GB/T 18980-2003乳和乳粉中黃曲霉毒素M1的測定免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法

ICS67.100.10X04中華人民共和國國家標準GB/T18980--2003乳和乳粉中黃曲霉毒素M，的測定免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法DeterminationofaflatoxinMcontentinmilkandmilkpowderCleanupbyimmunoaffinitvchromatogaphyanddeterminationbyhigh-performanceliquidchromatigraphyandfluorometer（ISO14501:1998,IDT)2003-02-21發(fā)布2003-08-01實施華中民共和發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局

GB/T18980—2003本標準的免疫親和層析凈化一高效液相色譜法等同采用ISO14501:1998《乳和乳粉中黃曲霉毒素M，免疫親和層析凈化高效液相色譜法》。本標準免疫親和層析凈化一熒光光度法快速測定乳和乳粉中黃曲霉毒素M,。本標準中的附錄A為資料性附錄。本標準由北京市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出本標準由全國食品工業(yè)標準化技術(shù)委員會歸口本標準起草單位：北京市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗所、青島出入境檢驗檢疫局、國家標準物質(zhì)研究中心。本標準主要起草人：王品、張鵬、張藝兵、邵明武。本標準為首次發(fā)布。

GB/T18980—2003乳和乳粉中黃曲霉毒素M，的測定免疫親和層析凈化高效液相色譜法和熒光光度法免疫親和層析凈化高效液相色譜法范圍本標準適用于乳、乳粉.以及低脂乳、脫脂乳、低脂乳粉和脫脂乳粉中黃曲霉毒素M，含量的測定乳粉中的坡低檢測限是0.08g/kg.乳中的最低檢測限是0.008gg/L.1.2術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標準1.2.1黃曲蛋毒素M，含量aflatoxinM，content通過本標準所測定出的本物質(zhì)的質(zhì)量含量。注：黃曲霉毒素M的含量以微克/升（Pg/L)或微克/千克（pg/kg)表示1.3原理試樣通過免疫親和柱時,黃曲霉毒素M被提取。親和柱內(nèi)含有的黃曲霉毒素M，特異性單克隆抗體交聯(lián)在固體支持物上·當樣品通過親和柱時.抗體選擇性的與黃曲霉毒素M（抗原)鍵合，形成抗體-抗原復(fù)合體。用水洗柱除去柱內(nèi)雜質(zhì).然后用洗脫劑洗脫吸附在柱上的黃曲霉毒素M.收集洗脫液。用帶有熒光檢測器的高效液相色譜儀測定洗脫液中黃曲霉毒素M，含量。1.4試劑除非特別聲明，所用試劑為分析純；使用蒸水、去離子水或其他相當純度的水。1.4.1免疫親和柱：應(yīng)該含有黃曲霉毒素M，的抗體。親和柱的最大容量不小于100g黃曲霉毒素M（相當于50mL濃度為22g/L的試樣),當標淮溶液含有4g黃曲霉毒素M（相當于50mL濃度為80ng/L的試樣)時回收率不低于80%。應(yīng)該定期檢查親和柱的柱效和回收率,對于每個批次的親和柱至少檢查一次(見1.4.1.1和1.4.1.2).1.4.1.1柱效檢查用移液管(1.5.4)移取1.0mL的黃曲霉毒素M，儲備液（1.4.5.2)到20mL的錐形試管中（1.5.9)。用恒流的氮氣(1.4.3)將液體慢慢吹干，然后用10mL10%的乙腈(1.4.2.2)溶解殘渣;用力搖蕩。將該溶液加人到40mL的水中.充分混勺.全部通過免疫親和柱。按說明書要求使用免疫親和柱淋洗免疫親和柱后，洗脫下黃曲霉毒素M.。將洗脫液進行適當稀釋后.用高效液相色譜儀測定免疫親和柱鍵合的黃曲霉毒素M含量。計算黃曲霉毒素M，的回收率.將其結(jié)果與1.4.1中所要求的指標進行比較1.4.1.2回收率檢查用移液管(1.5.4)移取0.8mL0.0052g/mL的黃曲霉毒素M，標準工作液(1.4.5.3)到10mL的水中.充分混勾.全部通