GB/T 21773-2008化學(xué)品體內(nèi)哺乳動物紅細(xì)胞微核試驗方法

犐犆犛１３．３００；１１．１００

犃８０

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜２１７７３—２００８

化學(xué)品體內(nèi)哺乳動物紅細(xì)胞

微核試驗方法

犆犺犲犿犻犮犪犾狊—犜犲狊狋犿犲狋犺狅犱狅犳犻狀狏犻狏狅犿犪犿犿犪犾犻犪狀

犲狉狔狋犺狉狅犮狔狋犲犿犻犮狉狅狀狌犮犾犲狌狊

２００８０５１２發(fā)布２００８０９０１實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局

發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

書

犌犅／犜２１７７３—２００８

前言

本標(biāo)準(zhǔn)等同采用經(jīng)濟合作與發(fā)展組織（ＯＥＣＤ）化學(xué)品測試指南Ｎｏ．４７４（１９９７年）《體內(nèi)哺乳動物

骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗》（英文版）。

本標(biāo)準(zhǔn)作了下列編輯性修改：

———增加了范圍部分；

———計量單位改成我國法定計劑量單位；

———刪除了ＯＥＣＤ參考文獻。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國危險化學(xué)品管理標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會（ＳＡＣ／ＴＣ２５１）提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位：中國疾病預(yù)防控制中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所。

本標(biāo)準(zhǔn)參加起草單位：天津市疾病預(yù)防控制中心、天津市檢驗檢疫科學(xué)技術(shù)研究院。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：劉克明、侯粉霞、楊德一、李津、王春花、楊雪瑩、張園、李寧濤。

Ⅰ

書

犌犅／犜２１７７３—２００８

犗犈犆犇引言

１．哺乳動物體內(nèi)微核試驗通過分析嚙齒類動物骨髓和（或）外周血液樣本中的嗜多染紅細(xì)胞，用以

檢測受試物誘發(fā)的染色體或成紅細(xì)胞有絲分裂器的損傷。

２．微核試驗的目的是鑒別可引起細(xì)胞遺傳學(xué)損傷的物質(zhì)，這種損傷會導(dǎo)致含遲滯染色體片斷或整

條染色體的微核形成。

３．當(dāng)骨髓正染紅細(xì)胞演變成為嗜多染紅細(xì)胞時，其主核被排出，已形成的微核隨后就留在無細(xì)胞

核的胞漿中。由于這些細(xì)胞中缺少主核，故很易觀察到。在染毒動物中有微核的嗜多染紅細(xì)胞出現(xiàn)頻

率的增加，是引起染色體損傷指征。

４．該試驗中常規(guī)使用嚙齒類動物骨髓，因該組織中可產(chǎn)生嗜多染紅細(xì)胞。如果已證明某種動物的

脾臟不能清除有微核紅細(xì)胞，或已顯示某種動物對檢測能致染色體結(jié)構(gòu)或數(shù)目畸變的物質(zhì)有足夠的敏

感性，則同樣也可考慮檢測其外周血的有核未成熟的（嗜多染的）紅細(xì)胞。有很多判斷微核的標(biāo)準(zhǔn)，其中

包括微核是否存在著絲粒或著絲的ＤＮＡ。有微核的未成熟的（嗜多染的）紅細(xì)胞的出現(xiàn)率是主要的終

點。當(dāng)受試動物連續(xù)染毒４周或更長時，外周血中的某些成熟紅細(xì)胞也含有微核，這時外周血中成熟的

（正染紅的）紅細(xì)胞數(shù)也可作為試驗終點。

５．哺乳動物體內(nèi)微核試驗特別適用于評價那些需要考慮體內(nèi)代謝、藥物代謝動力學(xué)和ＤＮＡ修復(fù)

過程諸因素的致突變危害?？缮鲜鲋T因素在不同動物種屬、不同組織和不同的遺傳終點之間是有所不

同。微核試驗對于進一步研究體外系統(tǒng)已檢測到的致突變作用也是有用的。

６．如果有證據(jù)表明受試物質(zhì)或活性代謝產(chǎn)物不能到達相應(yīng)的靶組織內(nèi)，則不適合使用本試驗。

Ⅱ

犌犅／犜２１７７３—２００８

化學(xué)品體內(nèi)哺乳動物紅細(xì)胞

微核試驗方法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了體內(nèi)哺乳動物紅細(xì)胞微核試驗的范圍、術(shù)語和定義、試驗基本原則、試驗方法、試驗數(shù)

據(jù)和報告。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于檢測化學(xué)品的致突變作用。

２術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

２．１

著絲粒犮犲狀狋狉狅犿犲狉犿／犽犻狀犲狋狅犮犺狅狉犲

在細(xì)胞分裂期，染色體與紡錘絲聯(lián)合的區(qū)域，以使子染色體有序地向子細(xì)胞的兩極移動。

２．２

微核犿犻犮狉狅狀狌犮犾犲犻

在有絲分裂（減數(shù)分裂）末期，由落后染色體片斷或整體染色體產(chǎn)生的，分離或附屬于細(xì)胞主核的

小核。

２．３

正染紅細(xì)胞狀狅狉犿狅犮犺狉狅犿犪狋犻犮犲狉狔狋犺狅犮狔狋犲

成熟紅細(xì)胞，因缺乏核糖體，可以用選擇性核糖體染料與不成熟的嗜多染紅細(xì)胞區(qū)分開來。

２．４

嗜多染紅細(xì)胞狆狅犾狔犮犺狉狅犿犪狋犻犮犲狉狔狋犺狉狅犮狔狋犲

未成熟紅細(xì)胞，處于發(fā)育中期，仍含核糖體，故可用選擇性核糖體染料與成熟的正染紅細(xì)胞區(qū)分

開來。

３試驗基本原則

采用適當(dāng)染毒途徑使受試動物染毒。如使用骨髓樣本，則在染毒后的合適時間將動物處死，提取骨

髓，制片和染色。當(dāng)使用外周血樣時，則要在染毒后適當(dāng)時間采血、制備涂片和染色，且最后一次染毒和

細(xì)胞收獲之間的時間要盡可能短。分析制片中存在的微核。

４試驗方法

４．１準(zhǔn)備

４．１．１動物種屬的選擇

如使用骨髓樣品，則推薦使用小鼠和大鼠，當(dāng)然其他合適的哺乳動物也可使用。當(dāng)使用外周血樣，

則推薦使用小鼠。但是，假如某種動物的脾臟不能清除有微核的紅細(xì)胞，或已顯示某種動物對檢測能