化學(xué)發(fā)光原理和應(yīng)用

化學(xué)發(fā)光免疫分析

臨床檢驗(yàn)常見類別血液/體液常規(guī)檢測(cè)免疫生化微生物放射性免疫檢測(cè)酶聯(lián)免疫檢測(cè)金標(biāo)免疫檢測(cè)化學(xué)發(fā)光檢測(cè)直接化學(xué)發(fā)光酶促化學(xué)發(fā)光電化學(xué)發(fā)光臨床檢驗(yàn)定量半定量免疫定量檢測(cè)原理血液（尿液）中有很多含量非常低（pg/ml、ng/ml、mg/ml），但非常靈敏，其濃度變化能準(zhǔn)確反映人體疾病的發(fā)生、發(fā)展?fàn)顩r。如：T3、T4、AFP、肌鈣等等

【生化：檢測(cè)含量比較高的物質(zhì)】準(zhǔn)確、定量

【酶標(biāo)法、金標(biāo)法：定性、半定量】檢測(cè)對(duì)象檢測(cè)要求免疫標(biāo)記技術(shù)發(fā)展歷程放射免疫

優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確、定量，項(xiàng)目齊全缺點(diǎn)：放射性污染

試劑有效期短（一個(gè)月）

操作繁瑣、時(shí)間2小時(shí)左右

磁酶免

半自動(dòng)化學(xué)發(fā)光

時(shí)間分辨優(yōu)點(diǎn)：沒有放射性污染，試劑有效期長(zhǎng)（6個(gè)月以上）缺點(diǎn)：操作繁瑣，2小時(shí)有結(jié)果，準(zhǔn)確性差免疫標(biāo)記技術(shù)發(fā)展歷程全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光優(yōu)點(diǎn)：沒有放射性污染試劑有效期長(zhǎng)（6個(gè)月以上）操作全自動(dòng)速度快，半小時(shí)出結(jié)果結(jié)果最準(zhǔn)確缺點(diǎn)：試劑價(jià)格貴免疫標(biāo)記技術(shù)發(fā)展歷程？全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光主要品牌羅

氏雅培西門子貝克曼新產(chǎn)業(yè)化學(xué)發(fā)光主要技術(shù)包被技術(shù)：板式化學(xué)發(fā)光

：

固液相5%參加反應(yīng)(時(shí)間分辨)（定性

定量不準(zhǔn)）

磁顆?；瘜W(xué)發(fā)光

：

準(zhǔn)均相95%參加反應(yīng)

（精確

定量）發(fā)光原理：直接化學(xué)發(fā)光

標(biāo)記物在堿性（酸性）條件下，加強(qiáng)氧化劑，瞬間發(fā)光

廠家由10個(gè)點(diǎn)做成標(biāo)準(zhǔn)曲線，用戶只要高低兩點(diǎn)定標(biāo)修正曲線即可，節(jié)省試劑，結(jié)果穩(wěn)定、準(zhǔn)確酶促化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物在酶催化下，緩慢發(fā)光

由于酶不穩(wěn)定，每次都必須用6-12個(gè)點(diǎn)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，浪費(fèi)試劑化學(xué)發(fā)光主要技術(shù)

經(jīng)過清洗和分離后，在反應(yīng)杯中先后加入激發(fā)底物1和激發(fā)底物2，引發(fā)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，產(chǎn)生光信號(hào)。

儀器測(cè)定后顯示相對(duì)光強(qiáng)度(RLU)值，最后根據(jù)工作曲線計(jì)算待測(cè)物濃度。夾心法免疫定量檢測(cè)原理免疫定量檢測(cè)原理夾心法

樣本,ABEI標(biāo)記物,FITC標(biāo)記物和磁珠加入到反應(yīng)杯中，溫浴15分鐘*,形成“夾心三明治”免疫復(fù)合物，并被磁珠俘獲。在夾心法中，待測(cè)物濃度和樣本RLU值成正相關(guān)此時(shí)主曲線單調(diào)遞增免疫定量檢測(cè)原理免疫定量檢測(cè)原理RLU0Con.50500ABCDEFGHIJ主曲線的繪制：十點(diǎn)定標(biāo)競(jìng)爭(zhēng)法磁珠樣本，ABEI標(biāo)記物,FITC標(biāo)記物和磁珠加入到反應(yīng)杯中，溫浴15分鐘*,ABEI標(biāo)記抗原，和樣本待測(cè)抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合FITC標(biāo)記的抗體，2種產(chǎn)物同時(shí)被磁珠俘獲。免疫定量檢測(cè)原理經(jīng)過清洗和分離后，在反應(yīng)杯中先后加入激發(fā)底

物1和激發(fā)底物2，引發(fā)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，產(chǎn)生光信號(hào)。

儀器測(cè)定后顯示相對(duì)光強(qiáng)度(RLU)值，最后根據(jù)工作曲線計(jì)算待測(cè)物濃度。競(jìng)爭(zhēng)法免疫定量檢測(cè)原理在競(jìng)爭(zhēng)法中，待測(cè)物濃度和樣本RLU值成負(fù)相關(guān)此時(shí)主曲線單調(diào)遞減免疫定量檢測(cè)原理*兩點(diǎn)定標(biāo)原理Cal1Cal2主曲線定標(biāo)曲線C01C02Δ1%=Rf|C1-C01|RfC1*100%線性補(bǔ)償曲線免疫定量檢測(cè)原理發(fā)光標(biāo)志物ABEI在酸堿溶液里都非常穩(wěn)定獨(dú)家專利ABEI化學(xué)品名稱:N-(4-氨基丁基)-N-乙烷基異魯米諾N-(4-Aminobutyl)-N-ethylisoluminol分子式:C14H20N4O2

分子量：276.33+NaOH+H2O2

ABEI激發(fā)底物1激發(fā)底物2發(fā)光(持續(xù)測(cè)量3秒)發(fā)光信號(hào)產(chǎn)生及測(cè)量ABEI直接化學(xué)發(fā)光發(fā)光標(biāo)志物ABEIdelay2.5sdelay0.1s發(fā)光標(biāo)志物ABEI納米磁珠：由聚合物交聯(lián)構(gòu)成骨架，包裹納米級(jí)鐵氧化物形成的微米級(jí)的小球納米級(jí)鐵氧化物賦予磁性微球超順磁性在磁場(chǎng)中迅速被磁化并增強(qiáng)磁場(chǎng)，從而可以快速聚集而從液相中分離。外部磁場(chǎng)消失后恢復(fù)到初始狀態(tài)，沒有剩磁，可以重新分散開,利于清洗。納米免疫磁性微珠

(專利技術(shù))磁球表面有大量活性基團(tuán)，在適當(dāng)條件下可以和各種分子以穩(wěn)定的化學(xué)鍵結(jié)合。根據(jù)標(biāo)記物的不同，可以廣泛應(yīng)用于診斷領(lǐng)域。MALGUMI系統(tǒng)中，我們可以在磁球上標(biāo)記FITC抗體，作為通用的分離工具。也可以根據(jù)需要直接標(biāo)記其他特定的抗原或抗體，作為特殊項(xiàng)目中的分離手段。納米免疫磁性微珠納米免疫磁性微珠磁珠擴(kuò)增了抗原抗體反應(yīng)面積，從而提高反應(yīng)效率，縮短了反應(yīng)時(shí)間更快更充分的捕獲抗原抗體從而提高了靈敏度作為液相分離平臺(tái)，與試劑充分混合后顯著的減少批內(nèi)和批間差異通過化學(xué)鍵作用標(biāo)記抗原或抗體增強(qiáng)了準(zhǔn)確性。性能優(yōu)點(diǎn)MAGLUMI1000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀MAGLUMI2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀MAGLUMI2000Plus全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀MAGLUMI4000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀超級(jí)POCTMAGLUMI600測(cè)試速度:180T／H；第一個(gè)結(jié)果時(shí)間：12分鐘；一次可裝載16個(gè)樣本，可隨時(shí)添加樣本；一次性可裝載4個(gè)試劑盒，可隨時(shí)連續(xù)裝載、替換；一次可裝載60個(gè)反應(yīng)杯全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀

精美、簡(jiǎn)練的外觀M2000M2000機(jī)器分解圖全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀樣本倉?144個(gè)標(biāo)本位，可隨時(shí)添加，急診優(yōu)先?條形碼識(shí)別，抽血管、放免管等都可?樣本稀釋比例任意設(shè)定，自動(dòng)稀釋高滴度樣本全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀試劑區(qū)?15/25個(gè)試劑位，可隨時(shí)連續(xù)裝載、調(diào)換試劑盒?采用射頻識(shí)別技術(shù)讀取試劑盒信息，讀取速度?試劑區(qū)冷藏（8-12℃），獨(dú)立供電?帶磁球自動(dòng)懸浮系統(tǒng)全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀采樣針

?雙針，分別加試劑和樣本?內(nèi)外壁清洗，針外壁特氟龍包被，杜絕交叉污染?液面探測(cè)、凝塊檢測(cè)功能全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀

一次可裝載720個(gè)反應(yīng)杯檢測(cè)過程中，可隨時(shí)連續(xù)裝載

反應(yīng)杯加載存儲(chǔ)器全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀樣本編輯模式

?正常模式：病人ID號(hào)從條形碼上讀取,項(xiàng)目手動(dòng)輸入；?快速模式：軟件自動(dòng)生成病人ID號(hào)，項(xiàng)目手動(dòng)輸入；?聯(lián)網(wǎng)模式：病人ID號(hào)條形碼讀取，項(xiàng)目從Lis系統(tǒng)獲取。全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀試劑盒試劑盒自帶標(biāo)準(zhǔn)品，兩點(diǎn)定標(biāo)修正主曲線集成試劑盒設(shè)計(jì)，無需試劑預(yù)處理，即開即用射頻識(shí)別技術(shù)，試劑的所有信息儲(chǔ)存在高頻電子標(biāo)簽上更新、增加新項(xiàng)目無需對(duì)軟件升級(jí)，方便快捷

全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀軟件系統(tǒng)中、英、西班牙文界面、報(bào)告軟件真正實(shí)現(xiàn)人機(jī)對(duì)話智能報(bào)警全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀M1000與M2000的比較1.無層存儲(chǔ)器2.

一次可裝載192個(gè)反應(yīng)杯3.單臂單針設(shè)計(jì)4.120測(cè)試/小時(shí)1.有層存儲(chǔ)器2.一次可裝載720個(gè)反應(yīng)杯3.雙臂雙針設(shè)計(jì)，分別加試

劑和樣本4.180測(cè)試/小時(shí)全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀M2000與M2000P的比較1.臺(tái)式2.15個(gè)試劑位3.樣本區(qū)無冷藏功能1.立式，帶儲(chǔ)藏柜2.25個(gè)試劑位3.樣本區(qū)有冷藏功能全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀M2000P與M4000的比較1.180測(cè)試/小時(shí)1.280測(cè)試/小時(shí)全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀

反應(yīng)杯溫育測(cè)量廢棄物加樣清洗M2000硬件介紹全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀

反應(yīng)杯溫育測(cè)量加樣清洗M2000硬件介紹全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀廢棄物新產(chǎn)業(yè)與同行產(chǎn)品對(duì)比對(duì)比項(xiàng)目MAGLUMI2000羅氏e-411羅氏e-601雅培i2000西門子CP貝克曼Access2發(fā)光標(biāo)記物ABEI三聯(lián)吡啶釕三聯(lián)吡啶釕吖啶酯吖啶酯堿性磷酸酶測(cè)量原理磁顆粒的直接化學(xué)發(fā)光磁顆粒的電化學(xué)發(fā)光磁顆粒的電化學(xué)發(fā)光磁顆粒的直接化學(xué)發(fā)光磁顆粒的直接化學(xué)發(fā)光酶促化學(xué)發(fā)光定標(biāo)品無需另購需另購需另購需另購需另購需另購第一個(gè)結(jié)果時(shí)間17分鐘18分鐘18分鐘29分鐘15分鐘20分鐘分析速度180T/H86T/H170T/H200T/H180T/H100T/H樣本位14430個(gè)（盤式）/75（架式）每模塊25個(gè)134個(gè)84個(gè)60個(gè)試劑連續(xù)裝載可連續(xù)裝載不可連續(xù)裝載不可連續(xù)裝載不可連續(xù)裝載可連續(xù)裝載不可連續(xù)裝載試劑成本低高高高高高維護(hù)成本低高高高高高

新產(chǎn)業(yè)化學(xué)發(fā)光優(yōu)點(diǎn)

試劑項(xiàng)目多，100個(gè)已注冊(cè)項(xiàng)目，rT3、TRab、肝纖、CA50、CA242、SCCA、CA724、211、NSE、S-100IAA、GAD65、IGF-1、醛固酮、血管緊張素、PCT、甘膽酸、FE3、肌鈣蛋白I、腦鈉肽、D-二聚體、25（OH）VD、TORCH、EB病毒、乙肝兩對(duì)半定量、丙肝等等。

180個(gè)測(cè)試/小時(shí)，第一個(gè)測(cè)試17分鐘，以后每分鐘3個(gè)測(cè)試

故障率低，試劑通過衛(wèi)生部室間質(zhì)評(píng)

試劑價(jià)格低、質(zhì)控品、標(biāo)準(zhǔn)品免費(fèi)

多快好省磁顆粒、管式直接化學(xué)發(fā)光

Thyroid甲狀腺T3三碘甲狀腺原氨酸T4四碘甲狀腺原氨酸FT3游離三碘甲狀腺原氨酸FT4游離四碘甲狀腺原氨酸RT3反三碘甲狀腺原氨酸TRAB促甲狀腺受體抗體TGA甲狀腺球蛋白抗體TMA甲狀腺微粒體抗體TG甲狀腺球蛋白TSH(3rdGen)促甲狀腺激素(第三代超敏)項(xiàng)目菜單細(xì)則甲亢、甲減、自身免疫性甲狀腺疾病的診斷;新生兒甲減檢查項(xiàng)目菜單細(xì)則

Fertility生育FSH促卵泡激素LH黃體生成素PRL催乳素

E2雌二醇

PRG孕酮TEST睪酮F-TEST游離睪酮HCG/β-HCG絨毛膜促性腺激素

B-HCG絨毛膜促性腺激素B亞單位FE3游離雌三醇PAPP-A妊娠相關(guān)血漿蛋白DHEA-S脫氫表雄酮卵巢性閉經(jīng)和垂體/下丘腦性閉經(jīng)、多囊卵巢綜合癥、男性性功能、青春期前兒童性早熟、孕檢、預(yù)測(cè)排卵Metabolism

糖代謝C-PeptideC-肽Insulin胰島素ProInsulin胰島素原IAA抗人胰島素抗體GAD65谷氨酸脫羧酶抗體IGF-1胰島素樣生長(zhǎng)因子1ICA

抗胰島細(xì)胞抗體糖尿病的病因、分型、診斷及監(jiān)測(cè)；妊娠期高血壓檢測(cè)項(xiàng)目菜單細(xì)則TumorMakers腫瘤標(biāo)志物AFP甲胎蛋白CEA癌胚抗原Ferritin鐵蛋白TPA組織多肽抗原PAP前列腺酸性磷酸酶PSA前列腺特異性抗原F-PSA游離前列腺特異性抗原CA125糖類抗原125項(xiàng)目菜單細(xì)則TumorMakers腫瘤標(biāo)志物CA153糖類抗原153CA199糖類抗原199CA50糖類抗原50CA242糖類抗原242CA724糖類抗原724CYFRA211細(xì)胞角蛋白十九片段NSE神經(jīng)元特異性烯醇化酶Stangtec-100Stangec-100蛋白質(zhì)SCCA鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原PepsinogenⅠ胃蛋白酶ⅠPepsinogenⅡ胃蛋白酶Ⅱ項(xiàng)目菜單細(xì)則部分疾病腫瘤標(biāo)志物選擇順序肝AFPCEA結(jié)/直腸CEACA19-9CA50胰腺CA19-9CEACA50胃CA724CEACA19-9食道CEACA19-9CA724CA50SCCA肺SYFRA211NSE

CA50CEACA19-9SCCA乳腺CA15-3CA125CEA卵巢CA125AFPβ-HCGCEA子宮SCCAβ-HCG前列腺fPSAPSAPAP項(xiàng)目菜單細(xì)則

Hepatic肝纖維化HA，HyaluronicAcid透明質(zhì)酸PIIIPN-PIII型前膠原N肽CIV，CollagenIVIV型膠原蛋白LN，Laminin

層粘連蛋白CG，GlycocholicAcid甘膽酸肝纖維化的程度，隨著慢遷移肝－慢活肝－肝硬化－肝癌病程演變，在血中的含量逐步升高；妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥檢測(cè)項(xiàng)目菜單細(xì)則KidneyFunction

腎功能β2-MGβ2微球蛋白H-ALB人尿微量白蛋白腎臟疾病的判斷、腎臟移植檢測(cè)項(xiàng)目菜單細(xì)則

BoneMetabolism

骨代謝

PTH甲狀旁腺素CT降鈣素BGP骨鈣素25-OHVitaminD（total）25-羥基維生素D（總）高、低鈣血癥、骨損傷后骨質(zhì)合成、骨質(zhì)疏松；VD在骨外，心血管系統(tǒng)疾病、糖尿病、腫瘤方面、免疫系統(tǒng)疾病中的作用項(xiàng)目菜單細(xì)則PrenatalScreening產(chǎn)前篩查AFP甲胎蛋白Free-B-HCG游離絨毛膜促性腺激素B亞單位PAPP-A妊娠相關(guān)蛋白唐氏(Down’s)綜合征和開放神經(jīng)管缺陷的產(chǎn)前篩查項(xiàng)目菜單細(xì)則

Cardiac心血管及心肌標(biāo)志物TroponinI肌鈣蛋白IMyoglobin肌紅蛋白CK-MB肌酸激酶同工酶ALD醛固酮AI血管緊張素IAII血管緊張素IINT-proBNP腦自然肽N端前體蛋白D-DimerD-二聚體心肌梗死、心力衰竭、高血壓的診斷，血栓和溶栓治療

項(xiàng)目菜單細(xì)則InflammationMonitoring

炎癥監(jiān)測(cè)PCT降鈣素原CRPC反應(yīng)蛋白細(xì)菌性和病毒性感染鑒別抗生素應(yīng)用指導(dǎo)器官、骨髓移植患者的術(shù)后感染監(jiān)測(cè)項(xiàng)目菜單細(xì)則

Immunoglobulin

免疫球蛋白IgG人免疫球蛋白IgGIgM人免疫球蛋白IgMIgE人免疫球蛋白IgEIgA人免疫球蛋白IgA類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的鑒別，過敏性疾病及一些免疫性疾病檢測(cè)項(xiàng)目菜單細(xì)則

DrugMonitoring

藥物檢測(cè)

Digoxin地高辛CyclosporineA環(huán)包霉素AFK506他克莫司用于器官移植的排斥反應(yīng)監(jiān)測(cè)，指導(dǎo)治療，提高存活率項(xiàng)目菜單細(xì)則

TORCHTOXOIgG弓形蟲IgGTOXOIgM弓形蟲IgMRubellaIgG風(fēng)疹病毒IgGRuballaIgM風(fēng)疹病毒IgMCMVIgG巨細(xì)胞病毒IgGCMVIgM巨細(xì)胞病毒IgMHSV-1/2IgG單純皰