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文檔簡介
基因芯片技術(shù)在中醫(yī)外科中的應(yīng)用基因芯片技術(shù)充分利用生物科學(xué)、信息學(xué)等前沿學(xué)科的先進(jìn)成果,以其快速、自動化程度高的特點而廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)科研的各個領(lǐng)域,為后基因組時代的生命科學(xué)討論供應(yīng)了一種強(qiáng)有力的工具。北京中醫(yī)藥高校東直門醫(yī)院裴曉華博士指出,將基因芯片技術(shù)運用于中醫(yī)外科前景寬闊。他主要介紹了基因芯片技術(shù)在以下幾個方面的應(yīng)用。
外科感染
隨著越來越多的病毒、支原體、衣原體和細(xì)菌的整個基因組測序的完成,就可以大量制備含有病原體基因的芯片,用于病原體的快速診斷,而且送檢標(biāo)本無需進(jìn)行培育。常見的外科感染中,有的細(xì)菌極難培育,有的細(xì)菌分別培育所需時間太長,給臨床細(xì)菌學(xué)檢驗帶來困難,使用基因芯片可以解決面臨的難題。標(biāo)本經(jīng)處理后,利用通用的核酸擴(kuò)增技術(shù)將樣品核酸進(jìn)行熒光標(biāo)記,然后與基因芯片上已知的細(xì)菌探針陣列進(jìn)行雜交;經(jīng)掃描后就可以推斷出是哪一種細(xì)菌的感染。由于基因芯片可以包含的信息特別多,可以集中多達(dá)幾千種探針信息,而臨床常見的細(xì)菌感染也不過幾十種,所以基因芯片能夠輕松應(yīng)付這種任務(wù)。
膿毒癥是外科面臨的麻煩問題,與中醫(yī)外科的“內(nèi)陷”、“走黃”類似。盡管已有強(qiáng)有力的抗生素的應(yīng)用,但膿毒癥仍是呼吸衰竭、多臟器功能障礙以及危重病人死亡的主要緣由。試驗和臨床表明,細(xì)胞因子的產(chǎn)生和全身性釋放在膿毒癥炎性反應(yīng)中起著重要的作用。因此,阻斷細(xì)胞因子的激活及其生物學(xué)效應(yīng)始終是討論的熱點。證據(jù)表明,膿毒癥反應(yīng)機(jī)制是以特定的方式,根據(jù)基因表達(dá)挨次,程序化地受基因掌握。膿毒癥休克是由多基因掌握的一種疾病,基因芯片技術(shù)可對膿毒癥達(dá)到更深刻、更全面的了解。中醫(yī)通里攻下法及清熱解毒法對膿毒癥進(jìn)行防治已取得確定的療效,對于中藥的作用機(jī)制,包括腸屏障愛護(hù)作用、對內(nèi)毒素及細(xì)胞因子的影響、對自由基的清除作用已初步闡明,還有待于從蛋白質(zhì)與基因水平進(jìn)行更高層次的討論。
腫瘤
通過基因芯片對腫瘤細(xì)胞系、動物模型、病理組織標(biāo)本的檢測,可以發(fā)覺腫瘤形成、浸潤、轉(zhuǎn)移相關(guān)的新基因。例如,通過前列腺腫瘤相關(guān)芯片檢測,可以依據(jù)基因表達(dá)不憐憫況區(qū)分正常和惡性上皮、雄激素依靠和非依靠的前列腺腫瘤、藥物敏感和耐藥的腫瘤。癌基因的低表達(dá)或者抑癌基因的高表達(dá)可作為藥物治療有效與否的標(biāo)志,為藥物治療及基因治療供應(yīng)新的靶點,可以削減抗腫瘤藥物的討論開發(fā)周期。采納基因芯片技術(shù)對有良好抗癌作用的中藥進(jìn)行篩選,并進(jìn)行作用機(jī)理的討論,可以探究中藥對腫瘤抑癌基因的表達(dá)與調(diào)控方式。目前國內(nèi)對單味藥、單靶點的基因調(diào)控討論已有初步成果,而對多因素、多靶點的基因調(diào)控與功能修飾討論尚屬起步階段。
泌尿外科
腎移植受者術(shù)后淋巴細(xì)胞受異體抗原刺激,發(fā)生激活和分化,往往同時伴隨著上百種免疫相關(guān)基因的轉(zhuǎn)變,而基因芯片這種高通量的檢測技術(shù)不僅一次可以檢測成千上萬免疫分子mRNA表達(dá)水平的轉(zhuǎn)變狀況,還可以滿意腎移植術(shù)后免疫監(jiān)測的要求,而且基因芯片的另一優(yōu)點就是它除了可以檢測免疫細(xì)胞表面的免疫分子基因表達(dá)狀況,還可以檢測核內(nèi)免疫調(diào)控基因的基因轉(zhuǎn)錄水平變化,基因芯片將在腎移植免疫討論中發(fā)揮重要的作用。
此外,將基因芯片技術(shù)應(yīng)用到移植免疫耐受討論中可以發(fā)覺大量新的與免疫耐受相關(guān)基因,為人工誘導(dǎo)耐受供應(yīng)新的靶點,而且通過對免疫抑制藥物使用后基因表達(dá)差異的討論,不僅可以更為全面、深化地了解免疫抑制劑的分子機(jī)理,有利于更好地使用已有免疫抑制藥,還可開發(fā)中藥免疫抑制藥。
基因芯片技術(shù)也可以應(yīng)用在組織配型方面,使用現(xiàn)在已知基因序列的HLA分子(包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ類)基因芯片對移植供者、受者進(jìn)行檢測,以全面了解供者、受者HLA基因型,而且寡核苷酸芯片技術(shù)還可以對HLA分子的多態(tài)性進(jìn)行討論。
中醫(yī)藥治療前列腺增生具有準(zhǔn)確的試驗依據(jù)。如對血漿性激素水平的調(diào)整,降低前列腺指數(shù)、調(diào)整前列腺組織中性激素水平和降低5α-還原酶活性、抑制前列腺細(xì)胞DNA的合成及有絲分裂、降低增生前列腺組織中的PCNA指數(shù)和bFGF的表達(dá)、拮抗α1-AR等。還可從前列腺細(xì)胞的增殖和凋亡水平,對直接刺激細(xì)胞生長的各種生長因子、調(diào)控和執(zhí)行細(xì)胞凋亡的相關(guān)基因及蛋白進(jìn)行討論,以期能更深化和全面地揭示中醫(yī)藥治療前列腺增生的作用機(jī)理。采納基因芯片技術(shù)使從靶基因組的角度討論中醫(yī)藥治療前列腺增生的作用機(jī)理成為可能。
裴曉華博士總結(jié)說,目前基因芯片還處在討論階段,用于臨床還有
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