標準解讀

《GB/T 27536-2011 豬流感病毒分離與鑒定方法》是一項國家標準，旨在提供一套科學、系統(tǒng)的方法來從疑似感染豬流感的樣本中分離并鑒定豬流感病毒。該標準適用于獸醫(yī)實驗室及研究機構對豬流感病毒的研究工作。

根據(jù)此標準，首先明確了樣品采集的要求，包括但不限于鼻拭子、氣管和肺組織等樣本類型的選擇，以及如何正確保存這些樣本以確保其在運輸過程中的穩(wěn)定性。接著，詳細描述了病毒分離的具體步驟，如使用特定細胞系（例如MDCK細胞）進行培養(yǎng)，并通過觀察細胞病變效應(CPE)初步判斷是否存在病毒感染。

對于已成功分離出的病毒株，該標準還規(guī)定了一系列分子生物學技術用于進一步確認其身份，比如RT-PCR擴增特定基因片段、測序分析以及血凝抑制試驗(HI test)等。此外，也提到了利用單克隆抗體進行免疫熒光檢測(IFAT)或ELISA實驗作為輔助手段之一。


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  • 正在執(zhí)行有效
  • 2011-11-21 頒布
  • 2012-03-01 實施
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文檔簡介

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T27536—2011

豬流感病毒分離與鑒定方法

Isolationandidentificationofswineinfluenzavirus

2011-11-21發(fā)布2012-03-01實施

中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T27536—2011

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由中華人民共和國農業(yè)部提出

。

本標準由全國動物防疫標準化技術委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位中國農業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所

:。

本標準主要起草人喬傳玲楊煥良陳艷辛曉光陳化蘭

:、、、、。

Ⅰ

GB/T27536—2011

豬流感病毒分離與鑒定方法

1范圍

本標準規(guī)定了豬流感病毒分離與鑒定方法

。

本標準適用于各種亞型豬流感的病原分離和鑒定

。

2試驗材料試劑

、

21剪刀鑷子

.、。

22注射器

.1mL。

23單道及多道微量移液器吸頭

.、。

24日齡雞胚

.9~11SPF。

25犬腎細胞

.(MDCK)。

26孔培養(yǎng)板

.6。

27培養(yǎng)基

.DMEM。

28緩沖液儲存液

.HEPES(1mol/L)。

29胎牛血清

.。

210胰蛋白酶胰蛋白酶經處理

.TPCK-(TPCK)。

211磷酸鹽緩沖液參見附錄中

.0.01mol/LpH7.0~7.4(PBS)(AA.1)。

212磷酸鹽緩沖液參見附錄中

.(pH5.9)(AA.5)。

213生理鹽水參見附錄中

.0.85%(AA.2)。

214阿氏液參見附錄中

.(Alsevers)(AA.3)。

215紅細胞懸液參見附錄中

.0.5%(AA.4)。

216胎球蛋白參見附錄中

.(AA.6)。

217過碘酸鹽參見附錄中

.(AA.7)。

218亞砷酸鹽參見附錄中

.(AA.8)。

219硫代巴比妥酸參見附錄中

.(AA.9)。

220無菌蒸餾水或去離子水

.。

3儀器

31生物安全柜柜內負壓有過濾器可避免細胞培養(yǎng)物污染及保護操作人員安全

.(,HEPA)。

32孵化器

.。

33培養(yǎng)箱

.CO2。

34臺式高速冷凍離心機

.。

35水浴加熱器

.37℃。

36煮沸鍋

.。

37

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