消毒與滅菌效果監(jiān)測(cè)技術(shù)

會(huì)計(jì)學(xué)1消毒與滅菌效果監(jiān)測(cè)技術(shù)消毒滅菌效果監(jiān)測(cè)的重要意義

1消毒滅菌設(shè)備存在質(zhì)量和故障等硬件問(wèn)題；

2消毒滅菌工藝存在人為操作不規(guī)范因素；

3操作人員存在技術(shù)不熟練或責(zé)任心問(wèn)題；

4消毒藥品存在質(zhì)量問(wèn)題；

5消毒藥品多數(shù)不是純品或不穩(wěn)定性。第1頁(yè)/共30頁(yè)

工藝監(jiān)測(cè)—壓力蒸汽滅菌質(zhì)量控制三查工藝檢查:檢查門框和墊圈有無(wú)損壞;門鎖扣有效;壓力表能否達(dá)零位;用水檢查排氣口有無(wú)堵塞;關(guān)門后檢查是否存在漏氣;檢查調(diào)節(jié)閥零活度,壓力和溫度指示是否吻合;安全閥的有效性;輸送蒸汽壓力過(guò)高,加層溫度過(guò)高;預(yù)真空式進(jìn)行B-D檢驗(yàn);把關(guān)檢查:滅菌包裝是否符合要求;滅菌包只小不能大;滅菌包擺放是否正確;裝載不過(guò)量;放常規(guī)監(jiān)測(cè)器材;滅菌后檢查:滅菌包有無(wú)損壞;有無(wú)濕包現(xiàn)象;有孔容器是否關(guān)閉;監(jiān)測(cè)指標(biāo)是否合格;無(wú)菌物品存放,發(fā)放,有效期等;第2頁(yè)/共30頁(yè)壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測(cè)器材制作標(biāo)準(zhǔn)1.國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織關(guān)于《對(duì)化學(xué)指示劑標(biāo)準(zhǔn)》。2.美國(guó)藥典第二十一版：關(guān)于生物指示劑參數(shù)的規(guī)定。3.中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)制定并由國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局頒布：國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（消毒效果評(píng)價(jià)方法與標(biāo)準(zhǔn)即GB15981—1995）。4.《消毒技術(shù)規(guī)范》2002年版對(duì)消毒滅菌監(jiān)測(cè)器材有專門條款規(guī)定。第3頁(yè)/共30頁(yè)

壓力蒸汽滅菌效果生物監(jiān)測(cè)方法1生物指示劑：標(biāo)準(zhǔn)抗力菌株為嗜熱脂肪桿菌（ATCC7953或SSIK31)芽胞，制劑為商品芽孢菌片和自含式生物指示劑管。2生物指示劑含芽孢數(shù)為5×105～5×106cfu

/片。3生物指示劑抗力標(biāo)準(zhǔn)：在121℃飽和壓力蒸汽條件下，存活時(shí)間（ST）≥3.9min,殺滅時(shí)間（KT）≤19min,D121值1.3min～1.9min。4抗力標(biāo)定：在標(biāo)準(zhǔn)生物和化學(xué)指示劑檢測(cè)器內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)和標(biāo)定。第4頁(yè)/共30頁(yè)2002年版《消毒技術(shù)規(guī)范》對(duì)化學(xué)指示劑規(guī)定指標(biāo)

1監(jiān)測(cè)條件規(guī)定：以標(biāo)準(zhǔn)抗力檢測(cè)器為標(biāo)定儀器，以生物指示劑抗力為標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)化學(xué)指示劑進(jìn)行抗力監(jiān)測(cè)。

2下排氣滅菌監(jiān)測(cè)121?指示卡與脈動(dòng)真空滅菌監(jiān)測(cè)132?指示卡分別在各自飽和蒸汽作用下，要求達(dá)到的符合率如下：第1組：以121?飽和蒸汽作用20min，132?作用3min，指示色塊與標(biāo)準(zhǔn)色塊符合率為100％；第2組：以121?飽和蒸汽作用10min，132?作用1min，指示色塊與標(biāo)準(zhǔn)色塊符合率＜20％；第3組：以117?飽和蒸汽作用20min，128?作用3min，指示色塊與標(biāo)準(zhǔn)色塊符合率＜20％；第5頁(yè)/共30頁(yè)

有菌生長(zhǎng)ME-型壓力蒸汽滅菌生物指示劑ME-型壓力蒸汽滅菌生物指示劑北京四環(huán)衛(wèi)生藥械廠菌管結(jié)構(gòu)透氣孔管蓋外管培養(yǎng)基管菌片第6頁(yè)/共30頁(yè)

自含式生物指示劑管使用方法

1將生物指示劑管2支直接置于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包內(nèi)，放于滅菌器下層排氣口附近（規(guī)范指排氣口上方）。

2按正常滅菌程序進(jìn)行滅菌處理。

3將試驗(yàn)包取出，取出指示管，于管尖部夾碎套管內(nèi)安瓿。

4將其置于56℃培養(yǎng)48h。在此部位夾碎第7頁(yè)/共30頁(yè)嗜熱脂肪桿菌芽孢菌片使用方法

1將裝有1片菌片的小紙袋2份放于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包中心包好。

2將試驗(yàn)包放于滅菌器下層排氣口附近。

3按正常滅菌程序進(jìn)行滅菌處理。

4取出試驗(yàn)包，在100級(jí)潔凈條件下，取出菌片直接接種于裝有5～10ml溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng)液試管內(nèi)，同時(shí)接種1片陽(yáng)性對(duì)照菌片。

5將接種管置于56℃培養(yǎng)48h觀察結(jié)果，若無(wú)菌生長(zhǎng)繼續(xù)培養(yǎng)至1周。第8頁(yè)/共30頁(yè)菌片紙袋滅菌后取出菌片接種到培養(yǎng)基于56℃培養(yǎng)48h第9頁(yè)/共30頁(yè)未培養(yǎng)前使用后擠破培養(yǎng)有菌生長(zhǎng)菌片第10頁(yè)/共30頁(yè)

生物監(jiān)測(cè)結(jié)果判斷：符合以下條件：1所有試驗(yàn)管內(nèi)培養(yǎng)液均未變色并呈透明無(wú)沉淀物；2陽(yáng)性對(duì)照管內(nèi)培養(yǎng)液變成黃色并呈混濁，為滅菌合格。附溴甲酚紫培養(yǎng)液處方及配制方法

處方：蛋白胨10g，葡萄糖5g，可溶性淀粉1g，溴甲酚紫乙醇溶液10ml，加蒸餾水至1000ml。調(diào)節(jié)pH值7.0~7.2,分裝試管,每管5~10ml,于115℃壓力蒸汽滅菌30min,保存?zhèn)溆?

溴甲酚紫為2%,直接溶解于乙醇內(nèi)即可.第11頁(yè)/共30頁(yè)關(guān)于快速生物指示劑問(wèn)題

1快速生物指示劑是近年來(lái)國(guó)外新推出的壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測(cè)器材，希望在56℃培養(yǎng)4h內(nèi)出結(jié)果。

2原理是利用細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程產(chǎn)生代謝酶，再以熒光顯色，以便肉眼觀察；嗜熱脂肪桿生長(zhǎng)過(guò)程可產(chǎn)生α-D葡萄糖酶與培養(yǎng)基中熒光素結(jié)合顯色。

3目前該產(chǎn)品質(zhì)量尚達(dá)不到標(biāo)準(zhǔn)要求，易受一些不穩(wěn)定因素影響。某醫(yī)院用其監(jiān)測(cè)脈動(dòng)真空滅菌器出現(xiàn)的假陽(yáng)性率達(dá)11％～44％。第12頁(yè)/共30頁(yè)

RapidIndicator第13頁(yè)/共30頁(yè)

環(huán)氧乙烷和干熱滅菌效果監(jiān)測(cè)1監(jiān)測(cè)所用生物指示菌為枯草桿菌黑色變種芽孢。2用標(biāo)準(zhǔn)株（ATCC9372）制成芽孢菌片。3監(jiān)測(cè)環(huán)氧乙烷抗力標(biāo)準(zhǔn)：菌片含菌量5×105～5×106cfu

/片。在環(huán)氧乙烷用量為600mg/L+30mg/L,相對(duì)濕度60％＋10％，54℃條件下，存活時(shí)間（ST）≥7.8min,殺滅時(shí)間（KT）≤58min,D10值2.6min～5.8min。4監(jiān)測(cè)干熱滅菌抗力標(biāo)準(zhǔn)：菌片含菌量與上述相同；在160℃干熱條件下，存活時(shí)間（ST）≥3.9min,殺滅時(shí)間（KT）≤19min,D121值1.3min～1.9min。5商品菌片每個(gè)紙袋1片，每包50片。第14頁(yè)/共30頁(yè)

枯草桿菌黑色變種芽孢菌片使用方法1環(huán)氧乙烷滅菌效果監(jiān)測(cè)：（1）將菌片連同紙包放入環(huán)氧乙烷滅菌包內(nèi)，一式2份，放在滅菌器內(nèi)適當(dāng)部位；（2）按環(huán)氧乙烷滅菌程序處理后，在潔凈度100級(jí)條件下，取出菌片將其接種到營(yíng)養(yǎng)肉湯管內(nèi)；（3）于37℃培養(yǎng)48h。2干熱滅菌效果監(jiān)測(cè)：（1）將菌片連同紙包放于玻璃試管內(nèi)，分別置于上中下中央部位，在中層內(nèi)角和門把手附近各放1片；（2）按干熱滅菌要求，作用1個(gè)滅菌周期；（3）按上述方法接種和培養(yǎng)。3商品枯草桿菌黑色變種芽孢菌片只適合于滅菌效果監(jiān)測(cè)，不適合作定量殺菌試驗(yàn)。第15頁(yè)/共30頁(yè)

生物指示劑使用應(yīng)注意的問(wèn)題菌片包括嗜熱脂肪桿菌芽孢和枯草桿菌黑色變種芽孢（ATCC9372）。1.菌片使用及存在問(wèn)題：制備培養(yǎng)基；專門技術(shù)人員負(fù)責(zé)；需要布樣、采樣、接種；技術(shù)復(fù)雜、受外界因素影響、易發(fā)生二次污染、總費(fèi)用較高；計(jì)數(shù)問(wèn)題，主要是不易洗下回收。2.生物指示劑管使用問(wèn)題：使用方法簡(jiǎn)單，不受外界因素影響，容易保證監(jiān)測(cè)質(zhì)量。3.培養(yǎng)溫度問(wèn)題和培養(yǎng)基pH值影響問(wèn)題。4不要試圖對(duì)菌片作回收活菌計(jì)數(shù)，很困難。第16頁(yè)/共30頁(yè)營(yíng)養(yǎng)瓊脂表面枯黑桿菌菌落形態(tài)及色素第17頁(yè)/共30頁(yè)營(yíng)養(yǎng)瓊脂表面枯黑桿菌菌落形態(tài)及色素第18頁(yè)/共30頁(yè)枯草桿菌黑色變種繁殖體革蘭染色菌體第19頁(yè)/共30頁(yè)

枯草桿菌黑色變種芽孢孔雀綠染色第20頁(yè)/共30頁(yè)

枯草桿菌黑色變種芽孢孔雀綠染色第21頁(yè)/共30頁(yè)

化學(xué)指示卡使用中的幾個(gè)問(wèn)題

1.如何看待標(biāo)準(zhǔn)色：標(biāo)準(zhǔn)色是最低合格線。

2.布放正確和足夠數(shù)量：包中心，雙標(biāo)本。

3.指示卡性能測(cè)試：標(biāo)準(zhǔn)條件下標(biāo)定，如在標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)器內(nèi)進(jìn)行，達(dá)到升溫速度10秒、排氣速度5秒、溫度誤差0.5℃。

4.防潮：不直接接觸金屬和玻璃，對(duì)折放置，置于紗布?jí)K中。第22頁(yè)/共30頁(yè)化學(xué)指示卡變色不達(dá)標(biāo)原因分析

1.不達(dá)標(biāo)準(zhǔn)色，但均勻：可能是溫度不夠，時(shí)間不足，超熱蒸汽，其他工藝問(wèn)題（參閱生物指示劑的分析結(jié)果）。

2.不達(dá)標(biāo)準(zhǔn)色，但變色不均勻：帶花白點(diǎn)，背面有濕印，可能為指示卡提前受潮。原因：器械的冷凝水；蒸汽含水量過(guò)高，如蒸汽源壓力低、輸送管道長(zhǎng)、管道漏氣；預(yù)熱不夠，進(jìn)蒸汽時(shí)冷凝水；送氣管道內(nèi)水未排除；干燥時(shí)間不足。第23頁(yè)/共30頁(yè)指示卡背面指示卡正面標(biāo)準(zhǔn)色塊指示色塊

指示色塊水濕印第24頁(yè)/共30頁(yè)20(mg50100300500100015000.0020.0050.0100.0300.0500.1000.150

2：試紙偶爾有紙張厚薄不均造成有里外之分，浸上消毒液后顯出兩面顏色深淺不一，此時(shí)依顏色深的一面為準(zhǔn)。另有時(shí)標(biāo)準(zhǔn)色印制出現(xiàn)誤差，造成讀值偏差，發(fā)現(xiàn)時(shí)請(qǐng)與生產(chǎn)廠聯(lián)系解決。Mg/L（％）注意：1：該試紙不適用于二氧化氯、臭氧、過(guò)氧化氫和萬(wàn)福金安消毒劑監(jiān)測(cè)。G-1型消毒劑濃度試紙第25頁(yè)/共30頁(yè)

戊二醛測(cè)試卡檢測(cè)范圍及顯色情況

卡標(biāo)號(hào)測(cè)試范圍顯色情況

3983M1.5%1.5%～2.0%1.5%可不顯色或顯色不均勻達(dá)到2.0%時(shí)方可正常顯色

3987M1.8%1.8%～2.3%1.8%可不顯色或顯色不均勻達(dá)到2.3%時(shí)方可正常顯色

3989M1.8%2.1%～2.6%2.1%可不顯色或顯色不均勻達(dá)到2.6%時(shí)方可正常顯色第26頁(yè)/共30頁(yè)

戊二醛化學(xué)指示卡變色情況Comply3987M1.8%正常未用指示卡監(jiān)測(cè)變色不均勻監(jiān)測(cè)變色均