變旋作用,促進到達平衡,否則測得的旋光度數(shù)據(jù)不準。4、用剩余碘量法測定葡萄糖含量時,要在近終點時參加淀粉指示劑,過早參加,會使碘結(jié)實被淀粉吸附,使終點延遲,產(chǎn)生誤差。5、折光率測定時,先用水校正折光計讀數(shù),201、3330,25℃時為1、3325,40℃時為1、3305。折光計棱鏡不得接觸強酸、強堿等腐蝕性液體,也不能用硬物碰擦鏡面。使用完畢后,用少量水沖洗棱鏡,1、3～1、7之間,則不能用阿培氏折光計測定。6、標示量=規(guī)格=處方量——表示單位制劑內(nèi)(例:每片,每丸、每毫升、每瓶等)所含主藥的量。試驗五芳酸及其酯類藥物的鑒別【試驗目的】嫻熟進展芳酸及其酯類藥物的鑒別操作,并正確推斷結(jié)果?！驹囼炘怼恳娬n本?！驹囼灢牧稀吭囁?β-萘酚試液、苯甲酸、水楊酸、阿斯匹林、貝諾酯、布洛芬等儀器:試管、酒精燈、滴瓶、漏斗、分光光度計【試驗內(nèi)容】一、苯甲酸的鑒別苯甲酸0、2g 0、4%氫氧化鈉15ml,振搖,過濾,加三氯化鐵2滴 赭色沉淀二、水楊酸的鑒別水楊酸水溶液,1滴,顯紫堇色三、阿斯匹林的鑒別0、1g,加水,煮沸,放冷,1滴,顯紫堇色;阿斯匹林0、5g,10ml,煮沸,放冷,加過量稀硫酸,白色沉淀,并有醋酸臭氣。四、貝諾酯的鑒別0、2g,50ml,煮沸,放冷,過濾,加鹽酸調(diào)酸性,2滴,顯紫堇色01g,5ml,煮沸,放冷,過濾,01mol/L亞硝酸鈉數(shù)滴,加堿性β-2滴,猩紅色沉淀五、布洛芬的鑒別取本品,0、4%1ml0、25mg的溶液,照分光光度法測定,265nm與273nm的波特長有最大吸取,245nm271nm的波特長有最小吸取。【試驗說明】1、做苯甲酸生成堿式苯甲酸鐵的試驗時,不行過多地參加氫氧化鈉溶液,否則將聲稱紅棕色的氫氧化鐵沉淀。并留意區(qū)分堿式苯甲酸鐵的赭色沉淀與氫氧化鐵的紅棕色沉淀的顏色。2.做阿斯匹林、貝諾酯水解試驗時,應在水浴中進展,不能直火加熱,否則水解產(chǎn)物會因溫度過高發(fā)生氧化,而影響試驗結(jié)果。試驗六阿司匹林制劑容量分析的綜合性試驗【試驗目的】1、把握兩步滴定法測定阿司匹林片劑的含量的原理、操作與計算。2、把握滴定液的標定、F值的計算。3、把握天平與容量儀器的正確操作。4、生疏阿司匹林原料、各種制劑,生物樣本中的阿司匹林的測定方法,以及這些方法的特點與應用范圍?！驹囼炘怼縫pt。【試驗材料】試藥:阿司匹林一般片或腸溶片。儀器:分析天平,50ml酸式/堿式滴定管,恒溫水浴鍋,電爐?！驹囼瀮?nèi)容】1、查閱有關文獻資料,了解阿司匹林的各種含量測定方法,寫出綜述文章。2、以小組(4～5人)為單位,派代表對文獻內(nèi)容進展溝通、爭論。每組介紹2～3個方法,內(nèi)容包括原理、操作、計算與方法特點,及其適用范圍,提出自己認為適宜的含量測定方法。3、依據(jù)各自的任務進一步查閱有關文獻,具體摘錄試驗操作方法,包括標準溶液、試藥的配制、標定方法,阿司匹林的含量測定方法,以及所需試驗儀器。4、每組完成樣品的含量測定工作(包括儀器的清洗,標準滴定液的配制、標定,試劑的配制,儀器選用與調(diào)試,含量測定與計算),寫出試驗報告。5、試驗報告內(nèi)容包括:題目、原理、主要儀器、操作方法、原始記錄、測定結(jié)果、分析爭論。【試驗說明】1、留意電子天平的標準操作,承受減重秤量法。2、酸式滴定管滴定時別使活塞松動,堿式滴定管別使氣泡進入管路。3、樣品混懸液從研缽轉(zhuǎn)移至容量瓶時應借助小漏斗,并用相應溶劑分次洗滌研缽,洗液并入濾液中,使內(nèi)容物定量轉(zhuǎn)移至量瓶。4、過濾用漏斗、燒杯、移液管必需枯燥,過濾過程中應留意醇溶液的揮發(fā)。5、依據(jù)需用量,自行配制中性乙醇(對所用酚酞指示液顯中性)。方法:取乙醇適量,加酚酞指示劑1滴,用滴定劑氫氧化鈉滴定至顯粉紅色,即得,另用配。6、樣品測定與空白試驗平行進展。7、反響物水浴加熱后承受流水快速冷卻。82?3份,計算兩次測定的間差或三次測定的RSD。試驗七有關物質(zhì)的色譜檢查【試驗目的】1、把握HPLC法測定原料藥中有關物質(zhì)的原理與限量計算方法。2、把握TLC法測定原料藥中有關物質(zhì)的原理與測定方法。3、生疏高效液相色譜儀的工作原理與操作方法。4、生疏粘合薄層板的制備與活化。5、了解高效液相色譜儀的主要部件與日常維護【試驗原理】ppt?！驹囼灢牧稀吭囁?硅膠H,硅膠GF254,對二甲氨基苯甲醛,鹽酸普魯卡因注射液,馬來酸氯苯那敏及氧氟沙星原料藥。儀器:高效液色譜儀,二極管陣列檢測器,ODS柱,層析缸,玻板,噴霧器,點樣用微量注射器或微量吸管?！驹囼瀮?nèi)容】(一)鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸檢查本品為鹽酸普魯卡因加氯化鈉適量使成等滲的滅菌水溶液。為無色的澄明液體。[檢查]對氨基苯甲酸周密量取本品,加乙醇制成每1mL中含鹽酸普魯卡因25mg的溶液,作為供試品溶液。另取對氨基苯甲酸比照品,加乙醇制成每1mL中含30μg的溶液,作為比照品溶液。照薄層色譜法(附錄A)試驗,10μl,分別點于含有羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H薄層板上,用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇(14:1:1:4)為開放劑,開放后,取出晾干,用對二甲氨基苯甲醛溶液(2%對二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100mL,5mL制成),其顏色與比照品溶液的主斑點比較,不得更深。(二)馬來酸氯苯那敏有關物質(zhì)檢查本品為N,N-二甲基-g(4-氯苯基)-2-吡啶丙胺順丁烯二酸鹽。[檢查]有關物質(zhì)取本品,1mL50mg的溶液,作為供試品溶液;周密量取適量,加氯仿稀釋1mL0、10mg的溶液,作為比照溶液。照薄層色譜法(A)試驗,10mL,分別點于同一硅膠GF254薄層板上,以醋酸乙酯-甲醇-稀醋酸(5:3:2)為開放劑,開放后,晾干,在紫外光燈(254nm)下檢視。供試品溶液除顯氯苯那敏與馬來酸兩個斑點外,如顯其她雜質(zhì)斑點,與比照溶液的主斑點比較,不得更深。(三)氧氟沙星有關物質(zhì)的檢查本品為(±)-9-氟-2,3-二氫-3-甲基-10-(4-甲基-1-呱嗪基)-7-氧代-7H-吡啶并[1,2,3-de]-[1,4]苯并惡嗪-6-羧酸。為白色或微黃色結(jié)晶性粉末。[檢查]有關物質(zhì)照高效液相色譜法測定(附錄B)。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;005mol/L枸櫞酸溶液-乙腈(79:21)pH4、0為流淌相;1、2mL;293nm。理論板數(shù)按氧氟沙星2500。測定法取本品,加流淌相制成每1mL中含1mg的溶液,作為供試品溶液;量取適量,加流淌相稀釋成每1mL中含0、05mg的溶液,10μl注入液相色譜儀,調(diào)整檢測靈敏度,使主成分色譜峰的峰高為滿量程的20%;再取供試品溶液10μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖至主成分峰保存時間的2倍,供試品溶液色譜圖上各雜質(zhì)峰面積的與不得大于比照溶液色譜圖主峰面積的1/5。并用二極管陣列檢測器檢測樣品峰的純度?！驹囼炚f明】1,點樣應分次點加,每次點加后,吹干。2、薄層板放入層析缸時,薄板底邊應水平浸入開放劑中,待開放至溶劑前沿距玻板頂端2～3cm時,取出薄層板。3,為使缸內(nèi)開放劑飽與,薄層板放入前可在層析缸內(nèi)壁貼濾紙條,讓濾紙條一端浸入展開劑中,密封層析缸,待系統(tǒng)平衡后再將薄層板放入,開放。4、HPLC測定中流淌相使用前必需經(jīng)過濾膜過濾與超聲脫氣。5、HPLC測定完畢后,必需用水沖洗系統(tǒng)30分鐘以上,然后再用甲醇沖洗。更換流淌相時必需先停泵,待壓力降至零時,將濾頭提出液面,置另一流淌相溶液中。一.試驗目的

試驗八槐花藥材中總黃酮的質(zhì)量分析1、把握比色法測定槐花藥材中總黃酮含量的方法及原理。2、生疏槐花藥材的薄層色譜鑒別法。二.試驗原理槐花為豆科植物SophorajaponicaL的枯燥花及花蕾。夏季花開放或花蕾形成時采收,準時枯燥,除去枝,“槐花”,后者習稱“槐米”,其中蘆丁的含量最高,所以槐花藥材的鑒別及含量測定均以蘆丁為指標成分。蘆丁(C27H30O16,610、51)黃酮類化合物在堿性條件下與鋁鹽發(fā)生配位反響,生成紅色的配位化合物,使得最大吸取波長紅移至可見光區(qū),且具有較高的吸取系數(shù)。黃酮類與鋁鹽的配位反響就是定量完成的,因此可承受比色法測定槐花藥材中總黃酮的含量,避開其她非黃酮成分對測定準確度的影響。三.儀器與試藥紫外—可見分光光度計,三用紫外,索氏提取器,槐花藥材,蘆丁比照品,三氯化鋁試液,5%亞硝酸鈉溶液,10%硝酸鋁溶液,氫氧化鈉試液,甲醇,乙酸乙酯,甲酸,乙醚。四.試驗步驟1、薄層色譜鑒別供試品溶液的制備,0、2g,置于具塞試管中,5ml,密塞,10分鐘,濾過,取濾液作為供試品溶液。比照品溶液的制備:取蘆丁比照品適量,加甲醇制成濃度為4mg/ml的溶液,作為比照品溶液。測定法:吸取兩種溶液各10ul,分別點于同一硅膠G薄層板上,以乙酸乙酯—甲酸-水(8:1:1)為開放劑,開放,取出,晾干,噴以三氯化鋁試液,待溶液揮干后,置紫外光燈(365nm)下檢視,供試品色譜中,在與比照品色譜相應的位置上,顯一樣的顏色的熒光斑點。2、總黃酮含量測定比照品溶液的制備:50mg,周密稱定,25ml量瓶中,加甲醇適量,置水浴上微熱使溶解,放冷,加甲醇至刻度,10ml,100ml量瓶中,加水至刻度,搖勻,0、2mg/ml的蘆丁比照品溶液。標準曲線的制備:1ml,2ml,3ml,4ml,5ml6ml,625ml量瓶中,各加水6、0ml,5%1ml,搖勻,6分鐘,10%1、0ml,搖勻,6分鐘,10、0ml,加水稀釋至刻度,搖勻,15分鐘,不加比照品溶液同法配制空白溶液,依據(jù)紫外可見分光光度法,500nm波特長測定各溶液的吸光度,以濃度為橫坐標,吸光度為縱坐標,繪制標準曲線。測定法:將槐花粉碎,1g,周密稱定,置于索氏提取器中,加乙醚120ml,水浴加熱回流至乙醚提取液無色,放冷,棄去乙醚提取液。提取器中再參加甲醇90ml,加熱回流至甲醇提取液無色,將提取液置于100ml量瓶中,用少量甲醇洗滌索氏提取器,100ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻。周密量取10ml,100ml量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。周密量取上述溶液10ml,置于100ml量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。周密量取供試品溶液3ml,25ml量瓶中,依據(jù)標準曲線制備項下的方法,自“加水使成6、0ml”起,同法測定吸光度,由標準曲線計算出供試品溶液中蘆丁的重量(ug),即得?；被ò纯菰锲酚嬎?含總黃酮以蘆丁(C27H30O16)計,槐花不得少于8、0%,槐米不得少于20、0%。五.留意事項1、使用乙醚時,留意試驗室不得有明火。2、比色法中顯色反響及條件對形成的穩(wěn)定配位化合物有肯定影響,因此試驗中需要遵守平行操作原則:如配置標準系列溶液時,保持平行;全部參加的反響試劑均應使用刻度吸管周密量取,準確參加。3、留意吸取池(比色皿)的配對使用。4、進展含量測定時,洗滌索氏提取器的甲醇量需掌握。六、思考題1、槐花含量測定法中,為何先用乙醚回流提取并將提取液棄去？2、簡述比色法測定槐花藥材中總黃酮含量的根本原理。七、附錄1-可見光區(qū)沒有強吸取,或在紫外光區(qū)雖有吸取,但為了排解干擾、增加選擇性或提高測定的靈敏度,可參加適當?shù)娘@色劑,就是待測樣品與顯色劑的反響產(chǎn)物的最大吸取波長移至可見光區(qū),用比色法測定時,由于顯色時有很多因素會影響顯色的深淺,所以供試品與比照品或標準品應遵循平行,依據(jù)紫外分光光度法項下比照品比較法來計算供試品濃度。當吸光度與濃度關系不呈線性時,應取數(shù)份濃度呈梯度的比照品溶液,用溶劑補充至同一體積,參加顯色劑顯色后測定各份溶液的吸光度,然后以吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標繪制標準曲線,再依據(jù)供試品的吸光度在標準曲線上查得其相應濃度,并求出其含量。2、試驗試液配制(1)三氯化鋁試液:1g,100ml,即得。(2)5%亞硝酸鈉溶液:2、5g亞硝酸鈉,50ml,搖勻即得。(3)10%硝酸鋁溶液:取5、0g硝酸鋁,加水溶解成50ml,搖勻即得。(4)氫氧化鈉試液:4、3g,100ml,即得。試驗九維生素C制劑分析的綜合設計性試驗【試驗目的】1、把握碘量法的原理與操作方法。2、把握常用輔料對制劑含量測定的影響與排解方法。3、把握制劑的含量計算方法【試驗原理】維生素C分子中的烯二醇基具有復原性,I2定量地氧化成二酮基:1C2I相當(中國藥典規(guī)定,1I1摩爾),C的滴定當量等于分子量1/2?！驹囼灢牧稀吭囁?維生素C片,維生素C注射液。儀器:25mL棕色滴定管,50mL移液管,刻度吸管,碘量瓶,100mL量瓶。【試驗內(nèi)容】(一)C片(VitaminCTablets)本品為白色或略帶淡黃色片,含維生素C(C6H8O6)應為標示量的93、0%~107、0%6 8 [含量測定]20片,周密稱定,研細,周密稱取適量(約相當于維生素C02g),100mL量瓶中,加100mL10mL的混合液適量,振搖使維生素C溶解并稀釋至刻度,搖勻,經(jīng)枯燥濾紙快速濾過,50mL,1mL,用碘滴定液(01mol/L)滴定,30秒鐘不1mL碘滴定液(0、1mol/L)8、806mgCHO6 8 (二)C注射液(VitaminCInjection)本品為維生素C的滅菌水溶液,無色或微黃色的澄明液體。含維生素C(C6H8O6)應為標示量的90、0%~110、0%。本品中可加適量的焦亞硫酸鈉為穩(wěn)定劑。[含量測定]周密量取本品適量(約相當于維生素C0、2g),15mL2mL,搖勻,5分鐘,加稀4mL1mL,用碘滴定液(0、1mol/L)滴定,30秒鐘不褪。每1mL碘滴6 8 定液(0、1mol/L)8、806mg的CHO6 8 【試驗說明】維生素C在空氣中易被氧化,過濾、滴定等操作應快速。試驗十雙波長分光光度法測定復方制劑含量【試驗目的】1、把握雙波長分光光度法消退干擾的原理與波長選擇原則。2、把握紫外-標準比照法測定藥物含量及計算方法。3、生疏紫外分光光度儀的構(gòu)造與使用操作?！驹囼炘怼繌头交前粪奏て涤苫前粪奏づc甲氧芐啶組成的復方制劑。兩者在紫外區(qū)有較強的吸取。在鹽酸溶液(9→1000)中,磺胺嘧啶在308nm處有吸取,而甲氧芐啶在此波特長無吸取,故可在此波特長直接測定磺胺嘧啶的吸取度而求得含量。甲氧芐啶在277、4nm波特長有較大吸取,277、4nm308nm處2774nm為測定波長,308nm為參比波長,測定甲氧芐啶在該兩波特長的ΔA(ΔA=A277nm-A308nm)值來計算含量。復方氨基比林注射液又稱安痛定注射液,系氨基比林、安替比林與巴比妥組成的復方制劑,承受雙波長分光光度法測定安替比林的含量。依據(jù)巴比妥在酸性溶液中不呈解離狀態(tài),而無明顯紫外吸取;安替比林在233nm處有較強的吸取;氨基比林在233nm與268nm處有等吸取,選擇安替比林的吸取峰波長233nm為測定λ1,268nmλ2,則△A=A233nm-A268nm只與安替比林的濃度有關,而巴比妥、氨基比林及其她輔料不干擾測定。【試驗材料】試藥:磺胺嘧啶比照品,甲氧芐啶比照品,復方磺胺嘧啶片,安替比林比照品,