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文檔簡介
檢測生物組織中的糖類脂肪和蛋白質(zhì)蘋果馬鈴薯黃豆花生?它們中那種有機(jī)物最豐富2021/4/272某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的相關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。
實驗原理:鑒定物質(zhì)還原性糖脂肪蛋白質(zhì)淀粉試劑實驗現(xiàn)象
斐林試劑磚紅色沉淀蘇丹Ⅲ橘黃色蘇丹Ⅳ紅色
雙縮脲試劑紫色
碘
藍(lán)色2021/4/273實驗的材料的選擇和處理有什么要求?材料的選擇材料的處理還原性糖的鑒定脂肪的鑒定含還原糖高,顏色為白色的植物組織如蘋果和梨富含脂肪的種子,如花生浸泡3~4小時/蛋白質(zhì)的鑒定富含蛋白質(zhì)的牛奶或雞蛋清雞蛋清要先稀釋淀粉的鑒定馬鈴薯/2021/4/274一、可溶性還原糖的檢測:還原糖:具有還原性基團(tuán)(醛基或酮基)的糖類,
如葡萄糖、果糖和麥芽糖等。
蔗糖、淀粉和纖維素屬于非還原糖。1、選材:蘋果、梨、白蘿卜等。(含糖量較高,顏色為白色或近于白色的植物組織)2、檢測試劑:斐林試劑甲液:0.1g/mL的NaOH乙液:0.05g/mL的CuSO4等量混勻后制成2021/4/275選材:3.實驗流程(步驟)制備組織樣液:制漿:去皮、切塊、研磨,過濾:(用單層紗布)樣液:顯色反應(yīng)
現(xiàn)象:
2ml組織樣液1ml新配制的斐林試劑5065℃水浴加熱約2min棕色淺藍(lán)色磚紅色2021/4/276一、可溶性還原糖的檢測:4、檢測原理:0.1g/mL的NaOH溶液與0.05g/mL的CuSO4
溶液混合后,立即生成淡藍(lán)色的Cu(OH)2懸濁液。
還原糖在水浴加熱的條件下,可將Cu(OH)2還原為磚紅色的Cu2O沉淀。2021/4/277二、蛋白質(zhì)的檢測:1、選材:雞蛋清、牛奶2、檢測試劑雙縮脲試劑A液:0.1g/mL
NaOHB液:0.01g/mL
CuSO4三、淀粉的檢測:1、選材:面粉、馬鈴薯樣液2、試劑:
碘液
3、檢測過程:2ml組織樣液
滴加碘液觀察顏色變化3.檢測過程:雞蛋清溶液
結(jié)果顯示
NaOH溶液滴加CuSO2
溶液,滴加后均需搖勻2021/4/278二、蛋白質(zhì)的檢測:4、實驗原理:
堿性環(huán)境(NaOH)中,蛋白質(zhì)中的肽鍵能和雙縮脲試劑中的Cu2+反應(yīng)生成紫色的絡(luò)化物,這個反應(yīng)叫做雙縮脲反應(yīng)三、淀粉的檢測:4、原理:藍(lán)色淀粉+碘液2021/4/279比較項目試劑及成分原理方法加熱與否結(jié)果可溶還原糖的鑒定斐林試劑甲液:NaOH,0.1g/mL乙液:CuSO4,0.05g/mL磚紅色沉淀蛋白質(zhì)的鑒定雙縮脲試劑A液
NaOH0.1g/mLB液
CuSO40.01g/mL溶液呈紫色斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同?新配制的Cu(OH)2溶液與加入的還原糖,在加熱條件下生成磚紅色的Cu2O在堿性環(huán)境下的Cu2+,與類似于雙縮脲結(jié)構(gòu)的肽鍵發(fā)生反應(yīng)生成紫色絡(luò)合物甲乙等量混合而后立即使用先A液1mL,然后再加B液4滴水浴加熱不需要2021/4/2710四、脂肪的檢測1、選材:經(jīng)浸泡去種皮的花生種子。2、檢測試劑:蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液3、實驗步驟:2021/4/2711橘黃色小圓顆粒即為脂肪顆粒脂肪+蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)染液橘黃色(或紅色)4、實驗原理:2021/4/2712若取少量植物油,加入蘇丹Ⅲ(IV),震蕩,可看到溶液呈什么顏色?
橘黃色(紅色)2021/4/2713問題探討:1、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實驗時,為什么要留出一部分樣液?作對照2、使用雙縮脲試劑時為什么B液只能加3~4滴而不能過量?過量的雙縮脲試劑B會與試劑A反應(yīng),使溶液呈藍(lán)色,而掩蓋生成的紫色。3、為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,不能放置太久?時間太長,Cu(OH)2懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應(yīng)。拓展2021/4/27144.若有西瓜、西紅柿,適合作檢測還原性糖的材料嗎?
不適合,此材料中雖富含還原糖,但含有色素,會遮蓋反應(yīng)顏色5.甘蔗、甜菜根適合作檢測還原性糖的材料嗎?此材料中雖不含色素,富含蔗糖,但蔗糖是非還原性糖2021/4/2715安徽阜陽劣質(zhì)奶粉事件震驚全國,引起世人注目。鑒定脫脂淡奶粉是否為偽劣產(chǎn)品,肯定不需要用到的化學(xué)試劑是()
A.斐林試劑B.紅墨水
C.雙縮脲試劑D.蘇丹Ⅳ染液
B
2021/4/2716各種可供實驗的材料梨黃桃胡蘿卜黃豆花生種子小麥種子①其中適合于鑒定可溶性還原糖的是
,理由是梨的組織細(xì)胞
,你打算用什么試劑鑒定?
。②小麥種子不如花生種子更適合用來鑒定脂肪,這是因為
,你打算用什么試劑鑒定?
.
[例]做生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實驗時,需要根據(jù)實驗需要選擇不同的實驗材料。請根據(jù)下表所列各種材料回答問題:梨顏色為白色,并且糖含量較高
斐林試劑脂肪含量不如花生高,也不容易做切片
用蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ試劑2021/4/2717③小麥種子中糖類化合物
含量很高,卻不適合用來鑒定
__________,這是因為
________________________________________。
④適合于鑒定蛋白質(zhì)的是
,理由是
,鑒定所用的試劑是
。
蛋白質(zhì)含量高
黃豆和花生
雙縮脲試劑淀粉
可溶性還原糖淀粉是非還原糖且不溶于水
2021/4/2718
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