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文檔簡(jiǎn)介
史上最強(qiáng)生物課件選修一果酒和果醋的制作第一頁,共四十六頁,2022年,8月28日一、制作果酒果醋的微生物:酵母菌——真菌醋酸菌——細(xì)菌二、兩種微生物的分類地位1.制作果酒——酵母菌2.制作果醋——醋酸菌第二頁,共四十六頁,2022年,8月28日菌種名稱生物學(xué)分類代謝類型適宜溫度繁殖方式對(duì)氧的需求酵母菌真核生物異養(yǎng)兼性厭氧最適20℃出芽生殖前期需氧,后期不需氧醋酸菌原核生物異養(yǎng)需氧30—35℃二分裂一直需氧控制空氣的一些措施三、繁殖方式和代謝類型出芽生殖二分裂生殖第三頁,共四十六頁,2022年,8月28日比較果酒制作果醋制作制作原理
酵母菌先在有氧條件下大量繁殖,再在無氧條件下進(jìn)行酒精發(fā)酵
醋酸菌在氧氣、糖源充足時(shí),將糖分解成醋酸;當(dāng)缺少糖源時(shí),將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿崴?、制作原理和發(fā)酵條件的比較第四頁,共四十六頁,2022年,8月28日制作果酒制作果醋最適發(fā)酵溫度18℃——25℃30℃——35℃對(duì)氧的需求前期:需氧后期:不需氧需充足氧pH酸性環(huán)境(3.3~3.5)酸性環(huán)境(5.4~6.3)發(fā)酵時(shí)間10——12d7——8d第五頁,共四十六頁,2022年,8月28日C6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量酶1、有氧呼吸:C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+能量酶2、無氧呼吸:酵母菌制酒㈠制作果酒(前期需氧,后期厭氧)出芽生殖,增加酵母菌數(shù)量產(chǎn)生酒精第六頁,共四十六頁,2022年,8月28日1、若氧氣、糖源充足時(shí),醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸,其反應(yīng)式:酶
C6H12O6→3CH3COOH(醋酸)2、若缺少糖源,氧氣不足時(shí),醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿?,其反?yīng)式:
酶2C2H5OH+O2→2CH3CHO(乙醛)+2H2O酶2CH3CHO+O2→2CH3COOH(醋酸)醋酸菌制醋㈡制作果醋(一直需要氧)第七頁,共四十六頁,2022年,8月28日
五、實(shí)驗(yàn)流程示意圖第八頁,共四十六頁,2022年,8月28日1、材料的選擇與處理 選擇新鮮的葡萄,榨汁前先將葡萄進(jìn)行沖洗,除去枝梗。①、取葡萄500g,去除枝梗和腐爛的葉子。②、用清水沖洗葡萄1-2次除去污物。
討論:你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗?為什么?
應(yīng)該先沖洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)六、實(shí)驗(yàn)操作第九頁,共四十六頁,2022年,8月28日2、清洗(WHY?)3、榨汁
將沖洗除枝梗的葡萄放入榨汁機(jī)榨取葡萄汁。4、發(fā)酵:發(fā)酵裝置如下5、注意事項(xiàng)①將葡萄汁裝人發(fā)酵瓶,要留大約1/3的空間
(如圖右圖所示),并封閉充氣口。(為什么?)
塑料瓶中不能裝滿葡萄液汁,應(yīng)留一定空間,有利于酵母菌有氧呼吸大量繁殖形成種群優(yōu)勢(shì)。防止榨汁機(jī)、發(fā)酵瓶帶菌引起發(fā)酵液污染70%酒精消毒第十頁,共四十六頁,2022年,8月28日③制葡萄醋的過程中,要適時(shí)通過充氣口充氣。將溫度嚴(yán)格控制在30℃~35℃,時(shí)間控制在前7~8d左右。②制葡萄酒的過程中,要嚴(yán)格密閉,將溫度嚴(yán)格控制在18℃~25℃,時(shí)間控制在10~12d左右,可通過出料口對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行。及時(shí)的監(jiān)測(cè)。第十一頁,共四十六頁,2022年,8月28日例:葡萄汁、葡萄酒都具有一定的保健養(yǎng)生功效,隨著人們生活水平的提高,我國(guó)葡萄汁、葡萄酒的需求量逐年增長(zhǎng)。請(qǐng)回答:⑴葡萄可用來制作葡萄汁、葡萄酒,為減少資源浪費(fèi),提高產(chǎn)品的附加值,可對(duì)葡萄做怎樣的處理?(2)制作葡萄酒時(shí),為防止發(fā)酵液被污染,應(yīng)采取的措施是
;在制作過程中,一般將溫度控制在18~25℃,原因是
??上扔脕碇谱髌咸阎?,濾渣等再用來發(fā)酵制作葡萄酒
在該范圍的溫度是酵母菌生長(zhǎng)發(fā)酵較適宜的溫度將器具洗凈且用酒精消毒第十二頁,共四十六頁,2022年,8月28日(3)為研究發(fā)酵罐中酵母菌的生長(zhǎng)狀況,常要取樣統(tǒng)計(jì)分析,并測(cè)定pH,判斷取樣先后順序的主要依據(jù)是
。(4)葡萄梗的主要成分為木質(zhì)素、纖維素和半纖維素,但是酵母菌無法直接利用,原因是其
。請(qǐng)你提出一種解決該問題的方法
。pH的大小,pH越小取樣時(shí)間越靠后。WHY?
缺乏相應(yīng)分解酶系(或缺乏纖維素酶和半纖維素酶)
在酵母菌中轉(zhuǎn)入分解酶系相關(guān)基因(或利用酶或微生物分解葡萄梗;利用物理和化學(xué)方法分解葡萄梗;將酵母菌與其他能分解葡萄梗的微生物混合發(fā)酵等)第十三頁,共四十六頁,2022年,8月28日⑸為提高葡萄酒的品質(zhì)并降低生產(chǎn)成本,許多廠家使用固定化酵母細(xì)胞。下面是制備固定化酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)過程:A.使干酵母與蒸餾水混合并攪拌,使酵母菌活化。B.將無水氯化鈣溶解在自來水中,配成氯化鈣溶液。C.用酒精燈大火連續(xù)加熱配制海藻酸鈉溶液。D.向剛?cè)芑玫暮T逅徕c溶液中加放入已活化的酵母細(xì)胞,充分?jǐn)嚢璨⒒旌暇鶆蜣D(zhuǎn)入注射器。E.將與酵母細(xì)胞混勻的海藻酸鈉溶液注入蒸餾水中,觀察凝膠珠形成。請(qǐng)你改正其中錯(cuò)誤的操作:B中自來水應(yīng)改用蒸餾水、C中大火應(yīng)改為小火或間斷加熱、D中剛?cè)芑暮T逅徕c溶液應(yīng)冷卻至室溫、E中蒸餾水應(yīng)改用CaCl2第十四頁,共四十六頁,2022年,8月28日解析本題綜合考查微生物發(fā)酵、酵母細(xì)胞的固定化等知識(shí)。(1)為減少資源浪費(fèi),提高產(chǎn)品的附加值,葡萄可先制作葡萄汁,剩下的葡萄渣等再用于發(fā)酵制作葡萄酒。(2)用于發(fā)酵的器具要洗凈且酒精消毒,防止發(fā)酵液受污染;溫度為18~25℃是酵母菌生長(zhǎng)發(fā)酵的較適宜的溫度。(3)由于發(fā)酵過程中酵母菌產(chǎn)生CO2,隨發(fā)酵時(shí)間的推移,發(fā)酵液的pH會(huì)逐漸變小,即pH越小取樣時(shí)間越靠后。第十五頁,共四十六頁,2022年,8月28日1、在制作葡萄酒的實(shí)驗(yàn)中,將葡萄漿加入發(fā)酵瓶的裝量不要超過2/3,其原因是
。
保證酵母菌在有氧時(shí)代謝旺盛,快速增殖(出芽生殖),當(dāng)無氧時(shí),進(jìn)行發(fā)酵可以產(chǎn)生較多酒精。2、甲同學(xué)是利用酵母菌研究種群增長(zhǎng)規(guī)律:(1)該實(shí)驗(yàn)制備的5%葡萄糖溶液,須加熱、冷卻后再使用,原因是
。(2)取A、B兩個(gè)錐形瓶,各加入等量恒定容積的葡萄糖溶液,A組接種少量酵母菌,B組不做處理。本實(shí)驗(yàn)設(shè)置B
瓶作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)的目的是
。(1)消滅雜菌和防止溫度過高酵母不能生存(2)排除無菌葡萄糖溶液渾濁度變化對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響第十六頁,共四十六頁,2022年,8月28日(3)分別對(duì)A、B瓶進(jìn)行
取樣,通過測(cè)定培養(yǎng)液的渾濁度,可估算酵母菌的
,進(jìn)行取樣計(jì)數(shù)之前,需將錐形瓶輕輕震蕩幾次,目的是
。定期(等時(shí)間取樣)種群數(shù)量使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布,以減少實(shí)驗(yàn)中的計(jì)數(shù)誤差。第十七頁,共四十六頁,2022年,8月28日課題3泡菜制作第十八頁,共四十六頁,2022年,8月28日泡菜制作原理一、乳酸菌在無氧的條件下,利用牛奶或蔬菜中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行無氧呼吸,產(chǎn)生乳酸等物質(zhì)。二、乳酸大量積累后又可抑制其他對(duì)酸敏感的雜菌的生長(zhǎng),從而酸奶或泡菜不腐爛變質(zhì)C6H12O6
2C3H6O3(乳酸)+少量能量酶第十九頁,共四十六頁,2022年,8月28日乳酸菌凡可使糖類發(fā)酵產(chǎn)生乳酸的細(xì)菌,都稱乳酸菌,包括乳酸桿菌、嗜乳鏈球菌、酵母等。第二十頁,共四十六頁,2022年,8月28日三、設(shè)備及用品泡菜罐、菜刀、菜板四、材料(1)各種蔬菜均可,一般用白菜、洋白菜、黃瓜、柿子椒、胡蘿卜、白蘿卜等。(2)添加的調(diào)味品,如花椒、八角等。(3)白酒。(4)食糖和鹽。第二十一頁,共四十六頁,2022年,8月28日五、腌制條件腌制過程中,要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量。
溫度過高、食鹽用量不足10%、腌制時(shí)間過短,容易造成細(xì)菌大量繁殖,亞硝酸鹽含量增加。
一般在腌制10天后,亞硝酸鹽的含量開始下降。第二十二頁,共四十六頁,2022年,8月28日六、泡菜的制作七、泡菜腌制過程中,乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變化第二十三頁,共四十六頁,2022年,8月28日發(fā)酵時(shí)期乳酸菌乳酸亞硝酸鹽發(fā)酵初期少(有O2,乳酸菌活動(dòng)受抑制)少
增加(硝酸鹽還原菌的作用)發(fā)酵中期最多(乳酸抑制其它菌活動(dòng))積累、增多、pH下降
下降(硝酸鹽還原菌受抑制,部分亞硝酸鹽被分解)發(fā)酵后期減少(乳酸繼續(xù)積累,pH繼續(xù)下降,抑制其活動(dòng))繼續(xù)增多,pH繼續(xù)下降下降至相對(duì)穩(wěn)定(硝酸鹽還原菌被完全抑制)第二十四頁,共四十六頁,2022年,8月28日提醒:(1)亞硝酸鹽與人體健康的關(guān)系①膳食中絕大部分亞硝酸鹽在人體內(nèi)以“過客”的形式隨尿排出,但當(dāng)攝入總量較多時(shí),可引起中毒或死亡。②亞硝酸鹽在一定條件下可轉(zhuǎn)化為致癌、致畸和致突變的物質(zhì)——亞硝胺。(2)乳酸菌、乳酸、亞硝酸鹽的數(shù)量隨時(shí)間變化的曲線如下乳酸菌、乳酸、亞硝酸鹽的數(shù)量隨時(shí)間變化的曲線如下:
亞硝酸鹽是硝酸鹽還原菌促進(jìn)硝酸鹽還原形成的,而不是硝化細(xì)菌氧化氨形成的。第二十五頁,共四十六頁,2022年,8月28日
制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量1.制作泡菜的原理。利用乳酸菌在無氧的環(huán)境下大量繁殖制作泡菜。2.檢測(cè)亞硝酸鹽的原理和方法名稱原理或方法顯色反應(yīng)在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)生成重氮鹽,重氮鹽與N-1-萘基乙二胺偶聯(lián),形成紫紅色產(chǎn)物比色將標(biāo)準(zhǔn)比色液與顯色液(實(shí)驗(yàn)液)進(jìn)行比較,以確定顯色液中亞硝酸鹽的含量第二十六頁,共四十六頁,2022年,8月28日例題:泡菜是人們?nèi)粘I钪斜容^喜歡的一種食品,但是泡菜中卻含有亞硝酸鹽。當(dāng)人體攝入的亞硝酸鹽總量達(dá)到0.3g~0.5g時(shí),會(huì)引起中毒;當(dāng)攝入總量達(dá)到3g時(shí),會(huì)引起死亡。我國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,亞硝酸鹽的殘留量在醬菜中不得超過20mg/kg。
為此,某課外小組通過實(shí)驗(yàn)來測(cè)定泡菜在腌制過程中亞硝酸鹽含量的變化,了解其在腌制過程中亞硝酸鹽含量的高峰期和加熱狀態(tài)下亞硝酸鹽含量的變化。第二十七頁,共四十六頁,2022年,8月28日具體操作步驟:(1)泡菜的腌制過程
2006年11月1日上午,課外小組同學(xué)選取號(hào)三只容積相同的泡菜壇,用清水洗凈,用開水消毒,然后在號(hào)壇中分別加入洗凈并用開水焯過的白蘿卜和洋白菜各1kg,再倒入倒?jié)M煮沸過的10%的NaCl溶液,用水封壇,置于溫度為18—20°C的同一環(huán)境中,封壇前進(jìn)行第一次測(cè)定以作對(duì)照。后來每隔三天測(cè)定一次,直到泡菜腌熟能夠食用為止(此周期為15天)——定期取樣。第二十八頁,共四十六頁,2022年,8月28日(2)取樣及亞硝酸鹽含量的測(cè)定
在號(hào)壇中分別吸取40ml濾液(從三只壇子中分別取等量的白蘿卜和洋白菜和50ml溶液混合后過濾)于3只50ml比色管中,貼標(biāo)簽標(biāo)記,作樣品。
另吸取0.00ml、0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.00ml亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)于0ug、1ug、2ug、3ug、4ug、5ug亞硝酸鈉),分別置于50ml比色管中。
在標(biāo)準(zhǔn)使用液和樣品中分別加入2ml0.4%的對(duì)氨基苯磺酸溶液,混勻,靜置3—5min,然后各加入1ml0.2%的鹽酸萘乙二胺溶液,加水至刻度(50ml),混勻,靜置15min,用目測(cè)法比色,測(cè)得號(hào)壇內(nèi)亞硝酸鹽含量,記錄下來。第二十九頁,共四十六頁,2022年,8月28日
測(cè)定以后,在號(hào)壇中再分別取40ml濾液(方法同前),置于酒精燈上加熱煮沸半小時(shí),再重新用目測(cè)比色法測(cè)定(方法同前)。觀察在加熱情況下的亞硝酸鹽含量是否變化。
隨著泡菜腌制過程中亞酸鹽含量的逐漸增加,取樣量可以逐漸減半,而標(biāo)準(zhǔn)使用液量不變。每隔3—4天測(cè)定1次。第三十頁,共四十六頁,2022年,8月28日⑸測(cè)定結(jié)果何時(shí)亞硝酸鹽的含量最高?第三十一頁,共四十六頁,2022年,8月28日表2:未加熱和加熱情況下亞硝酸鹽含量的對(duì)比(mg/kg)第三十二頁,共四十六頁,2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析和討論:
三只泡菜壇中的亞硝酸鹽含量變化的絕對(duì)數(shù)量雖然不同,但整體的變化趨勢(shì)卻基本相同。
在腌制后的第四天,三只泡菜壇中亞硝酸鹽的含量都達(dá)到最高峰(號(hào)壇中的亞硝酸鹽分別達(dá)到0.6mg/kg、0.2mg/kg、0.8mg/kg),也就是說,在腌制后的前5天內(nèi),泡菜中的亞硝酸鹽含量就可以達(dá)到最高峰。
這可能是由于泡菜在開始腌制時(shí),壇內(nèi)環(huán)境有利于幾種細(xì)菌的繁殖(包括一些硝酸鹽還原菌),這些細(xì)菌可以促進(jìn)硝酸鹽還原為亞硝酸鹽。第三十三頁,共四十六頁,2022年,8月28日
第8天后泡菜中的亞硝酸鹽含量開始有明顯下降。這是因?yàn)殡S著腌制時(shí)間的延長(zhǎng),乳酸細(xì)菌也大量繁殖,對(duì)硝酸鹽還原菌產(chǎn)生一定的抑制作,使其生長(zhǎng)繁殖受到影響,造成泡菜中亞硝酸鹽的含量又有所下降。
另一方面,加熱和未加熱的泡菜中,測(cè)得的亞硝酸鹽含量基本沒有發(fā)生變化。這說明泡菜煮熟后食用,并不會(huì)減少泡菜中亞硝酸鹽對(duì)人體的危害。第三十四頁,共四十六頁,2022年,8月28日1、加入白酒有什么作用?
白酒可抑制泡菜表面雜菌的生長(zhǎng),它也是一種調(diào)味劑,可增加醇香感。思考:2、用水封閉壇口起什么作用?不封閉有什么結(jié)果?
水封閉壇口起著使壇內(nèi)與壇外空氣隔絕的作用,空氣中21%是氧氣,這是最簡(jiǎn)易的造成無氧環(huán)境的方法。這樣,壇內(nèi)可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌進(jìn)行乳酸發(fā)酵。如不封閉,則會(huì)有許多需氧菌生長(zhǎng),蔬菜會(huì)腐爛。第三十五頁,共四十六頁,2022年,8月28日3、為什么泡菜壇內(nèi)有時(shí)會(huì)長(zhǎng)一層白膜,這層白膜是怎么形成的?
形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物,泡菜發(fā)酵液營(yíng)養(yǎng)豐富,其表面氧氣含量也很豐富,適合酵母菌的繁殖。
4、為什么日常生活中要多吃新鮮蔬菜,不吃存放時(shí)間過長(zhǎng)、變質(zhì)的蔬菜?
有些蔬菜,如小白菜和蘿卜等含有豐富的硝酸鹽。當(dāng)這些蔬菜放置過久時(shí)發(fā)生變質(zhì)(發(fā)黃、腐爛)或者煮熟后存放太久時(shí),蔬菜中的硝酸鹽會(huì)被微生物還原成亞硝酸鹽,危害人體健康。第三十六頁,共四十六頁,2022年,8月28日課題2腐乳的制作1.原理(1)毛霉等微生物能產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶。(2)蛋白酶能將蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸;脂肪酶能將脂肪水解為甘油和脂肪酸。2.流程讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。P280第三十七頁,共四十六頁,2022年,8月28日3.影響腐乳品質(zhì)的條件(1)鹽長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊(毛坯)與鹽的質(zhì)量分?jǐn)?shù)比為5∶1。
鹽的濃度過高,影響腐乳口味;濃度過低,不足以抑制微生物生長(zhǎng),導(dǎo)致腐乳腐敗變質(zhì)(2)酒鹵湯中酒的含量控制在12%左右。
酒精含量越高,對(duì)蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延長(zhǎng);酒精含量過低,不足以抑制微生物生長(zhǎng),豆腐易腐敗,難以成塊。第三十八頁,共四十六頁,2022年,8月28日(3)香辛料既可調(diào)制腐乳的風(fēng)味,又具有防腐殺菌的作用。(4)含水量
以70%為宜,若過高則影響毛霉的有氧呼吸,且腐乳不易成形;若過低,則不利于毛霉的代謝和生長(zhǎng)。(5)發(fā)酵溫度
前期的發(fā)酵溫度控制在15—18℃,利于毛霉的生長(zhǎng)。(6)發(fā)酵時(shí)間前期發(fā)酵和后期發(fā)酵的作用不同,所需時(shí)間應(yīng)控制好,太長(zhǎng)或太短都會(huì)影響腐乳的品質(zhì)。第三十九頁,共四十六頁,2022年,8月28日4.腐乳是通過微生物發(fā)酵制成的佐餐食品,其制作流程如下,請(qǐng)回答有關(guān)問題:(1)民間制作腐乳時(shí),豆腐塊上生長(zhǎng)的毛霉來自空氣中的毛霉孢子,現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的無菌條件下,將優(yōu)良的毛霉菌種直接接種在豆腐上,這樣做的目的是什么?可以避免其他菌種污染,保證產(chǎn)品的質(zhì)量讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制第四十頁,共四十六頁,2022年,8月28日(2)制作腐乳的原料中哪種有機(jī)物含量比較高?毛霉可利用體內(nèi)的酶將其分解成哪些小分子有機(jī)物?(3)在用鹽腌制腐乳的過程中,若鹽的濃度過低會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象?(4)鹵湯中酒的含量為什么要控制在12%左右?
制作腐乳的原料中蛋白質(zhì)含量比較高;毛霉可利用體內(nèi)產(chǎn)生的蛋白酶將蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸不足以抑制微生物生長(zhǎng),導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)
酒精含量過低,不足以抑制微生物生長(zhǎng),導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì);含量過高,腐乳成熟的時(shí)間將會(huì)延長(zhǎng)第四十一頁,共四十六頁,2022年,8月28日
苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì),自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚,為了降解廢水中的苯酚,研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株,篩選的主要步驟如下圖所示,①為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是 A.圖中②培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源B.如果要測(cè)定②中活細(xì)菌數(shù)量,常采用稀釋涂布平板法C.若圖中④為對(duì)照實(shí)驗(yàn),則其中應(yīng)以苯酚作為惟一碳源D.使用平板劃線法可以在⑥上獲得單菌落C第四十二頁,共四十六頁,2022年,8月28日
圖甲是果醋發(fā)酵裝置。發(fā)酵初期不通氣,溶液中有氣泡產(chǎn)生;中期可以聞到酒香;后期接種醋酸菌,適當(dāng)升高溫度并通氣,酒香逐漸變成醋香。圖乙中能表
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