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利用作物秸稈發(fā)酵生產(chǎn)工業(yè)乙醇第一頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日利用作物秸稈發(fā)酵生產(chǎn)工業(yè)乙醇姓名:高飛學(xué)號(hào):MG1430073第二頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日化石資源是現(xiàn)代工業(yè)和現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的物質(zhì)基礎(chǔ)石油、煤炭、天然氣不僅提供了基本的能源,而且提供了99%的有機(jī)工業(yè)原料。第三頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日中國(guó)的石油生產(chǎn)和需求:

-----現(xiàn)狀和預(yù)測(cè)第四頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日Environmentalproblem化石經(jīng)濟(jì),付出了巨大的環(huán)境代價(jià)(空氣污染和溫室效應(yīng)等)第五頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日廉價(jià)石油時(shí)代終結(jié)了---人類必須戒除“油癮”第六頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日生物質(zhì)資源開(kāi)發(fā)是人類繼續(xù)生存的必然選擇面對(duì)日益嚴(yán)峻的能源和環(huán)境問(wèn)題,開(kāi)發(fā)利用風(fēng)能、太陽(yáng)能、生物質(zhì)能等可再生能源已成為世界各國(guó)的共同選擇。孫鳳蓮,杜巍.生物質(zhì)能源開(kāi)發(fā)利用中的產(chǎn)業(yè)體系建設(shè)進(jìn)展與評(píng)述[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2014,42(24):8323-8326第七頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日生物質(zhì)生物質(zhì)是指利用大氣、水、土地等通過(guò)光合作用而產(chǎn)生的各種有機(jī)體,即一切有生命的可以生長(zhǎng)的有機(jī)物質(zhì)通稱為生物質(zhì)。它包括植物、動(dòng)物和微生物。廣義概念:生物質(zhì)包括所有的植物、微生物以及以植物、微生物為食物的動(dòng)物及其生產(chǎn)的廢棄物。有代表性的生物質(zhì)如農(nóng)作物、農(nóng)作物廢棄物、木材、木材廢棄物和動(dòng)物糞便。生物質(zhì)定義第八頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日生物質(zhì)是僅次于煤炭、石油和天然氣的第四大能源,也是我國(guó)可再生能源發(fā)展的重點(diǎn)。生物質(zhì)柳枝稷芒草第九頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日020301秸稈預(yù)處理物理法、物理化學(xué)法、化學(xué)法和生物法糖化將纖維素酶解為多糖或單糖。微生物發(fā)酵和蒸餾提取乙醇糖酵解階段、丙酮酸轉(zhuǎn)化為乙醇以及乙醇的提取的階段秸稈發(fā)酵機(jī)理PrachandShrestha,MaryRasmussen.Solid-substratefermentationofcornfiberbyphanerochaetechrysosporiumandsubsequentfermentationofhydrolysateintoethanol[J].J.Agric.Food.Chem,2008,56,3918-3924第十頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日纖維素的結(jié)構(gòu)纖維素的分子結(jié)構(gòu)第十一頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日

木質(zhì)纖維素結(jié)構(gòu)植物細(xì)胞壁含有多糖和木質(zhì)素

纖維素分子結(jié)晶纖維素分層網(wǎng)格的微纖維植物細(xì)胞壁次結(jié)晶纖維素第十二頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日纖維素約45%(主要由葡萄糖聚合而成)、半纖維素約30%(主要由木糖聚合組成)、木質(zhì)素約25%(主要由復(fù)雜酚類聚合而成)。木質(zhì)纖維素組成第十三頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日(作物秸稈)木質(zhì)纖維素預(yù)處理工藝一、木質(zhì)纖維素預(yù)處理的作用

天然纖維素的高度結(jié)晶性和木質(zhì)化,阻礙了酶與纖維素的接觸使其難以直接被降解。必須通過(guò)預(yù)處理,以降低纖維素的結(jié)晶度,增加纖維原料的多孔性,脫除木質(zhì)素的保護(hù)作用,增加酶與底物的接觸面積,從而提高酶解的效率。二、預(yù)處理方法

物理法、物理化學(xué)法、化學(xué)法和生物法。李海濤,姚開(kāi),賈冬英等.秸稈纖維素生物轉(zhuǎn)化預(yù)處理方法研究進(jìn)展[J].農(nóng)業(yè)技術(shù)與裝備,2010,14:56-58第十四頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日纖維素原料預(yù)處理方法1.物理方法

機(jī)械粉碎是纖維原料預(yù)處理的常用方法,通過(guò)切、碾和磨等工藝使纖維原料的粒度變小,增加底物和酶接觸的表面積,降低纖維素的結(jié)晶度。機(jī)械粉碎包括干法粉碎、濕法粉碎、振動(dòng)球磨碾磨等。2.物理化學(xué)法

蒸汽爆破:將木質(zhì)纖維原料用160~260℃水蒸汽處理適當(dāng)時(shí)間(30sec~20min)后,突然減壓,蒸汽從反應(yīng)釜中迅速噴出,使原料爆破。該預(yù)處理加劇了纖維素內(nèi)部氫鍵的破壞和有序結(jié)構(gòu)的變化,游離出新的羥基,增加了纖維素的吸附能力,也促進(jìn)了半纖維素的水解和木質(zhì)素的轉(zhuǎn)化。

氨纖維爆破(ammoniafiberexplosion,AFEX)法:和蒸汽爆破預(yù)處理類似,但是避免了高溫條件下糖的降解以及有害物質(zhì)的產(chǎn)生。第十五頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日纖維素原料預(yù)處理方法3.化學(xué)法

稀酸預(yù)處理:通常采用0.3~3%的H2S04于110~220℃下處理一定時(shí)間。由于半纖維素被酸水解成單糖,纖維殘?jiān)纬啥嗫谆蛉苊浶徒Y(jié)構(gòu),從而促進(jìn)了酶解效果。

堿法預(yù)處理:是利用木質(zhì)素能夠溶于堿性溶液的特點(diǎn),脫除木質(zhì)素,引起木質(zhì)纖維原料潤(rùn)脹,導(dǎo)致纖維內(nèi)部表面積增加,聚合度降低,結(jié)晶度下降,從而促進(jìn)酶水解的進(jìn)行。常用的堿包括NaOH,KOH,Ca(OH)2和氨水等。4.生物法

生物法預(yù)處理?xiàng)l件溫和,能耗低,無(wú)污染,但通常處理的時(shí)間較長(zhǎng),而且許多白腐真菌在分解木質(zhì)素的同時(shí)也消耗部分纖維素和半纖維素。第十六頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日纖維素酶水解工藝1.纖維素酶的定義

能水解植物纖維或經(jīng)物理、化學(xué)方法處理過(guò)的纖維素(如CMC)的β-1,4糖苷鍵的酶。

2.纖維素酶的分類(一)內(nèi)切β-1,4葡聚糖水解酶-Cx

(二)外切β-1,4葡聚糖水解酶-C1(三)β-1,4葡萄糖苷酶-Cb

作用方式

纖維素酶水解纖維素是各組酶(C1、Cx、Cb)協(xié)同作用的結(jié)果:

1.首先Cx酶在纖維素內(nèi)部隨機(jī)的切割,使其露出許多供外切酶作用的末端。

2.然后在C1酶的作用下生成大量纖維二糖和纖維寡糖。

3.最后Cb酶將他們進(jìn)一步分解成葡萄糖。CXC1Cb纖維二糖第十七頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日

發(fā)酵三個(gè)階段兩種途徑四步十二個(gè)反應(yīng)1.酵母乙醇發(fā)酵法:利用釀酒酵母、管囊酵母、卡爾酵母、清酒酵母在無(wú)氧條件下,得到乙醇

2.細(xì)菌乙醇發(fā)酵法:利用厭氧發(fā)酵單胞菌、棕櫚發(fā)酵菌、運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌發(fā)酵1.發(fā)酵前期:發(fā)酵菌種繁殖時(shí)期2.主發(fā)酵期:繁殖基本停止,主要厭氧乙醇發(fā)酵3.發(fā)酵后期:糖濃度降低,發(fā)酵作用減弱,菌種死去1.葡萄糖到二磷酸果糖,3步反應(yīng)。2.磷酸果糖到磷酸甘油醛,2步反應(yīng)。3.磷酸甘油醛到丙酮酸,5步反應(yīng)4.丙酮酸降解成乙醇,2步反應(yīng)。第十八頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日發(fā)酵微生物學(xué)生產(chǎn)中能夠發(fā)酵生產(chǎn)乙醇的微生物主要有酵母菌和細(xì)菌。目前工業(yè)上生產(chǎn)乙醇應(yīng)用的菌株主要是釀酒酵母,這是因?yàn)樗l(fā)酵條件要求粗放,發(fā)酵過(guò)程pH低,對(duì)無(wú)菌要求低,以及其乙醇產(chǎn)物濃度高(實(shí)驗(yàn)室可達(dá)23%,v/v)。細(xì)菌由于其生長(zhǎng)條件溫和,pH高于5.0,易染菌,細(xì)菌還易感染噬菌體,一旦感染了噬菌體將帶來(lái)重大經(jīng)濟(jì)損失。所以迄今為止,生產(chǎn)中大規(guī)模使用的仍是酵母。第十九頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日酵母的生長(zhǎng)條件

(1)溫度。其正常的生活和繁殖溫度是29—30℃。在很高或很低的溫度下,酵母的生命活動(dòng)消弱或停止。酵母發(fā)育的最高溫度是38℃,最低為-5℃;在50℃時(shí)酵母死亡。(2)pH。酵母的生長(zhǎng)pH為3—8,但最適生長(zhǎng)pH為3.8—5.0。當(dāng)pH降到4.0以下時(shí),酵母仍能繼續(xù)繁殖,而此時(shí)乳酸菌已停止生長(zhǎng),酵母的這種耐酸性能被用來(lái)壓制和消除其它細(xì)菌的生長(zhǎng),即將該培養(yǎng)料加酸調(diào)至pH3.8—4.0,并保持一段時(shí)間,在此期間酵母生長(zhǎng)占絕對(duì)優(yōu)勢(shì),細(xì)菌污染即可消除。第二十頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日(3)溶氧。釀酒酵母是兼性厭氧菌。在有氧時(shí)靠呼吸產(chǎn)能,無(wú)氧時(shí)借發(fā)酵或無(wú)氧呼吸產(chǎn)能。所以乙醇酵母在菌種生長(zhǎng)起始通風(fēng)培養(yǎng),等長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期快結(jié)束時(shí)停止通風(fēng),進(jìn)行厭氧培養(yǎng),從而使細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)乙醇。第二十一頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日發(fā)酵產(chǎn)生乙醇的其它細(xì)菌和真菌微生物種類產(chǎn)物細(xì)菌熱纖梭菌(Clostridiumthermocellum)乙醇,乙酸,乳酸熱硫化氫梭菌(C.thermohydrosulfuricum)乙醇熱解糖梭菌(C.thermosacchaolyticum)乙醇產(chǎn)乙醇熱厭氧桿菌(Thermoanaerobacterethanolicus)乙醇,乙酸,乳酸布氏熱厭氧桿菌(Thermoanaerobacterbrockii)乙醇,乙酸,乳酸乙酰乙基熱厭氧桿菌(Themobacteroidesacetoethylicus)乙醇,乙酸,乳酸真菌粗糙脈孢霉(Neurosporacrassa)乙醇具柄畢赤氏酵母(Pichiastipitis)乙醇第二十二頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日乙醇生產(chǎn)對(duì)酵母要求能應(yīng)用于生產(chǎn)酵母菌株必須基本符合以下要求:能快速并完全將糖分轉(zhuǎn)化為乙醇,有高的比生長(zhǎng)速度,有高的耐乙醇能力,抵抗雜菌能力強(qiáng),對(duì)培養(yǎng)基適應(yīng)性強(qiáng),不易變異。要耐滲透壓能力強(qiáng),耐酸耐溫能力強(qiáng),對(duì)金屬特別是Cu2+的耐受性強(qiáng),并且產(chǎn)生泡沫要少。第二十三頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日Process第二十四頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日工藝流程第二十五頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日

由葡萄糖到乙醇的過(guò)程主要分成兩個(gè)階段,即糖酵解階段和丙酮酸轉(zhuǎn)化為乙醇的階段。在糖酵解階段葡萄糖經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)化形成丙酮酸。酵母菌在無(wú)氧條件下,丙酮酸繼續(xù)降解,生成乙醇。丙酮酸乙醛乙醇丙酮酸脫羧酶Mg2+CO2乙醇脫氫酶NADHNAD乙醇發(fā)酵總過(guò)程袁麗婷.玉米秸稈發(fā)酵生產(chǎn)乙醇的工藝研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,37(3):922-925第二十六頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日葡萄糖發(fā)酵生成乙醇的總反應(yīng)式C6H12O6+2ADP+2H3PO42C2H5OH+2CO2+2ATP則1mol葡萄糖生成2mol乙醇,理論轉(zhuǎn)化率為

(2*46.05/180.1)*100%=51.1%

但在實(shí)際生產(chǎn)實(shí)踐中有約5%的葡萄糖用于合成酵母細(xì)胞和副產(chǎn)物,實(shí)際上乙醇生成量約為理論值的95%,即乙醇對(duì)糖的轉(zhuǎn)化率約為48.5%。第二十七頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日甘油正常發(fā)酵條件下,發(fā)酵醪中只有少量的甘油生成,其含量為發(fā)酵醪量的0.3%—0.5%。但在一些條件下,酵母可以轉(zhuǎn)化糖分為甘油雜醇油在乙醇發(fā)酵過(guò)程中,由于原料蛋白質(zhì)分解產(chǎn)生了氨基酸,氨基酸的氨基被酵母菌同化,用作氮源,余下的部分脫羧生成相應(yīng)的醇類,這些醇類就是雜醇油。有機(jī)酸除琥珀酸之外,其他有機(jī)酸均是由于雜菌污染的結(jié)果。乙酸菌可以利用乙醇生成乙酸,乙酸的生成往往會(huì)增加揮發(fā)酸的含量。酒精發(fā)酵的副產(chǎn)物詹美榮.電子受體對(duì)超高濃度乙醇發(fā)酵副產(chǎn)物形成的影響[D].華僑大學(xué),2013第二十八頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日每噸無(wú)水乙醇生產(chǎn)成本估算表項(xiàng)目單耗單價(jià)(元)金額(元)主要原輔材料1730木糖渣3.92噸52.00204纖維素酶液3.38噸391.44

1323燃料及動(dòng)力1591汽15.1噸92.921399電292kwh0.54161其它費(fèi)用

432直接生產(chǎn)成本3753第二十九頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日蛋白質(zhì)組學(xué)組學(xué)Discovery-driven轉(zhuǎn)錄組學(xué)代謝組學(xué)通量組學(xué)DNA芯片技術(shù)二維電泳/質(zhì)譜技術(shù)多維色譜/質(zhì)譜技術(shù)同位素-核磁共振技術(shù)計(jì)算生物學(xué)基因組模型化技術(shù)涉及的技術(shù)途徑實(shí)驗(yàn)生物科學(xué)Hypothesis-driven分子遺傳學(xué)分子微生物學(xué)蛋白質(zhì)工程結(jié)構(gòu)生物學(xué)代謝工程重組DNA技術(shù)蛋白質(zhì)結(jié)晶及晶體衍射技術(shù)酶的定向進(jìn)化技術(shù)高通量篩選技術(shù)微生物生理學(xué)反向代謝工程技術(shù)從基因組到產(chǎn)品第三十頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日秸稈發(fā)酵乙醇的主要難題原料分散---集運(yùn)增加成本組分復(fù)雜---必先預(yù)加處理多酶體系---效率急待提高戊糖難用---酵母先要改造

第三十一頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日中期目標(biāo)

在完善萬(wàn)噸級(jí)木糖相關(guān)產(chǎn)品-纖維素乙醇聯(lián)產(chǎn)示范工廠的基礎(chǔ)上:擴(kuò)大原料品種(如玉米秸和麥秸等)擴(kuò)大聯(lián)產(chǎn)產(chǎn)品(如乳酸、PHA等化學(xué)品、蛋白飼料、紙漿、木素產(chǎn)品、沼氣、二氧化碳等)建立植物全株綜合精練技術(shù)示范企業(yè)第三十二頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日黑龍江華潤(rùn)酒精公司

纖維素乙醇試驗(yàn)基地第三十三頁(yè),共四十頁(yè),2022年,8月28日中科院過(guò)程所秸桿乙醇生產(chǎn)線由中國(guó)科學(xué)院過(guò)程工程研究所與吉林省松原市石化園區(qū)的公司合作完成的“萬(wàn)噸級(jí)秸稈酶解發(fā)酵丁醇產(chǎn)業(yè)化技術(shù)”和“萬(wàn)噸級(jí)秸稈酶解發(fā)酵乙醇產(chǎn)業(yè)化技術(shù)”項(xiàng)目,分別于201

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