D二聚體的檢測及臨床意義

二聚體的檢測及臨床意義近年由于血栓性疾病的增多，檢驗醫(yī)學即時檢驗(POCT)在免疫測定技術方面，特別是在出凝血和血栓性疾病的研究上取得了重大的進展。D-二聚體的檢測方法，從傳統(tǒng)的定性試驗，變?yōu)楹唵慰焖贉蚀_定量的即時檢驗。金標全定量快速檢測對于血栓性疾病的及時準確診斷、以及對溶栓治療的療效監(jiān)測，是必不可少的重要指標。一、D-二聚體的形成正常人纖溶酶和抑制酶之間保持了動態(tài)平衡，使血液循環(huán)能正常進行。人體內(nèi)的纖溶系統(tǒng)，對保持血管壁的正常通透性；維持血液的流動狀態(tài)和組織修復，起著重要作用。為維護正常生理狀態(tài)，在外傷或血管受損的情況下，血栓的形成可防止血液從損傷的血管中流失。病理狀態(tài)下，機體發(fā)生凝血時，凝血酶作用于纖維蛋白，轉(zhuǎn)變?yōu)榻宦?lián)纖維蛋白，同時纖溶系統(tǒng)被激活，降解纖維蛋白形成各種碎片。Y鏈能把二個含D片斷的碎片連接起來，形成D-二聚體。 D-二聚體水平的上升，代表血塊在血管循環(huán)系統(tǒng)中形成，急性血栓形成的一個敏感的標記物。但不具特異性;下列因素如外科手術、創(chuàng)傷、感染、發(fā)炎、懷孕、產(chǎn)后等，也會導致凝血酶的產(chǎn)生使D-D水平的上升。D-二聚體的升高反映了體內(nèi)存在著凝血及纖溶活性增強的重要分子標志物。因此它既可反映體內(nèi)存在著血栓或繼續(xù)形成的狀況，又可反映體內(nèi)纖溶活性增強的指標，因為纖維蛋白降解產(chǎn)物中，唯有D-二聚體可反映血栓形成后的溶栓活性，對于臨床血栓性疾病的診斷和溶栓治療有著極其重要的價值。二、D-二聚體檢測的方法學的進展1、mP試驗：FDP碎片X和可溶性纖維蛋白單體FM復合物的定性試驗。缺點：敏感性差，DIC陽性率30-60%,試驗時間長，干擾因素多，采血不順，溶血均可影響結(jié)果,只能定性不能定量。2、膠乳凝集法：簡單快速缺點：敏感性低,定性或定量倍比稀釋,費試劑,重復性差。3、ELISA法：敏感性高，能定量缺點：操作煩，時間長，無法滿足急診需求。4、免疫滲濾膠體金顯色反應法：采用同種單克隆抗體夾心，即以包被的抗體捕獲血漿中抗原(D-二聚體)加入偶聯(lián)有膠體金的同種抗體顯色?？贵w特異性高，可與含D-二聚體的多種片斷結(jié)合可提高試驗的敏感度。特點：定量報告，快速簡便，敏感性高。測試范圍：-5mg/L正常參考值：＜L，接近或＞L應考慮疾病狀態(tài)。使用說明：(1)血漿未經(jīng)徹底離心，血漿中含有白細胞、血小板、高血脂或高粘度血漿，這些物質(zhì)停留在檢測板的膜表面，導致滲濾減慢時間過長，可能出現(xiàn)假性高值，應徹底離心(4000轉(zhuǎn)20分鐘為宜)，并小心吸取血漿。(2)各個不同廠家的D-二聚體試劑盒的正常參考范圍值也不一樣，有的以VL為正常，而有的試劑盒以VL為正常。此外有的以PEU單位模式報告，有的以mg/L的模式報告，其值正好相差一半。所以在評價D-二聚體結(jié)果時應注意上述問題。三、D-二聚體檢測的臨床應用D-二聚體增高提示了與體內(nèi)各種原因引起的血栓性疾病相關。同時也說明了纖溶活性的增強；臨床上常見于彌慢性血管內(nèi)凝血（DIC）、深靜脈血栓（DVT）、肺栓塞（PE）、急性心肌梗塞、腦梗塞、惡性腫瘤、卵巢癌、肺癌、敗血癥、肝病、妊高征孕婦、先兆子癇、燒傷、外科手術、創(chuàng)傷和膿毒血癥等均可使D-二聚體升高，但是D-二聚體檢測的升高并不能說明血栓形成的原因及位置，必須結(jié)合臨床和其他檢測分析結(jié)果。1、DIC（休克、系統(tǒng)感染、外傷、先兆子癇、惡性疾病和燒傷等）的并發(fā)癥：血液在全身微小血管內(nèi)廣泛性凝固，形成以血小板和纖維蛋白為主要成分的微血栓。此過程消耗了大量的血小板和凝血因子，并通過激活途徑激活了纖溶系統(tǒng)。微血栓中交聯(lián)纖維蛋白被纖溶酶降解而產(chǎn)生大量高于正常百倍的D-二聚體。與其他診斷DIC的指標相比較，D-二聚體是唯一直接反映凝血酶和纖溶酶生成的理想指標；診斷DIC的特異性也早于其他指標。2、深靜脈血栓（DVT）的篩查：血漿D-二聚體陰性可排除DVT的可能性。造影證實DVT者D-二聚體100%陽性，可做溶栓治療和肝素抗凝的用藥指導及療效觀察。靜脈栓塞是臨床上最常見的靜脈疾病，臨床醫(yī)生無法僅僅根據(jù)其臨床癥狀作出診斷。靜脈造影是診斷靜脈栓塞的黃金標準，它是創(chuàng)傷性檢查，費用高，而靜脈造影本身具有引發(fā)深靜脈栓塞或其它并發(fā)癥的危險性。

靜脈血栓栓塞癥（VTE）的危險因素較低的危險因素中度危險因素高危險因素臥床＞3日膝關節(jié)手術骨折（髖或腿）長時間的處于靜止狀態(tài)（如乘車或乘長途飛機）中央靜脈狹窄髖或膝復位年齡增大惡性腫瘤、化療大手術腹腔鏡外科充血性心衰、呼衰大倉1「傷減肥荷爾蒙代替物口服避孕藥脊髓損傷懷孕/產(chǎn)后偏癱性中風靜脈曲張懷孕/產(chǎn)后曾患VTE血栓形成傾向D-二聚體測試，配合臨床評估，可以快速、安全的排除30-50%懷疑DVT/PE的病例，可節(jié)省醫(yī)院的成本，減少不必要的影象診斷及抗凝血治療，減少病人留院的時間，改善病人的情況，減少入侵性診斷的危險，減少因不必要抗凝血治療而引起的出血。D-二聚體可反映血栓大小的變化。含量再升高，預示血栓再發(fā)生。治療期間持續(xù)較高，提示血栓大小無變化，說明治療無效。陳舊性血栓D-D不增高。3、肺栓塞病人（PE）：PE是一種較常見的潛在致命的疾病，尤其多見于血液病、心臟病和外科手術病人。PE臨床表現(xiàn)差異極大且缺乏特異性（從無任何表現(xiàn)到猝死）、常規(guī)檢查無法獲得直接證據(jù)，加上對該病的認識不足，常造成漏診或誤診。及時治療依賴早期診斷。對于呼吸困難、胸悶、咳嗽、咯血，昏厥的患者，尤其是近期有外傷，手術及長途旅行史；既往患有深靜脈血栓，應考慮是否存在PE。D-二聚體測定是PE必備的篩查方法；＜L可除外PE。D-二聚體測定在急性肺栓塞的篩選中具有重要作用，且操作方法簡便、設備要求不高，縣市級醫(yī)院均可開展此項檢測。我國目前應用D-二聚體篩選急性肺栓塞尚處于起步階段，對其在急性肺栓塞的診斷價值中積累的經(jīng)驗仍然較少，特別是急診D-二聚體的檢測更是剛剛起步，有待于進一步積累臨床資料，更好地發(fā)揮其在急性肺栓塞中的診斷作用。4、婦科病人及先兆子癇：Trafatter報告204例先兆子癇婦女中79例D-二聚體增高，而88例正常孕婦全正常。該指標對妊高征患者高凝狀態(tài)的診斷、療效觀察及預后判斷有重要意義。D-D檢測排除妊娠VTE:隨著妊娠期的發(fā)展，孕婦的D-D值隨之逐漸升高，可高至基礎值的3-4倍。若妊娠期發(fā)生VTE，干擾D-D排除VTE的有效性。若D-D結(jié)果陰性，仍有排除VTE的價值。5、肝臟疾?。篋-二聚體含量明顯增高并與肝病的嚴重程度呈正相關。惡性腫瘤伴有D-二聚體增高，提示血栓形成及栓塞，對于病情判斷及治療有重要意義。6、血管疾?。翰环€(wěn)定型心絞痛病人比急性心絞痛高、急性心肌梗死（AMI）、腦梗塞溶栓治療時，D-二聚體增高對指導溶栓治療很有意義。7、溶血栓治療的監(jiān)測：D-二聚體是溶栓藥物治療監(jiān)控和療效觀察的指標。應用溶栓藥物后D-二聚體明顯升高。若達到療效，該指標在升高后很快下降；如果二聚體升高后持續(xù)維持在一定程度高水平則提示溶栓藥物劑量不足。纖維蛋白降解產(chǎn)物中，唯有D-二聚體可反映血栓形成后的溶栓活性。因此定量檢測D-二聚體可以反映藥物溶栓的效果。應用溶血栓藥物（SK、UK、rt-PA等）溶解新鮮血栓，其出血的發(fā)生率高達5%?30%,建議Fg維持在?1.5g/L、TT維持在正常對照的?倍，F(xiàn)DPs維持在300?400ug/L。8、交聯(lián)衍生物D-二聚體水平的影響血栓的原始大?。ㄐ柙黾硬糠纸忉?，就影響狀況進行闡述）纖溶速率（需增加部分解釋，就影響狀況進行闡述）血栓形成時間，腎功正常時，循環(huán)中的D-二聚體半衰期約6h；有活躍的纖維蛋白降解和纖溶酶活化；血栓的位置是否被包裹。（需增加部分解釋，就影響狀況進行闡述）四，D-二聚體臨床應用時應注意的問題1、D-二聚體是一項陰性排除試驗。作為一種無創(chuàng)性檢查手段，在急性肺栓塞(PE)、深靜脈栓塞(DVT)、血管內(nèi)彌漫性凝血(DIC)排除診斷中有十分重要的價值，它是一項陰性排除試驗。在任何情況下D-二聚體測定值大于試劑盒推薦的CutOff值，都不能簡單的作為急性肺栓塞、深靜脈栓塞、血管內(nèi)彌漫性凝血的唯一確診依據(jù)，必須結(jié)合臨床情況綜合分析。在腦梗死、肺栓塞、彌漫性血管內(nèi)凝血、急性靜脈血栓形成時升高，從D-二聚體的檢測目標而言，這些歸屬陽性升高。但是只要機體血管內(nèi)有活化的血栓形成及纖維溶解活動，D-二聚體就會升高，比如手術、腫瘤、感染及組織壞死等均可導致D-二聚體升高。特別對80歲以上人群及住院患者，因患感染性等疾病易引起凝血異常而導致D-二聚體升高的病人應注意結(jié)合臨床情況綜合分析，國際上D-二聚體檢測的特異性一般為50%左右。2、國內(nèi)外無D-二聚體統(tǒng)一標準品。D-二聚體是血液中纖維蛋白降解產(chǎn)物，其大小和抗原決定簇不可能完全相同，因此D-二聚體既沒有國際標準、國內(nèi)外均無統(tǒng)一標準品，也無行業(yè)標準品。不同公司的企業(yè)D-二聚體標準品也不能相互通用。因此該試驗不同廠家試劑所測的D-D具體數(shù)據(jù),不可能互相獲得一致的結(jié)果也就可以理解了。但是基本的要求是陰性的排除值和陽性的確定值應總體符合。有關的權威論述如下：FACT（FibrinAssayComparisonTrial有關纖維蛋白化驗的國際專職評估和研究機構(gòu)）以下由權威的任人^）研究組發(fā)表的原文摘錄：“AlthoughD-dimerhasgainedwidespreadclinicaluseasaparameterfordetectionofinvivofibrinformation,thestandardizationissuehasnotbeenresolvedandreferencepreparationsand/orguidelineshavenotbeendistribute”.中文翻譯：雖然D-二聚體作為纖維蛋白形成的一項指標，在臨床巳廣泛使用，但其標準化問題至今未解決，也無標準品，甚至有關參照品制備的指導性文件也沒有公布過。 摘自ThrombHaemost2001;85:671-83、目前口-二聚體試劑溯源標準是如何建立的D-DDOT試劑標準的建立，D-二聚體試劑盒只能向同類公認可靠的D-二聚體測定方法或試劑盒靠攏。D-DDOT研發(fā)時用挪威NycoCard二聚體試劑盒測定患者樣品，從中選取高值D-Dimer陽性樣品混合，用此NycoCard二聚體試劑盒將這高值Dimer混合血漿系列稀釋后定標，作溯源標準，建立D-DDOT試劑盒的二聚體標準曲線、企業(yè)D-二聚體標準品、質(zhì)控品。本項目方法轉(zhuǎn)移靠混合高值血漿的做法符合國際的通常規(guī)定。有關的權威論述如下：FACT文獻摘錄：原文：“ThebestconformityisachievedbytheuseofpooledplasmasamplesfrompatientswithhighlevelsofD-dimerantigeninplasma.”“Asanalternativetopooledplasmasamples,D-dimerantigenassaysmaybecalibratedwithinvitropreparationscontainingpredominantly-fibrinoligomers.”中文翻譯：使用病人高值D-dimer混合血漿可取得最好的一致性，作為混合血漿樣品的代用品，D-二聚體檢測可以使用體外制備的標準品校正，體外制備的標準品主要含高分子量纖維蛋白的低聚物。 摘自：ThrombHaemost2001;85671—84、常見品牌D-二聚體試劑盒的檢測量程：一些品牌D-二聚體試劑盒,為了保證陰性排除判斷的敏感性和陽性確定結(jié)果的準確性，往往把檢測量程定在一5mg/L,這一設計除了滿足和保證區(qū)分陰陽性區(qū)域的敏感性外,更重要的是這種檢測量程設計已能滿足大部分血栓病人的輔助診斷和溶栓指導的參考。羅氏金標層析數(shù)碼定量系統(tǒng)，CARDIACD-Dimer,測量范圍：Ng/mL法國Stago—4口g/ml（FEU）,—L生物梅里埃D-二聚體測量范圍：45-10,000ng/ml（FEU）（注：FEUfmg/L=mg/L+2,=。）5、幾個常見品牌D-二聚體試劑主要檢測數(shù)據(jù)見下表幾個品牌D-D二聚體試劑比較稱方法學報告單位正常值檢測范圍檢D金標免疫法mg/L<LL3m

羅液體試劑717生化儀FEU<ml(<L)-9ug/ml(FEU)L10去國專用測定儀FEU<mlL)-4ug/mlL(FEU)7m11液體試劑FEU<ml(<L)-4ug/mlL(FEU)12Leux里埃酶免法FEU<500ng/mlL)45-10000ng/ml(FEU)L356、FEU單位和mg/L單位的報告模式及換算方

法：纖維蛋白等值單位(FibrinogenEquivalentUnitsFEU)這是目前一些測定D-二聚體儀器和試劑盒所用的報告模式。FEU和mg/L之間的換算，F(xiàn)EU1ng/mlD-dimer=2ng/FEU/ml，即FEU;1ng/mlD-dimer=2ng/ml的非FEU單位。例如如果以D-二聚體正常值VL,換算成FEU結(jié)果需乘2即為LFEU。7、奧普D-二聚體試劑的特點：保存期長，穩(wěn)定性好。12個月的失效期，較常見同類試劑的6個月失效期長了一半。更方便客戶應用。陰性結(jié)果排除試驗的準確性和鑒別排除假陽性結(jié)果的臨床符合性滿意。本試劑盒在臨床評估時發(fā)現(xiàn)6例D-D結(jié)果全正常范圍（5例，1例L）,而用進口試劑測數(shù)在值在之間 L），臨床追蹤證實該6例陽性結(jié)果的病人為非血栓病人。U2愛國者POCT即時檢驗儀器，可快速測定CRP、HCG、ALB、D-dimer四個項目，一機多用，有很好的配套效應。D-DDOT國產(chǎn)試劑的價格優(yōu)勢，與進口試劑等效的產(chǎn)品質(zhì)量。8、對D-D檢測中可能出現(xiàn)的假陰性和假陽性的評價：D-D檢測的陰性患者中（假陰性），仍有極少數(shù)患者（＜2%）伴靜脈血栓，其原因：（1）血栓體積很小/遠端小血栓；（2）放射線/超聲檢查出現(xiàn)假陽性；（3）臨床表現(xiàn)與標本采集時間相隔太長；（4）纖溶活性降低因為D-D增高所謂的假陽性，常見于老年人、孕婦、癌癥、DIC、肝病、炎癥、創(chuàng)傷、手術、冠心病等均會導致假陽性。9、不同型號D-二聚體試劑比對檢測評估應掌握的基本原則：D-二聚體試劑不同于其它試劑，既沒有國際標準、國內(nèi)外均無統(tǒng)一標準品，也無行業(yè)標準、不同公司的企業(yè)D-二聚體標準品也不能相互通用。生物梅里埃在宣傳資料中是這樣表達的：“D-dimer由于沒有統(tǒng)一的標準，不同試劑的測試可有不同的結(jié)果。不同商品D-二聚體試劑盒定量值各不相同,這是因為試劑單克隆抗體的來源/免疫反應性，基質(zhì)效應，干憂因素、定標物的種類不同等多因素，測試X試劑的結(jié)果不一定能與Y測試的試劑比較”，每種D-D試劑通過充份的臨床驗證，通過觀察陰性結(jié)果排除試驗的準確性和真陽性,以及鑒別排除假陽性結(jié)果的臨床符合性來評估試劑優(yōu)劣。這對于傳統(tǒng)用二種數(shù)據(jù)的比對試驗來評價試劑的方法不同,我們必須接受國際上通行的做法，來更新我們的觀念。DD-二聚體檢測倍受關注的原因分析中華醫(yī)學會檢驗學會主任、解放軍01醫(yī)院主任、叢玉隆教授認為：隨著生化、細胞生物學、免疫學飛速發(fā)展；止血、凝血和血栓疾病的研究取得了巨大進步，積極開展血栓與止血試驗檢測，推廣臨床應用，無疑具有重要意義。血栓性疾病的增多，診斷、治療、監(jiān)測的臨床需要。檢測方法學的進步、從定性到定量，正確快速。D-二聚體檢測試劑盒臨床研究總結(jié)報告（摘要）臨床研究評估單位：上海中醫(yī)藥大學岳陽醫(yī)院上海閔行區(qū)中心醫(yī)院一、材料和方法儀器和試劑：比對評估系統(tǒng)所用的儀器試劑，均為挪威原裝進口的NycoCardD-二聚體測定儀和試劑，與上海奧普生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)的U2金標斑點法定量讀數(shù)儀及試劑按各自操作說明作比對測定。標本采集：疑似病例組均為臨床送檢D-二聚體血漿，共135份（閔行醫(yī)院85例，岳陽醫(yī)院50例）。對照組均為健康體檢人群共100例（閔行醫(yī)院40例，岳陽醫(yī)院60例）。該組為隨機體檢人群，未進行挑選，年齡分布在16-85歲，平均年齡為歲。二、結(jié)果1、疑似病例組以比對法結(jié)果為標準，共有88例陽性，46例陰性，1例乳糜血有干擾不作統(tǒng)計。在陽性組（88例）中，D-DDOT檢測出82例陽性，6例陰性，陽性符合率為％（82/88），病例追蹤不符合的6例，結(jié)果支持D-DDOT的陰性結(jié)果。疑似病例組比對法陰性的46例中，D-DDOT檢測均陰性，陰性符合率100％。陰陽不符的6例均為比對試劑（+），而D-DDOT（-），見表1。對該陰陽不符的6例進行臨床病例追蹤，結(jié)果顯示該6例病例均無深靜脈血栓、肺栓塞和血管內(nèi)彌漫性凝血的相關癥狀和診斷，病例追蹤結(jié)果支持D-DDOT的可靠性，在兩家醫(yī)院臨床研究中D-DDOT特異性應優(yōu)于進口同類比對試劑。對照組以比對法結(jié)果為標準，共有1例陽性（閔行119號，mg/L），99例陰性。該陽性樣本D-DDOT檢測亦為mg/L，其它99例D-DDOT檢測均為陰性，符合率100％。在列入統(tǒng)計的全部234例樣本中，以比對法（NycoCard）為標準結(jié)果：陽性符合率=%陰性符合率=100%總符合率=%配對卡方檢測結(jié)果顯示兩者結(jié)果在統(tǒng)計學上無顯著差別；Kappa值（〉），具有非常好的一致性。以比對法陽性為標準，以比對法陽性為標準，D-DDOT的陽性符合率雖為%，但2個醫(yī)院對陽性不符病例(共6例)追蹤結(jié)果均支持D-DDOT的可靠性。D-DDOT與比對法(NycoCard)6例陽性不符結(jié)果序號D-DDOT(mg/L)比對法(mg/L)追蹤診斷閔行肺炎，高血壓，非血栓病閔行糖尿病，肺炎，非血栓病閔行胰頭癌，非血栓病閔行上消化道出血，肝硬化，非血栓病岳岳陽V氣管炎急性發(fā)作，非血栓病岳岳陽高血壓，心臟病，非血栓病2、對照組均為健康體檢人群共100例（閔行醫(yī)院40例，岳陽醫(yī)院60例）。該組為隨機體檢人群，未進行挑選，年齡分布在16-85歲，平均年齡為歲。以比對法結(jié)果為標準，共有1例陽性（閔行119號，mg/L）,99例陰性。該陽性樣本D-DDOT檢測亦為mg/L,其它99例D-DDOT檢測均為陰性，符合率100%。100例健康人D-二聚體讀數(shù)分布如下：在兩家醫(yī)院進行的共100例健康體檢人群的臨床研究中，二法99%的健康人D-二聚體讀數(shù)均Vmg/ml,表明D-DDOT與比對法一樣，所選的正常參考范圍Vmg/L設置恰當，滿足臨床需要。D-DDOT陽性符合率=a/(a+c)=%D-DDOT陰性符合率=d/(b+d)=100%D-DDOT總符合率=(a+d)/(a+b+c+d)=%閔行醫(yī)院和岳陽醫(yī)院的統(tǒng)計四格表分別進行配對卡方檢驗，兩者P均大于。三、結(jié)論上海市閔行區(qū)中心醫(yī)院和上海中醫(yī)藥大學附屬岳陽中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院的臨床研究結(jié)果表明上海奧普生物醫(yī)藥有限公司申請臨床研究的D-二聚體檢測試劑盒(膠體金法)和比對法NycoCardD-二聚體單一試劑盒在D-二聚體測定上有良好等效性，引用的正常人參考范圍(Vmg/L)恰當，D-DDOT可以與比對法一樣，在臨床用于排除深靜脈血栓、肺栓塞和血管內(nèi)彌漫性凝血，滿足臨床應用需要。以比對法陽性為標準，D-DDOT的陽性符合率雖為%，但2個醫(yī)院對陽性不符病例（共6例）追蹤結(jié)果均支持D-DDOT的可靠性，提示在本研究口-DDOT特異性應優(yōu)于同類比對試劑。檢測血漿D-二聚體新金標斑點滲濾法試劑盒的臨床適用性（摘要）上海交通大學醫(yī)學院附屬新華醫(yī)院崇明分院檢驗科張莉本研究對國產(chǎn)新研制的膠體金法D-二聚體試劑盒作了性能評價，并將其與挪威進口試劑盒的臨床測試結(jié)果進行了比較。一、材料與方法儀器與試劑D-二聚體檢測試劑盒（膠體金法）及配套UppergoldU2金標斑點法定量讀數(shù)儀和D-DDOT試劑，質(zhì)控品均由上海奧普生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)。比對用挪威NycoCard公司生產(chǎn)D—二聚體試劑盒及配套測讀儀NycoCardReaderII。234份臨床收集的新鮮血漿標本，作了線性、精密度（CV）、回收率并用統(tǒng)計軟件作了分析。結(jié)果一、試劑盒性能評價線性評價：回歸方程為：Y二+，Y=。此結(jié)果顯示，該試劑D-D在范圍內(nèi)線性良好。精密度總批內(nèi)及批間精密度分別為%和%?？偦厥章蕿?。二、臨床標本比對結(jié)果：234例樣本中，二者陽性符合率為％，陰性符合率為100%,總符合率為%。D-DDOT和Nycocard試劑盒結(jié)果具有非常好的一致性。討論目前,D-二聚體的臨床檢測主要應用街排除靜脈血栓栓塞(VTE),其中包括了口丫T和PE。目前快速D-二聚體測定已作為DVT診斷的首選項目。D-二聚體還是早期診斷彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)較敏感的指標。這對血栓性疾病的診斷,尤其是對于低臨床概率的排除性診斷具有重要的意義。目前D-二聚體的檢測沒有國際標準品和行業(yè)標準品,各公司的標準品不統(tǒng)一、不通用,通常只適合于與其配套的檢測系統(tǒng)的自身校正。另外,由于各個檢測系統(tǒng)所使用的免疫抗體差異較大，抗原決定簇各有不同，從而造成不同的檢測方法之間數(shù)據(jù)差異很大，其陽性率、敏感性、特異性均不同，甚至對于同一個樣本（枸櫞酸抗凝血漿）的讀數(shù)亦存在較大差異。D-二聚體項目目前公認的敏感度在90%以上，而特異性為40%?60%左右[7],因此診斷疾病時，其意義主要在于陰性結(jié)果，即它是用于排除性的診斷而非確診性的診斷。其陰性符合率達到100%,,陰陽不符的四例病例均為Nycocard試劑盒陽性而D-DDOT陰性，對于注重陰性排除試驗的D—二聚體檢測項目，這樣的結(jié)果顯示出D-DDOT更具臨床適用性。已上市的23種D-二聚體檢測試劑盒之間的比對評估，它們的Spearman等級相關系數(shù)在之間。而D-DDOT與NycoCard的Spearman系數(shù)為，說明其與國際知名試劑盒等效。以上三項臨床比對數(shù)據(jù)的統(tǒng)計指標和對試劑盒基本性能的評價結(jié)果均顯示D-DDOT完全能夠滿足臨床的需要。本文摘自：核心醫(yī)學期刊“檢驗醫(yī)學”2010年1月第1期D-二聚體檢測試劑盒（膠體金法）操作規(guī)程（SOP）一、項目名稱檢驗方法名稱D-二聚體檢測試劑盒（膠體金法）D-DDOT英文名：D-DimerassaybyDIGFAmethod二、方法學原理反應原理為固相雙抗體夾心法免疫試驗。待測樣品中所含的D-二聚體，能為固相在膜上的D-二聚體抗體特異性地捕獲，然后由另一個D-二聚體單抗-膠體金綴合物標記，呈紅色斑點，斑點紅色強度與樣品中D-二聚體濃度呈正比，可用U2金標斑點法定量讀數(shù)儀測定。三、試劑品牌、規(guī)格、內(nèi)含物：包裝規(guī)格：20人份/盒D-二聚體定量檢測試劑盒（膠體金法）

組份名稱主要活性成分及濃度數(shù)量1.反應板D-二聚體抗體、致敏濃度塊2.封閉液1%牛血清白蛋白（BSA），PBS緩沖液1X3.洗滌液PBS緩沖液1X4.金標液凍干品D-二聚體單抗膠體金綴合物、1%BSA2X5.金標液凍干品復溶液雙蒸水，%NaCl1X表中溶液分別以疊氮鈉防腐。四、儀器品牌、型號金標斑點法定量讀數(shù)儀UppergoldU2五、操作步驟.從冷藏處取出試劑盒，室溫至少平衡半小時，在D-二聚體金標液凍干品中，準確加入口-二聚體金標凍干品復溶液搖勻。.將D-二聚體反應板平放于實驗臺，在反應孔內(nèi)滴加2滴D-二聚體封閉液，待完全滲入。.使用潔凈吸頭準確吸取100口1枸櫞酸抗凝血漿，加到反應板中，待完全滲入后，加2滴D-二聚體洗滌液。.待洗滌液完全滲入，使用潔凈吸頭準確加入D-二聚體膠體金溶液100口1。.待完全滲入后，加4滴D-二聚體洗滌液。.立刻在U2金標定量儀D-二聚體項目下測讀，測讀時間不宜超過5分鐘。六、正常參考值本試劑盒推薦正常人的預期讀數(shù)應vmg/L。七、臨床意義本產(chǎn)品在UppergoldU2金標斑點法定量讀數(shù)儀上可快速測定血漿中的纖維蛋白降解產(chǎn)物D-二聚體，是深靜脈血栓、肺栓塞、彌漫性血管內(nèi)凝血的陰性排除試驗，屬即時檢驗(POCT)類體外診斷試劑。檢測結(jié)果可在3分鐘內(nèi)獲得，讀數(shù)范圍為，適用于醫(yī)院門急診、重癥監(jiān)護病房等需快速測定D-二聚體的場所。D-Dimer結(jié)果以D-二聚體濃度mg/L表達，如要用纖維蛋白原相當單位(FEU)表示，則應乘以2。D-二聚體濃度正常，可基