醫(yī)療廢物微波消毒處理效果檢測(cè)布點(diǎn)與評(píng)價(jià)要求

醫(yī)療廢物微波消毒處理效果檢測(cè)布點(diǎn)與評(píng)價(jià)要求1指示菌的選擇及菌量抗力要求1.1單獨(dú)微波消毒工藝選擇枯草桿菌黑色變種芽孢（ATCC9372）作為生物指示物，微波與高溫蒸汽組合消毒處理工藝選擇嗜熱性脂肪桿菌芽孢（ATCC7953）和枯草桿菌黑色變種芽孢（ATCC9372）作為生物指示物。1.2細(xì)菌芽孢及含量要求：嗜熱脂肪桿菌芽孢載體含量應(yīng)為1×106～5×106CFU/載體，枯草桿菌黑色變種芽孢應(yīng)為1×106～5×106CFU/載體，自含式的生物指示物應(yīng)符合說明書的要求。1.3細(xì)菌芽孢抗力的要求：嗜熱脂肪桿菌芽孢，在121℃條件下，D≥1.5min。菌種選擇及菌種抗力參見《消毒技術(shù)規(guī)范》和衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)的有關(guān)要求。2染菌載體選擇要求2.1單獨(dú)微波消毒處理工藝載體為輸液管（內(nèi)徑3mm、長度為破碎設(shè)備說明書中規(guī)定的最長破碎長度）。2.2微波與高溫蒸汽組合消毒處理工藝載體為輸液管（內(nèi)徑3mm、長度為破碎設(shè)備說明書中規(guī)定的最長破碎長度）或使用自含式生物指示物。2.3按《消毒技術(shù)規(guī)范》或相應(yīng)的消毒檢測(cè)方法制備染菌載體。3染菌載體布點(diǎn)要求3.1單獨(dú)微波消毒處理工藝每次試驗(yàn)應(yīng)在設(shè)備進(jìn)料口連續(xù)等間距加入至少10個(gè)染菌載體。3.2微波與高溫蒸汽組合消毒處理工藝消毒艙（＜5m3）內(nèi)至少放置10個(gè)染菌載體于不同的位置。3.3以上情況均應(yīng)包括艙內(nèi)或連續(xù)消毒處理線上最難消毒的位置，該位置應(yīng)由廠商提供，如果廠商不能提供，應(yīng)先進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)找出艙內(nèi)或連續(xù)消毒處理線上最難消毒的部位。4消毒處理效果檢測(cè)要求4.1試驗(yàn)器材a）試驗(yàn)菌株：按1.1進(jìn)行選擇。b）洗脫液：含0.1%吐溫80的磷酸鹽緩沖液（0.03mol/L，pH7.2）。c）培養(yǎng)基：嗜熱脂肪桿菌芽孢可使用嗜熱脂肪桿菌恢復(fù)瓊脂培養(yǎng)基，枯草桿菌黑色變種芽孢可使用胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基。d）載體：單獨(dú)微波消毒處理工藝載體為輸液管（內(nèi)徑3mm、長度為破碎設(shè)備說明書中規(guī)定的最長破碎長度）；微波與高溫蒸汽組合消毒處理工藝載體為輸液管（內(nèi)徑3mm、長度為破碎設(shè)備說明書中規(guī)定的最長破碎長度）或使用自含式生物指示物。e）模擬醫(yī)療廢物管腔：一次性使用輸液器去掉針頭部分，直徑為3mm、長度為1.9m。f）刻度吸管：刻度為1.0mL、5.0mL、10.0mL。g）移液器：刻度為10μL、20μL及配套的塑料吸頭。h）無菌平皿：直徑90mm。i）培養(yǎng)箱：枯草桿菌黑色變種芽孢應(yīng)采用37℃恒溫培養(yǎng)箱。嗜熱脂肪桿菌芽孢應(yīng)采用56℃恒溫培養(yǎng)箱。j）模擬醫(yī)療廢物：按廠家說明書的要求，準(zhǔn)備干凈的各種醫(yī)療用品，數(shù)量應(yīng)符合滿載的要求。4.2染菌載體的制備4.2.1芽孢懸液的制備按《消毒技術(shù)規(guī)范》的方法制備枯草桿菌黑色變種芽孢（ATCC9372）懸液，芽孢含量為108～109CFU/mL。從有資質(zhì)的生產(chǎn)企業(yè)購買或自制嗜熱性脂肪桿菌芽孢（ATCC7953）懸液，芽孢含量為1×108～1×109CFU/mL，在121℃條件下，D≥1.5min。4.2.2輸液管染菌載體的制備用移液器吸取10μL芽孢懸液，置入用作載體的輸液管內(nèi)，輕輕擠壓，使其均勻分布于管腔內(nèi)，將載體放入無菌平皿內(nèi)，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱或56℃恒溫培養(yǎng)箱中干燥，制成染菌載體備用，每個(gè)染菌載體的芽孢回收數(shù)量應(yīng)為1×106～5×106CFU/載體。4.2.3不銹鋼針染菌載體的制備用兩個(gè)小鐵夾子夾住用作載體的不銹鋼針兩端，將其橫向支撐起來，用10μL移液器吸取芽孢懸液并滴染不銹鋼針，每根不銹鋼針滴染5滴，在室溫自然晾干制成染菌載體，每個(gè)染菌載體的芽孢回收數(shù)量應(yīng)為1×106～5×106CFU/載體。將染菌載體放置于1.9m長的模擬醫(yī)療廢物管腔的中間部位，然后盤起該管腔（以防止不銹鋼針染菌載體移動(dòng)），放入180mm×120mm的無菌布袋內(nèi)備用。4.3消毒處理效果檢測(cè)4.3.1將至少10個(gè)染菌載體，按3的要求放入消毒處理設(shè)備中，在滿載的條件下，按說明書的消毒處理程序進(jìn)行消毒處理。4.3.2消毒處理過程結(jié)束后，立即在消毒處理設(shè)備出口處的醫(yī)療廢物中收集輸液管染菌載體或打開消毒艙取出染菌載體，以無菌操作方式獲取至少10個(gè)染菌載體，分別用無菌剪刀剪碎后放入含有5mL洗脫液的試管中，將試管在手掌上振打200次，做10倍系列稀釋。選擇適宜稀釋度，分別吸取1mL，以傾注法接種于兩個(gè)平皿中，置37℃恒溫培養(yǎng)箱或56℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h，計(jì)數(shù)存活菌數(shù)，作為實(shí)驗(yàn)組，使用自含式生物指示物按說明書要求培養(yǎng)。4.3.3分別取2個(gè)輸液管染菌載體放在室溫下，不經(jīng)消毒處理，待實(shí)驗(yàn)組達(dá)到規(guī)定作用時(shí)間后，分別用無菌剪刀將該染菌載體剪碎后，放入含5mL洗脫液的試管中，其余試驗(yàn)步驟與上述實(shí)驗(yàn)組相同，作為陽性對(duì)照組。4.3.4分別取洗脫液各1mL，接種至2個(gè)無菌平皿，倒入15～20mL同批次的培養(yǎng)基，并與實(shí)驗(yàn)組做同樣培養(yǎng)，作為陰性對(duì)照組。4.3.5以上試驗(yàn)重復(fù)3次。5評(píng)價(jià)規(guī)定5.1經(jīng)3次重復(fù)試驗(yàn)，每次試