原發(fā)性肝癌中KRAS及BRAF基因突變檢測(cè)的臨床意義-2700字符

原發(fā)性肝癌中KRAS及BRAF基因突變檢測(cè)的臨床意義摘要：目的：探討分析KRAS及BRAF基因突變檢測(cè)對(duì)原發(fā)性肝癌的意義。方法：回顧性分析2017年1月-2019年10月我院收治的353例原發(fā)性肝癌患者，根據(jù)病理臨床證實(shí)是否存在肝外轉(zhuǎn)移，分為轉(zhuǎn)移組175例，非轉(zhuǎn)移組178例，采集所有患者的血液，檢測(cè)KRAS、BRAF基因以及突變情況，分析兩組KRAS、BRAF基因的突變率，以及突變的情況。結(jié)果：轉(zhuǎn)移組KRAS基因突變率明顯比非轉(zhuǎn)移組高(PV0.05),兩組BRAF基因均未出現(xiàn)突變(P>0.05)。結(jié)論：有肝外轉(zhuǎn)移的患者KRAS存在突變，且突變率較高，而轉(zhuǎn)移和非轉(zhuǎn)移均未出現(xiàn)BRAF基因突變，因此可根據(jù)KRAS基因突變來(lái)判斷原發(fā)性肝癌是否存在轉(zhuǎn)移，其對(duì)原發(fā)性肝癌是否存在轉(zhuǎn)移中具有臨床價(jià)值。關(guān)鍵詞：原發(fā)性肝癌；BRAF基因；KRAS基因；基因突變；轉(zhuǎn)移；非轉(zhuǎn)移原發(fā)性肝癌位于惡性腫瘤的前5位，隨著環(huán)境污染，社會(huì)老齡化，食品平安等問(wèn)題的，我國(guó)發(fā)生原發(fā)性肝癌的人數(shù)也越來(lái)越高山。而且原發(fā)性肝癌早期沒(méi)有病癥，一旦發(fā)現(xiàn)不適即為癌癥中晚期，并且常會(huì)出現(xiàn)肝外轉(zhuǎn)移的情況，嚴(yán)重影響患者的生命⑵。而對(duì)于及時(shí)診斷是否存在轉(zhuǎn)移，以及對(duì)癥治療方法是臨床重點(diǎn)關(guān)注的問(wèn)題。本研究探討分析KRAS及BRAF基因突變檢測(cè)對(duì)原發(fā)性肝癌的意義。1、一般資料基本資料回顧性分析2017年1月-2019年10月我院收治的353例原發(fā)性肝癌患者，根據(jù)病理臨床證實(shí)是否存在肝外轉(zhuǎn)移，分為轉(zhuǎn)移組175例，非轉(zhuǎn)移組178例。轉(zhuǎn)移組89例男性,86例女性,年齡40-80歲,平均年齡(62.38+10.73)歲；非轉(zhuǎn)移組91例男性，87例女性，年齡40-例歲,平均年齡(62.91+10.27)歲，31例腦轉(zhuǎn)移，68例肺轉(zhuǎn)移，55例淋巴轉(zhuǎn)移，12例骨轉(zhuǎn)移，9例廣泛轉(zhuǎn)移。兩組患者在性別、年齡均可比(P>0.05),所有患者或者家屬均已經(jīng)簽署了知情同意書,并且也得到了倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，納入標(biāo)準(zhǔn)：均配合本次研究，符合原發(fā)性肝癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)過(guò)病理以及臨床證實(shí)是否存在轉(zhuǎn)移。排除標(biāo)準(zhǔn)：非原發(fā)性肝癌，器官功能障礙，其它惡性腫瘤引發(fā)的肝癌，精神性疾病，無(wú)法配合本次研究，老年癡呆史，凝血、造血功能障礙。研究方法采集所有患者空腹血液，加入到抗凝管中，使用天根試劑盒提取血液DNA,方法為：在血液中加入1-2.5倍體積的細(xì)胞裂解液，離心后去上清，加入200ul的GS,震蕩混勻后加入20ulproteinaseK,混勻后加200ul緩沖液GB,混勻后,56度放lOmin,澄清后加入200ul無(wú)水乙醇，會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀，加入吸附柱進(jìn)行離心，去上清，分別使用緩沖液GD和漂洗液PW進(jìn)行清洗離心，將吸附柱放入新的EP管中進(jìn)行洗脫，收集DNA,并對(duì)DNA的濃度進(jìn)行測(cè)定。使用KRAS、BRAF基因突變檢測(cè)試劑盒，檢測(cè)KRAS、BRAF基因的突變，PCR方法檢測(cè)：95℃5min進(jìn)行1個(gè)循環(huán)；95℃25s,64℃20s,72℃20s進(jìn)行15個(gè)循環(huán)；93℃25s,60℃35s,72℃20s進(jìn)行31個(gè)循環(huán)。并且設(shè)立陽(yáng)性和陰性對(duì)照，并設(shè)定平行，檢測(cè)KRAS、BRAF基因的突變情況，并進(jìn)行分析。觀察指標(biāo)分析兩組KRAS、BRAF基因的突變率，以及突變的情況。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理試驗(yàn)結(jié)果用n%表示，x2檢驗(yàn)，PV0.05為試驗(yàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。.結(jié)果兩組KRAS、BRAF基因的突變率比擬轉(zhuǎn)移組KRAS基因突變率明顯比非轉(zhuǎn)移組高(P<0.05),兩組BRAF基因均未出現(xiàn)突變(P>0.05),見表1。表1兩組KRAS、BRAF基因的突變率比擬(n%)2.2突變的情況組別nBRAF基因突變率(n,%)KRAS基因的突變率(n,%)轉(zhuǎn)移組1750(0%)43(24.57%)非轉(zhuǎn)移組1780(0%)0(0%)X2——49.8039P——0.000043例轉(zhuǎn)移組患者存在KRAS基因突變，其中16例(37.21%)G12D,6例(13.95%)G12V,9例(20.93%)Q61H,5例(11.63%)G12S,7例(16.28%)A146To.討論原發(fā)性肝癌(HCC)是一種常見的惡性腫瘤，主要指由肝臟自身產(chǎn)生的腫瘤,原發(fā)性肝癌主要包括：肝癌和膽管細(xì)胞癌⑶。而癌癥會(huì)使癌基因激活，并且抑癌基因缺失或者失活。RAS是原癌基因，RAS基因家族中有KRAS、HRAS、NRAS三種基因與癌癥相關(guān)，BRAF是RAF的一種亞型⑷。KRAS基因和BRAF基因都是RAS/RAF/MEK/ERK/MAPK激酶信號(hào)通路的一員，可以調(diào)節(jié)對(duì)生長(zhǎng)信號(hào)的細(xì)胞反應(yīng)⑸。本次研究，通過(guò)對(duì)KRAS、BRAF基因的突變進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移組KRAS基因突變率明顯比非轉(zhuǎn)移組高，兩組BRAF基因均未出現(xiàn)突變，其中KRAS基因突變中有16例G12D,6例G12V,9例Q61H,5例G12S,7例A146T。證明可以用KRAS突變對(duì)肝癌進(jìn)行評(píng)估，而有研究證明KRAS突變會(huì)導(dǎo)致EGFR的藥物失效，進(jìn)而通過(guò)鑒定KRAS基因突變對(duì)肝癌的治療提供有效的數(shù)據(jù)。而BRAF基因突變沒(méi)有發(fā)現(xiàn)與肝癌的相關(guān)性。綜上所述，有肝外轉(zhuǎn)移的患者KRAS存在突變，且突變率較高，而轉(zhuǎn)移和非轉(zhuǎn)移均未出現(xiàn)BRAF基因突變，因此可根據(jù)KRAS基因突變來(lái)判斷原發(fā)性肝癌是否存在轉(zhuǎn)移，其對(duì)原發(fā)性肝癌是否存在轉(zhuǎn)移中具有臨床價(jià)值。參考文獻(xiàn)[1]郭宇美，駱子義，黃華.原發(fā)性肝癌中KRAS及BRAF基因突變檢測(cè)及臨床意義分析[J].新發(fā)傳染病電子雜志,2018,3(1):43-46.[2]陳伊，韋常宏，寧淑芳，等.結(jié)直腸癌組織KRAS、BRAF基因突變情況及其臨床意義[J].山東醫(yī)藥,2017,57(16):77-80.[引唐華容，楊世峰，胡曉，等.原發(fā)小細(xì)胞肺癌中BRAF/KRAS以及PIK3CA突變的基因特征及臨床特征[J].中華放射腫瘤學(xué)雜志,2018,27(9):805-809.[4]沙如拉，李文新.結(jié)直腸癌K